• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    Box-Behnken設(shè)計(jì)響應(yīng)面法優(yōu)化土元凝膠貼膏基質(zhì)研究△

    2021-12-01 01:57:22鄧玉瑩邵炳豪位雪王慧慧王春梅
    中國現(xiàn)代中藥 2021年10期
    關(guān)鍵詞:貼膏剝離強(qiáng)度藥量

    鄧玉瑩,邵炳豪,位雪,王慧慧,王春梅

    北京中醫(yī)藥大學(xué) 生命科學(xué)學(xué)院,北京 102488

    土鱉蟲又名土元,為鱉蠊科昆蟲地鱉Eupolyphaga sinensisWalker 或冀地鱉Steleophaga plancyi(Boleny)的雌蟲干燥體,有小毒,可用于跌打損傷、筋傷骨折、血瘀經(jīng)閉等[1]?,F(xiàn)代研究表明,土元具有溶解血栓、拮抗凝血、促進(jìn)骨折愈合等多種藥理活性[2-5]。本課題組前期研究也發(fā)現(xiàn),土元對成骨細(xì)胞模型MC3T3-E1 細(xì)胞具有顯著的促增殖作用,且可促進(jìn)骨折大鼠的恢復(fù)[6]。本實(shí)驗(yàn)使用土元提取物,優(yōu)化了土元凝膠貼膏基質(zhì),為其開發(fā)成為一種治療外傷骨折等疾病的外用制劑奠定了基礎(chǔ)。凝膠貼膏指原料藥物與適宜的親水性基質(zhì)混勻后涂布于背襯材料上,制成的貼膏劑,具有使用方便、載藥量大、藥物透皮吸收效率高等顯著優(yōu)點(diǎn),且具有局部給藥、降低藥峰濃度、可隨時(shí)停藥等特點(diǎn),更適合毒性藥物的使用[7]。凝膠貼膏基質(zhì)主要由骨架材料、交聯(lián)劑、交聯(lián)調(diào)節(jié)劑、保濕劑、填充劑等組成,骨架材料可交聯(lián)形成凝膠網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu),提供一定的膠強(qiáng)度和黏性;交聯(lián)調(diào)節(jié)劑可避免交聯(lián)過快導(dǎo)致的涂布困難;保濕劑在保留水分的同時(shí),可增加凝膠貼膏柔韌度;填充劑既可吸附藥物,也可提供基質(zhì)強(qiáng)度。本實(shí)驗(yàn)以初黏力、剝離強(qiáng)度、持黏力為指標(biāo),單因素試驗(yàn)結(jié)合Box-Behnken 設(shè)計(jì)響應(yīng)面法優(yōu)化凝膠貼膏基質(zhì),以確定最佳的土元貼膏空白基質(zhì)處方,而后通過正交試驗(yàn)法確定含藥凝膠貼膏處方,本研究所得的凝膠貼膏基質(zhì)更適用于黏度較低的中藥提取物。

    1 材料

    PB303-S 型電子天平(北京Sartorius 儀器有限公司);CNS-11888 型膠帶初黏力測定儀(濟(jì)南賽成電子科技有限公司);CZY-25 型持黏性測試儀、BLD-200N 型電子剝離試驗(yàn)機(jī)(濟(jì)南蘭光機(jī)電技術(shù)有限公司)。

    聚丙烯酸鈉(NP-700,北京希比希貿(mào)易有限公司);甘羥鋁(北京希比希貿(mào)易有限公司;分析純);氫氧化鋁、檸檬酸、酒石酸、甘油(北京化工廠,批號分別為20141010、20140814、20170606、20200630);高嶺土(上海源葉生物科技有限公司,批號:Z25J10Y91491);純凈水(娃哈哈集團(tuán)有限公司);無紡布;壓花膜。

    2 方法

    2.1 空白凝膠貼膏的制備方法

    A 相:稱取處方量的酒石酸,加純凈水?dāng)嚢柚镣耆芙?。B 相:稱取處方量甘羥鋁、NP-700、高嶺土至蒸發(fā)皿中混合,加入甘油攪拌均勻。將A 相邊攪拌邊加入B 相中,以約60 r·min-1手動(dòng)攪拌均勻,后置于無紡布上加蓋壓花膜進(jìn)行涂布,室溫放置成型。

    2.2 指標(biāo)的測定和評價(jià)方案

    2.2.1 測定方法

    2.2.1.1 初黏力 按照《中華人民共和國藥典》2020 年版黏附力測定第一法規(guī)定采用斜坡滾球測定。

    2.2.1.2 剝離強(qiáng)度 取供試凝膠貼膏貼于潔凈的不銹鋼板上,用2 kg 的壓輥以自身質(zhì)量來回?cái)D壓3 次,放置10 min 后,置于電子剝離試驗(yàn)機(jī)上進(jìn)行剝離實(shí)驗(yàn),測力計(jì)以300 mm·min-1的速度將其從不銹鋼板上拉離并做180°折返,記錄測力儀顯示的讀數(shù)。平行測試3次,取平均值。

    2.2.1.3 持黏力 將供試凝膠貼膏(6 cm×3 cm)粘貼于2 塊不銹鋼板中央相接處,用2 kg 的壓輥以自身質(zhì)量來回?cái)D壓3 次,懸掛于持黏性測試儀上,垂直放置,懸掛200 g砝碼,計(jì)時(shí),記錄鋼板落下的時(shí)間(s),平行測試2次,取平均值。

    2.2.2 評價(jià)方案

    為了能全面評價(jià)貼膏的性能,本實(shí)驗(yàn)采用綜合評價(jià)方案。將2.1項(xiàng)下的每個(gè)指標(biāo)均標(biāo)準(zhǔn)化為0~1的“歸一值(OD值)[8]”。對取值越大越好的因素(初黏力、持黏力及剝離強(qiáng)度<0.333 kN·m-1者),按公式(1)計(jì)算歸一值(dmax),對剝離強(qiáng)度>0.333 kN·m-1者,按公式(2)計(jì)算歸一值(dmin)。在單因素試驗(yàn)與載藥量考察中,綜合評分計(jì)算方法為將得到的“歸一值”求平均值,按公式(3)計(jì)算,在Box-Behnken設(shè)計(jì)試驗(yàn)中綜合評分方法為計(jì)算三者幾何平均得到總“歸一值”,按公式(4)計(jì)算。

    式中,dmax為取值越大越好的因素歸一值;dmin為取值越小越好的因素歸一值;Y為本指標(biāo)測定值;OD為總歸一值。

    剝離強(qiáng)度越小,揭下凝膠貼膏時(shí)痛感越小,但剝離強(qiáng)度同時(shí)反映了基質(zhì)黏度,故本實(shí)驗(yàn)對8 篇已發(fā)表的凝膠貼膏基質(zhì)優(yōu)化實(shí)驗(yàn)文獻(xiàn)的配方進(jìn)行了重復(fù)[9-16],檢測其初黏力和剝離強(qiáng)度,并確定適宜的剝離強(qiáng)度,結(jié)果見表1。

    表1 8篇文獻(xiàn)中初黏力及剝離強(qiáng)度測定值

    由表1 可知,凝膠貼膏初黏力和剝離強(qiáng)度間存在一定的正相關(guān),回歸系數(shù)R2=0.763 9,說明在評價(jià)凝膠貼膏基質(zhì)時(shí)不是剝離強(qiáng)度越小越好,8 篇文獻(xiàn)中剝離強(qiáng)度平均值為0.333 kN·m-1,故認(rèn)為以剝離強(qiáng)度為0.333 kN·m-1時(shí)評分最高。

    2.3 單因素試驗(yàn)

    2.3.1 交聯(lián)時(shí)間考察 交聯(lián)型凝膠貼膏基質(zhì)強(qiáng)度的來源是交聯(lián)劑和骨架材料的交聯(lián)作用,凝膠貼膏基質(zhì)強(qiáng)度會(huì)隨著交聯(lián)時(shí)間增加而改變,故本實(shí)驗(yàn)首先考察凝膠貼膏交聯(lián)時(shí)間。按照2.1 項(xiàng)下方法平行制備7 張空白凝膠貼膏,分別放置1~7 d 后,按2.2.1項(xiàng)下方法測試指標(biāo),按2.2.2項(xiàng)下方法評價(jià)貼膏。

    2.3.2 優(yōu)選交聯(lián)劑種類 本實(shí)驗(yàn)考察氫氧化鋁、甘羥鋁不同用量對凝膠貼膏基質(zhì)性狀的影響。取酒石酸0.4 g,純凈水20 g,攪拌均勻作為A 相,另取聚丙烯酸鈉10 g,分別加入氫氧化鋁或甘羥鋁0.2、0.3、0.4、0.5、0.6 g,混合均勻后加入甘油20 g,攪拌均勻作為B相;制備凝膠貼膏評價(jià)。

    2.3.3 優(yōu)選交聯(lián)調(diào)節(jié)劑種類 本實(shí)驗(yàn)考察酒石酸、檸檬酸不同用量對凝膠貼膏基質(zhì)性狀的影響。分別取酒石酸或檸檬酸0.2、0.3、0.4、0.5、0.6 g,純凈水20 g,攪拌均勻作為A相,另取聚丙烯酸鈉10 g、加入甘羥鋁0.3 g,混合均勻后加入甘油20 g,攪拌均勻作為B相;制備凝膠貼膏評價(jià)。

    2.3.4 優(yōu)選保濕劑用量 本實(shí)驗(yàn)選擇甘油作為保濕劑,取酒石酸0.3 g,純凈水20 g,攪拌均勻作為A相,另取聚丙烯酸鈉10 g、加入甘羥鋁0.3 g,混合均勻后分別加入甘油18、27、36、45、54 g,攪拌均勻作為B相;制備凝膠貼膏評價(jià)。

    2.3.5 優(yōu)選純凈水用量 取酒石酸0.3 g,純凈水12、24、36、48、60 g,攪拌均勻作為A 相,另取聚丙烯酸鈉10 g、加入甘羥鋁0.3 g,混合均勻后加入甘油36 g,攪拌均勻作為B 相;制備凝膠貼膏評價(jià)。

    2.3.6 優(yōu)選填充劑用量 本實(shí)驗(yàn)選擇高嶺土作為填充劑。取酒石酸0.3 g,純凈水24 g,攪拌均勻作為A 相,另取聚丙烯酸鈉10 g、甘羥鋁0.3 g,分別加入高嶺土0、4、8、12、16 g,混合均勻后加入甘油36 g,攪拌均勻作為B相;制備凝膠貼膏評價(jià)。

    2.4 Box-Behnken響應(yīng)面設(shè)計(jì)試驗(yàn)

    2.4.1 考察因素與水平 以2.3 項(xiàng)下的單因素試驗(yàn)結(jié)論為基礎(chǔ),根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果選取對貼膏影響較大的酒石酸用量(A)、甘羥鋁用量(B)、甘油用量(C)和高嶺土用量(D),采用Box-Behnken 設(shè)計(jì)安排試驗(yàn),考察因素與水平見表2。

    表2 土元凝膠貼膏Box-Behnken設(shè)計(jì)因素水平

    2.4.2 數(shù)據(jù)結(jié)果與處理 利用Design-Expert V8.0.6 軟件安排試驗(yàn),按2.1 項(xiàng)下方法制備,2.2.1項(xiàng)下方法測試指標(biāo)。

    2.5 驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)

