異常威客漢姆酵母QF-1-1對(duì)大鼠鉛暴露毒性的緩解作用

李麗杰，賀銀鳳

（內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院 呼和浩特010018）

隨著經(jīng)濟(jì)與工業(yè)的迅速發(fā)展，鉛污染和鉛中毒已成為嚴(yán)重危害人體健康的公共安全衛(wèi)生問(wèn)題[1]。重金屬鉛可對(duì)造血系統(tǒng)和神經(jīng)系統(tǒng)造成巨大傷害[2-3]。目前對(duì)于人體、動(dòng)物體鉛中毒的防治，主要采用西醫(yī)制劑及中藥治療的方法，然而這些方法存在副作用較大、化學(xué)成分較為復(fù)雜、作用機(jī)理尚不明確等缺點(diǎn)[4]。開(kāi)發(fā)無(wú)污染、安全的新型微生物吸附劑用于去除食品中的鉛污染或者緩解人體、動(dòng)物體鉛中毒成為研究的熱點(diǎn)。

酵母菌是食品發(fā)酵中應(yīng)用廣泛、安全的微生物，易培養(yǎng)、繁殖速度快，對(duì)重金屬鉛具有良好的吸附能力[5]。Ilyas 等[6]發(fā)現(xiàn)，將工業(yè)廢水中分離的熱帶假絲酵母（Candida tropicalis）PS33 培養(yǎng)于含35 mmol/L Pb2+的培養(yǎng)基，8 d 后，從中除去87%Pb2+。本實(shí)驗(yàn)室自包頭內(nèi)蒙古重金屬污染區(qū)土壤分離篩選得到的1 株金佩梅奇酵母（Metschnikowia chrysoperlae）對(duì)鉛的去除達(dá)到了92.56%以上，1 株高抗、高吸附性的異常威客漢姆酵母（Wickerhamomyces anomalus）QF-1-1 對(duì)Pb2+的去除率可達(dá)78.94%～91.67%[7]，并且異常威客漢姆酵母QF-1-1 在廣泛的pH 值范圍、高滲環(huán)境、0.3%膽鹽、模擬胃腸道等環(huán)境中仍具有極高的存活率，對(duì)DPPH·和·OH 等自由基具有一定的清除能力[8]。

本試驗(yàn)以前期篩選得到的異常威客漢姆酵母QF-1-1 為研究對(duì)象，對(duì)鉛暴露后中毒的大鼠進(jìn)行干預(yù)，分析其對(duì)鉛中毒大鼠生理機(jī)能的影響，并對(duì)其促排鉛作用進(jìn)行全面的評(píng)價(jià)，為異常威客漢姆酵母QF-1-1 菌株后續(xù)開(kāi)發(fā)和利用奠定理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物、材料與試劑

1）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物（150±20）g 清潔級(jí)健康Wistar大鼠，雌、雄各半，購(gòu)于內(nèi)蒙古大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究中心（北校區(qū)），生產(chǎn)許可證號(hào)：SCXK（蒙）2016-0001。適應(yīng)性飼養(yǎng)7 d，無(wú)異常情況，將試驗(yàn)大鼠標(biāo)號(hào)、稱(chēng)重、分籠，每籠一只。動(dòng)物房溫度：20～25 ℃，相對(duì)濕度40%～70%。

2）菌株 異常威客漢姆酵母QF-1-1 分離自?xún)?nèi)蒙古包頭土壤中，對(duì)重金屬Pb2+具備較高耐受能力和吸附能力，由內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院食品生物技術(shù)團(tuán)隊(duì)提供。

3）試劑 酵母提取粉、大豆蛋白胨，廣東環(huán)凱微生物科技有限公司；葡萄糖、瓊脂、蔗糖，上海滬試分析儀器有限公司；無(wú)水乙醇、氯霉素、硝酸、高氯酸、乙酸鉛，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑責(zé)任有限公司，以上試劑均為分析純級(jí)。

