2種商品連翹的質(zhì)量比較

魏志華 郭婷婷 王新民

摘 要：分別采用HPLC法和UV-Vis法測(cè)定了不同產(chǎn)地連翹中有效成分（連翹苷、連翹酯苷A和總黃酮）含量及其浸出物含量。結(jié)果表明，各產(chǎn)地老翹和青翹中的浸出物、連翹苷含量和連翹酯苷A含量均符合藥典中的限量要求。青翹浸出物遠(yuǎn)高于老翹浸出物，老翹和青翹進(jìn)行無(wú)梗處理后，山西陵川無(wú)梗老翹中的浸出物含量提高較明顯，其余無(wú)梗老翹無(wú)明顯變化。山西陵川無(wú)梗老翹中，連翹苷和連翹酯苷A含量分別高達(dá)0.88%、0.69%，所有老翹和青翹樣品所含連翹苷和連翹酯苷A在去梗前后無(wú)明顯變化。老翹和青翹的總黃酮含量在去梗后均出現(xiàn)降低趨勢(shì)，而老翹總黃酮含量明顯低于青翹總黃酮含量。說(shuō)明連翹有梗與無(wú)梗對(duì)連翹苷和連翹酯苷A含量的影響較小，連翹藥材在加工炮制時(shí)不需要進(jìn)行去梗操作。

關(guān)鍵詞：連翹;活性成分;HPLC;UV-Vis

中圖分類號(hào) F311文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A文章編號(hào) 1007-7731（2021）22-0051-02

連翹為木犀科植物連翹[Forsythia suspensa （Thunb.） Vahl]的干燥果實(shí)，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，具有清熱解毒、消腫散結(jié)之功效。傳統(tǒng)上常常把連翹分為青翹和老翹2種商品規(guī)格，但目前市場(chǎng)上出現(xiàn)了有梗連翹和無(wú)梗連翹2種商品規(guī)格，兩者價(jià)格差異較大?！吨腥A人民共和國(guó)藥典》中并未對(duì)有梗連翹和無(wú)梗連翹進(jìn)行區(qū)分，兩者質(zhì)量是否有存在差異也尚未見相關(guān)報(bào)道[1-3]。為此，本實(shí)驗(yàn)通過(guò)研究有梗連翹和無(wú)梗連翹的質(zhì)量差異，為連翹生產(chǎn)及應(yīng)用提供參考。

1 儀器與試材

試驗(yàn)所用主要儀器有萊伯泰科LC-600型高效液相色譜、北京普析TU-1810紫外分光度計(jì)、高速粉碎機(jī)、超聲波清洗器、烘箱及電子天平等。

試驗(yàn)材料于2019年8月和10月分別采自山西陵川、河南濟(jì)源和河南欒川。8月采摘的尚未成熟的綠色連翹在鍋中蒸30min，取出曬干，加工成青翹，10月采摘的成熟果實(shí)曬干加工成老翹，每個(gè)產(chǎn)地的老翹和青翹一部分做去梗處理，一部分不去梗，備用。

連翹苷對(duì)照品（上海源葉生物科技有限公司），連翹酯苷A對(duì)照品（上海源葉生物科技有限公司），蘆丁對(duì)照品（上海源葉生物科技有限公司），甲醇（色譜純），乙腈（色譜純），65%乙醇（分析純），冰乙酸（分析純），磷酸（分析純），超純水。

2 試驗(yàn)方法

2.1 樣品處理 把每個(gè)產(chǎn)地的有梗老翹、無(wú)梗老翹、有梗青翹、無(wú)梗青翹分別粉碎，過(guò)2號(hào)篩，備用。

2.2 浸出物含量測(cè)定 取樣品約4.0g，精密稱定，置250mL的錐形瓶中，精密加65%乙醇100mL，密塞，冷浸，前6h內(nèi)時(shí)時(shí)振搖，再靜置18h，用干燥濾器迅速濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液20mL，置已干燥至恒重的蒸發(fā)皿中，在水浴上蒸干后，于105℃干燥3h，置干燥器中冷卻30min，迅速精密稱定重量。3次重復(fù)。

2.3 連翹苷和連翹酯苷A含量的測(cè)定 樣品溶液的制備：精密稱取各樣品粉末約2.0g，分別置于具塞錐形瓶中，加入95%甲醇30mL浸泡2h，超聲提取25min，放冷后用漏斗過(guò)濾，濾液再用0.45?m微孔濾膜過(guò)濾于標(biāo)記過(guò)的離心管中，待用[4]。

對(duì)照品溶液的制備：用十萬(wàn)分之一電子天平精密稱取連翹苷和連翹酯苷A對(duì)照品2.25mg和2.16mg，分別置于10mL的容量瓶中，先用少量的無(wú)水甲醇溶解，再用超聲溶解法處理10min，放冷后用無(wú)水的甲醇定容，制成0.225mg/mL的連翹苷對(duì)照品溶液和0.216mg/mL的連翹酯苷A對(duì)照品溶液;經(jīng)0.45?m微孔濾膜過(guò)濾，待用[4]。

色譜條件：色譜柱LabTech-C18（150mm×4.6mm，5μm）;測(cè)連翹苷時(shí)流動(dòng)相為乙腈-水（25∶75），檢測(cè)波長(zhǎng)為277nm，測(cè)連翹酯苷A時(shí)流動(dòng)相為乙腈-0.4%冰乙酸（15∶85），檢測(cè)波長(zhǎng)為330nm;流速為lmL/min;柱溫為室溫[5，6]。

