三種苦參堿制劑對(duì)非靶標(biāo)生物的毒性研究

吳 遲，孫 田，何明遠(yuǎn)，蔣紅云，張 蘭，張燕寧，毛連綱，朱麗珍，鄭永權(quán)，劉新剛*

（1.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所，植物病蟲害生物學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京 100193；2.廣西思浦林科技有限公司，南寧 530001）

我國(guó)是農(nóng)業(yè)大國(guó)，農(nóng)藥在生產(chǎn)生活中發(fā)揮著非常重要的作用[1]。近年來，隨著環(huán)保意識(shí)的提高和可持續(xù)發(fā)展的需要，生物農(nóng)藥受到了廣泛關(guān)注。2020年2月，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部印發(fā)的《2020年種植業(yè)工作要點(diǎn)》中就包括完善農(nóng)藥登記審批“綠色通道”政策。該政策為生物農(nóng)藥的登記創(chuàng)造了良好的環(huán)境[2]，也為生物農(nóng)藥的發(fā)展創(chuàng)造了有利的條件。植物源農(nóng)藥歷史悠久，具有種類多、作用方式特異、不易產(chǎn)生抗藥性、對(duì)環(huán)境友好等特點(diǎn)[3]，成為生物農(nóng)藥的首選之一。

目前，苦參堿是登記數(shù)量最多的植物源農(nóng)藥。根據(jù)中國(guó)農(nóng)藥信息網(wǎng)[4]，截至2020年10月，獲得登記許可且在有效期內(nèi)的苦參堿農(nóng)藥品種共121個(gè)?？鄥A是一種從苦參和苦豆子等植物中提取出的生物堿，具有殺蟲、殺螨、殺菌等生物活性[5-7]，在農(nóng)業(yè)領(lǐng)域被廣泛關(guān)注和應(yīng)用。目前，關(guān)于苦參堿的防控作用國(guó)內(nèi)外均有報(bào)道，如苦參堿可用于防控茶尺蠖[8]；對(duì)黑腹果蠅成蟲具有殺蟲活性[9]；能夠有效控制棉蚜種群數(shù)量[10]；對(duì)白蟻具有強(qiáng)烈的拒食作用[11]；對(duì)枸杞刺皮癭螨可達(dá)到較好的的防效，且對(duì)天敵安全性較高[12]；對(duì)蘋果樹腐爛病防效優(yōu)異[13]等。

關(guān)于苦參堿對(duì)環(huán)境安全性的研究也有相關(guān)報(bào)道。豆敏詳?shù)萚14]研究表明，苦參堿原藥對(duì)非靶標(biāo)生物鵪鶉、意大利蜜蜂、家蠶和斑馬魚等均為低毒。然而，在苦參堿加工生產(chǎn)過程中，一般會(huì)添加助劑以制成不同劑型，便于田間使用。然而，部分農(nóng)藥助劑中含有多種有害化學(xué)品[15]，如有機(jī)硅對(duì)大型溞的存活、生長(zhǎng)和繁殖等都有一定程度的影響，并且是對(duì)成年蜜蜂毒性最大的助劑之一[16-17]；壬基酚聚氧乙烯醚可導(dǎo)致斑馬魚胚胎死亡、胚胎畸形，以及限制斑馬魚的生長(zhǎng)等[18]。目前，在我國(guó)，苦參堿主要登記劑型為可溶液劑、水劑和可濕性粉劑等，但關(guān)于苦參堿制劑對(duì)生態(tài)系統(tǒng)中的非靶標(biāo)生物的毒性效應(yīng)研究較少。因此，本研究主要依據(jù)GB/T 31270—2014《化學(xué)農(nóng)藥環(huán)境安全評(píng)價(jià)試驗(yàn)準(zhǔn)則》標(biāo)準(zhǔn)[19]、美國(guó)國(guó)家環(huán)境保護(hù)局（EPA）和經(jīng)濟(jì)合作與發(fā)展組織（OECD）準(zhǔn)則[20-24]，分別測(cè)定了3種苦參堿制劑對(duì)以下非靶標(biāo)生物——日本鵪鶉（Coturnix japonica）、意大利蜜蜂（Apis melliferaL.）、家蠶（Bombyx moriL.）、斑馬魚（Danio rerio）和大型溞（Daphnia magna）的急性毒性效應(yīng)，以確定農(nóng)藥助劑是否影響苦參堿對(duì)非靶標(biāo)生物的毒性，并為苦參堿制劑在田間合理使用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

