• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    心外膜與心臟修復(fù)再生

    2021-12-05 22:15:01章瀾黃從新
    心血管病學(xué)進(jìn)展 2021年4期
    關(guān)鍵詞:心外膜斑馬魚纖維細(xì)胞

    章瀾 黃從新

    (武漢大學(xué)人民醫(yī)院心內(nèi)科 武漢大學(xué)心血管病研究所 心血管病湖北重點實驗室,湖北 武漢 430060)

    現(xiàn)如今缺血性損傷所致的心血管疾病仍是全球死亡的主要原因[1]。數(shù)百萬的心肌細(xì)胞因心肌梗死而丟失,再生醫(yī)學(xué)最重要的挑戰(zhàn)之一是設(shè)計如何替換心肌梗死后失去的數(shù)百萬心肌細(xì)胞,從而迅速觸發(fā)先天免疫反應(yīng)以清除死亡或垂死的細(xì)胞,并且激活產(chǎn)生膠原的成肌纖維細(xì)胞以重塑細(xì)胞外環(huán)境[2]。在過去的20年里,研究人員已確定了幾種心臟修復(fù)的潛在策略,如誘導(dǎo)現(xiàn)有心肌細(xì)胞的增殖,通過注射干細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞治療[3-5]。然而,由于成年哺乳動物的心肌細(xì)胞不會重新進(jìn)入細(xì)胞周期來替代缺血組織,因此心肌的損傷是不可逆的[3],目前還無針對人類心臟病的有臨床意義的再生療法。心外膜是位于心臟表面的一層由間皮細(xì)胞組成的膜,是一種多功能的心臟祖細(xì)胞組織,是心臟發(fā)育的信號中心,在心臟發(fā)育過程中起著重要的作用。在近期斑馬魚和小鼠的研究中表明,心臟損傷使心外膜及其衍生物復(fù)活,從而調(diào)節(jié)組織修復(fù)[6]。過去10年的研究表明,心外膜可能是心臟修復(fù)策略的關(guān)鍵靶點?,F(xiàn)總結(jié)心外膜與心臟修復(fù)和再生的相關(guān)機(jī)制,以及心外膜對心臟形成和發(fā)育的功能性貢獻(xiàn),并提出未來的觀點,以突出新興的治療策略,旨在利用心外膜的再生潛力進(jìn)行心臟修復(fù)。

    1 心臟再生模型

    受損心臟的功能再生預(yù)計包括清除壞死組織,恢復(fù)失去的肌肉,重建血管,以及消除新心肌細(xì)胞的電偶聯(lián)、炎癥和膠原蛋白、纖維蛋白的積累,其中主要的終點是產(chǎn)生新的、健康的心肌細(xì)胞[7-8]。雖然在成年哺乳動物心臟中有低水平心肌細(xì)胞增殖的報道,但表面上很少發(fā)生這種自然事件對心臟修復(fù)有意義的影響[9]。在2011年,Porrello等[10]研究的結(jié)果首次證明,新生小鼠在出生后的最初幾天,可在切除損傷后產(chǎn)生大量的再生反應(yīng),從而產(chǎn)生具有有限瘢痕的全尺寸心室。遺傳命運(yùn)圖譜顯示,這種修復(fù)是由現(xiàn)有心肌細(xì)胞的增殖介導(dǎo)的。在低溫?fù)p傷模型中,將冷卻的探針應(yīng)用于1日齡小鼠的心室表面,誘導(dǎo)局部細(xì)胞死亡,心臟在非跨壁損傷后再生,而在跨壁損傷后則不能再生[10]。這說明心臟的再生能力取決于受傷的嚴(yán)重程度。小鼠在7 d大的時候就失去了心臟再生能力,之后就會留下瘢痕。小鼠心臟再生能力與心肌細(xì)胞增殖之間的緊密聯(lián)系可能不僅僅是巧合[11-12]。此外,在出生早期,大多數(shù)小鼠心肌細(xì)胞是二倍體,過去兩年的研究表明,心肌細(xì)胞多倍體與心臟的損傷性再生能力有關(guān)[13]。與哺乳動物相反,低等脊椎動物例如斑馬魚和某些兩棲動物,成年后具有增強(qiáng)受傷心肌再生的能力。在這些較低的脊椎動物模型系統(tǒng)中,斑馬魚由于心肌替代的一致性和廣泛性以及該模型系統(tǒng)在分子遺傳學(xué)上的優(yōu)勢,成為研究最為廣泛的模型系統(tǒng)[14]。

