生姜瀉心湯對(duì)感染難辨梭菌小鼠的治療作用研究Δ

馬致潔，呂 治，于小紅，章從恩，陳 熹

(1.首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京友誼醫(yī)院藥學(xué)部，北京 100050； 2.首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京友誼醫(yī)院檢驗(yàn)科，北京 100050)

艱難梭菌感染(Clostridiumdifficileinfection，CDI)是由于抗菌藥物使用時(shí)破壞了腸道菌群，使腸道菌群的“定植耐受”能力下降，艱難梭菌在腸道中大量繁殖產(chǎn)生毒素A&B，引起偽膜性結(jié)腸炎，甚至中毒性巨結(jié)腸及全身中毒反應(yīng)的疾病，形勢(shì)嚴(yán)峻[1]。治療CDI的首選方案為萬(wàn)古霉素或甲硝唑[2]。但近年來(lái)的臨床應(yīng)用中發(fā)現(xiàn)，萬(wàn)古霉素及甲硝唑治療方案僅能殺死菌體而難以清除芽孢，其治療后的復(fù)發(fā)率可高達(dá)20%～30%，導(dǎo)致大量患者最終發(fā)生復(fù)發(fā)性CDI[3-4]。單獨(dú)使用抗菌藥物治療艱難梭菌相關(guān)性腹瀉(Clostridiumdifficileassociated diarrhea，CDAD)的難度越來(lái)越大[5]。研究人員一直在積極地尋找替代藥物或治療方案[6]。

中醫(yī)藥治療細(xì)菌感染從細(xì)菌與患者2個(gè)方面出發(fā)，強(qiáng)調(diào)患者自身正氣的強(qiáng)弱與疾病的關(guān)系，認(rèn)為“正氣存內(nèi)則邪不可干”，內(nèi)因是根本。中醫(yī)證候是根據(jù)患者本身及病邪2個(gè)方面辨證而來(lái)。中藥復(fù)方的抗菌作用也不是單一的抑制或殺滅細(xì)菌，而是抗菌、免疫調(diào)節(jié)和消除細(xì)菌耐藥性等途徑的多方位組合作用。中醫(yī)藥從機(jī)體出發(fā)，在抗感染的同時(shí)，保持菌群狀態(tài)和人體內(nèi)環(huán)境的動(dòng)態(tài)平衡，維護(hù)器官正常生理功能。中藥復(fù)方生姜瀉心湯由生姜12 g、炙甘草9 g、人參9 g、干姜3 g、黃芩9 g、清半夏9 g、黃連3 g和大棗9 g組成，出自《傷寒論》。方中黃芩、黃連苦寒降泄；半夏、干姜配黃芩、黃連，寒熱并用；人參、甘草和大棗相配，意在甘溫補(bǔ)益脾胃之氣[7]。研究結(jié)果證實(shí)，生姜瀉心湯能有效預(yù)防伊立替康所致遲發(fā)性腹瀉[8]。生姜瀉心湯減輕了燥熱之性，又有化散水氣之功，止瀉的同時(shí)又不致便秘，是預(yù)防和輔助治療CDI的可行藥物，課題組前期借助網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)、計(jì)算機(jī)化學(xué)技術(shù)方法，同時(shí)查閱中醫(yī)經(jīng)典古籍，結(jié)合臨床專(zhuān)家的實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)，篩選出生姜瀉心湯作為治療難辨梭菌感染的候選方劑[9]。本研究在前期課題組已建立的C57BL/6小鼠難辨梭菌感染模型上[10]，評(píng)價(jià)生姜瀉心湯對(duì)難辨梭菌感染的治療作用，為深入研究、開(kāi)發(fā)用于治療難辨梭菌感染的藥物奠定基礎(chǔ)。

1 材料

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

C57BL/6小鼠，雄性，黑色，5～6周齡，符合無(wú)特定病原體(SPF)動(dòng)物標(biāo)準(zhǔn)。小鼠購(gòu)自華阜生物科技股份有限公司，許可證號(hào)為11401300053920。小鼠在開(kāi)始實(shí)驗(yàn)前先在常規(guī)條件下飼養(yǎng)1周。

1.2 儀器

BD BACTEC FX型全自動(dòng)培養(yǎng)系統(tǒng)(美國(guó)BD公司)；艱難梭菌A&B毒素檢測(cè)設(shè)備：VIDAS 免疫分析系統(tǒng)(法國(guó)生物梅里埃公司)。

1.3 藥品與試劑

(1)抗菌藥物：萬(wàn)古霉素分析標(biāo)準(zhǔn)品，卡那霉素分析標(biāo)準(zhǔn)品，慶大霉素分析標(biāo)準(zhǔn)品，多黏菌素E分析標(biāo)準(zhǔn)品，甲硝唑分析標(biāo)準(zhǔn)品，均購(gòu)自美國(guó)Sigma-Aldrich公司；克林霉素分析標(biāo)準(zhǔn)品，購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定院。(2)生姜瀉心湯處方藥材：生姜(批次：18100803)，半夏(批次：18040501)，干姜(批次：18061102)，黃連(批次：17072303)，黃芩(批次：18050801)，人參(批次：17081204)，大棗(批次：18091401)，炙甘草(批次：18101202)，均購(gòu)自天津盛實(shí)百草藥業(yè)有限公司。(3)艱難梭菌ATCC43255-VPI10463購(gòu)自北京中原公司代理美國(guó)標(biāo)準(zhǔn)生物品收藏中心(ATCC)；艱難梭菌A&B毒素檢測(cè)試劑盒(法國(guó)生物梅里愛(ài)公司，批號(hào)：1005021200)糞便細(xì)菌基因組DNA提取試劑盒(QIAamp DNA StoolMini Kit)，購(gòu)自QIAGEN中國(guó)(上海)有限公司。

2 方法

2.1 動(dòng)物造模

將C57BL/6小鼠隨機(jī)分組，除正常組外，對(duì)其他組小鼠進(jìn)行造模。取抗菌藥物混合液(萬(wàn)古霉素0.022 5 mg/ml，甲硝唑0.107 5 mg/ml，黏菌素425 U/ml，慶大霉素0.017 5 mg/ml)代替飲水3 d；3 d后，更換正常飲水，持續(xù)2 d后，腹腔注射克林霉素(10 mg/kg)；次日灌胃給予難辨梭菌105CFU/只，每只小鼠200 μl；給菌后隨時(shí)觀察記錄小鼠狀態(tài)，包括活動(dòng)情況、糞便形狀和死亡情況等；24 d后，取糞便檢測(cè)A&B毒素，綜合評(píng)價(jià)模型復(fù)制情況。

2.2 分組與給藥

取C57BL/6小鼠54只，隨機(jī)分為6組，每組9只，分別為正常組、模型組(難辨梭菌感染模型)、萬(wàn)古霉素組(50 mg/kg)和萬(wàn)古霉素聯(lián)合生姜瀉心湯低劑量組[萬(wàn)古霉素50 mg/kg+生姜瀉心湯16.4 g生藥/kg]，以及生姜瀉心湯低劑量組[16.4 g(生藥)/kg]、高劑量組[32.8 g(生藥)/kg]。模型組小鼠每日給予相同體積的0.9%氯化鈉溶液。生姜瀉心湯低劑量組小鼠的給藥劑量相當(dāng)于人等效劑量的2倍。所有小鼠于每日上午9時(shí)以灌胃方式給藥，連續(xù)給藥7 d。

2.3 生姜瀉心湯供試品制備

生姜瀉心湯的處方為：半夏9 g，干姜3 g，黃連3 g，黃芩9 g，人參9 g，大棗9 g(擘)，炙甘草9 g，生姜12 g；制備方法為：半夏加沸水清洗數(shù)遍后與其他藥材合并煎煮，藥液過(guò)濾濃縮至一定體積即得。

2.4 檢測(cè)指標(biāo)

整個(gè)實(shí)驗(yàn)流程分3個(gè)階段，即造模期(M)、治療期(T)和觀察期(O)，見(jiàn)圖1。在不同時(shí)期的不同時(shí)間點(diǎn)稱(chēng)量小鼠體重，收集小鼠大便檢測(cè)難辨梭菌毒素A&B(參照試劑盒操作說(shuō)明)，同時(shí)觀察小鼠行為狀態(tài)、糞便形狀，治療結(jié)束后每組隨機(jī)選3只小鼠，取結(jié)腸組織染色，其余小鼠繼續(xù)觀察一般情況，并稱(chēng)量體重，收集大便檢測(cè)難辨梭菌毒素A&B。

圖1 實(shí)驗(yàn)流程示意圖Fig 1 Experimental flow chart

2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

3 結(jié)果

3.1 體重變化情況

分別于造模期(M)、治療期(T)和觀察期(O)檢測(cè)小鼠體重變化情況，見(jiàn)圖2。造模前至造模成功時(shí)，各組小鼠體重穩(wěn)步升高，組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；造模成功后(M3)至治療中期(T2)，小鼠體重持續(xù)降低，其中模型組降低最明顯；治療期(T)，除生姜瀉心湯高劑量組小鼠在治療第5日(T3)的體重低于模型組外，其他監(jiān)測(cè)時(shí)間點(diǎn)(T1，T3，T4)，模型組小鼠體重顯著低于萬(wàn)古霉素組、萬(wàn)古霉素聯(lián)合生姜瀉心湯低劑量組和生姜瀉心湯低劑量組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；觀察期(O)，各組小鼠體重仍持續(xù)升高，但各組體重的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

圖2 六組小鼠不同時(shí)間點(diǎn)體重變化情況Fig 2 Body weight changes of mice among six groups at different time points

3.2 A&B毒素檢測(cè)結(jié)果

難辨梭菌毒素A&B是該細(xì)菌的主要致病物質(zhì)，小鼠糞便標(biāo)本中A&B毒素水平可有效反映腸道中致病菌繁殖的數(shù)量和發(fā)展情況。實(shí)驗(yàn)中分別于造模期(M)、治療期(T)和觀察期(O)的不同時(shí)間點(diǎn)檢測(cè)了正常組、模型組及各治療組小鼠糞便中A&B毒素的變化情況，觀察造模過(guò)程A&B毒素的變化情況。

3.2.1 造模期(M)小鼠A&B毒素的水平：在小鼠造模前期(M1、M2)，正常組和模型組小鼠難辨梭菌A&B毒素檢測(cè)結(jié)果均為陰性(<0.13)，且差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；造模最后1日給予難辨梭菌灌胃后(M3)，模型組小鼠糞便中A&B毒素水平顯著高于正常組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，說(shuō)明該時(shí)間點(diǎn)造模成功，見(jiàn)圖3。

3.2.2 治療期各組小鼠A&B毒素的水平：六組小鼠治療期(T)A&B毒素水平比較見(jiàn)圖4。造模成功后的治療期(T)，各組小鼠的A&B毒素水平變化較明顯。模型組小鼠在治療期(T1、T2、T3和T4)A&B毒素水平均為陽(yáng)性(>0.37)，在造模成功后治療的第1日(T1)達(dá)到高峰(5.34±1.48)，隨后開(kāi)始降低，在治療第5日(T3)降低至1.55±1.33，但仍處于陽(yáng)性區(qū)，并未降至正常水平，說(shuō)明模型成功，且相對(duì)較穩(wěn)定。萬(wàn)古霉素及萬(wàn)古霉素聯(lián)合生姜瀉心湯低劑量組小鼠在治療期間(T1、T2、T3和T4)A&B毒素水平顯著降低(P<0.01/0.05)，均處于陰性區(qū)(<0.13)，說(shuō)明萬(wàn)古霉素及其聯(lián)合生姜瀉心湯均表現(xiàn)出了較好的抑菌作用。生姜瀉心湯低劑量組小鼠在治療期間A&B毒素水平相對(duì)于模型組顯著降低，但治療前期(T1、T2)仍處于陽(yáng)性區(qū)(>0.37)，直至治療第5日(T3)降低至灰區(qū)(0.13～0.37)，說(shuō)明生姜瀉心湯低劑量也具有一定的抑制艱難梭菌作用，但其起效不及萬(wàn)古霉素快，且作用強(qiáng)度較萬(wàn)古霉素弱。生姜瀉心湯高劑量組在治療過(guò)程中A&B毒素水平與模型組相比未顯示出差異性，甚至在治療后期其毒素水平高于模型組，治療期間未顯示出明顯的作用。

3.2.3 觀察期各組小鼠A&B毒素水平：給藥7 d后，每組取3只小鼠，處理后取結(jié)腸組織。后期仍對(duì)實(shí)驗(yàn)中各組剩余6只小鼠的狀態(tài)、死亡率和生存期進(jìn)行觀察，同時(shí)定期收集小鼠糞便進(jìn)行A&B毒素的檢測(cè)。六組小鼠觀察期(O)A&B毒素水平比較見(jiàn)圖5。從觀察期(O1、O2)A&B毒素水平的檢測(cè)結(jié)果看，觀察第2日(O1)萬(wàn)古霉素組、萬(wàn)古霉素聯(lián)合生姜瀉心湯低劑量組和生姜瀉心湯低劑量組與模型組的差異仍有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，說(shuō)明停藥前2 d，各組的治療作用相對(duì)比較穩(wěn)定。觀察第3日，發(fā)現(xiàn)萬(wàn)古霉素組2只小鼠狀態(tài)不佳，且其中1只于當(dāng)日死亡，另1只于觀察第4日死亡；萬(wàn)古霉素聯(lián)合生姜瀉心湯低劑量組小鼠糞便較稀，小鼠整體狀態(tài)欠佳，其他各組小鼠狀態(tài)無(wú)明顯變化。說(shuō)明隨著停藥時(shí)間的延長(zhǎng)，萬(wàn)古霉素及萬(wàn)古霉素聯(lián)合生姜瀉心湯的治療作用逐漸減弱，甚至可能出現(xiàn)了復(fù)發(fā)情況。于觀察第5日(O2)檢測(cè)各組存活小鼠A&B毒素水平，發(fā)現(xiàn)萬(wàn)古霉素組、萬(wàn)古霉素聯(lián)合生姜瀉心湯低劑量組毒素水平明顯升高，與模型組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，其治療作用基本消失；生姜瀉心湯低劑量組小鼠A&B毒素水平與模型組相比，差異仍有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，仍維持一定的治療作用。

Ⅰ.O1；Ⅱ.O2；A.正常組；B.模型組；C.萬(wàn)古霉素組；D.萬(wàn)古霉素聯(lián)合生姜瀉心湯低劑量組；E.生姜瀉心湯低劑量組；F.生姜瀉心湯高劑量組；與模型組相比，*P<0.05，**P<0.01Ⅰ.O1；Ⅱ.O2；A.normal group; B.model group; C.vancomycin group; D.vancomycin combined with Shengjiang Xiexin decoction low-dose group; E.Shengjiang Xiexin decoction low-dose group; F.Shengjiang Xiexin decoction high-dose group； vs. the model group, *P<0.05，**P<0.01圖5 六組小鼠觀察期(O)A&B毒素水平比較Fig 5 Comparison of A&B level of C. difficile among six groups during observation (O)

3.2.4 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中各組小鼠A&B毒素水平的變化趨勢(shì)：六組小鼠實(shí)驗(yàn)過(guò)程中A&B毒素的變化趨勢(shì)見(jiàn)圖6。給予難辨梭菌造模后(M3)，除正常組，其他各組小鼠A&B毒素水平顯著升高，表明模型成功。治療期(T)及觀察期(O)，模型組小鼠A&B毒素水平持續(xù)呈降低趨勢(shì)，說(shuō)明模型組小鼠可能由于自身免疫的作用，難辨梭菌感染逐漸恢復(fù)。萬(wàn)古霉素組和萬(wàn)古霉素聯(lián)合生姜瀉心湯低劑量組小鼠在治療期(T1、T2、T3和T4)A&B毒素水平較穩(wěn)定，表現(xiàn)了較強(qiáng)的治療作用，但觀察期(O2)A&B毒素水平開(kāi)始升高，可能是小鼠服用萬(wàn)古霉素治療后產(chǎn)生了復(fù)發(fā)跡象。生姜瀉心湯低劑量組小鼠在治療期至觀察期持續(xù)呈降低趨勢(shì)，無(wú)復(fù)發(fā)跡象，表現(xiàn)了較穩(wěn)定的治療作用。生姜瀉心湯高劑量組小鼠在治療期至觀察期A&B毒素一直處于較高水平，未表現(xiàn)出治療作用。

圖6 六組小鼠實(shí)驗(yàn)過(guò)程中A&B毒素的變化趨勢(shì)Fig 6 Changing trend of A&B level of C. difficile in mice of different groups during experiment

3.2.5 結(jié)腸組織病理染色結(jié)果：治療結(jié)束后，剖取組織，常規(guī)取材，脫水，包埋，制片，蘇木精-伊紅染色后，在光學(xué)顯微鏡下觀察并描述不同種類(lèi)的病變部位，結(jié)果見(jiàn)圖7。從腸組織病理染色結(jié)果看，正常組小鼠腸組織黏膜層腸上皮結(jié)構(gòu)完整，上皮細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)正常、排列緊密，固有層腸腺豐富，可見(jiàn)較多杯狀細(xì)胞，未見(jiàn)明顯炎癥。模型組小鼠腸組織黏膜層局部可見(jiàn)少量上皮細(xì)胞脫落[如圖7(B)中黑色箭頭所示]，周?chē)逃袑又锌梢?jiàn)腸腺數(shù)量減少。萬(wàn)古霉素組小鼠黏膜層腸上皮結(jié)構(gòu)完整，上皮細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)正常、排列緊密，固有層腸腺豐富，可見(jiàn)較多杯狀細(xì)胞，未見(jiàn)明顯炎癥。萬(wàn)古霉素聯(lián)合生姜瀉心湯低劑量組小鼠黏膜層腸上皮結(jié)構(gòu)完整，上皮細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)正常、排列緊密，固有層腸腺豐富，可見(jiàn)較多杯狀細(xì)胞，未見(jiàn)明顯炎癥。生姜瀉心湯低劑量組小鼠黏膜層腸上皮結(jié)構(gòu)完整，上皮細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)正常、排列緊密，固有層腸腺豐富，可見(jiàn)較多杯狀細(xì)胞，未見(jiàn)明顯炎癥。生姜瀉心湯高劑量組小鼠黏膜層腸上皮結(jié)構(gòu)完整，上皮細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)正常、排列緊密，固有層腸腺豐富，可見(jiàn)較多杯狀細(xì)胞；局部黏膜下層可見(jiàn)少量淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)[如圖7(F)中黑色箭頭所示]。

A.正常組；B.模型組；C.萬(wàn)古霉素組；D.萬(wàn)古霉素聯(lián)合生姜瀉心湯低劑量組；E.生姜瀉心湯低劑量組；F.生姜瀉心湯高劑量組A. Normal group; B. model group; C. vancomycin group; D. vancomycin combined with Shengjiang Xiexin decoction low-dose group; E. Shengjiang Xiexin decoction low-dose group; F. Shengjiang Xiexin decoction high-dose group圖7 治療結(jié)束后腸組織蘇木精-伊紅染色結(jié)果(×200)Fig 7 HE staining results of intestinal tissue after treatment(×200)

4 結(jié)論

隨著廣譜抗菌藥物的廣泛使用，在全球范圍內(nèi)，抗菌藥物相關(guān)性腹瀉尤其是CDI引起的CDAD的發(fā)病率逐漸升高[11]。CDAD是由艱難梭菌異常過(guò)度增殖、釋放毒素引起的，以腹瀉為主的感染性疾病[12]。艱難梭菌易耐藥[13]、芽孢外界存活時(shí)間長(zhǎng)[14]和傳播性強(qiáng)的特點(diǎn)，導(dǎo)致了其在醫(yī)院內(nèi)和護(hù)理機(jī)構(gòu)中的暴發(fā)流行，威脅公共衛(wèi)生安全，引起了醫(yī)學(xué)界的密切關(guān)注與重視[15]。

傳統(tǒng)抗菌藥物治療CDI性腹瀉的難度越來(lái)越大[5]，需要尋求更加安全、有效的替代治療藥物及方案，傳統(tǒng)中醫(yī)藥逐漸受到重視。黃連主要成分小檗堿的藥效尤為突出[16]。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，小檗堿可抑制艱難梭菌生長(zhǎng)，明顯改善腸道菌群[17-18]；臨床研究結(jié)果顯示，小檗堿可有效抑制CDAD，其單獨(dú)使用的治療有效率可達(dá)84%[19]。課題組前期基于專(zhuān)家臨床經(jīng)驗(yàn)對(duì)CDAD進(jìn)行有效中藥方劑的篩選與評(píng)價(jià)，發(fā)現(xiàn)經(jīng)典方劑生姜瀉心湯治療CDAD具有較大潛力。

本研究模擬人類(lèi)感染難辨梭菌的過(guò)程，在C57BL/6小鼠上復(fù)制了難辨梭菌感染的動(dòng)物模型，并用該模型評(píng)價(jià)了生姜瀉心湯及生姜瀉心湯輔助萬(wàn)古霉素治療難辨梭菌的療效。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：(1)從艱難梭菌A&B毒素水平看，難辨梭菌感染C57BL/6小鼠模型基本復(fù)制成功，可用于藥物作用的評(píng)價(jià)。(2)從治療期A&B毒素水平看，萬(wàn)古霉素抑制難辨梭菌分泌毒素的作用非常顯著；萬(wàn)古霉素聯(lián)合生姜瀉心湯低劑量抑制難辨梭菌分泌毒素的作用很強(qiáng)，與萬(wàn)古霉素相當(dāng)；生姜瀉心湯低劑量有抑制難辨梭菌分泌毒性的作用，但不及萬(wàn)古霉素；生姜瀉心湯高劑量不僅無(wú)抑制難辨梭菌分泌A&B毒素的作用，反而有促進(jìn)其分泌的趨勢(shì)。(3)從觀察期A&B毒素水平看，觀察前期萬(wàn)古霉素組及萬(wàn)古霉素聯(lián)合生姜瀉心湯低劑量組毒素水平有升高趨勢(shì)，觀察至第5日，與模型組的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，可能存在小鼠服用萬(wàn)古霉素復(fù)發(fā)的現(xiàn)象，但從A&B毒素水平上看，萬(wàn)古霉素組和萬(wàn)古霉素聯(lián)合生姜瀉心湯低劑量組的差異并無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，其治療作用有減弱的趨勢(shì)；生姜瀉心湯低劑量組毒素水平較穩(wěn)定，與模型組比較，差異仍有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，仍表現(xiàn)出一定的治療作用。(4)從各組在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中A&B毒素水平的變化趨勢(shì)看，模型組小鼠在造模成功后，本身有恢復(fù)的趨勢(shì)，說(shuō)明模型組小鼠可能由于自身免疫的作用，難辨梭菌感染逐漸恢復(fù)，也可能在造模時(shí)難辨梭菌注射量偏低，導(dǎo)致感染較輕所致；萬(wàn)古霉素組和萬(wàn)古霉素聯(lián)合生姜瀉心湯低劑量組在造模期和觀察期毒素水平較穩(wěn)定，一直處于陰性區(qū)，但觀察期開(kāi)始升高，可能是小鼠服用萬(wàn)古霉素引起部分復(fù)發(fā)造成的；而生姜瀉心湯低劑量組在治療期至觀察期一直呈降低趨勢(shì)，無(wú)復(fù)發(fā)的跡象。

本研究結(jié)果說(shuō)明，生姜瀉心湯單獨(dú)使用的抑菌能力雖不及萬(wàn)古霉素，但仍表現(xiàn)出了一定的治療作用；且生姜瀉心湯低劑量聯(lián)合萬(wàn)古霉素使用，相對(duì)于萬(wàn)古霉素單獨(dú)使用，對(duì)毒素水平的抑制能力較穩(wěn)定。生姜瀉心湯的治療作用穩(wěn)定，起效較慢，且無(wú)復(fù)發(fā)跡象，體現(xiàn)了中藥的作用特點(diǎn)和優(yōu)勢(shì)，可為CDI提供中西醫(yī)結(jié)合治療的新思路和借鑒，為抗菌藥物的臨床合理使用提供參考。CDAD發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，與腸道菌群及腸內(nèi)代謝的破壞等有關(guān)，中藥治療與恢復(fù)腸道菌群及代謝平衡是否有關(guān)值得進(jìn)一步深入探討。