4）YPD 液體培養(yǎng)基 2%葡萄糖、2%蛋白胨、1%酵母粉，pH 6.0（115 ℃高壓滅菌20 min）。

1.2 儀器與設(shè)備

LCJ－25C 型冷凍干燥機(jī)，北京四環(huán)科學(xué)儀器廠有限公司；HFsafe1500 生物安全柜，香港力康精密科技有限公司；SX-500 型高壓滅菌鍋，日本Tomy Digital Biology 公司；AAS990 原子吸收光譜儀，北京普析通用公司；JY-LNK-872 多功能快速消化器，北京金洋萬(wàn)達(dá)科技有限公司；5810R 型高速低溫離心機(jī)，德國(guó)Eppendorf 公司；BPG-9240A型精密鼓風(fēng)干燥箱，上海一恒科技有限公司；Forma 8000 超低溫冰箱，美國(guó)賽默科技有限公司；VIPTM5 Jr 全自動(dòng)組織脫水機(jī)，日本櫻花（中國(guó)）科技有限公司；Leica2235 切片機(jī)，德國(guó)徠卡（Leitz）公司。

1.3 方法

1.3.1 異常威客漢姆酵母QF-1-1 菌粉的制備甘油保存的異常威客漢姆酵母QF-1-1 解凍后，取100 μL 菌液（菌體濃度為活菌計(jì)數(shù)108CFU/mL）接種于20 mL YPD 培養(yǎng)基中，在30 ℃下的恒溫培養(yǎng)箱中震蕩培養(yǎng)24 h（轉(zhuǎn)速160 r/min），獲得一代菌。之后按照相同接種量，將QF-1-1 活化3 代。將活化好的3 代菌液在4 ℃下離心6 min（轉(zhuǎn)速6 000 r/min）棄上清液，用超純水洗滌菌體3次，再加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)12%的脫脂乳作為保護(hù)劑，冷凍干燥濃縮成菌粉。通過(guò)平板菌落計(jì)數(shù)法確定菌粉中酵母菌的活菌數(shù)，使其達(dá)到1×108CFU/g 以上，以便于確定飼喂劑量。

1.3.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組及處理 選取健康雌、雄大鼠共60 只，飼養(yǎng)適應(yīng)1 周后將60 只大鼠隨機(jī)分成6 個(gè)試驗(yàn)組，每組10 只（5♂+5♀），參照文獻(xiàn)[9]所述，實(shí)驗(yàn)大鼠自由飲用乙酸鉛水質(zhì)量濃度定為低劑量1 mg/mL 和高劑量4 mg/mL，連續(xù)飼養(yǎng)7周，建立模型組，分組情況見(jiàn)表1。

表1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組Table 1 Animal experimental design

1.3.3 動(dòng)物處理及樣本的采集 實(shí)驗(yàn)周期為7周，每天記錄大鼠體質(zhì)量和飲水量等生理指標(biāo)，每周固定時(shí)間采集大鼠糞便。大鼠處死前12 h 禁食，不禁水。眼球取血，斷頸處死，解剖大鼠摘取肝臟、腎臟、腦組織并稱(chēng)重，取得樣品凍存于-80 ℃超低溫冰箱中。

1.3.4 檢測(cè)方法及檢測(cè)指標(biāo)

1.3.4.1 一般情況觀察 試驗(yàn)期間觀察大鼠的飲食、行為活動(dòng)、健康狀況、鉛中毒反應(yīng)及毛色等外觀體征，每天觀測(cè)2 次。

1.3.4.2 大鼠體質(zhì)量增長(zhǎng)率及臟器指數(shù)的測(cè)定大鼠體質(zhì)量增長(zhǎng)率及肝臟、腎臟、腦組織指數(shù)按式（1）和式（2）計(jì)算。

