• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    FK506結(jié)合蛋白在腫瘤中的研究進(jìn)展

    2021-12-05 07:48:16
    醫(yī)學(xué)研究雜志 2021年4期
    關(guān)鍵詞:結(jié)構(gòu)域直腸癌癌癥

    邱 林 王 爽 劉 涵 張 軍

    FK506結(jié)合蛋白(FKBP)是一種分布廣泛,系統(tǒng)發(fā)育保守的非淋巴特異性蛋白,存在于從酵母菌到人體的許多真核生物中[1]。FKBPs屬于親免疫家族,能與免疫抑制藥物如FK506和雷帕霉素結(jié)合,并且參與腫瘤進(jìn)展和化療耐藥等各種過程[2]。該家族的原型FKBP12在1989年第一次被分離出來,只包含一個(gè)由108個(gè)氨基酸殘基組成的FK506結(jié)合閾(FK506-binding domain,F(xiàn)KBD),被認(rèn)為是代表了FKBP家族一部分成員所必需的最小結(jié)構(gòu)閾[3]。FKBPs可以和免疫抑制藥物結(jié)合正是由于FKBD的存在,并且FKBPs也具有肽基脯氨酰/反式異構(gòu)酶活性(PPIase),這種酶活性有助于多肽重組[4]。

    人FKBPs包含多種蛋白質(zhì),范圍從(12~135)kDa,分布于各種組織和亞細(xì)胞室中。這些蛋白質(zhì)最多可包含3個(gè)FKBD,通常緊隨其后的是四肽重復(fù)(TPR)結(jié)構(gòu)域,該結(jié)構(gòu)域與熱休克蛋白90(Hsp90)、C-末端鈣調(diào)蛋白結(jié)合域、跨膜基序的蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用有關(guān)。根據(jù)已有的研究表明,F(xiàn)KBP12-免疫抑制劑復(fù)合物可以通過干擾Ca2+來調(diào)節(jié)神經(jīng)磷酸酶,從而導(dǎo)致T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑中下游信號被抑制,因此可以用于治療某些自身免疫性疾病,防止器官移植后產(chǎn)生排斥反應(yīng)[5]。除此之外,F(xiàn)KBPs還參與許多細(xì)胞功能,如蛋白質(zhì)折疊、蛋白質(zhì)穩(wěn)定性、激酶活性、受體信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和蛋白質(zhì)運(yùn)輸?shù)萚6]。

    最近,F(xiàn)KBPs已被證明參與了其他的細(xì)胞過程,特別是癌變進(jìn)展和化療耐藥性。與正常的組織和細(xì)胞比較,F(xiàn)KBPs的表達(dá)水平在癌細(xì)胞系和人類癌癥組織中發(fā)生了改變。因此本文就FKBPs核心成員的分子結(jié)構(gòu)、基因表達(dá)水平和在腫瘤發(fā)生及發(fā)展中的功能作用、臨床意義及相關(guān)分子機(jī)制研究進(jìn)行回顧,并介紹它們作為癌癥生物學(xué)標(biāo)志物的潛在用途。

    一、FKBP3

    FKBP3(也稱為FKBP25)是第1個(gè)被確認(rèn)主要位于細(xì)胞核中的FKBP家族成員,相對分子質(zhì)量為25kDa,它定位于染色體14q21.2,由7個(gè)外顯子組成,普遍存在于多種組織中,以腦、前列腺、心臟表達(dá)量最多[7]。它包含1個(gè)N末端螺旋-環(huán)-螺旋(HLH)域和1個(gè)C末端FKBD,它們通過一個(gè)長度為35個(gè)氨基酸殘基的柔性環(huán)相連。它獨(dú)特的N末端結(jié)構(gòu)域與DNA相互作用,且與任何哺乳動(dòng)物蛋白均未顯示出明顯的序列相似[8]。盡管FKBP3兩個(gè)獨(dú)立結(jié)構(gòu)域的結(jié)構(gòu)已經(jīng)明確,但它的全長結(jié)構(gòu)以及和核酸之間相互作用的分子機(jī)制還不是很明確。Prakash等[9]通過磁共振法確定了人FKBP3在溶液中的三維結(jié)構(gòu),表征了其與DNA的結(jié)合,并提出了一個(gè)模型來顯示FKBP3的DNA結(jié)合機(jī)制,為識別核酸的分子調(diào)控機(jī)制提供見解,由此進(jìn)一步明確了它的結(jié)構(gòu),為進(jìn)一步的功能研究奠定了基礎(chǔ)。

    Liu等[10]對經(jīng)過褪黑素處理的兩種乳腺癌細(xì)胞進(jìn)行全基因組芯片檢測,發(fā)現(xiàn)了203個(gè)mRNA和66個(gè)長鏈非編碼RNA(lncRNA)在兩種細(xì)胞中均下調(diào)了至少2倍,通過篩選找到了下調(diào)量最多的FKBP3和Nonmmut010561并將后者命名為lnc010561。通過Western blot法檢測證明FKBP3在乳腺癌細(xì)胞中高表達(dá);在體外實(shí)驗(yàn)中,沉默F(xiàn)KBP3和lnc010561后發(fā)現(xiàn)乳腺癌細(xì)胞的增殖、侵襲以及集落形成能力減弱;RNA免疫沉淀分析表明lnc010561和FKBP3是miR-30的內(nèi)源競爭RNA(CeRNAs),由此表明,褪黑素通過lnc010561/miR-30/FKBP3軸調(diào)節(jié)乳腺癌的進(jìn)展。

