外胚層發(fā)育不良受體EDA2R的研究進展

藍希鉗，肖海婷，羅懷容，陳建寧

（西南醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院：1衰老與再生醫(yī)學(xué)實驗室，2藥理學(xué)教研室，四川瀘州 646000）

腫瘤壞死因子受體超級家族（tumor necrosis fac?tor receptor superfamily，TNFRSF）的死亡受體（death receptor）以及它們的配體在胚胎正常發(fā)育及機體免疫和炎癥反應(yīng)過程中扮演了重要角色。外胚層發(fā)育不良受體（ectodysplasin A2 receptor，EDA2R）是一個在20年前被鑒定出來的TNFRSF成員（TNFRSF27）［1］，在腫瘤發(fā)生、雄激素性脫發(fā)等過程中起到重要的作用，但對于該受體作系統(tǒng)性介紹的綜述文章尚未見報道。本文就該受體的研究進展作一系統(tǒng)性的綜述，旨在為相關(guān)研究提供新的思路。

1 EDA2R的蛋白結(jié)構(gòu)和配體

1.1 EDA2R的蛋白結(jié)構(gòu)

EDA2R 基因位于人類染色體Xq12，全長約43kb，有6個外顯子（GenBank 登錄號：NG_013271），轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生多個長度不一的mRNA，翻譯生成的蛋白主要為包含297 個（EDA2R-s）或318（EDA2R-L）個氨基酸的三型跨膜蛋白質(zhì)，其N末端朝向胞外，但缺失信號肽，單次跨膜，C 末端朝向胞內(nèi)。EDA2R 蛋白可分為三個區(qū)域：①胞外區(qū)，包含136 個氨基酸殘基，由三個富集半胱氨酸的區(qū)域組成；②單個跨膜區(qū)，包含21 殘基；③胞內(nèi)區(qū)，EDA2R-S 有140 個殘基，而EDA2R-L 則有161 個殘基。雖然EDA2R-L 在近膜部位比EDA2R-s多出21個殘基，但兩者在功能和活性上基本沒有差別［2-3］。由于EDA2R 胞外區(qū)的氨基酸序列與TNFRSF 中的TNFRSF19（68%）和EDAR（45%）等相似程度最高，所以其被劃歸為TN?FRSF 蛋白家族的成員。然而一個有趣的現(xiàn)象是，EDA2R胞內(nèi)區(qū)與TNFRSF蛋白家族中的其它成員沒有顯著的同源性，而且也不包含死亡結(jié)構(gòu)域（death domain，DD）。此外，小鼠的EDA2R基因也位于X染色體，有7個外顯子（GenBank 登錄號：NC_000086）；所編碼的蛋白序列與人的同源性高達80.7%，分子結(jié)構(gòu)與人的EDA2R相同。

1.2 EDA2R的配體

EDA-A2 是目前已知的EDA2R 的唯一配體，由Ectodysplasin A（EDA）基因編碼，蛋白全長為389 個氨基酸殘基，其中N 末端為含有52 個殘基的信號肽，成熟肽的分子量約為35 kD。EDA基因編碼的另一個蛋白是EDA-A1。與EDA-A2 相比，EDA-A1 僅多了兩個氨基酸殘基（Glu308 和Val309），但卻不能與EDA2R 相結(jié)合［1］；與EDA-A1 相結(jié)合的受體是EDAR（ectodysplasin A receptor）。另外，盡管EDA2R的胞外區(qū)在氨基酸序列上與多個TNFRSF蛋白家族的成員高度相似，但這些受體的配體，如APRIL，Blys/TALL-1，4-1BBL，CD27L，CD30L，CD40L，F(xiàn)asL，GITRL，OX-40L，RANKL，TNF-a，TRAIL/APO2L，都不能與之結(jié)合。同樣，EDA-A2 也不能與其它TNFRSF 蛋白家族成員（如EDAR、TNFRSF19）相結(jié)合。