供試農(nóng)藥。0.6%苦參堿可溶液劑，山東拜沃生物技術(shù)有限公司；0.5%苦參堿水劑，江西豐源生物高科有限公司；0.3%苦參堿可濕性粉劑，煙臺(tái)綠云生物科技有限公司；95.0%苦參堿標(biāo)準(zhǔn)品，北京勤誠(chéng)亦信科技開發(fā)有限公司。

供試生物。日本鵪鶉：選用同批孵化出殼的鵪鶉，試驗(yàn)用鳥為30日齡，平均體重為97.2 g；意大利蜜蜂：選擇健康無病、大小一致的成年工蜂用于試驗(yàn)；家蠶：品種為“九芙×七湘”，試驗(yàn)用蠶為二齡起蠶；斑馬魚：平均全長(zhǎng)為1.92 cm，平均體重為0.065 0 g；大型溞：處于孤雌生殖狀態(tài)，未出現(xiàn)雄溞和冬卵，試驗(yàn)用溞為培養(yǎng)3代以上、出生24 h以內(nèi)的非頭胎溞。

供試生物的品系和來源如表1所示。依據(jù)GB/T 31270—2014《化學(xué)農(nóng)藥環(huán)境安全評(píng)價(jià)試驗(yàn)準(zhǔn)則》[19]開展的意大利蜜蜂、家蠶、斑馬魚和大型溞參比物質(zhì)試驗(yàn)結(jié)果見表2，其毒性端點(diǎn)值和95%置信限均在可接受范圍內(nèi)，表明試驗(yàn)體系和供試生物有效可靠，可用于急性毒性試驗(yàn)。

表1 供試生物信息

表2 參比物質(zhì)試驗(yàn)結(jié)果

儀器設(shè)備。分析天平、半微量天平、便攜式pH計(jì)、便攜式溶解氧測(cè)定儀、便攜式溶解氧測(cè)定儀，梅特勒-托利多國(guó)際貿(mào)易（上海）有限公司；水質(zhì)硬度計(jì)，上海三信儀表廠；島津LC-20AT高效液相色譜儀、InertSustain C18色譜柱（4.6 mm×150 mm，5μm），島津企業(yè)管理（中國(guó)）有限公司；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，上海力辰邦西儀器科技有限公司；多管漩渦混合器，常州杰博森儀器有限公司；智能人工氣候箱，寧波海曙賽福實(shí)驗(yàn)儀器廠；不銹鋼鳥籠（60 cm×50 cm×40 cm）。

1.2 試驗(yàn)方法

本研究根據(jù)GB/T 31270—2014《化學(xué)農(nóng)藥環(huán)境安全評(píng)價(jià)試驗(yàn)準(zhǔn)則》[19]、EPA和OECD系列準(zhǔn)則（No.213、No.214、No.203、No.202）[20-24]，進(jìn)行供試農(nóng)藥對(duì)非靶標(biāo)生物的毒性效應(yīng)研究，并建立分析方法對(duì)水生生物試驗(yàn)溶液進(jìn)行真實(shí)濃度檢測(cè)。

1.2.1 非靶標(biāo)生物毒性試驗(yàn)

