怒江2 種漆樹(shù)籽不同部位及提取方法對(duì)漆油脂肪酸的影響

解 麗 ，趙 歆 ，吳少雄 ，劉 鵬 ，周建于

（1）昆明醫(yī)科大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院；2）藥學(xué)院;云南 昆明 650500）

中國(guó)是漆樹(shù)（Toxicodendron verniciflua）的原產(chǎn)地，在云南省怒江州各少數(shù)民族獨(dú)特的飲食習(xí)俗中，積淀了豐富的漆樹(shù)文化內(nèi)涵，當(dāng)?shù)鼐用癯Ｒ云針?shù)籽制作各種生活美食和治療藥物[1?2]。漆樹(shù)籽分為外果皮、中果皮和果核3 層，外果皮和中果皮組成籽殼，占全果40%；中果皮可提取漆蠟，含量高達(dá)60%以上。果核由內(nèi)果皮及果仁構(gòu)成，占全果重60%，果核可榨取漆油，含漆油25%～40%。傳統(tǒng)工藝對(duì)漆籽油脂的提取均未將漆蠟和漆油進(jìn)行完全分離。怒江漆蠟（油）在當(dāng)?shù)胤Q(chēng)作“碧乃金”，被認(rèn)為具有食、藥保健功能。對(duì)分娩后的產(chǎn)婦有恢復(fù)體能、提神補(bǔ)氣、催乳、補(bǔ)血、止血、消炎、止痛、舒筋活血、提高機(jī)體免疫力的功效。根據(jù)漆籽的果皮類(lèi)型可分為白漆籽與黑漆籽，分別可榨出白漆樹(shù)油與黑漆樹(shù)油[3?4]。目前對(duì)于怒江漆油這種地方特色油脂的營(yíng)養(yǎng)成分和保健功能研究較少，白漆油和黑漆油的肪酸組成及含量的區(qū)別尚不清楚。

本研究以經(jīng)過(guò)不同原料壓榨得到的白漆樹(shù)籽油與黑漆樹(shù)籽油為實(shí)驗(yàn)材料，采用氣相色譜-質(zhì)譜法（gas chromatography-mass spectrometry,GCMS），對(duì)它們的脂肪酸成分進(jìn)行初步分析，為怒江漆樹(shù)種籽油的研究和系統(tǒng)開(kāi)發(fā)提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

白漆樹(shù)籽、黑漆樹(shù)籽：購(gòu)買(mǎi)于云南怒江大型農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)，瀘水市、福貢縣、蘭坪縣各1 份，每份2000～3000 g；市售食用白漆樹(shù)籽油、市售食用黑漆樹(shù)籽油：市售食用漆油是經(jīng)傳統(tǒng)壓榨方法壓榨而得，購(gòu)買(mǎi)于瀘水市、福貢縣、蘭坪縣各1 份，每份1000～2000 g，固態(tài)。乙醚：國(guó)藥集團(tuán)；石油醚（30 ℃～60 ℃）：西隴科學(xué)股份有限公司；氫氧化鈉：上海試四赫維化工有限公司；氫氧化鉀：上海申博化工有限公司。

1.2 儀器與設(shè)備

氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀Nexis GC-2030s：島津國(guó)際貿(mào)易（上海）有限公司；電熱恒溫水浴鍋：上海森信實(shí)驗(yàn)儀器有限公司；電熱鼓風(fēng)干燥箱DHG-9240A：上海鴻都科技有限公司；電子分析天平：鄭州萬(wàn)博儀器設(shè)備有限公司；HCD-1820-Ⅰ型純水機(jī)：重慶恒諾水處理設(shè)備有限公司；1000 克搖擺式萬(wàn)能高速粉碎機(jī)：上海比朗儀器有限公司；索式提取器：實(shí)驗(yàn)室組裝.

1.3 方法

1.3.1 樣品處理采集的3 份白漆樹(shù)籽與黑漆樹(shù)籽樣品各取200 g 混合，用石磨、鑷子將果皮、果核分離，洗凈風(fēng)干，粉碎后干燥密封備用。

采集的3 份市售食用白漆樹(shù)籽油、市售食用黑漆樹(shù)籽油樣品各取500 g 混合，儲(chǔ)存于通風(fēng)干燥處。

1.3.2 漆油的提取取處理好的上述樣品15 g，用濾紙?jiān)o放入索式提取器加入石油醚后，在一定條件下水浴回流熱提，提取完畢后蒸發(fā)溶劑，冷卻后得到漆油。（1）漆籽仁油：采用果仁提取；（2）漆籽油：由整顆漆籽果皮和果核提取，含有漆油和部分漆蠟；（3）市售食用漆籽油：由整顆漆籽包括果皮和果核，經(jīng)粉碎、機(jī)械壓榨加工而成，含有漆油和部分漆蠟,購(gòu)買(mǎi)時(shí)已經(jīng)是成品。

