中華絹蛾為害藜麥初報及其防治措施

張樹明，邢 鯤，趙 飛

（山西農(nóng)業(yè)大學植物保護學院，山西太谷030801）

藜麥（Chenopodium quinoa）又稱南美藜、藜谷等，為藜科藜屬1年生植物，原產(chǎn)地在南美洲印第安地區(qū)安第斯山脈高原地區(qū)，是當?shù)鼐用竦膫鹘y(tǒng)食物，距今已有5 000～7 000 a的種植歷史[1]。藜麥生長于高原地區(qū)，因此，對低溫干旱有較高的抗性和適應性[2]。藜麥中含有多種滿足人體日常所需的營養(yǎng)成分，蛋白質(zhì)含量高且低糖低脂，具有極高的營養(yǎng)價值[3-4]，因此，被聯(lián)合國糧農(nóng)組織（WFO）認定為唯一一種單體植物，即能滿足人體日常所需營養(yǎng)的食物，素有“超級谷物”之稱[5]。自1988年我國成功開展藜麥引種后，逐漸在山西、吉林、青海、甘肅、河北等地形成了規(guī)?；斑B作化種植[6-11]。

中華絹蛾（Scythris sinensis）屬昆蟲綱鱗翅目絹蛾科，又稱四點絹蛾、藜中華絹蛾等。中華絹蛾主要取食藜科雜草，通常以老熟幼蟲在植物頂部的幼葉中生活，在植株葉片取食為害，可在葉片處拉絲結(jié)網(wǎng)，嚴重時?？墒罐伎浦参飻?shù)量大幅下降[12]。中華絹蛾一年3代，以蛹過冬，春季氣溫回升，越冬蛹開始羽化，蛹期9～10 d，成蟲期6～10 d，在5月產(chǎn)卵，卵期7～8 d，6月到7月上旬為羽化盛期，幼蟲期約20 d，入秋后老熟幼蟲作蛹，在密繭中越冬[13]。其1～2齡幼蟲具有群居性，3齡之后開始獨立生活。此外，成蟲還具有較強的遷飛性等習性。以往有關(guān)中華絹蛾的報道都是取食藜科雜草，曾被用來防治農(nóng)田草害[14]，但目前國內(nèi)外尚未見有為害藜麥的報道。所以中華絹蛾的防治研究尚不完善。

本研究在東陽藜麥田進行，采集中華絹蛾進行鑒定，并選用多種殺蟲劑進行大棚內(nèi)藥效篩選試驗，比較各類殺蟲劑的防治效果，旨在為藜麥病蟲害綜合防治提供用藥指導。

1 材料和方法

1.1 試驗地概況

試驗地設在山西省榆次縣東陽鎮(zhèn)的東陽試驗示范基地（東經(jīng)112.68°，北緯37.55°），于2020年7月22日至2月29日進行。該地土壤均為草甸土，土質(zhì)以中壤為主，全鎮(zhèn)地形均屬平川；氣候為溫帶大陸季風氣候，平均氣溫為9.7℃，年均降雨量為440.7 mm。

1.2 試驗材料

1.2.1 昆蟲采集2020年6月在晉中市東陽試驗地采集藜麥田內(nèi)中華絹蛾幼蟲、蛹、成蟲。

1.2.2 供試藥劑5%高效氯氰菊酯水乳劑（濟南綠霸農(nóng)藥有限公司）、3.2%高氯·甲維鹽微乳劑（濟南綠霸農(nóng)藥有限公司）、50億個孢子/g白僵菌微粒劑（寧夏中微泰克生物技術(shù)有限責任公司）、5%阿維菌素乳油（永農(nóng)生物科學有限公司）、10%氟啶蟲酰胺水分散粒劑（日本石原產(chǎn)業(yè)柱式會社）、24%甲氧蟲酰肼懸浮劑（南京南農(nóng)農(nóng)藥科技發(fā)展有限公司）、20 g/L氯蟲苯甲酰胺懸浮劑（美國富美實公司）、5%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽懸浮劑（陜西湯普森生物科技有限公司）、8 000 IU/μL蘇云金桿菌懸浮劑（山東魯抗生物農(nóng)藥有限責任）等藥劑均為市售，且采用田間推薦使用劑量（表1）。