鳥類急性經(jīng)口毒性試驗(yàn)。采用直接灌喂供試農(nóng)藥的方式進(jìn)行經(jīng)口染毒。將0.6%苦參堿可溶液劑設(shè)置成濃度為25.0、30.8、37.8、46.5和57.2 mg a.i./kg·bw 5個(gè)試驗(yàn)處理；0.5%苦參堿水劑和0.3%苦參堿可濕性粉劑受樣品含量限制，分別設(shè)置了上限濃度為51.0 mg a.i./kg·bw和12.4 mg a.i./kg·bw試驗(yàn)處理，同時(shí)設(shè)置空白對(duì)照組。每個(gè)處理為10只鵪鶉（雌雄各半）。染毒后8 h以及隨后連續(xù)7 d觀察鵪鶉的中毒癥狀與死亡情況，并計(jì)算7 d-LD50（半致死劑量）。

蜜蜂急性毒性試驗(yàn)。急性經(jīng)口毒性：用50%蔗糖水配制試驗(yàn)溶液，將0.6%苦參堿可溶液劑設(shè)置成濃度為24.9、29.9、35.9、43.1、51.7和62.0μg a.i./蜂6個(gè)試驗(yàn)處理；0.5%苦參堿水劑設(shè)置成濃度為3.12、6.25、12.50、25.00和50.00μg a.i./蜂5個(gè)試驗(yàn)處理；將0.3%苦參堿可濕性粉設(shè)置成濃度為0.625、1.250、2.500、5.000和10.000μg a.i./蜂5個(gè)試驗(yàn)處理，同時(shí)設(shè)置空白對(duì)照組。每處理3個(gè)重復(fù)，每重復(fù)10只蜜蜂。取200μL上述試驗(yàn)溶液供蜜蜂取食，根據(jù)取食量計(jì)算實(shí)際染毒劑量，于染毒后24和48 h觀察記錄蜜蜂的中毒癥狀和死亡數(shù)，并計(jì)算48 h-LD50。急性接觸毒性：采用0.6%苦參堿可溶液劑和0.5%苦參堿水劑直接染毒。取2.00μL供試農(nóng)藥點(diǎn)于麻醉后蜜蜂的中胸背板處，得到染毒濃度分別為12.1和10.2μg a.i./蜂的試驗(yàn)處理；0.3%苦參堿可濕性粉受劑型限制，設(shè)置上限染毒濃度為0.90μg a.i./蜂試驗(yàn)處理，同時(shí)設(shè)置空白對(duì)照組。每處理3個(gè)重復(fù)，每重復(fù)10只蜜蜂，于染毒后24和48 h觀察記錄蜜蜂的中毒癥狀和死亡數(shù)，并計(jì)算48 h-LD50。

家蠶急性毒性試驗(yàn)。采用浸葉法進(jìn)行染毒。將0.6%苦參堿可溶液劑設(shè)置成濃度為10.0、16.4、26.9、44.1、72.3、119.0和195.0 mg a.i./L 7個(gè)試驗(yàn)處理；將0.5%苦參堿水劑設(shè)置成濃度為2.00×103mg a.i./L試驗(yàn)處理；將0.3%苦參堿可濕性粉劑設(shè)置成濃度為0.500、0.825、1.360、2.250、3.710、6.110和10.100 mg a.i./L 7個(gè)試驗(yàn)處理，同時(shí)設(shè)置空白對(duì)照組。每處理3個(gè)重復(fù)，每重復(fù)20頭家蠶。用50 mL試驗(yàn)溶液浸漬約5 g桑葉，使藥液均勻分布在葉面上，取出陰干后，用于家蠶飼喂染毒，于染毒后24、48、72和96 h觀察記錄家蠶的中毒癥狀及死亡情況，并計(jì)算96 h-LC50（半致死濃度）。