1.3.4.3 大鼠糞便中鉛含量的測(cè)定 將采集的糞便樣品，于60 ℃電熱鼓風(fēng)干燥箱中干燥24 h，烘干后的樣品混勻、磨碎。稱(chēng)取0.5～0.6 g 烘干磨碎的糞便樣品（精確至0.001 g）于消化管中，加入10 mL 硝酸和2.5 mL 高氯酸，將消化管置于多功能快速消化器上濕法消解（120 ℃/0.5～1 h，升至180℃/2～4 h，最后升至220 ℃），消化液逐漸由棕色變?yōu)闊o(wú)色透明或略帶黃色，并冒白煙，最終剩余1～2 mL，取出放冷趕酸，定容，用微孔濾膜過(guò)濾，采用火焰原子吸收光譜儀測(cè)定鉛含量[10]。

1.3.4.4 大鼠全血樣品鉛含量的測(cè)定 稱(chēng)取解凍后均勻的全血樣品2.0～3.0 g（精確至0.001 g），按照1.3.4.3 節(jié)的方法對(duì)全血樣品中的鉛進(jìn)行消化，消化結(jié)束后采用石墨爐原子吸收光譜儀測(cè)定鉛含量。

1.3.4.5 大鼠肝臟、腎臟、腦中鉛含量的測(cè)定 取解凍后肝臟、腎臟、腦組織制備組織勻漿。然后取肝臟樣品2.0～3.0 g，腎臟和腦樣品0.5～1.0 g，按照

1.3.4.3 節(jié)的方法對(duì)肝臟、腎臟、腦組織中鉛含量進(jìn)行測(cè)定。

1.3.4.6 病理學(xué)切片的制作 取厚度為2～3 cm，大小為1～5 cm 的組織，在質(zhì)量分?jǐn)?shù)10%福爾馬林中固定24 h，酒精梯度脫水、透明處理，包埋制作石蠟切片，經(jīng)蘇木精-伊紅（Hematoxylin-eosin，HE）染色后，在光學(xué)顯微鏡下觀察組織切片的病理形態(tài)學(xué)變化[11]。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

數(shù)據(jù)采用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS 23.0 和Excel 2010進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組間差異顯著性比較采用單因素方差分析。

2 結(jié)果與討論

2.1 大鼠臨床觀察結(jié)果

實(shí)驗(yàn)期間，各組大鼠均未出現(xiàn)死亡現(xiàn)象，各組大鼠發(fā)育正常，毛色正常。在飲用鉛水的第7 天左右，高鉛模型組部分老鼠存在嗜睡現(xiàn)象，其中2 只雌鼠異常興奮，經(jīng)常竄出飼養(yǎng)籠。解剖時(shí)，其中1只大鼠（雌）胃部存在大量未消化食物，其它大鼠內(nèi)臟均無(wú)異常。

2.2 異常威客漢姆酵母QF-1-1 對(duì)鉛暴露大鼠體質(zhì)量增長(zhǎng)率和臟器指數(shù)和的影響

鉛的毒性作用可能會(huì)使大鼠的臟器組織結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，而使其體質(zhì)量及臟器質(zhì)量改變。為了解決因大鼠個(gè)體體質(zhì)量相差較大引起臟器質(zhì)量差別較大的問(wèn)題，引入臟器指數(shù)來(lái)評(píng)價(jià)各個(gè)試驗(yàn)組大鼠臟器的變化，進(jìn)而評(píng)定其鉛中毒情況。

如表2所示，在試驗(yàn)7 周后，空白對(duì)照組、處理組大鼠體質(zhì)量較試驗(yàn)開(kāi)始都有明顯增長(zhǎng)，其中空白對(duì)照組增長(zhǎng)最多，高鉛模型組增長(zhǎng)最少，說(shuō)明大鼠引用鉛水中毒后會(huì)使其體質(zhì)量下降，并且與空白對(duì)照組比較差異顯著（P＜0.05），而食用含菌飼料進(jìn)行干預(yù)后可使其體質(zhì)量回升，然而各組之間的增長(zhǎng)量差異不顯著，不具有統(tǒng)計(jì)意義（P＞0.05）。