    2 心外膜在心臟再生中的作用

    2.1 心肌損傷后心外膜細(xì)胞起到激活心肌的作用

    在過去的十年中,越來越多的研究通過動物模型系統(tǒng)來確定心外膜組織影響心臟修復(fù)的機(jī)制。低等脊椎動物如斑馬魚和某些有尾目兩棲動物,成年后擁有強(qiáng)大的心臟再生能力,其中斑馬魚由于其分子遺傳學(xué)的優(yōu)勢而備受研究人員關(guān)注[14]。在正常情況下,成體心外膜處于相對靜默狀態(tài)。當(dāng)心臟受到損傷時,心外膜對這種損傷具有快速而強(qiáng)烈的反應(yīng)。心臟損傷后,心外膜細(xì)胞誘導(dǎo)標(biāo)記胚胎心外膜,增殖并覆蓋損傷部位的基因表達(dá),這一過程稱為激活。在斑馬魚中,實際上整個心外膜在受傷后的1~2 d內(nèi)被激活,表達(dá)如抗衰蛋白,視黃醛脫氫酶(retinaldehyde dehydrogenase,RALDH)2,Tbx18蛋白和腎母細(xì)胞瘤1(Wilms tumor-1,Wt1)蛋白等蛋白[15]。在新生小鼠中,根尖切除與快速心外膜激活類似,都在整個器官范圍內(nèi)誘導(dǎo)RALDH2和Wt1表達(dá)。在成年小鼠中,心臟損傷還引起胚胎心外膜標(biāo)志物的重新表達(dá)[16]。

    心臟損傷激活心外膜的分子機(jī)制(尤其是在器官范圍內(nèi))讓很多科學(xué)家非常感興趣,但對其仍知之甚少。有學(xué)者試圖通過評估標(biāo)記小鼠胚胎心外膜的基因附近潛在的DNA調(diào)控元件的保守性來解決這個問題。研究人員通過與這些基因附近的增強(qiáng)子結(jié)合,確定了CCAAT/增強(qiáng)子結(jié)合蛋白轉(zhuǎn)錄因子家族是胚胎心臟和心肌梗死后成年心臟中RALDH2和Wt1表達(dá)的調(diào)節(jié)因子[17]。一項2017年的研究確定了轉(zhuǎn)錄激活因子BRG1(SWI/SNF染色質(zhì)重塑復(fù)合體的催化亞基)在小鼠心臟發(fā)育過程中和心臟損傷后具有心外膜表達(dá),是Wt1表達(dá)和心外膜激活的調(diào)節(jié)劑[18]。也有研究表明,心外膜激活會加劇炎癥反應(yīng)。小鼠缺血再灌注損傷后,在心外膜表面、心外膜下腔和梗死區(qū)域可觀察到中性粒細(xì)胞。在成人心外膜中,CCAAT/增強(qiáng)子結(jié)合蛋白顯性陰性突變體的病毒表達(dá)減少了中性粒細(xì)胞的數(shù)量,表明CCAAT/增強(qiáng)子結(jié)合蛋白轉(zhuǎn)錄因子在中性粒細(xì)胞浸潤中具有調(diào)節(jié)功能。此外,心外膜與巨噬細(xì)胞的緊密連接表明與心外膜細(xì)胞活化有關(guān)。對心外膜細(xì)胞內(nèi)在程序的研究和對激活外膜的外在因素的鑒定將有助于衍生生物學(xué)和潛在治療策略上的新發(fā)現(xiàn)[19]。

    2.2 心肌損傷后心外膜細(xì)胞分化為心肌細(xì)胞參與心肌再生

    早在對斑馬魚心尖切除再生機(jī)制研究中[19],研究者發(fā)現(xiàn)心尖切除后會啟動心外膜細(xì)胞經(jīng)過上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(epithelial-to-mesenchymal transition,EMT)向心內(nèi)膜下遷徙分化為心肌細(xì)胞,參與心肌再生。2007年Smart等[20]發(fā)現(xiàn)使用胸脈肽β4預(yù)處理成年小鼠,能誘導(dǎo)心外膜細(xì)胞重新再表達(dá)Wt1,其用胸脈肽β4預(yù)處理的小鼠再構(gòu)建心肌梗死模型,發(fā)現(xiàn)心肌梗死2 d后轉(zhuǎn)基因黃色熒光特異性標(biāo)志的Wt1細(xì)胞(YFP+/Wt1+)位于成年小鼠心外膜上,并且可分化為Nkx2.5+和Isl1+心肌祖細(xì)胞,該研究首次指出,成年哺乳動物心肌損傷后心外膜能分化為心肌細(xì)胞參與再生,但其機(jī)制尚不明確。

    盡管如此,對于心肌梗死后Wt1心外膜細(xì)胞是否能分化為心肌細(xì)胞目前尚有爭議。2011年Zhou等[21]在成年小鼠心肌梗死模型上研究發(fā)現(xiàn),心肌梗死后Wt1心外膜細(xì)胞經(jīng)過EMT后生成的心外膜衍生祖細(xì)胞(epicardium derived cells,EPDCs)僅存在心臟表面,僅能分化為成纖維細(xì)胞和血管平滑肌細(xì)胞,不能分化為心肌細(xì)胞。2012年Zhou等[22]建立wTIeR26R轉(zhuǎn)基因小鼠模型發(fā)現(xiàn)心肌梗死后Wt1心外膜細(xì)胞能分化為心肌細(xì)胞,但形狀為小圓,無成熟心肌細(xì)胞的結(jié)構(gòu),且數(shù)量少,于心肌梗死1~3個月出現(xiàn)在心肌梗死區(qū),因此可排除Cre-loxP隨機(jī)重組或細(xì)胞融合的可能。由此可見成年哺乳動物心肌梗死后能激活Wt1在心外膜上再次表達(dá)并向間質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)化,但與胚胎期不同在于產(chǎn)生的EPDCs缺乏遷徙能力,僅在心肌梗死區(qū)分化為少量的心肌細(xì)胞。Smart等[20]用能促細(xì)胞遷徙的細(xì)胞因子胸腺肽β4預(yù)處理誘導(dǎo)Wt1心外膜細(xì)胞參與再生,可能正是該細(xì)胞因子增強(qiáng)了Wt1心外膜細(xì)胞向心肌遷徒進(jìn)而分化為心肌細(xì)胞的能力。