按上述色譜條件，各進(jìn)樣20?L，按照色譜峰峰面積計(jì)算含量。

2.4 總黃酮含量（以蘆丁計(jì)）的測(cè)定 蘆丁對(duì)照品溶液的制備：精密稱取蘆丁的標(biāo)準(zhǔn)品2.8mg，置于50mL容量瓶中，用80%甲醇溶解并定容，搖勻，所得濃度均為0.056mg·mL-1，備用。

標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備：分別精密量取蘆丁對(duì)照品溶液0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0mL置于10mL容量瓶中，定容至刻度線。在327nm波長(zhǎng)處測(cè)其吸光度值[7]。以蘆丁濃度（mg·mL-1）為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，繪制蘆丁的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

蘆丁含量的測(cè)定：稱取各樣品粉末2g，分別置于標(biāo)記過(guò)的具塞錐形瓶中，精密加入60%乙醇30mL，密塞，在60℃超聲輔助提取50min，放冷，過(guò)濾，吸取提取液1mL，置于50mL容量瓶中，定容。在327nm波長(zhǎng)處測(cè)其吸光度，根據(jù)回歸方程計(jì)算蘆丁濃度[7]。

3 結(jié)果與分析

中國(guó)藥典規(guī)定了連翹醇溶性浸出物含量，青翹不得小于30.0%，老翹不得少于16.0%。由表1可知，3產(chǎn)地的老翹和青翹中浸出物含量均符合藥典中的限量要求。3產(chǎn)地老翹和青翹中連翹苷含量在0.46%～0.88%，連翹酯苷A含量在0.40%～0.69%，分別大于0.15%和0.25%中國(guó)藥典的限量要求;而其總黃酮含量在19.03%～25.87%。

通過(guò)對(duì)3產(chǎn)地連翹浸出物含量比較，發(fā)現(xiàn)青翹浸出物遠(yuǎn)高于老翹浸出物，而山西陵川無(wú)梗青翹浸出物最大，達(dá)43.12%，而河南欒川有梗老翹浸出物含量最低為25.48%;3個(gè)產(chǎn)地老翹進(jìn)行無(wú)梗處理后，無(wú)梗老翹的浸出物含量有一定程度提高，3個(gè)產(chǎn)地中只有山西陵川無(wú)梗連翹中浸出物含量提高較明顯，河南濟(jì)源的無(wú)梗老翹和河南欒川的無(wú)梗老翹增幅不明顯。3個(gè)產(chǎn)地的青翹進(jìn)行去梗處理后其浸出物含量和老翹表現(xiàn)基本一致，均略有增加。

3產(chǎn)地老翹中山西陵川無(wú)梗老翹中連翹苷和連翹酯苷A含量分別達(dá)0.88%、0.69%，在所有連翹樣品中含量最高;而山西陵川無(wú)梗老翹中連翹苷和連翹酯苷A含量均為0.62%，在所有老翹中最高;河南欒川有梗老翹中連翹苷和連翹酯苷A含量分別為0.46%、0.40%，含量最低。所有老翹樣品所含連翹苷和連翹酯苷A在去梗前后無(wú)明顯變化，去梗后的老翹中連翹苷含量略有增加，青翹去梗后連翹苷和連翹酯苷A含量也無(wú)明顯變化。比較3個(gè)產(chǎn)地的老翹及青翹中2種成分含量，在老翹和青翹中均以山西陵川的含量較高;連翹苷和連翹酯苷A是連翹質(zhì)量的主要評(píng)價(jià)指標(biāo)，試驗(yàn)結(jié)果與歷來(lái)認(rèn)為山西陵川連翹質(zhì)優(yōu)的觀點(diǎn)相符合。

本試驗(yàn)中，3產(chǎn)地老翹中總黃酮含量低于青翹，河南欒川無(wú)梗老翹中總黃酮含量最低，為19.03%，而山西陵川有梗青翹總黃酮含量最高，為25.87%。3產(chǎn)地老翹和青翹總黃酮含量在去梗后均出現(xiàn)降低趨勢(shì)。

4 討論

無(wú)梗連翹是近年在中藥材市場(chǎng)出現(xiàn)的一種商品規(guī)格，去梗后的連翹從外觀上看更加潔凈，價(jià)格常高于有梗連翹，但通過(guò)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)去梗后的連翹浸出物含量、連翹苷及連翹酯苷A等評(píng)價(jià)指標(biāo)變化并不明顯，對(duì)連翹藥材的質(zhì)量影響不大。另外，去梗需要耗費(fèi)大量的人工，增加人工成本，再者連翹在采收過(guò)程中由于機(jī)械外力作用，常?？梢栽斐刹糠止Ｃ撀洌瑹o(wú)須專門做無(wú)梗處理。另外，不同產(chǎn)地的連翹質(zhì)量存在一定差異，連翹的成熟度不一樣，其主要質(zhì)量評(píng)價(jià)指標(biāo)差異較大，建議在臨床應(yīng)用時(shí)區(qū)別對(duì)待。

當(dāng)前，中國(guó)藥典中尚未規(guī)定連翹藥材中總黃酮含量測(cè)定項(xiàng)目。本實(shí)驗(yàn)對(duì)其進(jìn)行了測(cè)定，老翹中總黃酮含量普遍低于青翹，可能與部分老翹成熟后果實(shí)開裂造成種子脫落有一定關(guān)系，也可能與黃酮類成分在連翹果實(shí)中的積累規(guī)律有關(guān)，尚需進(jìn)一步研究。

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（責(zé)編：張宏民）