    Tong等[11]通過real-time PCR和Western blot法檢測了結(jié)直腸癌中FKBP3和HDAC2的表達(dá),發(fā)現(xiàn)FKBP3和HDAC2在結(jié)直腸癌組織中高表達(dá);在體外,通過慢病毒轉(zhuǎn)染使得原代結(jié)直腸癌細(xì)胞中的FKBP3表達(dá)量下調(diào),HDAC2的表達(dá)量降低,AKT的磷酸化也隨之減少,同時(shí)增加了PTEN的表達(dá)并顯著增加原代結(jié)直腸癌細(xì)胞對奧沙利鉑的敏感度,由此證明FKBP3下調(diào)可能通過降低HDAC2表達(dá)減弱結(jié)直腸癌細(xì)胞對奧沙利鉑的抗性,而且FKBP3可能會(huì)通過調(diào)節(jié)PTEN/AKT通路參與結(jié)直腸癌的化療耐藥中。

    Zhu等[12]研究證明,非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞中FKBP3的mRNA和蛋白質(zhì)表達(dá)水平均上調(diào),體外和體內(nèi)實(shí)驗(yàn)均表明它可以促進(jìn)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞增殖。同時(shí)在體外實(shí)驗(yàn)中FKBP3的敲低顯著降低了非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞中HDAC2的表達(dá),增加了p27(細(xì)胞周期抑制劑)的表達(dá),并且FKBP3通過抑制轉(zhuǎn)錄因子Sp1的泛素化誘導(dǎo)HDAC2啟動(dòng)子活性。由此表明,F(xiàn)KBP3 可能通過調(diào)節(jié) Sp1/HDAC2/p27通路促進(jìn)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞增殖。

    目前針對FKBP3在腫瘤中的研究內(nèi)容還比較少,涉及的癌癥類型也相對局限,雖然研究人員對FKBP3的結(jié)構(gòu)以及功能的認(rèn)知日漸完善,但是它在所有的癌組織中是否都是高表達(dá)以及它對于促進(jìn)各種癌細(xì)胞的增殖能力有無差異這些都是未知的。以往的研究已經(jīng)為FKBP3在乳腺癌、結(jié)直腸癌和非小細(xì)胞肺癌中存在的可能作用提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù),經(jīng)過進(jìn)一步挖掘相關(guān)的分子機(jī)制以及增加動(dòng)物實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,那么它或許有望成為這幾類癌癥臨床治療的新靶點(diǎn)。除此之外,F(xiàn)KBP3在其他癌組織中的表達(dá)特點(diǎn)以及是否發(fā)揮某些作用還需要進(jìn)行更多的驗(yàn)證。

    二、FKBP11

    FKBP11是FKBP家族的一個(gè)新興成員,最初由Rulten等描述,它包含1個(gè)編碼22kDa前體蛋白的開放閱讀框,這個(gè)前體蛋白在3kDa的預(yù)測位點(diǎn)上被切割留下1個(gè)19kDa的成熟蛋白,因此FKBP11也被命名為FKBP19。FKBP11的其他特征還包括1個(gè)富含亮氨酸的具有25個(gè)氨基酸殘基的N-末端前導(dǎo)序列,1個(gè)包含跨膜結(jié)構(gòu)閾的C-末端,最后是內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜蛋白中發(fā)現(xiàn)的定位基序,由此認(rèn)為FKBP11參與蛋白質(zhì)的折疊和分泌[13]。FKBP11定位于染色體12q13.12,由8個(gè)外顯子組成,在胰腺和闌尾組織中廣泛表達(dá)。研究表明,F(xiàn)KBP11與許多炎性疾病有關(guān),如當(dāng)處于高水平循環(huán)游離脂肪酸的環(huán)境中,F(xiàn)KBP11可能調(diào)節(jié)β細(xì)胞中未折疊的蛋白反應(yīng)(UPR),從而參與2型糖尿病的發(fā)病機(jī)制[14]。

    FKBP11可以通過抑制克羅恩病中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)的JNK/caspase凋亡途徑,保護(hù)腸上皮細(xì)胞免受干擾素-γ(IFN-γ)/腫瘤壞死因子-α(TNF-α)誘導(dǎo)的凋亡[15]。通過分析靜止性系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)患者B細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組,證實(shí)FKBP11過表達(dá),同時(shí),動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證實(shí)FKBP11過表達(dá)可通過在paired box 5主調(diào)節(jié)基因的上游發(fā)揮作用來破壞B細(xì)胞對DNA的耐受性,并啟動(dòng)漿細(xì)胞分化,這可能在SLE免疫病理學(xué)中協(xié)同促成B細(xì)胞基因異常[16]。Lin等[17]通過分析腫瘤組織和與腫瘤相鄰的組織樣本,發(fā)現(xiàn)無論它們的臨床病理特征如何,均可在肝癌組織中觀察到FKBP11高表達(dá),重要的是FKBP11表達(dá)水平從良性肝組織到癌組織逐漸增加。因此,確定FKBP11為肝細(xì)胞癌新型標(biāo)志物,并認(rèn)為FKBP11有可能成為肝癌早期標(biāo)志物。此外,與正常皮膚比較,在黑色素瘤中FKBP11的表達(dá)上調(diào)了2.42倍。有關(guān)FKBP11是否在黑色素瘤進(jìn)展中發(fā)揮作用以及它是否能成為惡性黑色素瘤的標(biāo)志物尚未見任何報(bào)道[18]。