    3 心外膜與心臟再生和修復(fù)的關(guān)聯(lián)

    3.1 心外膜源性細(xì)胞在心臟損傷反應(yīng)中的作用

    先前存在的心外膜源性心臟成纖維細(xì)胞是肌纖維母細(xì)胞的主要來源,肌纖維母細(xì)胞通過分泌細(xì)胞外基質(zhì)在壓力過載或缺血重塑時產(chǎn)生瘢痕組織。心外膜衍生的周細(xì)胞或內(nèi)皮細(xì)胞也被報道表現(xiàn)出間充質(zhì)細(xì)胞特性,并產(chǎn)生細(xì)胞外基質(zhì)以響應(yīng)損傷。成人心外膜被重新激活和擴(kuò)張,以響應(yīng)心臟損傷。一小部分EPDCs經(jīng)歷EMT,成為分泌細(xì)胞外基質(zhì)的肌纖維。在有限的情況下,EPDCs還可成為脂肪細(xì)胞。激活的心外膜還促進(jìn)炎癥細(xì)胞(中性粒細(xì)胞或自然殺傷細(xì)胞、T調(diào)節(jié)細(xì)胞或調(diào)節(jié)性T細(xì)胞、巨噬細(xì)胞)的募集,并通過趨化因子的分泌穩(wěn)定冠狀血管。心外膜也可促進(jìn)心肌細(xì)胞的存活和/或細(xì)胞生長[23]。

    3.2 心外膜再激活

    心肌損傷后胎兒心外膜基因的激活被認(rèn)為是一種保守的心臟修復(fù)機(jī)制。Wt1、Tbx18、RALDH1和RALDH2轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物在小鼠心肌梗死后1 d和5 d內(nèi)上調(diào),尤其是在瓣膜和心房周圍,在損傷后2~4周表達(dá)減弱[24]。在成年小鼠和犬模型中都有記載,胎兒心外膜基因誘導(dǎo)與增殖增加和明顯的心外膜增厚相關(guān)[25]。與胎兒心外膜不同,成人心外膜會經(jīng)歷EMT并產(chǎn)生心臟成纖維細(xì)胞和血管壁細(xì)胞,譜系追蹤實驗表明,心外膜對新生成纖維細(xì)胞或側(cè)支形成的貢獻(xiàn)最小。相比之下,認(rèn)為成人心外膜更可用作再生潛能有限的旁分泌信號的來源[26]。因此,一個新興的研究領(lǐng)域包括開發(fā)利用心外膜源性發(fā)展計劃(EpCar撥號衍生的開發(fā)程序)來促進(jìn)成年心臟的修復(fù)和再生的方法正在誕生[10]。

    3.3 心外膜調(diào)節(jié)炎癥

    急性炎癥是一種清除死亡細(xì)胞組織的代償性反應(yīng),然而,慢性炎癥可增加細(xì)胞死亡、纖維化形成和心功能不全障礙。最近的報告表明,細(xì)胞和旁分泌的炎癥過程,部分由重新激活的心外膜協(xié)調(diào)[27]。在健康心外膜中可觀察到具有修復(fù)特性的常駐心臟巨噬細(xì)胞(M2巨噬細(xì)胞),但在衰老相關(guān)心臟功能障礙模型中其明顯耗盡[28]。Wt1b是一種早期的心外膜反應(yīng)基因,與斑馬魚中的再生巨噬細(xì)胞的表達(dá)重疊,提示了在心臟發(fā)育過程中心臟巨噬細(xì)胞募集時心外膜的需求。Hippo信號通路下游作用因子Yes相關(guān)蛋白/含PDZ結(jié)合基序的轉(zhuǎn)錄共激活因子在心肌梗死后加重心臟炎癥,這是由于免疫抑制調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的有限募集和來自成年小鼠心外膜的炎性細(xì)胞因子γ干擾素的分泌減少所致。在小鼠缺血再灌注損傷后腺病毒介導(dǎo)的CCAAT/增強(qiáng)蛋白結(jié)合蛋白增強(qiáng)Wt1和RALDH2的激活,推測其是通過減少急性中性粒細(xì)胞浸潤來減弱心臟損傷和纖維化[29]。

    3.4 心外膜在心臟再生中的應(yīng)用

    心外膜不僅可通過分化為成纖維細(xì)胞、血管壁細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞等以促進(jìn)心臟再生,而且可通過分泌成纖維細(xì)胞生長因子等有絲分裂原的混合物來促進(jìn)心肌細(xì)胞的增殖和胚胎心臟的生長。心臟再生發(fā)生在斑馬魚和出生后早期哺乳動物心臟的許多刺激中,包括根尖切除術(shù)、新生兒心肌梗死、冷凍消融或靶向消融。心外膜通過領(lǐng)導(dǎo)雙核心外膜細(xì)胞的遷移而主動再生,創(chuàng)口閉合,并有助于血管周細(xì)胞(平滑肌和成纖維細(xì)胞)的形成。心外膜源性成纖維細(xì)胞已獲得肌成纖維細(xì)胞表型(肌成纖維細(xì)胞和細(xì)胞外基質(zhì)),這在瘢痕消退階段可能是可逆的。心外膜通過分泌有絲分裂原促進(jìn)巨噬細(xì)胞募集、血管新生以及心肌細(xì)胞周期再入[30]。

    目前,通過增強(qiáng)內(nèi)源性心臟修復(fù)祖細(xì)胞的分離、擴(kuò)增和移植源自骨髓和心臟的細(xì)胞已取得了有限的成功。來源于成年人右心耳組織的原代心外膜細(xì)胞在體外培養(yǎng)早期即自發(fā)經(jīng)歷了EMT轉(zhuǎn)變并獲得成纖維細(xì)胞性質(zhì),用腺病毒載體將轉(zhuǎn)錄因子心肌蛋白、轉(zhuǎn)化生長因子-β1或骨形態(tài)發(fā)生蛋白質(zhì)2導(dǎo)入EPDCs時,這些細(xì)胞可分化為平滑肌細(xì)胞[31]。人類誘導(dǎo)多能性干細(xì)胞技術(shù)的最新進(jìn)展已證明了通過調(diào)節(jié)骨形態(tài)發(fā)生因子、Wnt/β-Catenin信號通路、成纖維細(xì)胞生長因子和視黃酸信號傳導(dǎo)途徑將多能細(xì)胞分化為心外膜細(xì)胞及其衍生物的可行性。將人胚胎干細(xì)胞源性心外膜細(xì)胞與心肌細(xì)胞共培養(yǎng),可促進(jìn)心臟組織收縮力和心肌細(xì)胞的成熟[32]。此外,將人胚胎干細(xì)胞源性心外膜細(xì)胞和心肌細(xì)胞共同移植到梗死大鼠心臟中,可增強(qiáng)移植效果,同時改善收縮功能,并增加了與心肌細(xì)胞單獨的血運(yùn)重建,朝著治療實踐邁進(jìn)了一大步[32]。各種心臟疾病模型以評估心外膜激活的最新進(jìn)展表明,通過促進(jìn)心外膜和內(nèi)皮細(xì)胞或心肌細(xì)胞之間的相互作用,心臟再生得到增強(qiáng)[33-35]。心外膜人卵泡抑素樣蛋白1的丟失是一種對損傷的適應(yīng)性反應(yīng),恢復(fù)其水平將是逆轉(zhuǎn)心肌梗死后心肌死亡和重構(gòu)的有效方法[36]。故上游生長因子信號可用于增強(qiáng)體外心外膜細(xì)胞的擴(kuò)增或用于臨床實踐的新型治療策略的產(chǎn)生。然而,若供體不是自體的受體,細(xì)胞移植會受到免疫排斥的阻礙[37]。目前,關(guān)于心外膜細(xì)胞異質(zhì)性的重要問題仍存在,這可能會使利用心外膜進(jìn)行心臟修復(fù)的策略復(fù)雜化。因此,需對心外膜的屬性進(jìn)行全面的分析評估,包括心外膜細(xì)胞的來源與分型、心外膜應(yīng)對不同損傷或環(huán)境的反應(yīng)、心外膜與心肌細(xì)胞間的聯(lián)系、心臟再生中心外膜的變化以及不同種屬之間心外膜行為的異同等以加強(qiáng)對心外膜細(xì)胞對正常發(fā)育、先天性心臟病和心力衰竭貢獻(xiàn)的了解,為利用心外膜的再生潛力進(jìn)行心臟修復(fù)提供新策略。隨著單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組學(xué)技術(shù)的發(fā)展,可能對這個問題提供思路。利用高通量單細(xì)胞RNA測序平臺(RNA-seq或scRNA-seq)對心外膜進(jìn)行轉(zhuǎn)錄分析,可識別出對心臟損傷反應(yīng)起作用的基因和通路。

    4 展望

    心臟病是人類健康的主要殺手之一,因而心肌再生和修復(fù)具有廣泛且重要的臨床應(yīng)用價值。心外膜在心臟發(fā)育中的重要地位提示其作為潛在治療手段的優(yōu)越性。本文討論了通過心外膜的細(xì)胞自主和非自主功能調(diào)節(jié)心臟生長和組織修復(fù)的基因程序,廣泛地分析描述了心外膜分泌的因素,包括轉(zhuǎn)錄因子和信號通路的研究,以及炎癥因子的調(diào)制,這可能會加強(qiáng)心外膜介導(dǎo)的心臟修復(fù)。此外,治療策略的發(fā)展,以成纖維細(xì)胞和脂肪細(xì)胞的分化為代價將EPDCs重新定向到增殖細(xì)胞類型的策略,可補(bǔ)充目前主要基于干細(xì)胞和誘導(dǎo)多能細(xì)胞遞送的再生醫(yī)學(xué)方法。

    猜你喜歡
    心外膜斑馬魚纖維細(xì)胞
    心外膜消融室性心律失常研究進(jìn)展
    斑馬魚天生就能辨別數(shù)量
    小斑馬魚歷險記
    Tiger17促進(jìn)口腔黏膜成纖維細(xì)胞的增殖和遷移
    滇南小耳豬膽道成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)鑒定
    心外膜在心肌梗死后心肌修復(fù)中作用的研究進(jìn)展
    瓜蔞不同部位對斑馬魚促血管生成及心臟保護(hù)作用
    中成藥(2017年6期)2017-06-13 07:30:35
    心外膜脂肪厚度對急性冠狀動脈綜合征的診斷價值
    房顫與心外膜脂肪研究進(jìn)展十點小結(jié)
    胃癌組織中成纖維細(xì)胞生長因子19和成纖維細(xì)胞生長因子受體4的表達(dá)及臨床意義
    亚洲av成人精品一区久久| 中文字幕精品免费在线观看视频 | 午夜福利视频精品| 黑人猛操日本美女一级片| 91久久精品电影网| 日本黄色片子视频| 成人国产麻豆网| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 国产成人freesex在线| 极品教师在线视频| 美女国产视频在线观看| 国产黄片美女视频| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 日本午夜av视频| 伦精品一区二区三区| 免费在线观看成人毛片| 丰满乱子伦码专区| 精品酒店卫生间| 亚洲国产精品国产精品| 18禁在线播放成人免费| 亚洲精品自拍成人| 国产成人精品福利久久| 观看免费一级毛片| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 国产精品一区www在线观看| 日本vs欧美在线观看视频 | 在线看a的网站| 色婷婷久久久亚洲欧美| 国产乱人视频| av.在线天堂| 联通29元200g的流量卡| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 男女国产视频网站| 在线播放无遮挡| 丰满人妻一区二区三区视频av| 黄色配什么色好看| 国产日韩欧美亚洲二区| 男人狂女人下面高潮的视频| av国产免费在线观看| 久久亚洲国产成人精品v| 丰满人妻一区二区三区视频av| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 亚洲av不卡在线观看| 免费观看性生交大片5| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 国产精品国产三级国产专区5o| 黄色怎么调成土黄色| 精品一区二区免费观看| 亚洲成人一二三区av| 成年美女黄网站色视频大全免费 | 久久精品久久久久久久性| 免费观看无遮挡的男女| 日日撸夜夜添| 日韩人妻高清精品专区| 99热这里只有精品一区| 最近中文字幕高清免费大全6| 99久久精品热视频| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 成人午夜精彩视频在线观看| 人妻系列 视频| 国产精品免费大片| 国产 一区精品| 国产亚洲5aaaaa淫片| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 又爽又黄a免费视频| 久久ye,这里只有精品| av网站免费在线观看视频| 欧美激情极品国产一区二区三区 | 一区二区三区精品91| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 少妇精品久久久久久久| 亚洲图色成人| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 久久久久久久久久久免费av| a级一级毛片免费在线观看| a级毛色黄片| 欧美成人一区二区免费高清观看| 亚洲欧美精品专区久久| 在线观看免费视频网站a站| 久久6这里有精品| 亚洲内射少妇av| 天堂中文最新版在线下载| 18禁在线无遮挡免费观看视频| 欧美少妇被猛烈插入视频| 亚洲国产欧美人成| freevideosex欧美| 成人午夜精彩视频在线观看| 中文字幕制服av| 国产欧美日韩一区二区三区在线 | 舔av片在线| 蜜臀久久99精品久久宅男| 全区人妻精品视频| 成人亚洲精品一区在线观看 | 久久精品国产a三级三级三级| 国产老妇伦熟女老妇高清| 精品少妇久久久久久888优播| 国产成人精品婷婷| 街头女战士在线观看网站| av网站免费在线观看视频| 国产精品一区二区三区四区免费观看| 伊人久久精品亚洲午夜| 天美传媒精品一区二区| 爱豆传媒免费全集在线观看| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看| 只有这里有精品99| 免费观看av网站的网址| 网址你懂的国产日韩在线| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 欧美一区二区亚洲| 99久久中文字幕三级久久日本| 极品少妇高潮喷水抽搐| 嘟嘟电影网在线观看| 国产视频内射| 男女下面进入的视频免费午夜| 国产成人午夜福利电影在线观看| 91精品伊人久久大香线蕉| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 天天躁日日操中文字幕| xxx大片免费视频| 久久久国产一区二区| 街头女战士在线观看网站| 亚洲欧美一区二区三区黑人 | 最近最新中文字幕免费大全7| 免费看光身美女| 成人特级av手机在线观看| 久久久久久伊人网av| 男女边摸边吃奶| 男人添女人高潮全过程视频| 国产高清三级在线| 国产精品久久久久成人av| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区| 日韩av在线免费看完整版不卡| 国产淫片久久久久久久久| 日本一二三区视频观看| 综合色丁香网| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 欧美一级a爱片免费观看看| 简卡轻食公司| 成人国产麻豆网| 夫妻性生交免费视频一级片| 老司机影院成人| 日本av免费视频播放| 成年女人在线观看亚洲视频| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 日本爱情动作片www.在线观看| 国产精品一区二区在线观看99| 国产欧美亚洲国产| 黑丝袜美女国产一区| 99热全是精品| 国产 精品1| 日韩不卡一区二区三区视频在线| 国产 精品1| 少妇丰满av| 直男gayav资源| 日韩一区二区三区影片| 国产人妻一区二区三区在| 亚洲av成人精品一二三区| 久久99精品国语久久久| 久久久久久久久久人人人人人人| 国产深夜福利视频在线观看| 免费黄频网站在线观看国产| 久久人人爽av亚洲精品天堂 | 在线免费观看不下载黄p国产| 韩国高清视频一区二区三区| 麻豆国产97在线/欧美| 男女边摸边吃奶| 国模一区二区三区四区视频| 国产精品久久久久久av不卡| 女人久久www免费人成看片| 丝袜喷水一区| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 国产精品无大码| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 99久国产av精品国产电影| 日韩制服骚丝袜av| 人人妻人人看人人澡| 人妻系列 视频| 中文天堂在线官网| 大陆偷拍与自拍| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 看十八女毛片水多多多| 亚洲精品国产av成人精品| 国产精品久久久久久av不卡| 日韩制服骚丝袜av| 国产成人a区在线观看| 在线亚洲精品国产二区图片欧美 | 久久av网站| 老司机影院成人| 精品久久久久久久末码| 激情五月婷婷亚洲| 国产精品国产三级国产av玫瑰| av播播在线观看一区| 人妻系列 视频| 男人爽女人下面视频在线观看| 欧美一区二区亚洲| 又大又黄又爽视频免费| 精品少妇黑人巨大在线播放| 欧美极品一区二区三区四区| 亚洲精品日韩av片在线观看| 国产伦精品一区二区三区四那| 国产欧美日韩一区二区三区在线 | 我要看黄色一级片免费的| 国产男人的电影天堂91| 午夜福利在线观看免费完整高清在| 国产毛片在线视频| 少妇高潮的动态图| 在线亚洲精品国产二区图片欧美 | 一级毛片久久久久久久久女| 搡老乐熟女国产| 久久97久久精品| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 最近中文字幕高清免费大全6| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 亚洲真实伦在线观看| 深夜a级毛片| 最黄视频免费看| 26uuu在线亚洲综合色| 亚洲av男天堂| 免费大片18禁| 日本一二三区视频观看| 婷婷色综合www| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 国产精品一区www在线观看| 麻豆成人午夜福利视频| 精品一区二区三区视频在线| 国产精品99久久99久久久不卡 | 成人毛片a级毛片在线播放| 欧美xxⅹ黑人| 免费播放大片免费观看视频在线观看| 亚洲自偷自拍三级| 少妇被粗大猛烈的视频| 国产精品av视频在线免费观看| 国产精品偷伦视频观看了| 亚洲av.av天堂| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 日韩不卡一区二区三区视频在线| 精品久久国产蜜桃| 97超视频在线观看视频| 91在线精品国自产拍蜜月| 一本久久精品| 99久久精品热视频| 国产精品一区二区三区四区免费观看| 一级毛片电影观看| 国产精品久久久久久av不卡| 久久久色成人| 99热6这里只有精品| 伊人久久国产一区二区| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 18禁动态无遮挡网站| 欧美97在线视频| 国产精品.久久久| 亚洲av中文av极速乱| av免费观看日本| 高清av免费在线| 97热精品久久久久久| 久久久久精品性色| av国产久精品久网站免费入址| 人妻系列 视频| 晚上一个人看的免费电影| 新久久久久国产一级毛片| 日本欧美视频一区| 人妻 亚洲 视频| 国产探花极品一区二区| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 性高湖久久久久久久久免费观看| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区| 日日撸夜夜添| 亚洲高清免费不卡视频| 国产v大片淫在线免费观看| 99久久精品一区二区三区| av.