與其它TNFRSF 蛋白家族受體相似，EDA2R 受體的胞外區(qū)與配體EDA-A2 相結(jié)合時，通過形成三聚體，引起胞內(nèi)部分發(fā)生構(gòu)象變化，并將信號傳遞到下游的一系列通路。下游信號通路的激活程度與配體EDA-A2的濃度成正比，即配體濃度越高，下游通路的激活程度也越高［1-2］。然而，受體表達的增高也會增強下游通路的活性。如在HEK293 細(xì)胞中過表達EDA2R，也可激活下游的NF-KB信號通路［2-4］。推測這可能是受體表達的增加增強了配體的敏感度，也可能是該受體還存在其它不依賴EDA-A2配體的信號激活途徑，如同EDAR 受體能在不與配體相結(jié)合的情況下直接募集Caspase 8 并激活細(xì)胞凋亡那樣[5]，其具體的分子調(diào)控機制還有待更深入的研究。另外，如果沒有與配體相結(jié)合，EDA2R 的胞外部分很容易脫落，并且胞內(nèi)部分也容易被金屬蛋白酶降解，而與配體EDA-A2的結(jié)合則可以穩(wěn)定EDA2R胞內(nèi)外的結(jié)構(gòu)[6]。

2 EDA2R的表達分布

通過RT-PCR 檢測EDA2R 基因mRNA 的表達水平，Newton 等[7]發(fā)現(xiàn)，EDA2R在小鼠的胚胎發(fā)育的E8.5 d就有表達，且一直持續(xù)整個胚胎的發(fā)育過程。通過對轉(zhuǎn)錄組分析，Yue等［8］進一步發(fā)現(xiàn)，EDA2R基因在小鼠胚胎的四肢部分較高水平地表達，在中樞神經(jīng)系統(tǒng)呈現(xiàn)部分表達，在肝臟內(nèi)則表達較低。Yan等［1］通過原位雜交，也發(fā)現(xiàn)EDA2R在小鼠胚胎發(fā)育E 17 d 后，在胎兒皮膚的毛囊泡中表現(xiàn)為較高的表達水平。這些研究說明EDA2R在胚胎發(fā)育過程中呈現(xiàn)高表達的模式。

EDA2R 基因在成年人和小鼠的多個器官組織中均有表達。Newton 等［7］還發(fā)現(xiàn)在成年小鼠的心臟、腎臟、小腸、肺、睪丸、前列腺、乳房、子宮、骨骼肌等器官組織中，EDA2R都有高水平的表達；但在腦、肝臟、脾臟、胸腺等部位，則沒有檢測到EDA2R 的表達。Yue等［8］的研究則發(fā)現(xiàn)，EDA2R在成年小鼠的皮下脂肪墊和膀胱中呈現(xiàn)高表達，在生殖器脂肪墊、心臟、腎臟、卵巢、胎盤等器官組織中呈現(xiàn)部分表達。在人的腎上腺、腦、結(jié)腸、子宮內(nèi)膜、食管、膽囊、心臟、腎臟、肺臟、卵巢、胎盤、前列腺、腮腺、皮膚、小腸、脾臟、胃、睪丸、胸腺、膀胱等器官組織中，EDA2R也被發(fā)現(xiàn)大量地表達［9］。雖然不同的研究報告的具體結(jié)果不完全一致，但整體上都表明EDA2R基因在成年人和動物的多個器官組織中普遍表達。

3 EDA2R 的表達依賴于p53

在胚胎成纖維細(xì)胞和結(jié)腸癌細(xì)胞中，EDA2R都被證實是抑癌因子p53的靶基因，抑制或敲除p53基因的表達會使得EDA2R 的表達被抑制，而誘導(dǎo)p53表達的阿霉素（adriamycin）也能促進EDA2R 的表達［10-11］。P53 能與EDA2R 第一個內(nèi)含子中的兩個相毗鄰的共有序列結(jié)合，進而調(diào)節(jié)EDA2R 基因的轉(zhuǎn)錄，且只有當(dāng)這兩個共有序列同時發(fā)生突變才能阻斷依賴于p53 的EDA2R 的表達。編碼EDA2R 配體EDA-A2 的基因EDA 也是p53 的靶基因，其表達也賴于p53［6］。在HEK293細(xì)胞中，過表達p53顯著增加EDA 基因的表達，同時也會增加EDA-A2 的mRNA和蛋白的形成［6］。