表1 供試藥劑及用量

1.3 試驗方法

田間試驗嚴格按照《農(nóng)藥田間藥效試驗準則（二）》進行。試驗設9種藥劑處理和1個空白對照，每個處理3個重復。于2020年7月22日在藜麥大棚內(nèi)施藥，空白對照區(qū)不施藥。分別在施藥1、3、5、7 d后檢查中華絹蛾活蟲數(shù)量和藜麥生長情況，并記錄。

1.4 動物基因組DNA的提取及PCR擴增

將采集到的昆蟲幼蟲、蛹和成蟲均送往上海派森諾生物科技有限公司提取總DNA，所得樣品-20℃保存?zhèn)溆谩Ｊ褂猛ㄓ靡飻U增COI基因LCO1490：5′-GGTCAACAAATCATAAAGATATTGG-3′和HCO 2198：5′-TAAACTTCAGGGTGACCAAAAAATCA-3′，引物均由上海派森諾生物科技有限公司提供及合成。

PCR擴增反應體系如表2所示。輕彈混勻，瞬時離心收集管壁上的液滴至管底，在PCR擴增儀上進行PCR反應。PCR擴增反應程序為：95℃預變性5 min；95℃變性30 s，58℃退火30 s，72℃延伸1.5 min，35個循環(huán)；72℃終延伸7 min。

表2 PCR擴增反應體系

反應完成后，取3 μL PCR產(chǎn)物進行1%瓊脂糖凝膠電泳檢測。確認PCR擴增片段。

1.5 PCR產(chǎn)物的回收和測序分析

PCR產(chǎn)物用AxyPrep DNA凝膠回收試劑盒回收，具體操作按試劑盒說明書進行。取各個樣品純化后的PCR產(chǎn)物，通過瓊脂糖凝膠電泳檢測合格后將產(chǎn)物送至上海派森諾生物科技有限公司進行測序，并進行數(shù)據(jù)分析，得出鑒定結(jié)果。

1.6 數(shù)據(jù)分析

采用SPSS 20.0軟件Duncan新復極差法（DMRT）進行防效差異顯著性檢驗（P＜0.05）。

藥劑防治效果計算依據(jù)《農(nóng)藥田間藥效試驗準則（一）》進行。

2 結(jié)果與分析

2.1 害蟲種類鑒定

中華絹蛾為小型蛾，體長約7～9 mm，體形呈紡錘形，體色為黑色或黑褐色，頭部扁平，觸角呈絲狀，體表密被灰色短毛，前翅膜質(zhì)，呈深褐色，在1/3處和2/3處各有一亮黃色斑點，故又稱四點絹蛾（圖1）。蛹呈繭形，棕褐色（圖2）。幼蟲腹部正面為黃棕色（圖3）。

對線粒體細胞色素C氧化酶亞基COI基因進行擴增測序，將測序得到的序列在NCBI（https://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi?PROGRAM＝blastn&PAGE_TYPE＝BlastSearch&LINK_LOC＝blasthome）中進行比對（表3），選擇相似度最大的序列作為物種鑒定結(jié)果，確定為中華絹蛾。加拿大動物學家HEBERT等[15]對動物界包括脊椎動物和無脊椎動物共11門13 320個物種的線粒體細胞色素C氧化酶亞基COI基因序列比較分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，可以利用該基因一段長648 bp片段的DNA堿基序列差異進行物種的分類識別；除腔腸動物外，98%的物種種內(nèi)的差異為0～2%，種間差異平均為11.3%。所以，對于大部分動物群體而言，利用COI基因序列作為物種識別的條形碼是十分有效的。