    FKBP11在腫瘤中的研究僅限于此,對于FKBP11的探索還處于初級階段。對FKBP11的結(jié)構(gòu)認(rèn)識仍需不斷的完善,以期為后續(xù)具體的功能研究提供理論基礎(chǔ)。但是,已有證據(jù)表明,大約25%的人類癌癥歸因于慢性炎癥,許多微生物與癌癥的發(fā)生和進(jìn)展有關(guān),炎性標(biāo)志物在癌癥患者中高表達(dá)也與預(yù)后差有關(guān),這充分表明炎癥是癌癥的重要標(biāo)志之一[19]。因此,在已有的關(guān)于FKBP11在炎癥方面研究的基礎(chǔ)上,可以針對炎癥相關(guān)癌癥的調(diào)控進(jìn)行探索,同時(shí)FKBP11在其他類型的癌癥組織中的表達(dá)特點(diǎn)以及在腫瘤發(fā)生、發(fā)展中的功能作用及其潛在機(jī)制也需要進(jìn)一步探索。

    三、FKBP38

    FKBP38 是FKBP家族中的一種多功能蛋白,又名FKBP8,包含F(xiàn)KBD、三方TPR結(jié)構(gòu)域及推測的鈣調(diào)蛋白和跨膜基序。它定位于染色體19p13.11,由9個(gè)外顯子組成,在睪丸和腦組織中表達(dá)量最高。與大多數(shù)規(guī)范性FKBPs不同,F(xiàn)KBP38是非規(guī)范性家族成員,缺乏結(jié)合FK506和PPIase活性所需的保守氨基酸殘基,表明其有獨(dú)立于FKBPs的功能[20]。在壓力超負(fù)荷時(shí),F(xiàn)KBP38通過防止蛋白質(zhì)錯(cuò)誤折疊并產(chǎn)生內(nèi)質(zhì)網(wǎng)相關(guān)的細(xì)胞凋亡,起到保護(hù)心臟作用[21]。在腫瘤中,F(xiàn)KBP38可以幫助抗凋亡蛋白Bcl-2和Bcl-XL定位于線粒體膜,并保護(hù)細(xì)胞免于凋亡,從而促進(jìn)腫瘤發(fā)生和化療抵抗,但作用機(jī)制尚不明確[22]。

    眾所周知,癌癥形成的過程很復(fù)雜,與癌基因和抑癌基因突變的逐漸累積有關(guān),會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞周期失調(diào)、生長抑制和抗凋亡。與此同時(shí),腫瘤細(xì)胞與微環(huán)境的相互作用也會(huì)促進(jìn)癌癥的進(jìn)展。癌細(xì)胞增殖速度普遍較快,疾病進(jìn)展也通常迅速,在短短幾個(gè)月內(nèi)腫瘤的體積可以增加一倍,這種加速的進(jìn)展也是癌癥預(yù)后不良的原因之一,因此抑制腫瘤細(xì)胞的增殖現(xiàn)在也成為了研究熱點(diǎn)。細(xì)胞凋亡作為抑制細(xì)胞增殖的一種機(jī)制,也同樣具有很廣闊的研究前景,F(xiàn)KBP38已經(jīng)展現(xiàn)出了和細(xì)胞凋亡的關(guān)系,那么未來或許可以研究在不同癌癥中FKBP38的表達(dá)特點(diǎn)從而將FKBP38的異常表達(dá)與癌細(xì)胞的凋亡相結(jié)合。

