藏藥濕生扁蕾與苦豆子、金錢草配伍的研究進(jìn)展

薄雙琴,曲 馨,劉越敏,柳 娜,寇 亮,謝田朋,景 明

(甘肅中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院中藥藥劑實驗室,蘭州 730000;*通訊作者,E-mail:1339512509@qq.com)

藏藥濕生扁蕾(Gentianopsis paludosa Ma)性寒味苦,清熱解毒、消炎利膽,藏醫(yī)常用于治療膽囊炎、腸胃炎等消化系統(tǒng)疾病[1,2];金錢草性寒味甘,歸肝、膽、膀胱經(jīng),具有清熱解毒、利尿消腫、利水通淋等功效,臨床常用于膽囊炎、泌尿系統(tǒng)結(jié)石及膽結(jié)石、急性黃疸型肝炎等[3,4];金錢草對已形成的膽固醇結(jié)石較有優(yōu)勢;金錢草對治療肝膽系統(tǒng)的炎癥更顯優(yōu)勢[5]。近現(xiàn)代研究表明,單味藥金錢草湯或膏劑,或以金錢草為主的復(fù)方制劑對膽囊炎有治療作用。二者配伍應(yīng)用,主要治療膽囊炎?？喽棺尤晡犊嘈院?具有清熱解毒、祛風(fēng)燥濕、止痛殺蟲等作用。濕生扁蕾與苦豆子配伍應(yīng)用具有清熱解毒,祛濕止瀉的功效,臨床主要用于治療潰瘍性結(jié)腸炎[6]。本文通過對濕生扁蕾與金錢草、苦豆子的配伍進(jìn)行綜述,為濕生扁蕾的配伍應(yīng)用研究提供理論依據(jù),進(jìn)而為擴(kuò)大濕生扁蕾的研究范圍提供思路。

1 濕生扁蕾、苦豆子、金錢草配伍研究

1.1 濕生扁蕾-苦豆子配伍功效、應(yīng)用及其比例

濕生扁蕾與苦豆子均為清熱解毒、抗炎鎮(zhèn)痛藥,二者的配伍應(yīng)用多為近代臨床經(jīng)驗方劑。藥學(xué)工作者將濕生扁蕾、苦豆子兩味藥材根據(jù)臨床經(jīng)驗方研制成具有結(jié)腸靶向性的復(fù)方濕生扁蕾膠囊,二者配伍使用,發(fā)揮清熱解毒、利濕、止瀉之效,主治大腸濕熱所致的痢疾、腸炎等腸道疾病,臨床主要用于治療潰瘍性結(jié)腸炎[6]。趙慧巧等[7]采用熱板致小鼠疼痛、瓊脂致小鼠肉芽腫、三硝基苯磺酸致大鼠腹瀉的動物模型,通過觀察濕生扁蕾與苦豆子不同配伍提取物的鎮(zhèn)痛、抗炎、止瀉作用以及濕生扁蕾與苦豆子不同配伍提取物對小鼠的急性毒性,篩選出濕生扁蕾與苦豆子的最佳配伍比例。研究結(jié)果表明,濕生扁蕾與苦豆子最佳配伍質(zhì)量比例為20 ∶1[6]。目前,由濕生扁蕾與苦豆子組成的中藏藥復(fù)方廣泛應(yīng)用于臨床,但兩者組成的中藥復(fù)方制劑較少,故對于藥理作用突出、療效顯著的臨床經(jīng)驗方,應(yīng)該明確其發(fā)揮療效的主要活性成分,深入研究其藥理作用機(jī)制、體內(nèi)藥動學(xué)等,積極研發(fā)濕生扁蕾苦豆子復(fù)方制劑,進(jìn)而提高臨床用藥方便性,同時為臨床合理用藥提供科學(xué)依據(jù)。

