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    22年前命案中作案工具上DNA檢測1例

    2021-12-07 03:05:32劉翠蘭吳玉劍李暉黃方方王茜孫婧
    法醫(yī)學(xué)雜志 2021年4期
    關(guān)鍵詞:作案工具邱某檢材

    劉翠蘭,吳玉劍,李暉,黃方方,王茜,孫婧

    武漢市公安司法鑒定中心,湖北 武漢 430024

    1 案 例

    1.1 簡要案情

    1997年6月12日13:00許,外來務(wù)工人員邱某在其租住的某集貿(mào)市場鐵棚內(nèi)被人先用釘錘打擊頭部,后用菜刀多次砍其頸部致死,案件一直未能偵破。2019 年8 月23 日,辦案人員再次送檢該案作案工具釘錘及菜刀,DNA 技術(shù)人員通過對作案工具全面進(jìn)行網(wǎng)格化分區(qū)分層檢驗(yàn),在釘錘上檢出死者邱某DNA分型,在菜刀上檢出一未知男性DNA 分型,該未知男性Y 染色體STR 分型比中外省某縣的“付”姓家系和“郭”姓家系。

    1.2 DNA提取及檢驗(yàn)

    送檢的釘錘斷成兩截,錘頭已經(jīng)生銹(圖1A);菜刀有一個(gè)缺口,刀刃部分也布滿鐵銹(圖1B)。把釘錘的錘頭、錘柄劃分成30 個(gè)網(wǎng)格,把菜刀的刀刃、刀柄劃分成24 個(gè)網(wǎng)格,每個(gè)網(wǎng)格大小約3 cm×3 cm。分兩層提取,先用脫落細(xì)胞粘取器粘取上述每個(gè)網(wǎng)格的表層,均勻用力粘取約20 次,再用干濕棉簽二步擦拭每個(gè)網(wǎng)格,54個(gè)網(wǎng)格共獲取108份檢材。然后用干濕棉簽二步擦拭釘錘和菜刀的溝槽、縫隙處,各提取4份檢材。

    圖1 作案工具Fig.1 Tools for criminal purpose

    采用聯(lián)苯胺試驗(yàn)檢驗(yàn)上述116 份檢材。采用磁珠法分別提取上述116 份檢材的DNA,洗脫體積為20 μL。DNA 模板采用GlobalFilerTMPCR 擴(kuò)增試劑盒及YfilerTMPlus PCR擴(kuò)增試劑盒(美國Applied Biosys?tems公司)擴(kuò)增,反應(yīng)體系為10 μL,31個(gè)擴(kuò)增循環(huán)。擴(kuò)增產(chǎn)物用3500xL基因分析儀(美國Applied Biosystems公司)檢測,上樣量為2.5 μL。使用GeneMapperTMIDX軟件(美國Applied Biosystems公司)分析DNA圖譜。

    1.3 檢驗(yàn)結(jié)果

    116 份檢材的聯(lián)苯胺試驗(yàn)檢驗(yàn)結(jié)果均為陰性。釘錘的64 份檢材中共有3 份檢出死者邱某的常染色體STR 分型(圖1A 中標(biāo)注“1、2、3”處),其中錘頭縫隙處(圖1A 中標(biāo)注“3”處)檢材分型完整(圖2);4 份檢出死者邱某Y 染色體STR 分型(圖1A 中標(biāo)注“1、2、3、4”處),其中錘頭縫隙處(圖1A 中標(biāo)注“3”處)檢材分型完整(圖3)。菜刀的52 份檢材中共有5 份檢出同一未知男性常染色體STR 分型(圖1B 中標(biāo)注“1、2、3、4、5”處),其中刀刃處(圖1B 中標(biāo)注“5”處)檢材分型完整(圖4);5 份檢出同一未知男性Y 染色體STR 分型(圖1B 中標(biāo)注“1、2、3、4、5”處),其中刀刃處(圖1B中標(biāo)注“5”處)檢材分型完整(圖5)。檢出標(biāo)準(zhǔn)均為檢出9 個(gè)及以上STR 基因座,相對熒光單位(relative fluorescence units,RFU)>100。

    圖2 釘錘上常染色體STR分型結(jié)果Fig.2 Autosomal STR typing results of the nail hammer

    圖3 釘錘上Y染色體STR分型結(jié)果Fig.3 Y chromosome STR typing results of the nail hammer

    圖4 菜刀上常染色體STR分型結(jié)果Fig.4 Autosomal STR typing results of the knife

    圖5 菜刀上Y染色體STR分型結(jié)果Fig.5 Y chromosome STR typing results of the knife

    2 討論

    本例從22 年前發(fā)生的命案作案工具(釘錘和菜刀)中檢出邱某和一未知男性完整獨(dú)立的常染色體和Y 染色體STR 分型,且該未知男性的Y 染色體STR 分型比中外省的兩個(gè)家系,為案件的偵破提供了極其重要的線索。

    從當(dāng)年的現(xiàn)場照片看,釘錘和菜刀上疑似留有大量血跡,但現(xiàn)在116 份檢材的血痕預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果均為陰性,說明當(dāng)年遺留在釘錘和菜刀上血跡中的血紅蛋白已經(jīng)完全降解。由于年代久遠(yuǎn),釘錘和菜刀上的DNA絕大部分也已經(jīng)腐敗、降解和丟失。此外,釘錘和菜刀曾經(jīng)多次被提取過其他的痕跡物證,如熏顯過指紋等,不排除某些抑制物存在的可能。由于實(shí)驗(yàn)室多次搬家,物證保管環(huán)境發(fā)生變化也不利于作案工具上DNA 的保存。盡管如此,仍有極其微量的DNA 殘存下來,并被成功檢出完整DNA 分型。分析其成功的原因有如下幾點(diǎn):(1)對工具全面進(jìn)行網(wǎng)格化分區(qū)分層檢驗(yàn),包括溝槽、縫隙處,確保不遺漏,每個(gè)網(wǎng)格的面積不宜太大(<10 cm2),面積太大,抑制物增多,且容易檢出混合DNA 分型,特別是多人混合,不易拆分[1]。本實(shí)驗(yàn)也檢出大量混合DNA 分型,隨機(jī)擴(kuò)增比較多,擴(kuò)增極其不平衡,沒有太大分析價(jià)值。不同提取轉(zhuǎn)移方法對生物檢材DNA 檢出率有很大影響[2],要兼顧載體屬性,特別注意溝槽、縫隙處。本實(shí)驗(yàn)采用脫落細(xì)胞粘取器粘取和干濕棉簽二步擦拭分兩層提取所有檢材,兩次檢出完整DNA 分型的檢材都是粘取而來,推測原因可能是歷時(shí)太久,釘錘頭和菜刀已經(jīng)嚴(yán)重生銹,除鐵銹外的其他抑制物比較多,表層粘取的DNA 中抑制物比深層次棉簽擦拭的少。實(shí)際檢案中為了獲得更大的DNA 模板量,可以把黏附膜和棉簽合并提取。(2)在控制污染、減少抑制的前提下,DNA 檢測的各個(gè)環(huán)節(jié)均注意加大DNA 量,如減小洗脫體積,終體積減少至20 μL。擴(kuò)增時(shí)增加1~2 個(gè)循環(huán)數(shù),但不建議增加更多循環(huán)數(shù),防止非特異性譜帶出現(xiàn)。電泳時(shí)加大上樣量,較一般的檢材上樣量多1.5~2 倍即可。(3)每份檢材均進(jìn)行Y 染色體STR 檢測。本例116份檢材中共8份檢出常染色體STR分型結(jié)果,9份檢出Y染色體STR分型結(jié)果,日常檢案實(shí)踐也表明,Y 染色體STR 分型檢測靈敏度比較高,且能直接得到男女混合樣本中男性成分的DNA 分型,在家系排查中具有重要作用,可以作為常染色體STR分型檢測的補(bǔ)充[3]。

    本例歷時(shí)22 年久偵不破,社會(huì)影響極其惡劣。22 年來,DNA 檢驗(yàn)技術(shù)不斷進(jìn)步,在提取、擴(kuò)增、檢測等各環(huán)節(jié)的操作方法越來越標(biāo)準(zhǔn)化,試劑質(zhì)量越來越高,檢測靈敏度不斷提高,去抑制物能力增強(qiáng),一些腐敗、微量檢材以及年代久遠(yuǎn)的案件遺留下來的檢材如骨骼、牙齒、接觸性DNA 等也有可能檢出DNA[4-5]。技術(shù)人員要規(guī)范物證保管、增強(qiáng)證據(jù)保全意識(shí),對命案積案檢材進(jìn)行梳理,運(yùn)用新技術(shù)、新方法,攻堅(jiān)克難,不斷優(yōu)化DNA 檢測方法,就有可能成功檢測各類命案積案中犯罪分子遺留的DNA。

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