魚類急性毒性試驗(yàn)。采用靜態(tài)法進(jìn)行染毒，試驗(yàn)期間不更換試驗(yàn)溶液。將0.6%苦參堿可溶液劑設(shè)置成濃度為1.00、1.24、1.54、1.91、2.36和2.93 mg a.i./L 6個(gè)試驗(yàn)處理；將0.5%苦參堿水劑設(shè)置成濃度為0.100、0.132、0.174、0.230、0.304和0.401 mg a.i./L 6個(gè)試驗(yàn)處理；將0.3%苦參堿可濕性粉劑設(shè)置成濃度為0.065 0、0.085 2、0.112 0、0.146 0、0.191 0和0.251 0 mg a.i./L 6個(gè)試驗(yàn)處理；同時(shí)設(shè)置空白對(duì)照組。每個(gè)處理為7尾魚，于染毒后6、24、48、72和96 h觀察和記錄斑馬魚的中毒癥狀及死亡情況，并計(jì)算96 h-LC50。

溞類急性活動(dòng)抑制試驗(yàn)。采用靜態(tài)法進(jìn)行染毒，試驗(yàn)期間不更換試驗(yàn)溶液。將0.6%苦參堿可溶液劑設(shè)置成濃度為1.00、1.58、2.50、3.94、6.23和9.85 mg a.i./L 6個(gè)試驗(yàn)處理；將0.5%苦參堿水劑設(shè)置成濃度為1.05、1.61、2.46、3.76、5.75和8.80 mg a.i./L 6個(gè)試驗(yàn)處理；將0.3%苦參堿可濕性粉劑設(shè)置成濃度為0.020 0、0.027 6、0.038 1、0.052 6、0.072 5和0.100 0 mg a.i./L 6個(gè)試驗(yàn)處理，同時(shí)設(shè)置空白對(duì)照組。每處理4個(gè)重復(fù)，每重復(fù)5只溞，于染毒后24和48 h觀察記錄大型溞的中毒癥狀及受抑制情況，并計(jì)算48 h-EC50（半抑制濃度）。

1.2.2 儀器條件分析方法建立

采用島津LC-20AT高效液相色譜儀對(duì)苦參堿進(jìn)行真實(shí)濃度檢測(cè)。色譜條件：色譜柱為InertSustain C18（4.6 mm×150 mm，5μm）；進(jìn)樣體積為20μL；柱溫箱為40℃；流動(dòng)相為乙腈與0.02%三乙胺水溶液（40.0∶60.0，V/V），流速為1.000 mL/min；檢測(cè)器為PDA二極管陣列檢測(cè)器；檢測(cè)波長(zhǎng)為200 nm；保留時(shí)間為4.04 min。

前處理方法。采集10.000 mL供試水樣于離心管中，加入10.000 mL乙酸乙酯漩渦振蕩萃取。加入適量的氯化鈉再次振蕩萃取，靜置分層。轉(zhuǎn)移上層有機(jī)相至旋蒸瓶中，重復(fù)提取1次。合并有機(jī)相，旋蒸至干。吸取1.000 mL乙腈（色譜純）至旋蒸瓶中，洗滌內(nèi)壁，過0.22μm濾膜，上機(jī)檢測(cè)。

水樣檢測(cè)。分別在魚類急性毒性試驗(yàn)和溞類急性活動(dòng)抑制試驗(yàn)開始和結(jié)束時(shí)采集試驗(yàn)溶液，并對(duì)苦參堿進(jìn)行真實(shí)濃度檢測(cè)。

1.3 數(shù)據(jù)分析與毒性等級(jí)劃分

采用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS 25.0概率回歸分析計(jì)算毒性端點(diǎn)值，并根據(jù)GB/T 21270—2014《化學(xué)農(nóng)藥環(huán)境安全評(píng)價(jià)試驗(yàn)準(zhǔn)則》判斷供試農(nóng)藥對(duì)不同非靶標(biāo)生物的毒性等級(jí)。

2 結(jié)果與分析

2.1 3種苦參堿制劑對(duì)供試生物的急性毒性效應(yīng)