4 EDA2R介導(dǎo)細(xì)胞的凋亡

TNFRSF 的死亡受體及它們的配體在正常的發(fā)育、免疫和炎癥反應(yīng)的調(diào)控中起到重要作用。這些死亡受體介導(dǎo)凋亡的能力被定位到一個由60～80 個氨基酸組成的保守的胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域，該結(jié)構(gòu)域被稱之為死亡結(jié)構(gòu)域（DD），其是死亡受體介導(dǎo)細(xì)胞凋亡的核心區(qū)域。TNFR1 是個典型的死亡受體[12]。研究表明，配體TNF-α與受體TNFR1結(jié)合后，能夠誘導(dǎo)TN?FR1 三聚化，使胞內(nèi)的DD 區(qū)構(gòu)象改變，然后與接頭蛋白TRADD（TNFRSF1A associated death domain）的DD 區(qū)結(jié)合，組裝成與質(zhì)膜結(jié)合的復(fù)合物I。TRADD能夠幫助募集含有DD區(qū)的絲氨酸/蘇氨酸激酶RIP1和銜接蛋白TRAF2。復(fù)合物I 的組裝發(fā)生在脂質(zhì)筏中，并通過RIP1 介導(dǎo)的IκB 激酶復(fù)合物的募集使得NF-κB 被活化，而JNK 是通過TRAF2 介導(dǎo)的MAP3激酶的活化而被激活。隨后，TRADD和RIP1與復(fù)合物I 分離，并與胞質(zhì)復(fù)合物II 結(jié)合；復(fù)合物II 由FADD（fas associated death domain）N 端的DED 區(qū)（death effect or domain）與Caspase-8 前體蛋白結(jié)合而成。在有利于TNFR1 誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡的條件下，caspase 8 前體在募集到復(fù)合物II 后被激活，隨后導(dǎo)致下游caspase（例如caspase 3、6 和7）的激活，并最終造成細(xì)胞死亡。死亡受體Fas，Death domain 4 和Death domain 5與TNFR1稍有不同，與相應(yīng)的配體結(jié)合后，這些受體的DD區(qū)會直接與FADD相結(jié)合而無需TRADD的參與，而后與Caspase-8（或-10）前體蛋白結(jié)合，啟動Caspase 的級聯(lián)反應(yīng)導(dǎo)致細(xì)胞凋亡［3］。不同于大部分的TNFRSF 受體，EDA2R 的胞內(nèi)區(qū)沒有DD 區(qū)，不能直接與TRADD、FADD、RIP1（recep?tor-interacting protein 1）等接頭蛋白相結(jié)合；但與配體EDA-A2相集合后，EDA2R可以導(dǎo)致包含F(xiàn)ADD、caspase 8和caspase 10的二級復(fù)合物的形成，從而引發(fā)caspase 級聯(lián)反應(yīng)，造成細(xì)胞凋亡［3］。EDA2R 可能是死亡結(jié)構(gòu)域出現(xiàn)之前死亡受體進化的早期階段的蛋白分子，并且可能在胚胎發(fā)育和成年期的細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)中發(fā)揮作用。

