巴泰病毒研究進展

李麗霞，員曉慶，唐甜，梁曉彤，陳盛楠，張浩吉，黃良宗，司興奎，劉昊

（佛山科學技術(shù)學院，廣東 佛山 528200）

巴泰病毒（Batai virus,BATV）屬于布尼亞病毒科（Bnuyaviridae）布尼亞病毒屬（Bunyavirus）布尼亞姆韋拉（Bunyamwera）血清組病毒成員[1]。該病毒在自然界中主要以“蚊蟲-脊椎動物-蚊蟲”的方式循環(huán)，涉及的地區(qū)和宿主十分廣泛，例如歐洲、亞洲以及非洲中部地區(qū)的很多國家，都先后分離到該病毒[2]。BATV最早是從馬來西亞的吉隆坡地區(qū)捕獲的庫蚊體中分離到，隨后在非洲流行造成數(shù)萬人感染，部分感染者出現(xiàn)死亡現(xiàn)象。經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)該次流行的病原體是由BATV發(fā)生基因重配（genetic reassortment）形成的新毒株Ngari病毒而引起，給當?shù)氐墓残l(wèi)生安全帶來嚴重威脅[3]。我國科學家于1998年從云南省思茅地區(qū)按蚊體中首次分離到BATV（YN92-4）株[4]。2012年從內(nèi)蒙古牛血清中分離到1株牛源BATV（NM/12）株[5]。2014年從浙江某鴨場送檢的成年番鴨體中分離得到1株鴨源BATV（ZJ2014）株，以上研究表明了BATV在中國不同的宿主動物中廣泛存在[6]，并且國外科學家也在多個地區(qū)的牛、豬和猴等哺乳動物體中檢測到BATV陽性抗體，甚至在嚙齒動物體中也分離到該病毒[7-12]。2016年，在德國死亡的海豹體內(nèi)分離到1株BATV，感染海豹表現(xiàn)出嚴重的腦膜炎等臨床癥狀，海豹對BATV特別敏感，加上高齡、并發(fā)癥和免疫缺陷等問題導致病情尤為嚴重。因此，推測免疫功能低下的人類或其他哺乳動物會增加患神經(jīng)源性BATV感染的風險[13]。

1 病原學特性

1.1 基因特征

布尼亞病毒科是最大的RNA病毒家族成員之一，而布尼亞病毒屬是布尼亞病毒科中最大的屬，至少有260種病毒。目前該病毒科在我國發(fā)現(xiàn)的病毒主要有克里米亞-剛果出血熱病毒（CCHFV）、Tahyna病毒和BATV等[14]。BATV病毒粒子呈現(xiàn)圓形，電鏡下觀察有包膜，與同病毒組的布尼安姆韋拉病毒大小相似，直徑約為80 nm左右[15,16]。BATV為單股負鏈RNA病毒，由?。⊿）、中（M）和大（L）3個片段組成，在我國首次分離的YN92-4毒株S片段長947 nt，5'非編碼區(qū)長68 nt，編碼區(qū)含兩個開放閱讀框（第69～770 nt和第88～393nt），分別編碼含核衣殼蛋白N和非結(jié)構(gòu)蛋白NS，3'非編碼區(qū)長177 nt。M片段長度為4 371 nt，3'非編碼區(qū)為35 nt，5'非編碼區(qū)長31 nt，可編碼前體蛋白。L片段長度為6 860 nt，5'非編碼區(qū)長含35 nt，開放閱讀為第36～6 752 nt，共6 717 nt，編碼含2 239個氨基酸，3'非編碼區(qū)長108 nt[1]。

1.2 基因重配

據(jù)報道，BATV MM2222株、ON-1/E/94株、ON-7/B/01株與Bunyamwera和Ngari的S和L片段同源性較低，而Ngari與Bunyamwera同源性較高；BATV M片段與Ngari同源性較高（88.0%～95.0%），顯著高于Bunyamwera病毒（64.0%～64.9%）。因此推測BATV可能與Bunyamwera病毒M片段發(fā)生基因重配形成致病力更強的Ngari，該病毒曾在東非多個地區(qū)暴發(fā)和流行，引起人群嚴重發(fā)熱性疾病甚至死亡[17-19]。科學家通過分子克隆互補DNA探針斑點雜交技術(shù)證實，布尼亞病毒屬中的病毒M片段能自由分離，可能會與同種屬的病毒發(fā)生重配[20]，因此，BATV可能成為潛在的基因庫，隨時可能產(chǎn)生新基因重配病毒。所以關(guān)注BATV流行情況及基因重配現(xiàn)象，有助于及時應對公共衛(wèi)生方面的潛在風險。