1.2 濕生扁蕾-金錢草配伍的功效及臨床應(yīng)用

濕生扁蕾為藏茵陳類,具有清瘟熱、利膽、止瀉之功效[8],金錢草既可除濕退黃治肝膽所致膽濕熱之癥,又善利尿通淋,排除結(jié)石[9],濕生扁蕾與金錢草配伍具有清熱、祛濕、利膽的功效,主治肝膽濕熱所致的脅痛、口苦、急性膽囊炎、膽管炎等。

2 濕生扁蕾、苦豆子以及金錢草的化學(xué)成分研究

2.1 濕生扁蕾的化學(xué)成分

2.2 苦豆子的化學(xué)成分

采用色譜方法(硅膠、Sephadex LH-20)及波譜方法(核磁共振、HMBC、ESI-MS)及理化性質(zhì)對苦豆子的化學(xué)成分進(jìn)行分離和結(jié)構(gòu)鑒定發(fā)現(xiàn),苦豆子中包括生物堿類、黃酮類、甾醇類、有機(jī)酸類、氨基酸類以及揮發(fā)油等成分。從苦豆子中分離出來的生物堿類與黃酮類多達(dá)幾十種。研究結(jié)果顯示,生物堿化合物包括苦參堿、氧化苦參堿、槐定堿、13,14-去氫槐定堿、槐果堿、氧化槐果堿等;黃酮類化合物包括槐屬二氫黃酮、3′-甲氧基木犀草素、苦豆雙黃酮苷、紫鉚查耳酮等[14,15]。

2.3 金錢草的化學(xué)成分

大量的研究[16,17]結(jié)果顯示,金錢草主要含有酚酸類、黃酮類、苷類、揮發(fā)油、鞣質(zhì)及氨基酸等化學(xué)成分,其中酚酸及黃酮類是其主要活性成分。周祎等[18]采用HPLC-DAD法同時檢測金錢草中綠原酸、槲皮素、山奈酚、山奈酚-3-O-β-D-葡萄糖苷、蘆丁、蒙花苷。Gao等[19]采用紫外光譜、質(zhì)譜和核磁共振從金錢草中分離出兩種新的黃酮類化合物:楊梅素3,3′-二-α-鼠李糖苷和槲皮素3，3′-二-α-二吡喃吡喃糖苷。

2.4 濕生扁蕾-苦豆子配伍的化學(xué)成分

復(fù)方腸康寧膠囊是濕生扁蕾與苦豆子配伍而成的復(fù)方制劑,以濕生扁蕾中的活性成分木犀草素、當(dāng)藥醇苷、當(dāng)藥黃素,苦豆子中的苦參堿、氧化苦參堿、槐定堿為指標(biāo)成分,濕生扁蕾與苦豆子的質(zhì)量以20 ∶0.9比例配伍時,濕生扁蕾與苦豆子中的主要活性成分溶出率達(dá)到最高[6,20]。濕生扁蕾與苦豆子配伍以后,其中的化學(xué)成分可能會發(fā)生變化,但其主要活性成分仍然存在,這與濕生扁蕾和苦豆子原藥材的化學(xué)成分分析一致。當(dāng)藥黃素是黃酮苷類化合物,對鼠傷寒桿菌具有中度抑制作用,當(dāng)藥醇苷為山酮苷類化合物時,具有抑制結(jié)核菌的作用[21],是龍膽科藥物中的有效成分。