    四、FKBP51

    FKBP51又名FKBP5、FKBP54,相對分子質(zhì)量為51kDa,定位于染色體6p21.31,由13個(gè)外顯子組成,在脂肪及淋巴結(jié)中表達(dá)量最高。FKBP51由兩個(gè)連續(xù)的FKBP域和一個(gè)TPR(四肽重復(fù))域組成,第1個(gè)FKBP閾具有肽基脯氨?;悩?gòu)酶活性,第2個(gè)FKBP閾與第1個(gè)相似,二者的不同之處在于第2個(gè)FKBP結(jié)構(gòu)域缺少肽基脯氨酰基異構(gòu)酶活性,而且第2個(gè)FKBP結(jié)構(gòu)域的插入會(huì)影響孕酮受體復(fù)合物的形成。該蛋白還可以通過與Hsp90結(jié)合,參與高親和力類固醇受體復(fù)合物的形成,比如糖皮質(zhì)激素(GR)或孕激素(PR)的受體必須通過涉及Hsp40、Hsp70、Hsp90及各種Hsp結(jié)合伴侶蛋白的有序途徑進(jìn)行組裝[23]。除了FKBP51在免疫抑制方面的作用研究外,近些年在腫瘤中的研究也取得了一定進(jìn)展。如Wu等[24]研究發(fā)現(xiàn)FKBP51在前列腺癌中高表達(dá),并且可以促進(jìn)雄激素受體的活性,增強(qiáng)雄激素受體結(jié)合雄激素的能力,導(dǎo)致下游基因表達(dá)上調(diào),最終促進(jìn)前列腺癌細(xì)胞的增殖。Gao等[25]研究發(fā)現(xiàn)與臨近的正常組織比較,F(xiàn)KBP51在甲狀腺乳頭狀癌中表達(dá)增加,并且表達(dá)水平與臨床腫瘤、淋巴結(jié)和轉(zhuǎn)移階段相關(guān)。

    在體外實(shí)驗(yàn)中選用K1細(xì)胞和TPC-1細(xì)胞,確定FKBP51可以促進(jìn)甲狀腺乳頭狀癌的遷移和侵襲。進(jìn)一步研究表明,F(xiàn)KBP51激活了NF-κB通路和上皮間充質(zhì)轉(zhuǎn)化從而導(dǎo)致細(xì)胞的遷移和侵襲能力增強(qiáng)。夏志秀等[26]研究發(fā)現(xiàn),與正常結(jié)直腸組織比較,F(xiàn)KBP51在結(jié)直腸癌組織中表達(dá)高,而且與腫瘤增殖和浸潤深度呈正相關(guān),由此表明FKBP51作為癌基因可能促進(jìn)結(jié)直腸癌生長和侵襲,有可能成為結(jié)直腸癌個(gè)體化診治的候選靶點(diǎn)。Chen等[27]研究發(fā)現(xiàn),與鄰近正常組織比較,肺癌組織中FKBP51表達(dá)量明顯下調(diào)。在非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞A549中過表達(dá)FKBP51可顯著增加細(xì)胞凋亡,p53和caspase-3的水平也顯著升高;A549細(xì)胞生存力與空載對照比較,暴露在順鉑中的FKBP51過表達(dá)細(xì)胞顯示出明顯較低的存活率,由此表明FKBP51可以通過改變p53信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的活性影響肺癌進(jìn)展且提高藥物敏感度。李慶敏等[28]研究發(fā)現(xiàn),F(xiàn)KBP51 在乳腺癌中低表達(dá),而且其表達(dá)水平與組織學(xué)分級呈負(fù)相關(guān),即FKBP51 的表達(dá)水平越高,組織學(xué)分級越低,細(xì)胞分化越好,惡性程度越低,預(yù)后相對較好,可能在乳腺癌中發(fā)揮抑癌基因的作用而抑制癌細(xì)胞增殖。

    綜上所述,F(xiàn)KBP51在前列腺癌、甲狀腺乳頭狀癌、結(jié)直腸癌、黑色素瘤、神經(jīng)膠質(zhì)瘤中過表達(dá),在肺癌、乳腺癌中表達(dá)下調(diào)或不表達(dá)。因此,對于FKBP51的性質(zhì)目前還無法給出一個(gè)明確的定義,對于腫瘤的誘發(fā)機(jī)制來說,可能作為促癌基因或抑癌基因在不同腫瘤組織中受不同信號通路調(diào)控發(fā)揮作用。雖然FKBP51在腫瘤中的研究比較廣泛,但由于它在不同腫瘤甚至是不同分化程度的同一腫瘤中都有可能表現(xiàn)出不同作用,表明它在某些腫瘤中的功能作用不具有普遍性,在疾病中受到的調(diào)控機(jī)制相對復(fù)雜且尚不明確。因此針對FKBP51的這種表達(dá)特性,未來研究的方向主要是針對于它在不同類型的癌癥中的個(gè)性化靶向治療,在沒有完全認(rèn)清它對于某種癌癥及其全部分型的作用之前,不可以貿(mào)然下結(jié)論。

    五、展 望

    自1989年FKBP被發(fā)現(xiàn)并且命名后,已陸續(xù)發(fā)現(xiàn)多達(dá)16種FKBPs,它們擁有相似的結(jié)構(gòu)與作用,定位于不同的染色體,在各種組織中的表達(dá)有明顯差異[3]。盡管FKBPs發(fā)現(xiàn)30余年,但相關(guān)研究仍處于初級階段,許多問題亟待探究,如該蛋白家族成員尚未完全被發(fā)現(xiàn),現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)的成員結(jié)構(gòu)認(rèn)識尚不完全以及相關(guān)生理作用未見報(bào)道,研究多在基因表達(dá)和細(xì)胞實(shí)驗(yàn)水平,蛋白表達(dá)調(diào)控及功能作用機(jī)制研究不全面深入,缺乏體內(nèi)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,多數(shù)研究對象是結(jié)直腸癌、前列腺癌、乳腺癌等發(fā)生率較高的惡性腫瘤,在其他類型癌癥發(fā)生、發(fā)展中的作用、分子機(jī)制及臨床意義方面鮮有研究。