5 EDA2R 參與了NF-κB 和JNK 信號通路的激活

NF-κB（nuclear factor kappa-light-chain-en?hancer of activated B cells）是調(diào)節(jié)基因表達的細(xì)胞核轉(zhuǎn)錄因子，幾乎存在于所有動物細(xì)胞類型中，并參與了應(yīng)激、細(xì)胞因子、自由基、重金屬、紫外線照射、細(xì)菌或病毒抗原等刺激對于細(xì)胞的反應(yīng)，在細(xì)胞生存、胚胎發(fā)育和免疫應(yīng)答調(diào)節(jié)中起到關(guān)鍵作用。NF-κB家族包括5 個成員：p50、p52、RelA（p65）、c-Rel、RelB，其中p50 和p52 分別由更大的前體分子p105（NF-κB1）和p100（NF-κB2）剪切而來。受體介導(dǎo)的NF-κB 激活主要有經(jīng)典和非經(jīng)典兩種信號途徑。在經(jīng)典信號途徑中，通常情況下，NF-κB 二聚體（主要是p50/RelA）和抑制蛋白IKK復(fù)合物（主要包括兩個催化亞基IKKα 和IKKβ，以及調(diào)節(jié)亞基IKKγ 即NEMO）結(jié)合并以無活性狀態(tài)存在于細(xì)胞質(zhì)中。當(dāng)刺激因素激活I(lǐng)KKβ后，使之將IKKα磷酸化，而IKKα被磷酸化后繼續(xù)被泛素化，進而被降解，從而將NF-κB 二聚體釋放成有活性的游離狀態(tài)，進入細(xì)胞核，進而與靶基因的啟動子上的特異序列相結(jié)合，驅(qū)動基因的表達。對于EDAR，被EDA-A1 激活后，其胞內(nèi)的DD 區(qū)與接頭蛋白EDARADD（edar-associat?ed death domain）相結(jié)合；后者將TAK1（TGF b-acti?vatedkinase1）、TAB2（TAK1-bindingprotein2）及TRAFs（TNF-receptor-associated factors，包 括TRAF1-3，5，6）等聚集成一個復(fù)合物，并將TAK1 激活，進而激活I(lǐng)KK，釋放NF-κB 二聚體［13］。雖然EDA2R 沒有DD 區(qū)，但Sinha 等［2］研究發(fā)現(xiàn)其胞內(nèi)區(qū)域含有兩個能分別與TRAF3 和TRAF6 相結(jié)合的序列，使得EDA2R能直接與它們結(jié)合，從而激活下游的NF-κB通路。通過進一步的末端刪除和定點突變分析，他們還證實EDA2R-L 位于胞內(nèi)部分的Glu-253 和Glu-277 對于募集TRAF3 和6、以及激活下游的NF-KB和JNK信號通路都是至關(guān)重要的。類似于其它TNFRSF 受體，EDA2R 激活NF-κB 轉(zhuǎn)錄因子同樣需要依賴IKK 復(fù)合物（IKKα，IKKβ，IKKγ）。EDA2R介導(dǎo)的NF-κB信號通路受去泛素化酶CYLD的反向調(diào)節(jié)，即CYLD可以使得TRAF家族成員失去泛素化的活性，從而使它們不能激活NF-κB路徑［14］。

EDA2R 也可以激活非經(jīng)典NF-κB 信號通路［4］。非經(jīng)典NF-κB 信號通路不需要IKKβ和IKKγ的參與，但有賴于IKKα和NIK（NF-κB inducing kinase）的活性。NF-κB2（p100）和RelB 在靜息細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中形成無活性的二聚體。TRAF3 和TRAF2 與cIAP1/2和NIK組成一個復(fù)合物，將NIK泛素化并降解，從而抑制NF-κB2 的活化。與配體結(jié)合后，受體將TRAF3-TRAF2-cIAP1/2 募集到膜筏上，從而使NIK 在胞內(nèi)積累，激活I(lǐng)KKα，使后者將p100 降解成小分子p52，從而形成有活性的p52/RelB二聚體，進入細(xì)胞核，驅(qū)動基因表達。研究表明，用EDA-A2 刺激表達EDA2R 受體的HEK293 細(xì)胞，可顯著增強NIK 的活性，促進p100 降解成p52，并使p52 和RelB往細(xì)胞核轉(zhuǎn)移［4］，說明EDA-A2/EDA2R 信號可激活非經(jīng)典NF-κB 信號通路。EDA2R 促使p100 降解的過程依賴于該受體與TRAF3和TRAF6的結(jié)合，也需要IKKα和NIK的活性。

除了激活NF-κB 轉(zhuǎn)錄因子外，TNF 受體家族的一些成員也能激活JNK 信號通路。雖然EDAR 對JNK途徑只有微弱的激活，但EDA2R卻可以強烈激活該途徑［1-2］。JNK（c-Jun N terminal kinase）是有絲分裂原激活的蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase，MAPK）家族成員之一。MAPK 信號通路是真核生物信號傳遞網(wǎng)絡(luò)中的重要途徑之一，在基因表達調(diào)控和細(xì)胞質(zhì)功能活動中發(fā)揮關(guān)鍵作用。經(jīng)典的MAPK 信號通路包括三級信號傳遞過程：MAPK 激酶的激酶（MEKK 或MKKK）、MAPK 激酶（MEK 或MKK）和MAPK這三種激酶依次激活，將信號從細(xì)胞表面?zhèn)鬟f到細(xì)胞核內(nèi)部，共同調(diào)節(jié)著細(xì)胞的生長、分化、應(yīng)激等多種重要的生理/病理效應(yīng)，主要參與對潛在有害的非生物應(yīng)激刺激（高滲透壓、氧化應(yīng)激、DNA 損傷、低滲透壓）的反應(yīng)。MAPK 通路有4 種主要的分支路線：ERK、JNK、p38/MAPK 和ERK5。其中，ERK主要調(diào)節(jié)細(xì)胞的生長和分化；JNK和p38功能相似，主要與炎癥、凋亡、生長有關(guān)。分支路線所使用3 種激酶一般是不同的，但有些MKKK 也可以激活其中不同的分支。在293F細(xì)胞中過表達EDA2R受體，可以直接激活JNK 信號通路，加上配體EDA-A2 后，JNK 通路的激活更加明顯［1-2］。與激活NF-κB通路相同，EDA2R 激活JNK也賴于其胞內(nèi)部分的Glu-253和Glu-277位點與TRAF3和TRAF6的結(jié)合，可能是TRAF3 和TRAF6 與MKKK 中的ASK1形成復(fù)合物，從而激活A(yù)SK1，并進一步激活下游的JNK 通路，使轉(zhuǎn)錄因子c-Jun 磷酸化，c-Jun 結(jié)合到目的基因的啟動子上后啟動轉(zhuǎn)錄。

6 EDA2R 參與了機體的發(fā)育和多種疾病的調(diào)控

6.1 EDA2R與外胚層發(fā)育

少汗性外胚層發(fā)育不良（hypohidrotic ectoder?mal dysplasias，HED）是由于在胚胎發(fā)育的過程中外胚層衍生物頭發(fā)、汗腺、牙齒等發(fā)育不良造成的，主要臨床特征為頭發(fā)稀疏，牙齒異?；蛉笔В约盁o法出汗。這是一類相對常見的遺傳性疾病，多以X染色體連鎖隱性方式在人和鼠中遺傳，但也存在常染色體顯性或隱性遺傳［2］。EDA 基因編碼的產(chǎn)物之一EDA-A1 配體與EDAR 受體相結(jié)合，使得胞內(nèi)的DD結(jié)構(gòu)域能夠募集接頭蛋白EDARADD，而后者又通過TRAF2，3，6 等與IKK 形成一個復(fù)合物并將IKK磷酸化，從而激活NF-κB信號通路。EDAR介導(dǎo)的這條通路對于外胚層的發(fā)育有著非常重要的作用，因為EDA、EDARADD、TRAF6、或IKK這幾個基因中的任何一個突變或刪除，都會導(dǎo)致HED 的發(fā)生［2，7，15］。由于與EDAR 具有高度相似性，人們曾推測EDA2R基因可能有相似的功能，因而EDA2R 受體又被稱為X-連鎖性外胚層發(fā)育不良受體（X-linked ecto?dermaldysplasia receptor，XEDAR）；但后來的研究證實這兩個基因在功能上相差很大。盡管小鼠胚胎發(fā)育的E17 d 及出生后P1 d 時，EDA2R 受體在毛囊中有表達［1］，但人類HED的發(fā)生與EDA2R基因的突變卻并沒有關(guān)聯(lián)，而且在實驗小鼠中敲除該基因，也沒有引起小鼠表型的明顯變化［7］；這說明在外胚層延伸器官的發(fā)育過程中，EDA2R 介導(dǎo)的NF-κB 途徑不像EDAR的那么重要，甚至可能是可有可無的。