不同處理組大鼠肝臟、腎臟、腦指數(shù)見(jiàn)表2。由表2 可知，在肝臟指數(shù)方面，其中高鉛模型組與空白對(duì)照組相比上升最多，達(dá)到15.27%，差異顯著（P＜0.05），說(shuō)明高鉛模型組肝臟損傷最為嚴(yán)重，原因可能是由于肝臟因鉛的蓄積出現(xiàn)細(xì)胞腫脹、增生等不同程度的損傷，使臟器系數(shù)升高[12]。其它組與空白相比，肝臟指數(shù)雖有所上升但是差異不顯著（P＞0.05），低鉛模型組和干預(yù)組可能是由于鉛質(zhì)量濃度低，使其肝損傷與空白對(duì)照組相比沒(méi)有顯著差別，而高鉛干預(yù)組可能是由于食用異常威客漢姆酵母QF-1-1 而使其肝臟指數(shù)下降。

表2 異常威客漢姆酵母QF-1-1對(duì)大鼠體質(zhì)量增長(zhǎng)率和臟器指數(shù)的影響Table 2 Effects of Wickerhamomyces anomalus QF-1-1 on body mass growth rate and organ index of rats

腦指數(shù)方面，與空白對(duì)照組相比，各處理組的腦指數(shù)均升高，其中鉛模型組的腦指數(shù)升高顯著（P＜0.05），而干預(yù)組升高不顯著（P＞0.05），并且各模型組與干預(yù)組相比，腦指數(shù)也呈現(xiàn)顯著差異（P＜0.05），說(shuō)明模型組大鼠攝入鉛水后其腦組織出現(xiàn)水腫而使腦指數(shù)顯著升高，經(jīng)異常威客漢姆酵母QF-1-1 干預(yù)后，腦水腫明顯緩解，腦指數(shù)下降。高文靜等[13]研究巖藻多糖對(duì)染鉛大鼠影響時(shí)也發(fā)現(xiàn)鉛中毒模型組大鼠的腦指數(shù)會(huì)出現(xiàn)升高現(xiàn)象。

腎臟指數(shù)上，各處理組與空白對(duì)照組相比，均有顯著上升，并且均表現(xiàn)出差異顯著（P＜0.05），高鉛模型組上升達(dá)18.75%。趙世文等[14]研究發(fā)現(xiàn)鉛、鎘暴露下大鼠腎臟、肝臟會(huì)發(fā)生炎癥、水腫，導(dǎo)致相關(guān)臟器系數(shù)升高。冷星宇[15]研究了鼠李糖乳桿菌GG 株對(duì)鉛中毒子代鼠的保護(hù)作用后得到了與本研究類(lèi)似的結(jié)論。各模型組與干預(yù)組相比，只有低鉛組呈現(xiàn)顯著差異（P＜0.05），高鉛組無(wú)顯著差異（P＞0.05）。以上結(jié)果說(shuō)明，與肝臟和腦組織相比，鉛中毒對(duì)腎臟損傷最為明顯，并且異常威客漢姆酵母QF-1-1 干預(yù)只對(duì)低鉛模型組有顯著效果，原因可能是由于腎臟是最重要的排泄器官，是鉛毒性作用的主要靶器官之一，血液中的鉛流經(jīng)腎臟時(shí)，大部分輸送到腎皮質(zhì)后，對(duì)皮質(zhì)功能造成影響較大[16]。

2.3 異常威客漢姆酵母QF-1-1對(duì)大鼠血液鉛含量的影響

根據(jù)國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局對(duì)保健食品促進(jìn)排鉛功能評(píng)價(jià)方法中動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的規(guī)定[17]，本研究選取自由飲用1 mg/mL 和4 mg/mL 乙酸鉛水溶液，模擬自然狀態(tài)，構(gòu)建鉛中毒動(dòng)物模型。因?yàn)殂U經(jīng)過(guò)消化道進(jìn)入大鼠體內(nèi)后，首先隨血液循環(huán)到達(dá)全身，會(huì)引起血鉛含量的較大波動(dòng)，所以短期體內(nèi)鉛暴露的重要指示性指標(biāo)之一就是血鉛含量。