表3 各樣品NCBI物種相似度比對結(jié)果

2.2 田間藥效試驗結(jié)果

由方差分析結(jié)果可知（表4），用藥1 d后，每個處理都表現(xiàn)出或高或低的效果，其中，5%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽懸浮劑和3.2%高氯·甲維鹽微乳劑這2種效果最佳，防治效果分別為58.5%和55.1%，且顯著高于其他處理組（P＜0.05）；24%甲氧蟲酰肼懸浮劑防治效果次之，為43.8%，且與其他處理組具有顯著差異（P＜0.05）。這3種藥劑在用藥1 d后均表現(xiàn)出較好的速效性。8 000 IU/μL蘇云金桿菌懸浮劑、50億個孢子/g白僵菌微粒劑、10%氟啶蟲酰胺水分散粒劑、5%阿維菌素乳油、20 g/L氯蟲苯甲酰胺懸浮劑、5%高效氯氰菊酯水乳劑處理1 d后的防效分別為6.7%、6.7%、6.7%、9.0%、9.0%、14.6%，且防治效果顯著低于前3種藥劑（P＜0.05）。

表4 不同殺蟲劑對中華絹蛾的田間防治效果

用藥3 d后，5%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽懸浮劑和3.2%高氯·甲維鹽微乳劑處理組防治效果仍然最佳，分別為61.8%和51.0%，且與其他處理組具有顯著差異（P＜0.05）；24%甲氧蟲酰肼懸浮劑防治效果較1 d后有所下降，為38.2%；5%高效氯氰菊酯水乳劑、10%氟啶蟲酰胺水分散粒劑、20 g/L氯蟲苯甲酰胺懸浮劑、50億個孢子/g白僵菌微粒劑、8 000 IU/μL蘇云金桿菌懸浮劑、5%阿維菌素乳油防效在8.8%～26.5%，且防治效果顯著低于其他處理組（P＜0.05）。

用藥5 d后，各處理組防治效果較之前略有改變，防效較好的藥劑為8 000 IU/μL蘇云金桿菌懸浮劑、10%氟啶蟲酰胺、24%甲氧蟲酰肼懸浮劑、5%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽懸浮劑，防治效果分別為63.6%、60.7%、59.8%、57.9%；3.2%高氯·甲維鹽微乳劑、20 g/L氯蟲苯甲酰胺懸浮劑、5%阿維菌素乳油防效相對較好，分別為51.4%、50.4%、47.6%；50億個孢子/g白僵菌微粒劑、5%高效氯氰菊酯水乳劑防效相對較差，分別為26.2%、23.4%，且與防效較好的4種藥劑間具有顯著性差異（P＜0.05）。

用藥7 d后，24%甲氧蟲酰肼懸浮劑、20 g/L氯蟲苯甲酰胺懸浮劑、10%氟啶蟲酰胺水分散粒劑防效相對較佳，分別為93.1%、86.1%、84.1%，且與其他處理組差異顯著（P＜0.05）；8 000 IU/μL蘇云金桿菌懸浮劑和5%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽懸浮劑處理組防效相對較好，分別為65.3%和57.4%；3.2%高氯·甲維鹽微乳劑和5%阿維菌素乳油處理組防效分別為48.5%和44.6%，防治效果一般；5%高效氯氰菊酯水乳劑和50億個孢子/g白僵菌微粒劑處理組防效相對較差，僅為23.8%和19.8%，且顯著低于其他處理組（P＜0.05）。

2.3 對藜麥的安全性評價

經(jīng)試驗期間觀察，各處理組與清水對照組藜麥生長無差異，且未發(fā)現(xiàn)藜麥生長不正常，未發(fā)現(xiàn)藥害，說明各處理組劑量設計合理，對藜麥安全。