在线天堂| 国产伦精品一区二区三区视频9| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 一级毛片久久久久久久久女| 国产av国产精品国产| 亚洲av免费高清在线观看| 在线免费十八禁| 啦啦啦啦在线视频资源| 男人爽女人下面视频在线观看| 亚洲国产色片| 成年免费大片在线观看| 中文字幕制服av| 一个人免费看片子| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 成人一区二区视频在线观看| 欧美日本视频| 久久亚洲国产成人精品v| 久久久久久九九精品二区国产| 欧美日韩在线观看h| 国产精品人妻久久久影院| 激情 狠狠 欧美| 丰满乱子伦码专区| 欧美成人一区二区免费高清观看| 一区二区三区四区激情视频| 热99国产精品久久久久久7| 国产视频内射| av黄色大香蕉| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 亚洲,欧美,日韩| 久久鲁丝午夜福利片| 午夜免费男女啪啪视频观看| 最近中文字幕2019免费版| 国产一区二区三区av在线| 国产视频首页在线观看| 一区二区三区乱码不卡18| 成人影院久久| 国产精品人妻久久久影院| 亚洲av男天堂| 男男h啪啪无遮挡| 最近2019中文字幕mv第一页| 日韩一区二区三区影片| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| a级毛色黄片| 久久亚洲国产成人精品v| 边亲边吃奶的免费视频| 久久久午夜欧美精品| 日韩中文字幕视频在线看片 | 搡女人真爽免费视频火全软件| xxx大片免费视频| av免费在线看不卡| 日韩中文字幕视频在线看片 | 在现免费观看毛片| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜 | 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 美女主播在线视频| 午夜免费鲁丝| 午夜老司机福利剧场| 最后的刺客免费高清国语| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 国产精品久久久久久精品电影小说 | 另类亚洲欧美激情| 国产精品蜜桃在线观看| 少妇的逼水好多| 99视频精品全部免费 在线| 亚洲美女黄色视频免费看| 欧美精品一区二区大全| 一本色道久久久久久精品综合| 美女国产视频在线观看| 久久综合国产亚洲精品| 亚州av有码| xxx大片免费视频| 日本爱情动作片www.在线观看| 麻豆成人午夜福利视频| 国产伦理片在线播放av一区| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 3wmmmm亚洲av在线观看| 欧美bdsm另类| 国产精品三级大全| 天天躁日日操中文字幕| 欧美日韩亚洲高清精品| 男人添女人高潮全过程视频| 岛国毛片在线播放| 精品国产乱码久久久久久小说| xxx大片免费视频| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 91精品国产国语对白视频| 久久国产亚洲av麻豆专区| 久久久久久久久久久丰满| 少妇的逼水好多| 中文在线观看免费www的网站| 欧美97在线视频| 中文在线观看免费www的网站| 欧美+日韩+精品| 午夜福利高清视频| 久久ye,这里只有精品| 婷婷色综合www| 日韩一区二区视频免费看| 男女免费视频国产| 婷婷色综合大香蕉| 18禁在线无遮挡免费观看视频| 久久精品国产a三级三级三级| 黄色日韩在线| 一本色道久久久久久精品综合| 女性被躁到高潮视频| 国产精品一二三区在线看| 老熟女久久久| 亚洲国产高清在线一区二区三| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 女性被躁到高潮视频| 精品一区二区三卡| 国产精品国产三级专区第一集| 久久青草综合色| 乱码一卡2卡4卡精品| 亚洲精品aⅴ在线观看| 中国国产av一级| 久久久久久久精品精品| 黄色一级大片看看| 少妇人妻 视频| 我要看黄色一级片免费的| 99久久精品一区二区三区| 国产真实伦视频高清在线观看| 亚洲高清免费不卡视频| 国产高清三级在线| 亚洲精品视频女| 嫩草影院新地址| 亚洲不卡免费看| 免费观看在线日韩| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 国产精品一区www在线观看| 内射极品少妇av片p| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 亚洲va在线va天堂va国产| 夜夜爽夜夜爽视频| freevideosex欧美| 国产成人免费无遮挡视频| 一级爰片在线观看| 午夜日本视频在线| 久久6这里有精品| 老女人水多毛片| 亚洲精品亚洲一区二区| 久久精品久久精品一区二区三区| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 2022亚洲国产成人精品| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 久久久久久久久久久丰满| 日韩欧美 国产精品| 亚洲精品久久午夜乱码| 国产成人a区在线观看| 中文欧美无线码| 最后的刺客免费高清国语| 欧美变态另类bdsm刘玥| 少妇被粗大猛烈的视频| 毛片女人毛片| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 最近中文字幕高清免费大全6| 乱码一卡2卡4卡精品| 只有这里有精品99| 毛片一级片免费看久久久久| 国产色爽女视频免费观看| 又大又黄又爽视频免费| 成人国产麻豆网| av卡一久久| 久久这里有精品视频免费| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 91精品伊人久久大香线蕉| 男人添女人高潮全过程视频| 亚洲精品,欧美精品| 能在线免费看毛片的网站| 午夜免费男女啪啪视频观看| 搡女人真爽免费视频火全软件| 麻豆成人午夜福利视频| 亚洲自偷自拍三级| 日韩亚洲欧美综合| 高清视频免费观看一区二区| 亚洲av男天堂| 久久99热6这里只有精品| 最近中文字幕2019免费版| 久久ye,这里只有精品| 老师上课跳d突然被开到最大视频| 欧美精品一区二区大全| 欧美zozozo另类| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 国产一区二区在线观看日韩| 日韩亚洲欧美综合| 在线精品无人区一区二区三 | 日本一二三区视频观看| 国产一区二区三区综合在线观看 | 多毛熟女@视频| 欧美 日韩 精品 国产| 亚洲欧美精品自产自拍| 综合色丁香网| 国产日韩欧美亚洲二区| 亚洲精品亚洲一区二区| 高清不卡的av网站| 欧美变态另类bdsm刘玥| 99热网站在线观看| 国产精品久久久久久精品古装| 男女免费视频国产| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 久热这里只有精品99| 少妇被粗大猛烈的视频| 亚洲精品第二区| 在线天堂最新版资源| 午夜免费鲁丝| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 五月伊人婷婷丁香| 免费黄色在线免费观看| 黄色配什么色好看| 激情五月婷婷亚洲| 久久久a久久爽久久v久久| 婷婷色综合大香蕉| 少妇人妻精品综合一区二区| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线| 欧美日韩视频高清一区二区三区二| 久久国产精品男人的天堂亚洲 | 国产精品成人在线| 在线免费十八禁| h日本视频在线播放| 青春草亚洲视频在线观看| 国产色爽女视频免费观看| 亚洲成人中文字幕在线播放| 丝袜脚勾引网站| 少妇高潮的动态图| 国产亚洲最大av| 成人综合一区亚洲| 国产成人免费观看mmmm| 中文字幕亚洲精品专区| 久久久午夜欧美精品| 大香蕉97超碰在线| 亚洲成色77777| 欧美日韩视频高清一区二区三区二| 国产日韩欧美在线精品| 日韩精品有码人妻一区| 少妇人妻精品综合一区二区| 精品熟女少妇av免费看| 精品久久久久久久末码| 黄色配什么色好看| 色视频在线一区二区三区| 日韩电影二区| 久久久久久久久大av| 国产精品伦人一区二区| 日日啪夜夜撸| 日韩 亚洲 欧美在线| 欧美日韩综合久久久久久| 国产免费视频播放在线视频| 麻豆成人av视频| av一本久久久久| 亚洲丝袜综合中文字幕| 26uuu在线亚洲综合色| 久久99热6这里只有精品| 欧美xxⅹ黑人| 精品久久久精品久久久| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 午夜视频国产福利| 午夜激情久久久久久久| 在线观看人妻少妇| 黄片wwwwww| 成人二区视频| 国产精品国产三级专区第一集| 亚洲精品日本国产第一区| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 搡老乐熟女国产| 国产欧美日韩精品一区二区| 777米奇影视久久| av在线老鸭窝| 高清日韩中文字幕在线| 成年av动漫网址| 在线观看一区二区三区| 国产精品久久久久久精品古装| 日韩一本色道免费dvd| 国内精品宾馆在线| 欧美最新免费一区二区三区| 最近中文字幕高清免费大全6| 尾随美女入室| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 免费看不卡的av| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 亚洲av.av天堂| 又爽又黄a免费视频| 一区二区av电影网| 高清毛片免费看| 日韩精品有码人妻一区| 韩国av在线不卡| 两个人的视频大全免费| 成人无遮挡网站| 国产黄片美女视频| 国精品久久久久久国模美| 一个人看视频在线观看www免费| 久久ye,这里只有精品| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 亚洲国产欧美在线一区| 一级爰片在线观看| 日韩中文字幕视频在线看片 | 中文欧美无线码| 秋霞在线观看毛片| 永久免费av网站大全| 日韩欧美精品免费久久| 一个人看的www免费观看视频| 一级毛片久久久久久久久女| 久久久精品免费免费高清| 国产精品人妻久久久影院| 久久国产精品男人的天堂亚洲 | 亚洲伊人久久精品综合| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 欧美bdsm另类| 国产欧美日韩一区二区三区在线 | 建设人人有责人人尽责人人享有的 | 免费大片黄手机在线观看| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 国产精品.久久久| 亚洲高清免费不卡视频| 久久国产精品大桥未久av | 日本av手机在线免费观看| 十八禁网站网址无遮挡 | 美女xxoo啪啪120秒动态图| 人妻一区二区av| 国产精品免费大片| av专区在线播放| 亚洲国产欧美人成| 欧美高清成人免费视频www| 欧美性感艳星| 内射极品少妇av片p| 国产黄片视频在线免费观看| 国产精品一区二区三区四区免费观看| 午夜福利视频精品| av福利片在线观看| 国产在视频线精品| 国产精品一区二区性色av| 狂野欧美激情性bbbbbb| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 如何舔出高潮| 日本wwww免费看| 老师上课跳d突然被开到最大视频| 日韩三级伦理在线观看| av专区在线播放| 国产亚洲最大av| 亚洲久久久国产精品| av在线播放精品| 亚洲成人av在线免费|