    目前腫瘤治療依然是以外科手術(shù)、放療以及化療等治療手段為主的綜合治療模式,盡管這種模式日益成熟,但癌癥患者的預(yù)后仍然不理想,所以迫切需要尋找一些具有足夠特異性和敏感度的標(biāo)志物用于臨床癌癥診斷,特別是早期癌癥,以求做到早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早治療。隨著分子腫瘤時(shí)代的到來,針對腫瘤治療的策略實(shí)現(xiàn)了從“尋找和破壞腫瘤”到“靶向和控制腫瘤”的轉(zhuǎn)變。除FKBPs在免疫抑制方面作用外,其在腫瘤發(fā)生與化療耐藥中的作用也愈來愈受重視,未來一或多個(gè)蛋白家族成員可能成為腫瘤個(gè)體化診治的候選靶點(diǎn),結(jié)合傳統(tǒng)臨床治療模式,最終達(dá)到阻遏和治療腫瘤的目的。

    猜你喜歡
    結(jié)構(gòu)域直腸癌癌癥
    留意10種癌癥的蛛絲馬跡
    蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)域劃分方法及在線服務(wù)綜述
    癌癥“偏愛”那些人?
    海峽姐妹(2018年7期)2018-07-27 02:30:36
    對癌癥要恩威并施
    特別健康(2018年4期)2018-07-03 00:38:08
    不如擁抱癌癥
    特別健康(2018年2期)2018-06-29 06:13:42
    腹腔鏡下直腸癌前側(cè)切除術(shù)治療直腸癌的效果觀察
    重組綠豆BBI(6-33)結(jié)構(gòu)域的抗腫瘤作用分析
    直腸癌術(shù)前放療的研究進(jìn)展
    組蛋白甲基化酶Set2片段調(diào)控SET結(jié)構(gòu)域催化活性的探討
    COXⅠ和COX Ⅲ在結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)及其臨床意義
    麻豆av在线久日| 亚洲一区二区三区欧美精品| 日本欧美国产在线视频| 最新的欧美精品一区二区| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 国产一区二区 视频在线| 大型av网站在线播放| 国产麻豆69| 午夜福利一区二区在线看| 国产精品久久久久成人av| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 国产又色又爽无遮挡免| av电影中文网址| 亚洲免费av在线视频| 国产精品久久久人人做人人爽| 蜜桃国产av成人99| 色婷婷久久久亚洲欧美| 高清不卡的av网站| av网站在线播放免费| 亚洲国产av新网站| 丝袜人妻中文字幕| 国产精品av久久久久免费| a级片在线免费高清观看视频| 精品亚洲成a人片在线观看| 亚洲精品成人av观看孕妇| 美女福利国产在线| 一区二区三区四区激情视频| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 激情五月婷婷亚洲| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 狠狠婷婷综合久久久久久88av| 欧美激情 高清一区二区三区| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 黄色 视频免费看| 97人妻天天添夜夜摸| 国产免费视频播放在线视频| 精品第一国产精品| 久久久久精品国产欧美久久久 | 黄色 视频免费看| 一区二区三区激情视频| 欧美精品亚洲一区二区| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 国产成人a∨麻豆精品| 在线观看国产h片| 国产精品三级大全| 国产精品亚洲av一区麻豆| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 欧美成狂野欧美在线观看| 婷婷色麻豆天堂久久| 亚洲av日韩在线播放| 男女免费视频国产| cao死你这个sao货| 亚洲一区二区三区欧美精品| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 国产成人精品无人区| 90打野战视频偷拍视频| 亚洲av日韩精品久久久久久密 | 香蕉国产在线看| 18在线观看网站| 男女下面插进去视频免费观看| 国产精品av久久久久免费| 亚洲av日韩在线播放| 国产男女超爽视频在线观看| 国产精品一区二区在线观看99| 亚洲国产日韩一区二区| 欧美激情极品国产一区二区三区| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 久久av网站| 黄片小视频在线播放| 精品人妻在线不人妻| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 无遮挡黄片免费观看| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 亚洲专区中文字幕在线| 晚上一个人看的免费电影| 又紧又爽又黄一区二区| 午夜两性在线视频| 国产一级毛片在线| 一区二区三区激情视频| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 亚洲精品成人av观看孕妇| 久热爱精品视频在线9| 午夜激情av网站| 国产日韩欧美视频二区| 亚洲精品第二区| 美女国产高潮福利片在线看| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲 | 国产爽快片一区二区三区| 9热在线视频观看99| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 国产精品一区二区免费欧美 | 爱豆传媒免费全集在线观看| 国产成人一区二区三区免费视频网站 | 亚洲一码二码三码区别大吗| 国产亚洲精品久久久久5区| 精品免费久久久久久久清纯 | 80岁老熟妇乱子伦牲交| 日韩欧美一区视频在线观看| 尾随美女入室| 亚洲av日韩精品久久久久久密 | av福利片在线| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 中文字幕色久视频| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 