3 結(jié)論與討論

本試驗選擇了9種藥劑，施藥1、3、5、7 d后各藥劑對中華絹蛾防效結(jié)果顯示，24%甲氧蟲酰肼懸浮劑、20 g/L氯蟲苯甲酰胺懸浮劑、10%氟啶蟲酰胺水分散粒劑在用藥7 d后，可有效控制中華絹蛾數(shù)量，建議在實際生產(chǎn)中使用。實際施藥時，隨著單一種類殺蟲劑施用時間的延長，殺蟲劑使用量的增加，害蟲會不可避免的出現(xiàn)抗藥性[15-16]，為避免這一現(xiàn)象的發(fā)生，應制定預防性抗性治理策略，要做到科學用藥，合理輪換用藥。本試驗中，8 000 IU/μL蘇云金桿菌懸浮劑處理組防效在7 d后可達60%以上，雖然防治效果比前3種低，但可與前3種藥劑輪換使用，避免害蟲產(chǎn)生抗藥性。而5%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽懸浮劑和3.2%高氯·甲維鹽微乳劑雖然在7 d后的防效低于以上4種藥劑，但在用藥前3 d內(nèi)的防治效果在9種藥劑中十分突出，表現(xiàn)出良好的速效性，因此，其在中華絹蛾發(fā)生前期施用，用以控制中華絹蛾種群快速增長。

本試驗選取的藥劑中，24%甲氧蟲酰肼懸浮劑是一種雙酰肼類昆蟲生長調(diào)節(jié)劑，對鱗翅目的昆蟲具有較廣譜的活性，其毒性較強，對環(huán)境和非靶標生物的安全性較高[17]，在本試驗中的表現(xiàn)也驗證了甲氧蟲酰肼對中華絹蛾優(yōu)秀的防治效果，推薦在藜麥實際生產(chǎn)中使用，可作為防治中華絹蛾等鱗翅目害蟲的首選藥劑。此外，20 g/L氯蟲苯甲酰胺懸浮劑、10%氟啶蟲酰胺水分散粒劑在本試驗中的表現(xiàn)也比較突出，氯蟲苯甲酰胺是以昆蟲魚尼丁受體為靶標的雙酰胺類新型殺蟲劑，其對鱗翅目昆蟲毒性較高，對環(huán)境較為安全，且與其他化學藥劑很少有拮抗作用[18]；氟啶蟲酰胺是一種高選擇性殺蟲劑，對防治刺吸式口器昆蟲極為有效，通過抑制昆蟲鉀離子通道，干擾昆蟲體細胞內(nèi)的離子電位及穩(wěn)態(tài)，從而影響唾液腺、馬氏管等器官的工作，破壞昆蟲的取食與排泄功能，從而抑制昆蟲進食，導致其因饑餓而死亡[19]，因此，推薦這2種藥劑與其他藥劑交替使用。5%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽懸浮劑是一種高效、低毒、低殘留的十六元大環(huán)內(nèi)酯類殺蟲劑，對鱗翅目昆蟲幼蟲的毒性較高，與高效氯氰菊酯混合制成的3.2%高氯·甲維鹽微乳劑可改善單一藥劑性能[20]，達到增效、經(jīng)濟等目的，結(jié)合本試驗數(shù)據(jù)分析，這2種藥劑在施用前期表現(xiàn)出良好的速效性，但在5 d后，防治效果趨于穩(wěn)定，持效性較差，因此，在中華絹蛾發(fā)生初期可用這2種藥劑防治，對中華絹蛾種群增長具有一定的抑制作用。

在藜麥中華絹蛾防治中，要將防治的各項措施貫穿于整個生產(chǎn)過程中，除病蟲害發(fā)生嚴重時需要化學防治，還應制定科學合理的綜合防治策略，對于防治中華絹蛾等鱗翅目昆蟲，特提出以下防治措施：第一，植株殘體、田間雜草等經(jīng)常帶有病蟲，是某些害蟲的重要越冬場所和產(chǎn)卵地點，因此，要及時清除廢棄秸稈、田間雜草等，可從源頭大大減少害蟲數(shù)量；第二，鱗翅目昆蟲大多都有強烈趨光性，可利用害蟲的這一特點，在田間地頭設置殺蟲燈，從而達到良好的誘殺效果；第三，保護害蟲天敵，利用害蟲天敵如捕食性鳥類、瓢蟲、草蛉、寄生蜂等控制害蟲數(shù)量[21-24]。