試驗(yàn)期間，對(duì)照組供試生物無死亡或受抑制情況，且未出現(xiàn)任何中毒癥狀。在日本鵪鶉急性毒性試驗(yàn)中，用0.6%苦參堿可溶液劑處理的日本鵪鶉出現(xiàn)閉眼打盹的癥狀；在0.5%苦參堿水劑和0.3%苦參堿可濕性粉劑的試驗(yàn)處理組中，日本鵪鶉表現(xiàn)正常，未出現(xiàn)任何癥狀。在蜜蜂急性經(jīng)口毒性試驗(yàn)中，用0.6%苦參堿可溶液劑處理的蜜蜂出現(xiàn)失去平衡、行動(dòng)緩慢、身體蜷縮、雙翅張開的癥狀；在0.5%苦參堿水劑試驗(yàn)處理組中，蜜蜂表現(xiàn)正常，無不良癥狀；在0.3%苦參堿可濕性粉劑的試驗(yàn)處理組中，蜜蜂出現(xiàn)身體蜷縮和雙翅張開的癥狀。在蜜蜂急性接觸試驗(yàn)中，用3種苦參堿制劑處理的蜜蜂均無不良癥狀。在家蠶急性毒性試驗(yàn)中，用0.6%苦參堿可溶液劑和0.3%苦參堿可濕性粉劑處理的家蠶均出現(xiàn)吐液現(xiàn)象；0.5%苦參堿水劑未對(duì)家蠶造成不良影響。在魚類急性毒性試驗(yàn)中，用3種苦參堿制劑處理的斑馬魚均出現(xiàn)游動(dòng)緩慢和失去平衡的現(xiàn)象；0.5%苦參堿水劑試驗(yàn)處理組中，斑馬魚還出現(xiàn)了身體彎曲的情況。在溞類急性活動(dòng)抑制試驗(yàn)中，3種苦參堿制劑對(duì)大型溞均造成游動(dòng)能力減弱的影響。

2.2 3種苦參堿制劑真實(shí)濃度檢測(cè)

分別在魚類急性毒性試驗(yàn)和溞類急性活動(dòng)抑制試驗(yàn)開始和結(jié)束時(shí)采集試驗(yàn)溶液，并對(duì)苦參堿進(jìn)行真實(shí)濃度檢測(cè)。在本實(shí)驗(yàn)室條件下，0.6%苦參堿可溶液劑、0.5%苦參堿水劑和0.3%苦參堿可濕性粉劑對(duì)魚類急性毒性試驗(yàn)的濃度偏差的最大值分別為10.00%、15.00%和16.23%，對(duì)溞類急性活動(dòng)抑制試驗(yàn)的濃度偏差最大值分別為11.17%、6.91%和16.01%。苦參堿實(shí)測(cè)濃度相對(duì)穩(wěn)定，濃度偏差均保持在理論濃度的±20%，因此使用理論濃度計(jì)算毒性端點(diǎn)值[25-26]。3種苦參堿制劑對(duì)水生生物急性毒性試驗(yàn)的暴露濃度見表3。

表3 水生生物急性毒性試驗(yàn)暴露濃度

2.3 3種苦參堿制劑對(duì)供試生物的毒性試驗(yàn)結(jié)果

因受樣品含量和劑型限制，0.6%苦參堿可溶液劑對(duì)蜜蜂接觸的毒性試驗(yàn)、0.5%苦參堿水劑和0.3%苦參堿可濕性粉劑對(duì)日本鵪鶉和蜜蜂的毒性試驗(yàn)均采用最高劑量進(jìn)行染毒暴露。結(jié)果顯示，0.6%苦參堿可溶液劑對(duì)蜜蜂接觸的LD50值大于12.1μg a.i./蜂；0.5%苦參堿水劑和0.3%苦參堿可濕性粉劑對(duì)日本鵪鶉的LD50值分別大于51.0和12.4 mg a.i./kg·bw，對(duì)蜜蜂經(jīng)口的LD50值分別大于29.2和1.1μg a.i./蜂，對(duì)蜜蜂接觸的LD50值分別大于10.2和0.9μg a.i./蜂。由此可見，3種苦參堿達(dá)到最高劑量時(shí)未對(duì)日本鵪鶉和蜜蜂造成明顯的毒害。

除此之外，供試生物的死亡率隨苦參堿濃度的升高而升高，呈現(xiàn)出顯著的濃度/劑量-效應(yīng)關(guān)系。結(jié)果顯示，0.6%苦參堿可溶液劑對(duì)日本鵪鶉和蜜蜂經(jīng)口的LD50值分別為42.8 mg a.i./kg·bw和21.1μg a.i./蜂，毒性分別為高毒和低毒。0.6%苦參堿可溶液劑、0.5%苦參堿水劑和0.3%苦參堿可濕性粉劑對(duì)家蠶的LC50值分別為44.40、大于2.00×103和3.07 mg a.i./L，毒性分別為中毒、低毒和高毒；對(duì)斑馬魚的LC50值分別為1.660、0.213和0.120 mg a.i./L，毒性分別為中毒、高毒和高毒；對(duì)大型溞的LC50值分別為3.26、2.47和4.58×10-2mg a.i./L，毒性分別為中毒、中毒和劇毒。3種苦參堿制劑對(duì)供試生物的急性毒性試驗(yàn)結(jié)果見表4。

表4 3種苦參堿制劑對(duì)供試生物急性毒性試驗(yàn)結(jié)果

3 結(jié)論與討論

急性毒性試驗(yàn)結(jié)果表明，0.5%苦參堿水劑和0.3%苦參堿可濕性粉劑對(duì)日本鵪鶉和蜜蜂已達(dá)到試驗(yàn)條件下可達(dá)到的最高劑量，但未產(chǎn)生明顯的毒性效應(yīng)。0.6%苦參堿可溶液劑對(duì)日本鵪鶉的毒性為高毒，對(duì)蜜蜂的毒性為低毒。0.6%苦參堿可溶液劑、0.5%苦參堿水劑和0.3%苦參堿可濕性粉劑對(duì)家蠶的毒性分別為中毒、低毒和高毒，對(duì)斑馬魚的毒性分別為中毒、高毒和高毒，對(duì)大型溞的毒性分別為中毒、中毒和劇毒。由此可見，不同的苦參堿制劑對(duì)非靶標(biāo)生物毒性影響存在差異。