七月丁香在线播放| 成年女人毛片免费观看观看9 | 亚洲中文av在线| 久久女婷五月综合色啪小说| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 99国产综合亚洲精品| 国产成人精品久久久久久| 欧美xxⅹ黑人| 亚洲一码二码三码区别大吗| 美女大奶头黄色视频| 亚洲黑人精品在线| a级毛片在线看网站| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 久久精品亚洲av国产电影网| 亚洲天堂av无毛| 国产成人免费观看mmmm| 91麻豆av在线| 日本一区二区免费在线视频| 日韩制服骚丝袜av| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 青春草亚洲视频在线观看| 亚洲 欧美一区二区三区| 一本大道久久a久久精品| a 毛片基地| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 妹子高潮喷水视频| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 午夜福利一区二区在线看| 久久av网站| 叶爱在线成人免费视频播放| 国产精品国产三级专区第一集| 观看av在线不卡| 久久九九热精品免费| 欧美日韩成人在线一区二区| 国产一区二区在线观看av| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 爱豆传媒免费全集在线观看| 久久久国产一区二区| av天堂久久9| 国产高清videossex| 黄色怎么调成土黄色| 精品一区二区三区av网在线观看 | 国产欧美日韩一区二区三区在线| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 亚洲av美国av| 欧美激情高清一区二区三区| 日本a在线网址| 国产色视频综合| 最新在线观看一区二区三区 | 日本av手机在线免费观看| 久久国产精品人妻蜜桃| 一级毛片我不卡| 国产免费视频播放在线视频| 一级黄片播放器| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 91成人精品电影| 久久av网站| 性色av乱码一区二区三区2| 一级片免费观看大全| 日本一区二区免费在线视频| 国产视频首页在线观看| 老司机亚洲免费影院| 亚洲中文字幕日韩| 国产免费又黄又爽又色| 一二三四社区在线视频社区8| 欧美日韩综合久久久久久| 在线观看免费日韩欧美大片| 各种免费的搞黄视频| 天堂8中文在线网| 成年人午夜在线观看视频| 国产爽快片一区二区三区| 精品人妻在线不人妻| 成在线人永久免费视频| 欧美日韩成人在线一区二区| av网站在线播放免费| 无限看片的www在线观看| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 国产精品久久久久久人妻精品电影 | 国产精品一区二区在线不卡| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 久久久久久免费高清国产稀缺| 亚洲欧美色中文字幕在线| 欧美黑人欧美精品刺激| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 美女主播在线视频| 少妇的丰满在线观看| 免费在线观看日本一区| 精品国产国语对白av| 国产日韩欧美视频二区| 丁香六月天网| 男女床上黄色一级片免费看| 久久中文字幕一级| 99香蕉大伊视频| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 一区二区三区乱码不卡18| 久久精品久久久久久久性| 国产爽快片一区二区三区| 欧美黑人精品巨大| 精品久久久久久久毛片微露脸 | 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 成年美女黄网站色视频大全免费| 日韩大码丰满熟妇| 国产国语露脸激情在线看| 黑人猛操日本美女一级片| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 婷婷色av中文字幕| 另类亚洲欧美激情| 51午夜福利影视在线观看| 国产一区二区在线观看av| 成人影院久久| 老司机亚洲免费影院| 亚洲精品一区蜜桃| 亚洲精品美女久久av网站| 亚洲一区二区三区欧美精品| 一本色道久久久久久精品综合| 青青草视频在线视频观看| 成年人午夜在线观看视频| 精品人妻一区二区三区麻豆| 精品少妇黑人巨大在线播放| 日韩av不卡免费在线播放| 精品熟女少妇八av免费久了| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 久久久久网色| 亚洲成人免费av在线播放| 欧美激情 高清一区二区三区| 日韩一本色道免费dvd| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 黄色怎么调成土黄色| 男人爽女人下面视频在线观看| 国产深夜福利视频在线观看| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| www.av在线官网国产| 久久99精品国语久久久| √禁漫天堂资源中文www| 我要看黄色一级片免费的| 18禁观看日本| a级片在线免费高清观看视频| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 一本色道久久久久久精品综合| 久久 成人 亚洲| 亚洲欧美激情在线| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 国产日韩欧美在线精品| 午夜福利在线免费观看网站| 青草久久国产| 午夜激情久久久久久久| 午夜福利影视在线免费观看| 欧美日韩亚洲高清精品| 久久精品国产亚洲av涩爱| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 国产一区亚洲一区在线观看| 丁香六月欧美| 国产亚洲av高清不卡| 欧美在线黄色| 男女之事视频高清在线观看 | 国产精品亚洲av一区麻豆| 国产精品一区二区在线不卡| 国产视频一区二区在线看| 久久亚洲精品不卡| 亚洲精品自拍成人| 