由于空白對(duì)照組大鼠血液中的鉛含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于各處理組，因此圖中未體現(xiàn)這組數(shù)據(jù)。由于成人鉛中毒沒(méi)有國(guó)際上通用標(biāo)準(zhǔn)，根據(jù)近年來(lái)國(guó)際研究成果并結(jié)合中國(guó)衛(wèi)生部對(duì)兒童鉛中毒的診斷標(biāo)準(zhǔn)，一般認(rèn)為：相對(duì)安全血鉛＜100 μg/L；高鉛血癥100～199 μg/L；輕度鉛中毒200～249 μg/L；中度鉛中毒250～449 μg/L；重度鉛中毒450～699 μg/L[18]。參照此診斷標(biāo)準(zhǔn)，由圖1 可知，低鉛模型組血液鉛含量為0.29 μg/g 達(dá)到中度鉛中毒，高鉛模型組血液鉛含量為0.56 μg/g 達(dá)到重度鉛中毒，并且兩組差異極顯著（P＜0.05），說(shuō)明本實(shí)驗(yàn)通過(guò)自由引用鉛水造模成功。其中，低鉛干預(yù)組的鉛含量為0.12 μg/g，明顯低于低鉛模型組，且差異顯著（P＜0.05）；高鉛干預(yù)組的鉛含量為0.48 μg/g，雖低于高鉛模型組，但是兩組之間差異不顯著（P＞0.05）。以上結(jié)果表明，異常威客漢姆酵母QF-1-1 對(duì)于低鉛模型組大鼠的中度鉛中毒有顯著的緩解作用，而對(duì)于高鉛模型組大鼠的重度鉛中毒效果并不明顯。

圖1 異常威客漢姆酵母QF-1-1 對(duì)鉛暴露大鼠血液中鉛含量的影響Fig.1 Effects of Wickerhamomyces anomalus QF-1-1 on contents of lead in blood of rats

2.4 異常威客漢姆酵母QF-1-1對(duì)大鼠糞便鉛含量影響

鉛經(jīng)血液循環(huán)進(jìn)一步到達(dá)肝、腎、腦等組織，經(jīng)過(guò)一系列的循環(huán)后，部分鉛會(huì)主要以糞便形式排出體外。由于空白對(duì)照組大鼠糞便里的鉛含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于各處理組，因此圖中未體現(xiàn)這組數(shù)據(jù)。由圖2 可知，在試驗(yàn)的7 周內(nèi)，高鉛模型組的鉛含量均顯著高于低鉛模型組（P＜0.05），說(shuō)明建模成功，并且干預(yù)組糞便中的鉛含量均高于模型組。其中在第1，3，7 周時(shí)，高鉛干預(yù)組糞便中的鉛含量顯著高于模型組（P＜0.05），尤其是在第1 周時(shí)，高鉛干預(yù)組糞便鉛含量為（31.94±12.02）mg/g，比高鉛模型組糞便鉛含量高28.9%。在第3 周時(shí)，低鉛干預(yù)組糞便鉛含量為（5.86±1.29）mg/g 比低鉛模型組高28.7%，且兩組差異顯著（P＜0.05）。結(jié)合2.3節(jié)血液鉛含量結(jié)果發(fā)現(xiàn)，當(dāng)糞便中鉛含量高時(shí)，對(duì)應(yīng)的血液中鉛含量則較低，再一次證明了異常威客漢姆酵母QF-1-1 具有促排鉛作用，而在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，各處理組糞鉛含量有一個(gè)降低又升高的趨勢(shì)，原因可能是由于異常威客漢姆酵母QF-1-1吸附鉛之后短時(shí)仍存在于腸道內(nèi)，腸道對(duì)鉛重新吸收所致。