6.2 EDA2R參與了骨骼肌的降解

鑒于EDAR 和EDA2R 受體在骨骼肌和皮膚中均有表達，Newton等［7］構(gòu)建了轉(zhuǎn)基因小鼠，使這兩個受體的配體EDA-A1和EDA-A2分別在這些組織中進行分泌性表達。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在皮膚中表達EDA-A1的小鼠表現(xiàn)出表皮油膩和蓬頭垢面，皮脂腺突出，皮脂細(xì)胞密度和數(shù)量增加，毛囊密度也增加；在骨骼肌中表達EDA-A1 的小鼠毛囊密度增加。這些結(jié)果進一步說明EDA-A1/EDAR信號通路在外胚層衍生器官的發(fā)育過程中起重要作用。與之形成對比的是，無論是在骨骼肌還是在皮膚中表達EDA-A2，構(gòu)建的轉(zhuǎn)基因小鼠在外形外觀、以及皮脂腺等方面與野生型小鼠并無明顯區(qū)別［7］。但一些EDA-A2 轉(zhuǎn)基因的F0 代小鼠變得瘦小瀛弱，出生后一個月內(nèi)就死去，而且這些表型的嚴(yán)重程度與肌肉和皮膚中EDA-A2的轉(zhuǎn)錄水平成正相關(guān)。組織學(xué)分析發(fā)現(xiàn)，在骨骼肌中表達EDA-A2可導(dǎo)致小鼠的承重和非承重肌肉都出現(xiàn)降解。這種降解是多灶性的，受損于隨機的肌肉束，并經(jīng)常伴隨著衛(wèi)星細(xì)胞增殖形式的肌再生。但在敲除EDA2R基因后，表達EDA-A2的轉(zhuǎn)基因小鼠所表現(xiàn)出的肌肉降解有所緩解。這些結(jié)果說明，EDA2R 介導(dǎo)的信號傳遞可能在保持肌肉的動態(tài)平衡中起到一定的作用。

6.3 EDA2R可以抑制腫瘤的發(fā)展

研究表明，作為抑癌因子p53 的直接靶基因，EDA2R 同樣具有抑癌的功能，其表達與乳腺癌、扁桃體鱗狀細(xì)胞癌、卵巢癌、結(jié)直腸癌、肺癌、胃癌、骨肉瘤、胸主動脈瘤等的發(fā)生密切相關(guān)［16-24］。通過EDA2R途徑，可激活Caspase級聯(lián)反應(yīng)，從而誘導(dǎo)癌細(xì)胞發(fā)生凋亡［19-21］；甚至使在細(xì)胞粘附中起核心作用的FAK 蛋白降低，導(dǎo)致癌細(xì)胞失巢凋亡［11］。EDA2R 在癌細(xì)胞中的表達往往受到抑制［23-24］，其中的一個重要原因是其啟動子區(qū)發(fā)生甲基化，使該基因不能轉(zhuǎn)錄［11,19］。用5-aza-2′ -deoxycytidine 抑制DNA 甲基化，可恢復(fù)EDA2R 的表達，并使乳腺癌細(xì)胞對EDA-A2誘導(dǎo)的凋亡敏感［19］。同樣，在癌細(xì)胞中過表達EDA2R 或EDA-A2，也可誘導(dǎo)癌細(xì)胞凋亡，使細(xì)胞處于分裂周期的G0/G1 期［11,19-21］。EDA-A2 還可以促使骨肉瘤細(xì)胞分化，從而失去增生和轉(zhuǎn)移的能力［20］。放射治療也可提高EDA2R在扁桃體鱗狀細(xì)胞癌中的表達，從而促進其凋亡［17］。因而，EDA2R具有抑制癌癥的功能，有可能作為治療癌癥的一個新的靶標(biāo)。