国产成人啪精品午夜网站| 99久久99久久久精品蜜桃| 中文字幕亚洲精品专区| 久热这里只有精品99| 亚洲人成77777在线视频| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 校园人妻丝袜中文字幕| 日韩 亚洲 欧美在线| 人人妻,人人澡人人爽秒播 | 久久免费观看电影| 女人精品久久久久毛片| 亚洲欧美一区二区三区久久| 亚洲 国产 在线| 18禁国产床啪视频网站| 日韩大码丰满熟妇| 欧美精品av麻豆av| 一本大道久久a久久精品| 18禁观看日本| 亚洲男人天堂网一区| 亚洲七黄色美女视频| 黄色片一级片一级黄色片| 一级毛片电影观看| 老司机深夜福利视频在线观看 | 欧美亚洲日本最大视频资源| 少妇被粗大的猛进出69影院| 国产欧美日韩一区二区三 | 国产老妇伦熟女老妇高清| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 国产精品九九99| 黄色片一级片一级黄色片| 人体艺术视频欧美日本| 18在线观看网站| 久久国产精品人妻蜜桃| 在线观看www视频免费| 亚洲国产精品999| 大香蕉久久成人网| 久久影院123| 99热全是精品| 欧美激情 高清一区二区三区| 久久免费观看电影| 成人三级做爰电影| 高清欧美精品videossex| 精品一区二区三卡| 免费高清在线观看日韩| 人人妻人人澡人人看| 一本大道久久a久久精品| 欧美97在线视频| 亚洲一码二码三码区别大吗| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 国产精品久久久久久精品电影小说| 精品视频人人做人人爽| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 国产一区亚洲一区在线观看| 欧美人与性动交α欧美软件| 亚洲图色成人| 亚洲人成77777在线视频| 精品一区二区三区四区五区乱码 | 悠悠久久av| 欧美黑人欧美精品刺激| 亚洲美女黄色视频免费看| 黄色怎么调成土黄色| 嫩草影视91久久| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 大片电影免费在线观看免费| 中文字幕精品免费在线观看视频| 国产精品久久久av美女十八| 国产成人精品久久二区二区91| 2018国产大陆天天弄谢| 午夜激情av网站| 亚洲精品一二三| 日韩伦理黄色片| 亚洲国产欧美网| 乱人伦中国视频| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 欧美大码av| 国产高清视频在线播放一区 | 天天添夜夜摸| 亚洲伊人久久精品综合| 国产1区2区3区精品| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 国产免费现黄频在线看| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 国产成人精品久久二区二区免费| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 国产精品av久久久久免费| 一级毛片 在线播放| 在现免费观看毛片| 日韩电影二区| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 国产精品欧美亚洲77777| 国产视频首页在线观看| 亚洲成人免费电影在线观看 | 日韩制服骚丝袜av| 咕卡用的链子| tube8黄色片| 日韩av在线免费看完整版不卡| 亚洲精品乱久久久久久| 真人做人爱边吃奶动态| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 午夜福利视频在线观看免费| 叶爱在线成人免费视频播放| 人人妻人人澡人人看| 99国产精品99久久久久| 国产野战对白在线观看| 性色av乱码一区二区三区2| 亚洲精品国产色婷婷电影| 国产亚洲av高清不卡| www.999成人在线观看| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 天天躁日日躁夜夜躁夜夜| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 在线观看免费日韩欧美大片| 久久久久久久精品精品| 国产亚洲一区二区精品| 国产成人一区二区在线| 男人操女人黄网站| 黄色毛片三级朝国网站| 欧美 日韩 精品 国产| 久久精品人人爽人人爽视色| 中文字幕人妻熟女乱码| 91精品国产国语对白视频| 国产亚洲精品第一综合不卡| 亚洲七黄色美女视频| 激情五月婷婷亚洲| 欧美精品亚洲一区二区| 成人午夜精彩视频在线观看| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 亚洲欧洲国产日韩| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 69精品国产乱码久久久| 欧美中文综合在线视频| 亚洲专区国产一区二区| 男人添女人高潮全过程视频| 亚洲一区二区三区欧美精品| av网站在线播放免费| 999精品在线视频| 国产精品九九99| 精品久久久久久电影网| 99国产精品一区二区三区| 男女无遮挡免费网站观看| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 日日摸夜夜添夜夜爱| 亚洲伊人色综图| 成人亚洲欧美一区二区av| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 亚洲欧美清纯卡通| a级片在线免费高清观看视频| 亚洲美女黄色视频免费看| netflix在线观看网站| 国产淫语在线视频| 国产精品国产三级专区第一集| 久久久国产精品麻豆| 满18在线观看网站| 亚洲人成电影观看| 久久99热这里只频精品6学生| 十分钟在线观看高清视频www| 日日爽夜夜爽网站| 欧美日韩黄片免| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 男人添女人高潮全过程视频| 日韩欧美一区视频在线观看| 制服诱惑二区| 咕卡用的链子| 国产精品久久久人人做人人爽| 欧美成狂野欧美在线观看| 婷婷色综合www| 少妇被粗大的猛进出69影院| 午夜老司机福利片| 亚洲欧美一区二区三区国产| 九草在线视频观看| 婷婷丁香在线五月| 