圖2 異常威客漢姆酵母QF-1-1 對(duì)鉛暴露大鼠糞便中鉛含量的影響Fig.2 Effects of Wickerhamomyces anomalus QF-1-1 on contents of lead in the faces of rats

2.5 異常威客漢姆酵母QF-1-1對(duì)大鼠肝臟、腎臟、腦中鉛含量的影響

鉛在生物體的蓄積分為長(zhǎng)期蓄積和短期蓄積，本實(shí)驗(yàn)持續(xù)時(shí)間為7 周，為短期蓄積。短期蓄積通常蓄積在生物體代謝主要場(chǎng)所，如肝、腎等組織中。在各組織中，由于空白對(duì)照組中的鉛含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于各處理組，因此圖中未體現(xiàn)這組數(shù)據(jù)，由圖3 可知，在肝臟組織中，與低鉛干預(yù)組比較，低鉛模型組肝臟鉛含量顯著增高，達(dá)到（0.56±0.29）μg/g，是低鉛干預(yù)組鉛含量的2.7 倍，并且差異極顯著（P＜0.01）。同樣，與高鉛干預(yù)組比較，高鉛模型組肝臟鉛含量明顯升高達(dá)（0.77±0.23）μg/g，是高鉛模型組的1.6 倍，且呈極顯著性差異（P＜0.01）。各組大鼠腎臟組織中鉛殘留情況與肝臟不同，其中，與低鉛模型組比較，低鉛干預(yù)組腎鉛含量為1.04 μg/g，比低鉛模型組降低了0.25 μg/g，并且差異顯著（P＜0.05）。然而，與高鉛模型組比較，高鉛干預(yù)組雖然使腎臟鉛含量減少了0.12 μg/g，但不存在顯著性差異（P＞0.05）。在腦組織中，低鉛模型組腦鉛含量為0.61 μg/g，比低鉛干預(yù)組高66.8%，差異極顯著（P＜0.01）。高鉛模型組腦鉛含量為0.70 μg/g 比高鉛干預(yù)組高48.5%，差異極顯著（P＜0.01）。以上結(jié)果表明，酵母菌對(duì)鉛暴露大鼠中毒有明顯緩解作用，可以減少模型組中肝臟、腎臟、腦組織中的鉛蓄積，其中，與對(duì)照組比較，模型組大鼠肝臟和腦組織鉛蓄積減少效果顯著，而腎臟中鉛蓄積減少效果顯著的是中度鉛中毒的模型組大鼠。

圖3 異常威客漢姆酵母QF-1-1 對(duì)鉛暴露大鼠肝、腎、腦組織中鉛含量的影響Fig.3 Effects of Wickerhamomyces anomalus QF-1-1 on contents of lead in liver，kidney and brain of rats

應(yīng)用于食品中的酵母菌緩解體內(nèi)重金屬毒性作用的研究較少，然而Zhai 等[19]和Yu 等[20-21]對(duì)乳酸菌緩解重金屬中毒的研究與本結(jié)論一致。他們發(fā)現(xiàn)，植物乳桿菌 CCFM8610、CCFM8661、CCFM639 可以通過(guò)對(duì)重金屬鎘、鉛、鋁較高的吸附和去除能力，促進(jìn)糞便金屬離子的排出，降低金屬離子在血液、組織和器官中的蓄積降低重金屬的毒性作用。Jadán-Piedra 等[22]研究發(fā)現(xiàn)干酪乳桿菌BL23 和嗜酸乳桿菌ATCC4356 均可顯著降低急性汞中毒大鼠體內(nèi)有機(jī)汞的生物利用度，并增加了糞便中汞的含量。Majid 等[23]發(fā)現(xiàn)口服植物乳桿菌CNR273 和凝固芽孢桿菌中的任何一種菌都可以通過(guò)降低大鼠肝臟和腎臟中的汞水平，防止GPx 和SOD 水平的改變，從而對(duì)大鼠汞中毒起到顯著的保護(hù)作用。本研究中的異常威客漢姆酵母菌QF-1-1 在pH 5.5、質(zhì)量濃度100 mg/L 鉛溶液中，對(duì)Pb2+去除率高達(dá)97.89%[7]，是其緩解大鼠鉛中毒的主要原因，對(duì)于重度鉛中毒緩解效果不明顯，可能通過(guò)加大食用異常威客漢姆酵母QF-1-1的劑量和延長(zhǎng)時(shí)間可以解決。除此之外，本研究的異常威客漢姆酵母菌QF-1-1 是否具有與乳酸菌相似的重金屬的體內(nèi)解毒機(jī)制需要進(jìn)一步深入研究。