6.4 EDA2R與雄激素性脫發(fā)緊密相關(guān)

雖然EDA2R 受體對于毛發(fā)的發(fā)育沒有明顯的影響［7］，但越來越多的證據(jù)顯示該受體在脫發(fā)的過程中起重要作用。雄激素性脫發(fā)（androgenetic alope?cia，AGA）是男女中最常見的進行性脫發(fā)，分別被稱為男性的男性型禿發(fā)和女性的女性型脫發(fā)。AGA是一種多基因疾病，其嚴(yán)重程度、發(fā)病年齡和脫發(fā)的頭皮位置各不相同［25］。通過對X 染色體的單核苷多態(tài)性（single nucleotide polymorphism，SNP）進行分析，人們發(fā)現(xiàn)AGA 與該染色體上EDA2R 基因的多態(tài)性緊密相關(guān)聯(lián)［26-28］。然而這種關(guān)聯(lián)似乎只發(fā)生在男性中，而對于女性型脫發(fā)卻沒有這種關(guān)聯(lián)［29-30］。

AGA 與EDA2R 基因SNP 的關(guān)聯(lián)性或許是由于EDA2R介導(dǎo)的毛囊細(xì)胞凋亡引起的。毛囊包含外根鞘（ORS）、內(nèi)根鞘、基質(zhì)等上皮細(xì)胞，源自上皮的毛干，以及包括真皮乳頭（DP）和間充質(zhì)的真皮鞘細(xì)胞在內(nèi)的間充質(zhì)細(xì)胞。DP 是一組特殊的成纖維細(xì)胞，可調(diào)節(jié)包括ORS在內(nèi)的毛囊內(nèi)多種細(xì)胞的活性，在毛發(fā)的生長和循環(huán)過程中起重要的作用［31］。出生后的毛囊經(jīng)歷生長期、退化期、靜止期的循環(huán)。生長期向退化期過度的一個特征就是包括ORS細(xì)胞在內(nèi)的卵泡角質(zhì)形成細(xì)胞發(fā)生凋亡，過早地從生長期轉(zhuǎn)入退化期就會導(dǎo)致毛發(fā)生長抑制和小型化。通過免疫熒光染色，Kwack 等發(fā)現(xiàn)在非禿頭男性的頭皮中，EDA2R 在ORS 細(xì)胞中有高表達，而在DP 中則有微弱的表達。用EDA-A2 處理從中分離出來的ORS 和DP 細(xì)胞，可激活Caspase-3，導(dǎo)致細(xì)胞凋亡［31］。他們還發(fā)現(xiàn)，與生長期的其他階段相比，EDA2R 在小鼠的毛囊生長期后期中表達最高。通過皮下注射EDA-A2，可顯著促進毛囊退化期的到來，抑制毛發(fā)的生長。這些結(jié)果暗示，EDA-A2/EDA2R 信號途徑可能抑制頭發(fā)生長，其抑制劑可望成為治療和預(yù)防脫發(fā)的藥物。

6.5 EDA2R可能參與了干燥綜合征進展的調(diào)控

干燥綜合征（sj?gren′s syndrome）是一種緩慢進行性自身免疫疾病，主要表現(xiàn)為口、眼干燥，并可累及腎、肺、神經(jīng)系統(tǒng)、消化系統(tǒng)等多個系統(tǒng)，引起全身器官受累。原發(fā)性干燥征的一個重要致病機制是外分泌腺（主要是淚腺和唾液腺）被淋巴細(xì)胞浸潤，導(dǎo)致腺體細(xì)胞凋亡。Sisto 等［32］通過研究發(fā)現(xiàn)，EDA2R受體及其配體EDA-A2在原發(fā)性干燥征病人的唾液腺上皮細(xì)胞中呈現(xiàn)高表達，而且用siRNA 抑制EDA2R 的表達，可降低這些上皮細(xì)胞的凋亡，說明EDA-A2/EDA2R 系統(tǒng)介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡在原發(fā)性干燥綜合征的發(fā)病過程中起重要作用。