2.5 濕生扁蕾-金錢草配伍的化學(xué)成分

金蕾膠囊是金錢草和濕生扁蕾配伍而成的新制劑,濕生扁蕾經(jīng)甲醇、乙醇等有機(jī)試劑回流提取后,可得到有效成分木犀草素[22],山奈酚是金錢草中的重要黃酮類成分[23]。柳娜等[24]對3個批次的金蕾膠囊進(jìn)行薄層色譜分析,結(jié)果顯示木犀草素對照品溶液、濕生扁蕾對照藥材溶液色譜的相應(yīng)位置上顯相同的熒光斑點,在與山柰酚對照品溶液、金錢草對照藥材溶液色譜的相應(yīng)位置上顯相同的熒光斑點。此外,采用HPLC分析金蕾膠囊中的指標(biāo)成分,結(jié)果顯示金蕾膠囊中同時含有木犀草素和山柰酚。張夙萍等[25]同樣采用HPLC對金蕾膠囊中的當(dāng)藥醇苷、當(dāng)藥黃素進(jìn)行含量測定,并以此為評價指標(biāo),優(yōu)選金蕾膠囊的提取工藝。金錢草與濕生扁蕾配伍后其主要化學(xué)成分的量可能會發(fā)生變化,但木犀草素、當(dāng)藥醇苷、當(dāng)藥黃素、山柰酚分別是濕生扁蕾和金錢草中量比較高的成分。這些研究為濕生扁蕾和金錢草的提取制備工藝以及濕生扁蕾和金錢草制劑(如金蕾膠囊)的質(zhì)量控制提供參考和借鑒。

3 濕生扁蕾、苦豆子以及金錢草的藥理作用

3.1 濕生扁蕾的藥理作用

濕生扁蕾是藏醫(yī)常用于治療消化系統(tǒng)疾病的民族藥,其具有抗腫瘤、止瀉、保肝、利膽、抑菌等作用[1,2],隨著對濕生扁蕾藥理作用研究的深入,研究發(fā)現(xiàn)濕生扁蕾在治療潰瘍性結(jié)腸炎以及腸纖維化方面也具有很好的效果[26]。

3.1.1 抗腫瘤作用 有研究表明,藏藥濕生扁蕾提取物可能通過抑制增殖調(diào)控因子CyclinD1、CDK4、PCNA mRNA的表達(dá)、促進(jìn)p21kip1·mRNA的表達(dá)以及NF-κB信號通路來抑制SW480細(xì)胞增殖和誘導(dǎo)SW480細(xì)胞凋亡[27,28]。

3.1.2 利膽、保肝作用 濕生扁蕾提取物(GPM)能降低血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)和谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)水平,抑制脂質(zhì)過氧化損傷,從而保護(hù)肝損傷,改善肝功能[29,30]。

3.1.3 抗纖維化作用 濕生扁蕾對于治療潰瘍性結(jié)腸炎腸纖維化具有良好的療效,有研究表明,GPM能減少TGF-β的表達(dá),減輕結(jié)腸纖維化的程度,進(jìn)而抑制潰瘍性結(jié)腸炎腸纖維化[31]。濕生扁蕾中所含酮成分能顯著增加潰瘍性結(jié)腸炎腸纖維化大鼠腸上皮細(xì)胞E-鈣黏蛋白(E-cadherin)的表達(dá),抑制α-平滑肌肌動蛋白(α-SMA)的表達(dá),從而抑制結(jié)腸上皮細(xì)胞間質(zhì)轉(zhuǎn)化,明顯改善由2,4,6-三硝基苯磺酸誘導(dǎo)的大鼠潰瘍性結(jié)腸炎腸纖維化[32]。

3.1.4 抗炎、鎮(zhèn)痛作用 濕生扁蕾可用于潰瘍性結(jié)腸炎,藏藥濕生扁蕾提取物(GTP)可不同程度對抗2,4,6-三硝基苯磺酸所致的炎性病理損害,抑制炎性滲出,改善潰瘍性結(jié)腸炎小鼠的病理狀態(tài)[33]。濕生扁蕾乙醇提取物對小鼠急性和慢性炎癥的抑制作用較水提取物明顯,且均能顯著抑制小鼠扭體反應(yīng),說明濕生扁蕾具有一定的鎮(zhèn)痛作用[34]。

3.2 苦豆子的藥理作用

3.2.1 對中樞神經(jīng)系統(tǒng)的作用 苦豆子中的苦參堿、槐定堿、槐果堿等生物堿有鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜以及降溫作用。苦參堿、實驗研究表明槐定堿對小鼠痛反應(yīng)均有明顯抑制作用[35]?；倍▔A通過提高細(xì)胞外鈣離子濃度和突觸前遞質(zhì)釋放幾率來影響其抑制作用進(jìn)而發(fā)揮鎮(zhèn)靜作用,有研究發(fā)現(xiàn)苦參堿的抑制作用與激動中樞阿片受體有關(guān)[36]。