苦參堿原藥對(duì)鵪鶉、家蠶、蜜蜂經(jīng)口和斑馬魚均為低毒，毒性端點(diǎn)值分別為512 mg a.i./kg·bw、大于3 000 mg a.i./L、1 145 mg a.i./L和85 mg a.i./L[14]。本研究所使用的3種苦參堿制劑對(duì)非靶標(biāo)生物的毒性相對(duì)苦參堿原藥較高，特別對(duì)于斑馬魚和大型溞毒性為中高毒，甚至劇毒。這一結(jié)果與川楝素和雷公藤生物堿等植物源農(nóng)藥的毒性結(jié)果較為相似，即78%川楝素原藥對(duì)鵪鶉和蝌蚪均為低毒，但0.5%川楝素乳油對(duì)鵪鶉中毒，蝌蚪高毒[27]。95%雷公藤總生物堿對(duì)蝌蚪為低毒，但1.0%雷公藤生物堿微乳劑對(duì)蝌蚪為高毒[28]。同時(shí)也有研究表明，部分化學(xué)農(nóng)藥的制劑產(chǎn)品對(duì)非靶標(biāo)生物的毒性高于原藥的毒性，如百菌清和雙甲脒的制劑產(chǎn)品對(duì)蜜蜂的經(jīng)口毒性至少是原藥的4倍[29]；二嗪磷原藥對(duì)鵪鶉為高毒，但其乳油和顆粒劑產(chǎn)品對(duì)鵪鶉則為劇毒[30]；硝磺草酮不同劑型對(duì)斑馬魚的急性毒性順序由大到小依次為：懸浮劑、可分散懸浮劑、水分散粒劑、原藥[31]。Caroline等[32]研究表明，部分農(nóng)藥助劑具有增強(qiáng)發(fā)育神經(jīng)毒性、遺傳毒性和擾亂激素功能等危害，還可能增強(qiáng)農(nóng)藥制劑對(duì)微生物、植物、魚類和兩棲動(dòng)物的毒性等。姜錦林等[33]調(diào)查發(fā)現(xiàn)，常用溶劑甲醇、乙醇、丙酮等在低濃度條件下對(duì)水生生物慢性影響較小，但甲苯、二甲苯等對(duì)生物存在重大慢性風(fēng)險(xiǎn)，表面活性劑可改變細(xì)胞膜通透性，造成細(xì)胞內(nèi)容物外滲，影響細(xì)胞的正常代謝活動(dòng)，最終導(dǎo)致細(xì)胞死亡，對(duì)水生生物產(chǎn)生不利影響。在101種助劑的毒性調(diào)查中，發(fā)現(xiàn)4%以上的助劑具有中等毒性，玫瑰精、甲苯、二甲苯、環(huán)己酮和壬基酚等具有致癌性、致畸性、致突變性、內(nèi)分泌干擾性、繁殖損傷和神經(jīng)毒性等健康風(fēng)險(xiǎn)。因此，苦參堿制劑毒性增高可能與其中添加的農(nóng)藥助劑有關(guān)。

根據(jù)NY/T 2882—2016《農(nóng)藥登記環(huán)境風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估指南》[34]，筆者進(jìn)行0.6%苦參堿可溶液劑對(duì)日本鵪鶉的急性毒性風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，得到風(fēng)險(xiǎn)商值最大值為0.074，即該制劑產(chǎn)品對(duì)日本鵪鶉的風(fēng)險(xiǎn)可接受。由此可見，農(nóng)藥對(duì)環(huán)境非靶標(biāo)生物的危害不僅取決于農(nóng)藥對(duì)非靶標(biāo)生物的毒性危害，還與農(nóng)藥施用后在環(huán)境中的暴露濃度有關(guān)。盡管不同劑型的毒性差異較大，但鑒于苦參堿易降解，在不同土壤和不同自然水體中的半衰期均不超過15 d[35-36]，在環(huán)境中的暴露濃度較低，其風(fēng)險(xiǎn)可接受。

隨著人們對(duì)環(huán)境保護(hù)和生態(tài)安全等方面的重視，農(nóng)藥助劑的安全性也受到了廣泛關(guān)注。目前，美國(guó)、澳大利亞和歐洲等地區(qū)已出臺(tái)了關(guān)于農(nóng)藥助劑的管理和登記辦法[37]。我國(guó)農(nóng)藥登記管理中雖暫未明確規(guī)定農(nóng)藥助劑的信息要求，但已開始加強(qiáng)對(duì)農(nóng)藥助劑的管理。因此，在大力開發(fā)苦參堿等對(duì)環(huán)境安全的農(nóng)藥的同時(shí)，研究開發(fā)和應(yīng)用毒性低、對(duì)環(huán)境友好、可增強(qiáng)藥效的農(nóng)藥助劑也越來越重要。

綜上所述，雖然苦參堿作為植物源農(nóng)藥具有對(duì)環(huán)境友好的特點(diǎn)，但本研究結(jié)果表明，苦參堿制劑對(duì)部分非靶標(biāo)生物毒性較高，可能與農(nóng)藥制劑中添加的助劑有關(guān)。因此，在植物源農(nóng)藥的劑型研制中，建議選用更加高效安全的助劑，以避免對(duì)非靶標(biāo)生物造成危害。