2 臨床癥狀

BATV可感染脊椎動物、嚙齒動物和鳥類等，宿主范圍十分廣泛，并在多種哺乳動物中檢查出陽性抗體。目前已在發(fā)熱伴有神經(jīng)癥狀的牛的血清中檢測到病毒核酸和抗體，而且反芻動物感染嚴重的可能會引起流產(chǎn)、死胎和先天性異常等癥狀，綿羊和山羊感染會引起輕微疾病[21-23]。番鴨感染后可引起采食量和產(chǎn)蛋量下降、排稀便甚至死亡等癥狀，病理解剖發(fā)現(xiàn)其卵巢有不同程度地出血、充血且子宮內(nèi)充滿干酪樣分泌物[24]。海豹感染會出現(xiàn)嚴重的神經(jīng)癥狀，其腦部的病理分析顯示有淋巴組織細胞性腦膜腦脊髓炎[13]；人感染后多以流感樣癥狀為主，包括發(fā)熱、肌肉酸痛和厭食等癥，易與其他發(fā)熱性疾病混淆，重癥患者可發(fā)展成無菌性腦膜炎[25,26]。通過小鼠攻毒實驗證明BATV（NM/12）可引起乳鼠死亡，3周齡小鼠出現(xiàn)神經(jīng)癥狀，如行走困難、厭食和被毛凌亂等[5]。

3 巴泰病毒檢測方法

3.1 分子生物學檢測方法

目前已確定BATV可感染人、家畜和鳥類等并引起明顯的臨床癥狀甚至死亡，因此，盡早確定病毒的感染對疫病的治療和防控至關(guān)重要。隨著分子生物學技術(shù)的快速發(fā)展，科學家已經(jīng)研制出BATV的快速準確臨床檢測方法。如劉昊等[27]研發(fā)的環(huán)介導等溫擴增（RT-LAMP）檢測方法僅需要水浴鍋就可在60 min內(nèi)完成病原檢測。該RT-LAMP檢測方法是一種靈敏度好、特異性強且成本低的檢測方法，既可用于現(xiàn)場檢測，也可用于實驗室診斷[27]。萬春和等[28]研制出用于鴨BATV的SYBR Green I熒光定量PCR檢測方法，該方法特異性強靈敏度高，可用于鴨群中BATV的臨床診斷。傅光華等[29]基于病毒的M基因建立了一種BATV一步RT-PCR法檢測方法。曹玉璽等[30]也建立了一步Taq-Man Real-time PCR檢測方法，具有較高的特異性、穩(wěn)定性和敏感性。已建立的分子檢測方法均具有操作簡便、準確、快速的優(yōu)勢，能滿足今后該病的早期監(jiān)測及流行病學調(diào)查需求。

3.2 血清學檢測

血清學檢測方法主要是針對BATV的特異性抗體來進行檢測，目前血清學檢測方法主要有Hofmann等[31]建立的間接免疫熒光法和血清中和試驗相結(jié)合的檢測方法，該方法可有效地監(jiān)測牛群中BATV的抗體水平。章域震等[32]也建立了BATV免疫熒光和空斑減少中和試驗。劉榮昌等[33]通過純化病毒鴨BATV ZJ-01作為包被抗原，建立了可用于鴨BATV抗體檢測的間接ELISA方法，該方法僅與BATV陽性血清發(fā)生特異性反應，而對禽流感病毒等8種常見鴨病毒陽性血清無交叉反應，特異性強、敏感性高。劉昊等[34]將牛BATV NM/12株濃縮純化病毒作為包被抗原，建立了用于診斷牛BATV抗體水平的間接ELISA方法。此外，通過純化的NM/12株免疫小鼠制備和篩選出的特異性強、效價高的BATV單克隆抗體用于病毒特異性檢測。單克隆抗體的制備將為膠體金試紙條等診斷方法的研發(fā)以及病毒感染和致病機制的研究奠定基礎(chǔ)[35]。

4 疾病預防

目前還沒有關(guān)于BATV的特效疫苗和治療方法，但對該病原應采取以下方法進行防控：首先，BATV主要傳播媒介是不同種類的庫蚊、按蚊和伊蚊[22]，因此需要采用化學和物理的方法控制家養(yǎng)動物（包括羊、牛和豬等）被蚊蟲的叮咬，從而降低人和動物感染BATV的機會；其次，要做好自身防護，在野外區(qū)域時應該穿緊身服、戴防護帽，減少在樹叢茂密區(qū)域的活動；另外，應加強病原檢測，采用多種檢測方法加大對不同地區(qū)易感動物的血清學和分子生物學檢測，及時了解BATV分子生物學特征及病毒毒株之間的變異情況；最后，還要對其他布尼亞病毒進行檢測，防止新的重組病原的出現(xiàn)。

5 展望

由于BATV可感染多種動物且臨床癥狀易與其他疾病混淆，如不及時診斷和治療將會出現(xiàn)神經(jīng)系統(tǒng)疾病甚至死亡。目前關(guān)于BATV的研究較少，其病毒感染和致病機制尚不明確，傳播途徑也未完全了解，也沒有有效的疫苗和治療方法能對該病進行防控。因此有必要加強對BATV的研究，開展多地區(qū)多物種的病原監(jiān)測，同時加強對BATV的分離、基因特性以及毒株的抗原性研究，進一步了解其致病機制，研發(fā)安全有效的疫苗，為BATV的科學防控提供科學支撐。