2.6 異常威客漢姆酵母QF-1-1 對(duì)鉛中毒大鼠肝臟、腎臟、腦組織病理學(xué)影響

由以上各組血液、肝臟、腎臟、腦中鉛含量可知，異常威客漢姆酵母QF-1-1 對(duì)緩解低鉛模型組的中度鉛中毒效果強(qiáng)于高鉛模型組的重度鉛中毒，因此以下各組織病理切片只呈現(xiàn)低鉛模型組和低鉛干預(yù)組的結(jié)果。圖4a～c 可知，空白對(duì)照組肝細(xì)胞漿均質(zhì)，核和胞漿完整，界限清晰。與空白對(duì)照組比較，低鉛模型組出現(xiàn)肝水腫，狄氏腔顯現(xiàn)，肝血竇竇壁（毛細(xì)血管壁）破損明顯，肝細(xì)胞普遍中度微泡性脂肪變性。食用異常威客漢姆酵母QF-1-1 的低鉛干預(yù)組只是肝輕度水腫，部分肝細(xì)胞核體積輕度腫大，淡染，肝血竇竇壁輕度不完整，無(wú)其它明顯病變。由圖4d～f 可知，空白對(duì)照組腎小管上皮細(xì)胞完整，無(wú)明顯病變。與空白對(duì)照組比較，低鉛模型組出現(xiàn)腎小管上皮細(xì)胞淡染，顆粒變性，部分上皮細(xì)胞脫落，一些上皮細(xì)胞核內(nèi)可見(jiàn)紅染滴狀包涵體樣物質(zhì)（箭頭），然而低鉛干預(yù)組除腎小管上皮細(xì)胞明顯腫脹外，無(wú)其它病變。由圖4g～i 可知，空白對(duì)照組的腦組織正常，無(wú)明顯病變。與低鉛模型組相比，低鉛干預(yù)組組腦組織內(nèi)偶見(jiàn)細(xì)小出血灶，而低鉛模型組出血灶面積大、數(shù)量多、并且出現(xiàn)腦水腫。以上組織病理切片結(jié)果表明，鉛水對(duì)健康大鼠的各組織器官有一定的損傷作用，食用異常威客漢姆酵母QF-1-1 可以緩解由于飲用鉛水造成的各臟器損傷，尤其是緩解肝臟和腦組織損傷的效果更明顯。

圖4 肝臟、腎臟和腦組織學(xué)變化Fig.4 Histological changes of liver，kidney and brain tissue

3 結(jié)論

大鼠自由飲用1 mg/mL 和4 mg/mL 乙酸鉛水溶液可致中度鉛中毒和重度鉛中毒，而同時(shí)食用異常威客漢姆酵母QF-1-1 可以降低血液、肝臟、腎臟、腦中的鉛含量，并且可以提高糞便中鉛含量，說(shuō)明異常威客漢姆酵母QF-1-1 對(duì)鉛中毒大鼠體內(nèi)蓄積的鉛有較好的促排作用，同時(shí)還可有效緩解鉛中毒造成的肝臟、腎臟、腦組織的病理?yè)p傷，尤其是對(duì)大鼠中度鉛中毒的效果優(yōu)于重度鉛中毒。