少妇粗大呻吟视频| 国产熟女欧美一区二区| 老司机靠b影院| 99久久人妻综合| 中国美女看黄片| 亚洲欧美日韩高清在线视频 | 嫁个100分男人电影在线观看 | 男女无遮挡免费网站观看| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 亚洲 欧美一区二区三区| 亚洲成人免费av在线播放| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 久久综合国产亚洲精品| 精品人妻1区二区| 日韩av在线免费看完整版不卡| 男男h啪啪无遮挡| 日韩精品免费视频一区二区三区| 久久性视频一级片| 日日摸夜夜添夜夜爱| 亚洲第一av免费看| 麻豆国产av国片精品| 一区二区三区乱码不卡18| 一本一本久久a久久精品综合妖精| 成人国语在线视频| 曰老女人黄片| 国产在线免费精品| 欧美少妇被猛烈插入视频| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 国产伦人伦偷精品视频| 亚洲情色 制服丝袜| 在线观看人妻少妇| 又大又爽又粗| 精品久久久精品久久久| 99re6热这里在线精品视频| e午夜精品久久久久久久| 亚洲精品在线美女| 丝袜美腿诱惑在线| 成人影院久久| 极品少妇高潮喷水抽搐| 大香蕉久久成人网| 国产精品熟女久久久久浪| 亚洲国产日韩一区二区| 啦啦啦在线观看免费高清www| 老汉色∧v一级毛片| 亚洲av日韩在线播放| 久久精品久久精品一区二区三区| 国产淫语在线视频| 午夜老司机福利片| 日韩 亚洲 欧美在线| 99国产综合亚洲精品| 色视频在线一区二区三区| 亚洲国产看品久久| 亚洲国产av新网站| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡 | tube8黄色片| 99精品久久久久人妻精品| 欧美精品亚洲一区二区| 美女高潮到喷水免费观看| 久久久精品94久久精品| 新久久久久国产一级毛片| 日本午夜av视频| 丝袜脚勾引网站| 国产有黄有色有爽视频| 久久午夜综合久久蜜桃| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 后天国语完整版免费观看| 亚洲精品第二区| 国产伦人伦偷精品视频| 在线观看免费高清a一片| 1024香蕉在线观看| 亚洲成国产人片在线观看| 婷婷色av中文字幕| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 一区二区三区四区激情视频| 午夜免费男女啪啪视频观看| 国产成人91sexporn| 超碰97精品在线观看| 成在线人永久免费视频| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 久久国产精品影院| 国产淫语在线视频| 电影成人av| 国产精品免费大片| 亚洲欧美一区二区三区国产| 日韩欧美一区视频在线观看| 51午夜福利影视在线观看| 亚洲av成人精品一二三区| 亚洲欧美一区二区三区国产| 精品国产乱码久久久久久男人| 国产精品一区二区在线不卡| 久久久国产欧美日韩av| 欧美成狂野欧美在线观看| 一边摸一边抽搐一进一出视频| 午夜福利在线免费观看网站| 精品少妇久久久久久888优播| 国产淫语在线视频| 十分钟在线观看高清视频www| 欧美日韩亚洲高清精品| 国产色视频综合| 国产片特级美女逼逼视频| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 久久久久久久精品精品| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 一本色道久久久久久精品综合| 午夜精品国产一区二区电影| 日韩av不卡免费在线播放| 成年人午夜在线观看视频| 99精国产麻豆久久婷婷| 久久国产亚洲av麻豆专区| 久久av网站| 午夜激情久久久久久久| 亚洲第一av免费看| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 热re99久久国产66热| www.999成人在线观看| 久久影院123| av欧美777| 久久久久国产一级毛片高清牌| av天堂在线播放| 男人操女人黄网站| 热re99久久精品国产66热6| 亚洲av欧美aⅴ国产| 欧美国产精品va在线观看不卡| 国产有黄有色有爽视频| 精品少妇内射三级| 国产欧美亚洲国产| 久久综合国产亚洲精品| 国产真人三级小视频在线观看| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 老司机靠b影院| 只有这里有精品99| 午夜福利影视在线免费观看| 女性生殖器流出的白浆| 看免费av毛片| 18禁国产床啪视频网站| 爱豆传媒免费全集在线观看| 飞空精品影院首页| 成年人黄色毛片网站| 美女国产高潮福利片在线看| 成年人免费黄色播放视频| 久久久久久久精品精品| 久久亚洲国产成人精品v| 欧美另类一区| 国产精品香港三级国产av潘金莲 | 在线亚洲精品国产二区图片欧美| 一级片免费观看大全| 咕卡用的链子| 亚洲九九香蕉| 一本久久精品| 亚洲七黄色美女视频| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 国产精品av久久久久免费| 亚洲中文日韩欧美视频| 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 免费在线观看日本一区| 久久精品国产亚洲av涩爱| 精品一区二区三区av网在线观看 | 99香蕉大伊视频| 欧美日韩亚洲高清精品| 精品熟女少妇八av免费久了| 欧美成人精品欧美一级黄| 日本av免费视频播放| 亚洲欧美激情在线| 91国产中文字幕| 激情视频va一区二区三区| 久久99精品国语久久久| 国产精品国产三级国产专区5o| 亚洲五月婷婷丁香| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 成人手机av| 国产亚洲av高清不卡| 大香蕉久久成人网| 热re99久久精品国产66热6| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 丝袜在线中文字幕| 99香蕉大伊视频| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁|