病原微生物檢測技術(shù)的應(yīng)用現(xiàn)狀及趨勢展望

鄭曉華 董銳 白晶 仲偉明 趙宇

(黑龍江省疾病預(yù)防控制中心,黑龍江 哈爾濱,150030)

一、對病原微生物進(jìn)行檢測的重要性

病原微生物對人體和動物具有致病性，會引發(fā)過敏、感染等問題，是造成傳染病肆虐的主要原因，也是導(dǎo)致食品安全問題的因素之一。病原微生物在生物體生長繁殖的過程中會對機(jī)體造成一定不利影響，同時由于其具有一定的抗藥性，還會干擾臨床的診斷，影響治療進(jìn)程的安排。因此，需要對病原微生物進(jìn)行檢測，運用一定的技術(shù)手段和檢測方法，準(zhǔn)確識別病原微生物的類型和數(shù)量，為臨床疾病的診治提供科學(xué)依據(jù)，及時制止病原微生物的擴(kuò)散。針對檢驗出的具有傳染性的病原微生物類型，通過采取及時的隔離和治療措施，有助于維護(hù)公共安全和社會穩(wěn)定，對維護(hù)社會和國家的穩(wěn)定具有現(xiàn)實意義。

二、病原微生物檢測技術(shù)的應(yīng)用

（一）傳統(tǒng)檢測技術(shù)：生物化學(xué)檢驗技術(shù)是較為傳統(tǒng)的病原微生物檢測方法，其通過對微生物特異性酶的識別和檢測，從而對病原微生物進(jìn)行檢驗?？紤]各類微生物的構(gòu)造和特點存在差異，生物化學(xué)檢驗技術(shù)演化出通過檢測各底物的代謝產(chǎn)物來判別底物屬性的方法，例如沙門氏菌的生化檢驗就應(yīng)用到這一原理，通過檢測底物MUCAP(4-甲基傘形酮辛酯)產(chǎn)生的釋放物4MU 藍(lán)色熒光程度，判斷是否含有沙門氏菌及其含量。生物化學(xué)檢驗技術(shù)表現(xiàn)出操作簡單、檢驗迅速的特點，是傳統(tǒng)的病原微生物檢測方法。但由于針對不同病原微生物的底物的選擇和研究進(jìn)度尚不統(tǒng)一，因此該方法的應(yīng)用對某些病原微生物的檢測十分有效，甚至可以達(dá)到90%及以上的檢測靈敏度和特異度，但其他類型的病原微生物檢驗效果有待提升。

（二）血清學(xué)檢測技術(shù)：血清學(xué)檢測技術(shù)的主要應(yīng)用機(jī)理為通過檢測病原微生物中抗原或抗體，然后將檢測出來的抗原或抗體同現(xiàn)有資源庫進(jìn)行比對，判斷病原微生物的類型。該檢測方法操作步驟簡單，且可以實現(xiàn)抗原和抗體的同步檢測。目前，血清學(xué)檢測方法主要包含血清凝集技術(shù)、協(xié)同凝集試驗、熒光抗體檢測技術(shù)和酶聯(lián)免疫測試技術(shù)等，根據(jù)病原微生物的可能類型不同，具體選擇的方法也不一樣。例如，酶聯(lián)免疫測試技術(shù)主要用于早期的HBV（乙型肝炎病毒）篩查，該檢測技術(shù)能將抗原與抗體的免疫反應(yīng)同酶的催化作用二者相結(jié)合，產(chǎn)生一個酶標(biāo)記復(fù)合物，這種酶標(biāo)記復(fù)合物能讓相應(yīng)底物分解產(chǎn)生有色產(chǎn)物，通過比對比色計，即可判斷出病毒的含量，診斷患者的病癥。

（三）免疫學(xué)檢測技術(shù)：免疫學(xué)檢測技術(shù)主要指的是免疫磁珠分離技術(shù)，該技術(shù)在微生物檢測中的應(yīng)用較為廣泛。目前臨床病原微生物檢測要求將致病菌與非致病菌相分離，免疫磁珠分離技術(shù)依靠磁珠同單抗體或多抗體的病原體進(jìn)行反應(yīng)實驗，實現(xiàn)致病菌與非致病菌的磁力分離效果，進(jìn)而進(jìn)行病原微生物檢測。免疫學(xué)檢測技術(shù)在臨床的應(yīng)用范圍主要為分離軍團(tuán)菌、白色念珠菌、李斯特菌、大腸埃希菌等菌種，以白色念珠菌為例，其整合了免疫反應(yīng)的高度特異性和磁性分離的快速簡單的優(yōu)點，使得白色念珠菌能夠在顯微鏡下被明顯發(fā)現(xiàn)，特別是隨著免疫磁珠分離技術(shù)的不斷進(jìn)步和成熟，檢測時間變得越來越短，分離率越來越高。

（四）基因檢測技術(shù)：基因檢測技術(shù)顧名思義，是根據(jù)病原微生物的核酸序列的特異性發(fā)展而來的，通過核酸雜交技術(shù)、基因芯片技術(shù)、聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)等，對病原微生物所特有的基因片段進(jìn)行檢測，從而判斷病原微生物類型?；驒z測技術(shù)能在較短時間內(nèi)實現(xiàn)病原微生物的檢驗，但同時也存在一些問題，諸如特異性和敏感性有待提升，技術(shù)運行成本過高、臨床應(yīng)用不廣泛等，該技術(shù)尚且處于不斷的改進(jìn)和完善過程中。以基因芯片技術(shù)為例，該技術(shù)應(yīng)用的基礎(chǔ)是基因芯片，基因芯片中包含有數(shù)以百萬計的基因探針序列，這些有規(guī)律的基因探針中的某一部分會與被檢測樣本的分子進(jìn)行核酸雜交反應(yīng)，從而完成基因檢測工作。

三、病原微生物檢測技術(shù)的應(yīng)用趨勢分析

首先，病原微生物檢測技術(shù)會向微觀領(lǐng)域進(jìn)行深度鉆研和完善。這既是由其檢測對象的微觀屬性所決定的，也是受技術(shù)發(fā)展精細(xì)化影響的結(jié)果。從應(yīng)用角度來說，目前基因檢測技術(shù)的應(yīng)用范圍尚且受限。隨著高通量檢測技術(shù)的快速發(fā)展，其在病原微生物檢測方面的診斷分析應(yīng)用會得到日益推廣。其次，多種檢測技術(shù)交叉應(yīng)用成為新的病原微生物檢測手段。由于各檢測技術(shù)具有各自的優(yōu)勢和不足，導(dǎo)致其檢測范圍受限。在一定的靈敏度和特異度要求下，聯(lián)合運用兩種及兩種以上的病原微生物檢測技術(shù)往往可以收獲意想不到的檢測效果。這不僅擴(kuò)充了可檢測的病原微生物種類，也提升了檢測結(jié)果的精確度。再次，病原微生物檢測技術(shù)同信息化技術(shù)的融合趨勢凸顯。信息技術(shù)的參與，特別是數(shù)據(jù)庫和共享平臺的構(gòu)建，能快速實現(xiàn)病原微生物檢測全過程的自動化進(jìn)程。通過病原微生物檢測技術(shù)信息空間的開發(fā)，能加速檢測的效率，促進(jìn)檢測技術(shù)的同步提升，并衍生出更多新型的檢測方法。

四、結(jié)語

綜上所述，病原微生物檢測技術(shù)得到了一定的發(fā)展和進(jìn)步，在臨床診治和安全檢測中發(fā)揮了重要作用。但同時，我們也看到該技術(shù)還存在一些不足，諸如靈敏度參差不齊、技術(shù)操作流程繁瑣等一系列問題，亟待完善和解決。病原微生物檢測技術(shù)表現(xiàn)出巨大的發(fā)展空間和應(yīng)用空間，在未來，隨著該項技術(shù)的不斷進(jìn)步，會應(yīng)用到更多領(lǐng)域和行業(yè)中，創(chuàng)造更多的社會價值。