3.2.2 對心腦血管系統(tǒng)的作用 苦豆子對心血管系統(tǒng)具有重要的藥理作用,如抗心律失常、降壓、心肌缺血和心肌梗死的保護(hù)作用等[37]?；倍▔A(sophoridine)、氧化槐定堿(oxysophoridine)是苦豆子中含量較高的生物堿,對心力衰竭、心肌梗死、腦缺血、腦缺血再灌注損傷等心腦血管疾病具有良好的防治效果。氧化槐定堿對缺血性腦損傷有保護(hù)作用,降低神經(jīng)系統(tǒng)評分,降低梗死體積和腦水含量,預(yù)防性給與大腦中動脈閉塞(MACO)小鼠氧化槐定堿后,小鼠腦內(nèi)Glu、Asp、GABA、Gly含量可維持在正常水平[38]。氧化槐定堿能夠降低丙二醛(MDA)含量,使超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性顯著增高,乳酸脫氫酶(LDH)、肌酸激酶(CK)活性明顯增高,一氧化氮合酶(NOS)活性顯著降低,說明氧化槐定堿可通過抗氧化作用發(fā)揮對急性腦缺血損傷的保護(hù)作用[39]。

3.2.3 抗腫瘤作用 苦豆子具有抗癌活性,為癌癥和一些慢性疾病的新藥開發(fā)提供了前景。從苦豆子中分離得到的苦參堿、氧化苦參堿等生物堿具有顯著的抗癌作用[40]。陳冠等[41]研究證明各劑量的苦豆子多糖SAP對CT26荷瘤小鼠腫瘤生長有抑制作用。有研究表明,槐定堿通過抑制受體酪氨酸激酶(EphA1)的表達(dá)發(fā)揮抗腸癌作用[42]?？喽箟A通過上調(diào)Bax、下調(diào)Bcl-2表達(dá)促進(jìn)結(jié)腸癌細(xì)胞凋亡,并能上調(diào)P53、P21蛋白和基因水平,下調(diào)cyclin D1和cyclinB1的蛋白和基因水平,使HT29細(xì)胞周期阻滯在G2/M期,其通過抑制RAS/RAF/ERK信號通路的蛋白抑制細(xì)胞的增殖從而發(fā)揮抗腫瘤作用[43]。

3.2.4 抗炎作用 苦豆子總堿可通過減輕結(jié)腸損傷,調(diào)節(jié)膽汁酸代謝和防止腸道微生物群失調(diào)改善潰瘍性結(jié)腸炎[44]。苦參堿和苦豆堿3種生物堿均可通過降低IL-6和TNF-α活性發(fā)揮抗炎作用[45]。葉文初[46]研究發(fā)現(xiàn)苦豆子提取物可明顯降低小鼠耳廓腫脹,足趾腫脹,其還可抑制棉球所致小鼠肉芽組織的增生,說明苦豆子提取物具有明顯的抗炎作用。

3.2.5 其他作用 苦豆子除了具有以上藥理作用外,還具有明顯的免疫調(diào)節(jié)、抑菌以及抗病毒等藥理作用。有研究發(fā)現(xiàn)[47],苦豆子多糖能夠通過促進(jìn)小鼠脾淋巴細(xì)胞的增殖,在一定程度上提高小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的廓清能力、吞噬速度及血清中溶血素的含量來增強(qiáng)小鼠免疫功能?？喽棺涌倝A、槐果堿、苦參堿、槐定堿以及氧化苦參堿對煙曲霉、須癬毛癬菌和新生隱球菌有一定的抑制作用,且槐果堿、苦參堿和槐定堿的抗真菌活性與苦豆子總堿相當(dāng)[48]。

3.3 金錢草藥理作用

臨床上,金錢草主要用于治療結(jié)石病、病毒性肝炎、高尿酸血癥、急性膽囊炎等,與左氧氟沙星或莫西沙星治療尿路感染,其治療效果高于單純使用抗菌藥[49]。

3.3.1 抗肝、腎損傷作用 Wang等[50,51]研究表明,金錢草對小鼠急性酒精性肝損傷具有保護(hù)作用,其作用機(jī)制可能與抑制肝臟氧化應(yīng)激損傷有關(guān),其主要保肝成分為槲皮素,進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)槲皮素可能通過減輕氧化應(yīng)激和抗炎作用來改善TG誘導(dǎo)的急性肝損傷。金錢草中的總黃酮能抑制泌尿系結(jié)石的形成,其作用機(jī)制與金錢草總黃酮通過阻斷p38/MAPK通路抑制腎小管上皮細(xì)胞的過度自噬和凋亡,減少腎小管上皮細(xì)胞的損傷有關(guān)[52]。

3.3.2 利膽作用 實驗研究發(fā)現(xiàn)金錢草能促進(jìn)膽汁分泌和膽汁排空[53],說明其具有抗膽囊炎和利膽作用。閻婷等[54]研究證明,金錢草的水、醇提取物均可明顯抑制二甲苯所致的小鼠耳腫脹和瓊脂所致的大鼠肉芽腫,并且醇提物可升高大鼠膽汁分泌量,對抗Ach引起膽囊平滑肌強(qiáng)烈收縮活動。

3.3.3 神經(jīng)保護(hù)作用 Ryu等[55]研究表明,金錢草提取物對谷氨酸損傷的HT22細(xì)胞具有神經(jīng)保護(hù)作用,其可能通過減少氧化應(yīng)激對神經(jīng)元細(xì)胞的損傷,從而顯著減緩神經(jīng)退行性變。

3.3.4 血管舒張作用 胡致君等[56]研究發(fā)現(xiàn),金錢草乙酸乙酯部位能顯著舒張大鼠主動脈,其機(jī)制可能與其激活內(nèi)皮細(xì)胞一氧化氮合酶、促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞釋放一氧化氮有關(guān)。金錢草提取物中正丁醇部位能促進(jìn)內(nèi)皮依賴性血管舒張和抑制主動脈環(huán)ROS生成[57]。

3.3.5 其他 金錢草提取物有抗氧化和內(nèi)皮保護(hù)作用,如清除自由基,降低過氧化氫酶活性和GSH、NO、MDA水平,阻止內(nèi)皮細(xì)胞ROS的積累[58]。金錢草總黃酮還能抗氧化應(yīng)激,抑制骨橋蛋白表達(dá),并且能有效抑制草酸鈣結(jié)晶的形成[59]。

3.4 濕生扁蕾與苦豆子配伍的藥理作用研究

濕生扁蕾與苦豆子配伍后臨床上主要用于治療消化系統(tǒng)疾病,如潰瘍性結(jié)腸炎,共同發(fā)揮清熱解毒、祛濕止瀉的功效。隨著對濕生扁蕾苦豆子復(fù)方制劑研究的深入,研究發(fā)現(xiàn)濕生扁蕾與苦豆子配伍以后具有鎮(zhèn)痛、抗炎、止瀉作用。在濕生扁蕾與苦豆子不同比例配伍中,濕生扁蕾配比的增加對配伍提取物的抗炎、鎮(zhèn)痛、止瀉作用影響顯著,苦豆子配比的增加對配伍提取物的鎮(zhèn)痛、抗炎作用有增強(qiáng)效應(yīng)[6]?？喽棺又械纳飰A、黃酮類化合物具有抗炎、抑菌作用[14]。濕生扁蕾中的木犀草素、當(dāng)藥醇苷、當(dāng)藥黃素和苦豆子中的苦參堿、氧化苦參堿、槐定堿是濕生扁蕾苦豆子配伍的主要藥效物質(zhì)基礎(chǔ),兩者均具有鎮(zhèn)痛、抗炎、抗菌、抗纖維化、抗腫瘤、抗氧化以及免疫調(diào)節(jié)等作用。明確濕生扁蕾苦豆子配伍的主要活性成分,是研發(fā)復(fù)方制劑的重點所在,進(jìn)而實現(xiàn)藥效最大化,擴(kuò)大藏藥濕生扁蕾、中藥苦豆子的臨床使用。

3.5 濕生扁蕾與金錢草配伍的藥理作用研究

金蕾復(fù)方在臨床上主要用于治肝膽濕熱所致的肋痛、口苦,急性膽囊炎、膽管炎等。藥學(xué)工作者將其研制成便于攜帶及服用的膠囊劑,經(jīng)動物實驗表明,金蕾膠囊具有鎮(zhèn)痛、抗炎作用[60]。張旭東[61]研究表明,金蕾復(fù)方提取物在一定程度上具有緩解膽汁淤積的作用,改善肝細(xì)胞損傷,抑制炎性滲出。

4 結(jié)語與展望

濕生扁蕾是藏醫(yī)治療消化系統(tǒng)疾病的常用藥,其與金錢草、苦豆子進(jìn)行配伍能起到增效(抗膽囊炎)的作用。藏醫(yī)理論認(rèn)為,濕生扁蕾具有清熱解毒、消炎利膽的功效,在臨床應(yīng)用中非常廣泛,但對其發(fā)揮藥理作用的活性成分、作用機(jī)制以及藥效學(xué)等的研究不太深入。中醫(yī)理論認(rèn)為,金錢草具有清熱解毒、利尿消腫、利水通淋等功效,苦豆子具有清熱解毒、祛風(fēng)燥濕、止痛殺蟲等功效,兩者均為治療膽囊炎、膽管炎以及腸道疾病的良藥。通過學(xué)者們的研究發(fā)現(xiàn),濕生扁蕾與金錢草配伍以后,其發(fā)揮藥理作用的主要有效成分為木犀草素、當(dāng)藥醇苷、當(dāng)藥黃素、山柰酚,濕生扁蕾與苦豆子配伍發(fā)揮藥理作用的有效成分為木犀草素、當(dāng)藥醇苷、當(dāng)藥黃素、苦參堿、氧化苦參堿、槐定堿。濕生扁蕾與苦豆子配伍研制而成的復(fù)方制劑具有鎮(zhèn)痛、抗炎、止瀉作用,能夠改善潰瘍性結(jié)腸炎。金蕾復(fù)方(濕生扁蕾與金錢草配伍)可緩解膽汁淤積,改善肝細(xì)胞損傷,抑制炎性滲出,臨床用于治療急性膽囊炎、膽管炎等。濕生扁蕾分別與金錢草、苦豆子配伍以后的部分藥理作用與主要化學(xué)成分已有相關(guān)研究,但兩者配伍以后的化學(xué)成分以及藥理作用發(fā)生哪些變化并無相關(guān)研究,故今后需要進(jìn)一步深入研究,從而更好地指導(dǎo)臨床用藥。

目前,對濕生扁蕾與金錢草、苦豆子的配伍研究雖然有了一定的進(jìn)展,但其主要集中于藥效學(xué)研究,并未對具體機(jī)制進(jìn)行深入研究。要讓藥物配伍以后發(fā)揮更好的療效,我們需要對復(fù)方中的有效成分及各成分之間相互作用進(jìn)行深入的研究,完整地闡明藥物配伍所針對的適應(yīng)證以及藥理作用機(jī)制。從近幾年的文獻(xiàn)來看,對濕生扁蕾的研究較少,但它的藥用價值不可忽視。通過對濕生扁蕾與金錢草、苦豆子配伍總結(jié),為今后學(xué)者研究濕生扁蕾配伍以及復(fù)方制劑的研制提供理論依據(jù)。