6.6 EDA2R參與了糖尿病腎病的進展

通過對高血糖和正常小鼠腎臟組織的轉(zhuǎn)錄組進行分析，人們發(fā)現(xiàn)EDA2R受體在高血糖小鼠的腎臟組織中呈現(xiàn)高水平表達［33-34］。通過免疫熒光染色，本研究進一步發(fā)現(xiàn)，EDA2R受體在糖尿病病人和高血糖的實驗小鼠足細(xì)胞及腎小管上皮細(xì)胞中表達水平顯著提高，并且可能介導(dǎo)了高血糖誘導(dǎo)的足細(xì)胞凋亡［35］?；赗NA-seq技術(shù)的研究表明，在糖尿病病人的腎臟中，EDA2R基因在mRNA水平的表達呈現(xiàn)升高[36]。另外，糖尿病人血清中的EDA2R受體的含量與末期腎臟疾?。╡nd-stage renal disease，ESRD）的進程呈正相關(guān)，暗示EDA2R介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)可能參與了糖尿病腎病的發(fā)生和發(fā)展進程［37］，被認(rèn)為是的潛力糖尿病腎?。―KD）治療靶標(biāo)和ESRD風(fēng)險預(yù)測性生物標(biāo)記物[38]。

6.7 其它

通過比較分析慢性阻塞性肺疾?。╟hronic ob?structive pulmonary disease，COPD）病人和非慢性阻塞性肺疾病病人的肺部組織轉(zhuǎn)錄組水平變化，De Vries 等發(fā)現(xiàn)EDA2R 基因的高表達可能是肺衰老的一個重要因素［39］。研究者還發(fā)現(xiàn)輻射可以大大提高EDA2R在小鼠或獼猴的腸道黏膜中的表達，暗示該基因可能參與了輻射對腸道造成的損傷［40-41］。另外，EDA2R 基因的非同義突變可能通過調(diào)節(jié)神經(jīng)系統(tǒng)參與無先兆偏頭痛（migraine without aura，MWO）的發(fā)作［42］。但是，EDA2R 的這些潛在功能主要是基于不同樣品間基因組、轉(zhuǎn)錄組水平的比較，通過信息分析推測出來的結(jié)果，因而需要進一步的實驗驗證。

7 結(jié)語

作為TNF受體家族的一員，EDA2R在分子結(jié)構(gòu)及生物學(xué)功能上都與其它成員相似。雖然缺乏DD結(jié)構(gòu)域，EDA2R 卻可以直接與TRAFs 相結(jié)合，從而激活NF-κB 和JNK 途徑。EDA2R 在介導(dǎo)腫瘤、雄激素性脫發(fā)、干燥綜合征等的發(fā)生發(fā)展起著重要的作用，在糖尿病腎病、骨骼肌代謝平衡、肺衰老、偏頭痛、輻射引起的組織損傷等方面也可能起到一定的作用。雖然人們對于EDA2R 介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡研究得相對較多，但對其在免疫調(diào)節(jié)及炎癥反應(yīng)中的作用機制卻研究得較少。例如，既然EDA2R 受體也能激活與免疫調(diào)節(jié)和炎癥反應(yīng)密切相關(guān)的NF-κB、JNK 途徑，完全可以推測，外分泌腺上皮細(xì)胞中高表達EDA2R可能參與調(diào)節(jié)了淋巴細(xì)胞的浸潤，從而促進干燥綜合征的發(fā)生和發(fā)展，但這需要通過實驗來驗證。另外，EDA2R 在成年人和動物的多個器官和組織中廣泛表達，暗示可能起著某些未知的作用，值得更加深入的研究。本研究有理由相信，隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)、分子生物學(xué)等科學(xué)和技術(shù)的不斷進步，人們會對EDA2R基因有更進一步的了解，并將其作為一些疾病的早期診斷和治療的新靶點。