1.3.3 漆油油脂的指標(biāo)測(cè)定總脂肪含量測(cè)定。（1）參照GB 5009.6—2016[5]食品中脂肪的測(cè)定中索氏提取法提取。（2）脂肪酸組成分析。脂肪酸甲酯化：參照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB 5009.168—2016 要求[6]，將白漆籽仁油、黑漆籽仁油、白漆籽油，黑漆籽油、市售食用白漆樹(shù)籽油、市售食用黑漆樹(shù)籽油6 種油脂各稱(chēng)取0.3 g 樣品于5 mL 刻度試管中，加入2 mL 石油醚-苯（1∶1）0.4 mol/L 氫氧化鉀-甲醇溶液后搖勻，靜置10 分鐘，加入蒸餾水至刻度，靜置分層后取上層清液進(jìn)行GC-MS 分析。每個(gè)樣測(cè)定3 次，取平均值。

氣相色譜條件：色譜柱：30 m×0.25 mm×0.25 μm 的DB-5MS 石英毛細(xì)管柱；程序升溫：50 ℃保持5 min，以5 ℃/min 的速率升至190 ℃，保持5 min，以10 ℃/min 的速率升至280 ℃，保持15 min。進(jìn)樣口溫度：230 ℃；進(jìn)樣模式：載氣為高純氦，柱流量為1 mL/min；掃吹流量：3 mL/min；分流比：100∶1；進(jìn)樣量：1 μL。

質(zhì)譜條件：電離方式為EI；離子源溫度280 ℃；電子能量：70 eV；溶劑延遲：1.5 min；采集方式：scan；質(zhì)量掃描范圍：40～550 amu。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

GC-MS 檢索庫(kù)：NIST；采用峰面積歸一化法定量。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)所有數(shù)據(jù)均為3 組平行實(shí)驗(yàn)，采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，使用SPSS 21.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析，以P<0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 3 種白漆樹(shù)籽油的脂肪酸組成

對(duì)不同原料和提取方法獲得的3 種白漆樹(shù)種子油樣品色譜圖中主要峰進(jìn)行全面質(zhì)譜掃描分析，由GC-MS 譜圖（圖1～圖3）以及表1 可知，白漆籽仁與白漆籽總脂肪平均含量分別為7.57 g/100 g和19.93 g/100 g，均含有肉豆蔻酸等13 種脂肪酸。其中白漆籽仁油中飽和脂肪酸6 種，占脂肪酸總量20.20%，以棕櫚酸（16.73%）和硬脂酸（2.94%）為主。不飽和脂肪酸7 種，占79.78%，其中單不飽和脂肪酸4 中，以油酸含量最高（14.77%）；多不飽和脂肪酸3 種，以亞油酸（63.2%）和亞麻酸（1.11%）含量較高。

表1 不同漆籽油的脂肪酸組成的測(cè)定結(jié)果（n=3，）Tab.1 The determination results of fatty acid composition of different lacquer seed oils

表1 不同漆籽油的脂肪酸組成的測(cè)定結(jié)果（n=3，）Tab.1 The determination results of fatty acid composition of different lacquer seed oils

注：表1中僅列入了已確定的脂肪酸組分，而尚未確定的脂肪酸尚未列入其中；“－”為未檢出；同行字母不同代表差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P <0.05）。

圖1 白漆籽仁油氣質(zhì)聯(lián)用圖譜Fig.1 GC-MS chromatogram of white lacquer kernel oil

圖2 白漆籽油氣質(zhì)聯(lián)用圖譜Fig.2 GC-MS chromatogram of white lacquer seed

圖3 市售食用白漆籽油氣質(zhì)聯(lián)用圖譜Fig.3 GC-MS chromatogram of edible white paint sold in the market

白漆籽油中飽和脂肪酸6 種，占71.29%，以棕櫚酸（65.8%）和硬脂酸（4.76%）為主。不飽和脂肪酸7 種，總含量為28.72%；其中單不飽和脂肪酸4 中，以油酸含量最高（15.77%）；多不飽和脂肪酸3 種，以亞油酸（12.3%）含量最高。

而市售食用白漆籽油中檢測(cè)的飽和脂肪酸主要為棕櫚酸（64.63%）和硬脂酸（5.65%）；單不飽和脂肪酸為油酸（19.33%），多不飽和脂肪酸主要是亞油酸（7.38%）。此外，市售食用白漆油中十六烯酸、1，3－二硬脂酸甘油酯、十六碳二酸、二十烷二酸、十七酸、三反油酸甘油酯等6 種脂肪酸，總含量占比約2%左右。

2.2 3 種黑漆樹(shù)籽油的脂肪酸組成

對(duì)3 種黑漆樹(shù)種子油樣品色譜圖中主要峰進(jìn)行全面質(zhì)譜掃描分析，由GC-MS 譜圖（圖4-圖6）和表1 可知，黑漆籽仁與黑漆籽總脂肪平均含量分別為11.60 g/100 g 和42.67 g/100 g，黑漆籽仁油中含14 種脂肪酸，比黑漆籽油多了一種二十三碳酸。其中黑漆籽仁油中飽和脂肪酸6 種，總含量為24.86%，以棕櫚酸（20.97%）和硬脂酸（3.14%）為主。不飽和脂肪酸8 種，總含量為75.10%；其中單不飽和脂肪酸4 中，以油酸含量最高（13.23%）；多不飽和脂肪酸4 種，以亞油酸（58.67%）和亞麻酸（1.55%）含量較高。

圖4 黑漆籽仁油氣質(zhì)聯(lián)用圖譜Fig.4 GC-MS chromatogram of black lacquer kernel oil

圖5 黑漆籽油氣質(zhì)聯(lián)用圖譜Fig.5 GC-MS chromatogram of black lacquer seed

圖6 市售食用黑漆籽油氣質(zhì)聯(lián)用圖譜Fig.6 GC-MS chromatogram of edible black lacquer oil sold in the market

黑漆籽油中飽和脂肪酸6 種，總含量為76.08%，以棕櫚酸（70.5%）和硬脂酸（4.06%）為主。不飽和脂肪酸7 種，總含量為23.90%；其中單不飽和脂肪酸4 中，以油酸含量最高（18.0%），棕櫚一烯酸（1.25%）；多不飽和脂肪酸3 種，以亞油酸（4.23%）含量最高。

市售食用黑漆籽油飽和脂肪酸主要為棕櫚酸（70.47%）和硬脂酸（5.31%）；單不飽和脂肪酸為油酸（16.97%），多不飽和脂肪酸主要是亞油酸（1.25%）。市售食用黑漆油中十六烯酸、1，3-二硬脂酸甘油酯、十六碳二酸、二十烷二酸、14-甲基十六烷酸、順式-十八烷酸、山崳酸、十六酸乙烯酯等8 種脂肪酸成分，與黑漆籽和黑漆仁油成分不盡相同?？偤考s3%左右。

2.3 黑、白2 種漆樹(shù)籽油的脂肪酸組成比較

以同樣原料和提取方法得到的黑、白兩種漆籽油，它們的脂肪酸組成和含量相似。6 種不同的油脂不飽和脂肪酸均以棕櫚酸和硬脂酸為主，以完整原料提取的漆籽油棕櫚酸含量更高，而僅以果仁提取的漆籽仁油棕櫚酸含量較少（P<0.05），見(jiàn)表1。對(duì)于單不飽和脂肪酸，6 種油脂以油酸含量最高，含量由多到少分別為：市售食用白漆油 >黑漆籽 >市售食用黑漆油 >白漆籽 >黑漆籽仁油 >白漆籽仁油（P<0.05），見(jiàn)表1，圖1～圖6，黑漆籽油中還含有較為豐富的棕櫚一烯酸；而多不飽和脂肪酸以亞油酸含量最高，從果仁中提取的漆籽仁油不飽和脂肪酸含量更豐富，亞油酸含量排序：白漆籽仁油 >黑漆籽仁油 >白漆籽 >市售食用白漆油 >黑漆籽 >市售食用黑漆油（P<0.05），不同漆油中亞麻酸含量：黑漆籽 >白漆籽 >白漆籽仁油 >黑漆籽仁油（P<0.05），見(jiàn)表1，圖1～圖6。

3 討論

從脂肪酸種類(lèi)來(lái)看，市售食用漆籽油檢測(cè)的脂肪酸種類(lèi)少于漆籽仁油和漆籽油，脂肪酸以飽和脂肪為主，含量占70%以上，又以棕櫚酸含量最高，而不飽和脂肪酸種類(lèi)較少，亞麻酸未檢出。這個(gè)結(jié)果與李浩成等研究怒江州4 個(gè)主要產(chǎn)地及不同加工方式漆油成分分析一致[7]。漆籽油以整顆漆樹(shù)籽為原料，索氏提取后進(jìn)行脂肪酸測(cè)定，檢出脂肪酸種類(lèi)多于市售漆籽油，但含量仍以棕櫚酸占主導(dǎo)的飽和脂肪為主。不飽和脂肪酸含量較少，以油酸為主，占比15%～18%。這個(gè)結(jié)果可能與原料選擇、提取壓榨和貯存條件有關(guān)。市售食用漆籽油采用傳統(tǒng)工藝，將整個(gè)漆樹(shù)籽粉碎后進(jìn)行機(jī)械壓榨，原料中包含有果皮和果核，含有漆油和部分漆蠟，因此成品呈固態(tài)，當(dāng)?shù)鼐用癫蛔鋈魏伟b就進(jìn)行貯存，產(chǎn)品極易被氧化，因此營(yíng)養(yǎng)價(jià)值損失較大。漆籽油提取原料與市售食用漆籽油一致，因此主要成分含量較為相似。但由于沒(méi)有長(zhǎng)時(shí)間暴露于空氣貯存，因此不飽和脂肪酸種類(lèi)較多。此外，市售食用白漆油與市售食用黑漆油均含有十六碳二酸、二十烷二酸兩種二元酸。值得注意的是，當(dāng)?shù)厣俨糠志用袷秤脗鹘y(tǒng)工藝獲得的漆油，會(huì)出現(xiàn)過(guò)敏性皮炎 皮疹等癥狀[8?9]，可能與果皮也參與其中進(jìn)行壓榨，含有漆酚等化學(xué)成分有關(guān)。

漆籽仁油提取原料為最核心的果仁部分，提取方式為索氏提取，成分以漆油為主。因此，脂肪酸種類(lèi)豐富，并以不飽和脂肪酸為主，含量達(dá)70%以上，亞油酸含量高達(dá)60%左右。這與王佳等對(duì)怒江地區(qū)4 種類(lèi)型漆樹(shù)的漆樹(shù)籽油和蠟的脂肪酸成分分析結(jié)果一致[10]。多不飽和脂肪酸被認(rèn)為是調(diào)節(jié)人類(lèi)健康和發(fā)展的關(guān)鍵營(yíng)養(yǎng)素[11]，其中亞油酸和亞麻酸不能自身合成，必須從食物中獲取，所以被稱(chēng)為必需脂肪酸[12?13]。亞油酸具有防癌抗癌，抗粥狀動(dòng)脈硬化，參與脂肪分解與新陳代謝，增強(qiáng)機(jī)體免疫能力，促進(jìn)骨組織的代謝等作用[13?15]。其中檢測(cè)出含量較高的單不飽和脂肪酸為油酸，含量與漆籽油和市售食用漆籽油相當(dāng)，對(duì)降低人體膽固醇有重要作用[16]。因此，以果仁提取的漆籽油在三種類(lèi)型的油脂中營(yíng)養(yǎng)價(jià)值最高。

白漆籽仁油與黑漆籽仁油相比，前者的油酸、亞油酸的含量高于后者，而亞麻酸含量則是黑漆籽仁油較高（P<0.05）。黑漆籽油還有一個(gè)特點(diǎn)，棕櫚一烯酸含量高于白漆籽油，達(dá)1%左右。棕櫚烯酸存在于人體皮膚真皮層中，是我們皮脂中的一種必須脂肪酸，因此它具有天然的親膚性，而且在動(dòng)植物油中鮮有存在。

綜上所述，漆油提取原料和壓榨工藝的選擇對(duì)所獲得的油脂脂肪酸組成和營(yíng)養(yǎng)價(jià)值有較大影響。以果仁部分為原料提取的漆籽仁油不飽和脂肪酸含量最高，營(yíng)養(yǎng)保健價(jià)值最優(yōu)，適合于作為食用油脂。以整個(gè)漆籽（包括果皮和果仁）為原料提取的漆樹(shù)籽油，含有漆油和部分漆蠟，飽和脂肪含量高，因此營(yíng)養(yǎng)價(jià)值被減弱，但可以作為潤(rùn)膚劑、表面活性劑、洗滌劑等用于食品、藥品和化妝品中。本研究為漆籽資源的開(kāi)發(fā)利用提供科學(xué)依據(jù)和數(shù)據(jù)參考。