    對得出的最優(yōu)成型工藝進(jìn)行3 批平行試驗(yàn),并測試初黏力、持黏力、剝離強(qiáng)度、膜殘留性指標(biāo),并將此數(shù)據(jù)與Design-Expert V 8.0.6 軟件中給出的預(yù)測值對比。

    2.6 載藥量的考察

    土元貼膏所載藥物為土元提取物的凍干粉,其制備方法如下:土元加8 倍量水,提取2 次,每次40 min,純化后凍干。藥物含量設(shè)置4 個(gè)水平,按2.4 項(xiàng)下得到的最佳配比,分別加入貼膏總質(zhì)量2.5%、5.0%、7.5%、10.0%的土元凍干粉,制備凝膠貼膏評價(jià)。

    為盡可能增大載藥量,以載藥量(X)、高嶺土用量(Y)、甘油用量(Z)和為因素,使用正交設(shè)計(jì)對含藥貼膏進(jìn)行再次優(yōu)化,因素水平見表3。

    表3 土元凝膠貼膏載藥量正交試驗(yàn)因素水平

    3 結(jié)果與討論

    3.1 單因素試驗(yàn)

    3.1.1 交聯(lián)時(shí)間考察 由圖1 可知,凝膠貼膏在交聯(lián)3 d后綜合評分最高,其黏性和膠強(qiáng)度適宜,故確定交聯(lián)時(shí)間為3 d。

    圖1 土元凝膠貼膏交聯(lián)時(shí)間考察結(jié)果

    3.1.2 優(yōu)選交聯(lián)劑種類 由圖2 可知,甘羥鋁用量在0.2~0.4 g 時(shí)綜合評分均高于氫氧化鋁,同時(shí)發(fā)現(xiàn),隨交聯(lián)劑用量增加,膏體硬度增加,用料超過0.5 g時(shí),膏體交聯(lián)速度過快,難以涂布,故選擇交聯(lián)劑為甘羥鋁,在后續(xù)實(shí)驗(yàn)中甘羥鋁的優(yōu)化為0.2~0.4 g。

    圖2 土元凝膠貼膏交聯(lián)劑種類考察

    3.1.3 優(yōu)選交聯(lián)調(diào)節(jié)劑種類 由圖3 可知,2 種交聯(lián)調(diào)節(jié)劑用量為0.2~0.4 g時(shí)綜合評分高于0.5~0.6 g,且酒石酸綜合評分高于檸檬酸,故確定交聯(lián)調(diào)節(jié)劑種類為酒石酸,后續(xù)優(yōu)化用量為0.2~0.4 g。

    圖3 土元凝膠貼膏交聯(lián)調(diào)節(jié)劑種類考察

    3.1.4 優(yōu)選保濕劑用量 由圖4 可知,隨保濕劑甘油用量增加,綜合評分先增大后減小,當(dāng)甘油用量為27~45 g 時(shí)綜合評分最優(yōu),故選用27~45 g 為后續(xù)實(shí)驗(yàn)考察范圍。

    圖4 土元凝膠貼膏保濕劑用量考察

    3.1.5 優(yōu)選純凈水用量 由圖5 可知,隨著水用量的增加,綜合評分先增大后減小,當(dāng)水用量為24 g時(shí),凝膠貼膏性狀最優(yōu),故確定后續(xù)實(shí)驗(yàn)用水量為24 g。

    圖5 土元凝膠貼膏水用量考察

    3.1.6 優(yōu)選填充劑用量 由圖6 可知,隨填充劑高嶺土的增加,綜合評分先減小后增加再減小,當(dāng)高嶺土用量為4~12 g 時(shí)綜合評分最優(yōu)。同時(shí),實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),高嶺土用量為16 g 時(shí),膏體過硬,難以涂布,故后續(xù)實(shí)驗(yàn)選用4~12 g為考察范圍。

    圖6 土元凝膠貼膏填充劑用量考察

    3.2 Box-Behnken響應(yīng)面設(shè)計(jì)試驗(yàn)

    指標(biāo)測定結(jié)果見表4,回歸方程的方差分析見表5,預(yù)測效應(yīng)面圖見圖7。根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果,以O(shè)D值對所選的4個(gè)因素通過多元回歸分析可得到含有曲率的二階響應(yīng)表面模型方程,即OD=0.54+0.10A+0.30B-0.082C+0.64D-0.004AB+0.06AC+0.071AD-0.13BC+0.16BD-0.008 25CD-0.16A2-0.068B2-0.084C2+0.022D2(P<0.000 1,r=0.903 5);方程中模型皆顯著,失擬項(xiàng)皆不顯著,表明該模型可以很好地預(yù)測凝膠貼膏性狀。r>0.9,殘差皆分布在一條直線上,進(jìn)一步說明模型擬合優(yōu)度較好,可用來對凝膠貼膏的制備工藝進(jìn)行初步分析和預(yù)測。

    表4 土元凝膠貼膏Box-Behnken設(shè)計(jì)與指標(biāo)測定結(jié)果

    根據(jù)表5 可知,4 個(gè)因素對OD 值影響均顯著,即酒石酸、甘羥鋁、高嶺土和甘油的用量可以顯著改變凝膠貼膏基質(zhì)性狀。凝膠貼膏中NP-700 與甘羥鋁反應(yīng),形成凝膠網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu),可以提高基質(zhì)膠強(qiáng)度;酒石酸可以促進(jìn)鋁離子電離,進(jìn)而調(diào)節(jié)交聯(lián)反應(yīng)速度;高嶺土可以增加凝膠貼膏黏彈性,進(jìn)而改變黏度及藥物釋放;甘油可以促進(jìn)皮膚水合作用,且可以改變膏體黏度,不同基質(zhì)組成間具有一定的交互作用[17-18]。預(yù)測響應(yīng)面圖中,等高線越接近橢圓,說明2個(gè)因素間相互作用越大。由圖7可知,多種因素間存在相互作用。響應(yīng)面法是一種綜合試驗(yàn)設(shè)計(jì)和數(shù)學(xué)建模的優(yōu)化方法,通過對具有代表性的各點(diǎn)進(jìn)行試驗(yàn),回歸擬合全局范圍內(nèi)因素與結(jié)果間的函數(shù)關(guān)系,并且取得各因素最優(yōu)水平值[19],其較為常用的試驗(yàn)設(shè)計(jì)方法有Box-Behnken 設(shè)計(jì)和星點(diǎn)設(shè)計(jì)法,均可以考慮不同因素間的相互作用。本實(shí)驗(yàn)在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上確定各輔料合理使用區(qū)間,可使Box-Behnken 設(shè)計(jì)-響應(yīng)面法優(yōu)化效率更高、結(jié)果更可信。

    圖7 土元凝膠貼膏OD值預(yù)測響應(yīng)面圖

    表5 土元凝膠貼膏Box-Behnken設(shè)計(jì)結(jié)果OD值方差分析

    通過Design-Expert V 8.0.6軟件分析得出1組最優(yōu)的成型工藝參數(shù):NP-700 10.00 g、甘羥鋁0.40 g、酒石酸0.32 g、甘油36.65 g、高嶺土12.00 g、水24.00 g,此時(shí)初黏力可粘住直徑為18.764 mm 的鋼球,持黏力達(dá)到600 s,剝離強(qiáng)度為0.321 kN·m-1。

    3.3 驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)

    以最優(yōu)成型工藝進(jìn)行3批平行驗(yàn)證,結(jié)果見表6。驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)各指標(biāo)RSD 均小于5%,表明差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,且實(shí)測值和預(yù)測值相近,認(rèn)為此工藝穩(wěn)定可行,可用于后續(xù)土元凝膠貼膏的開發(fā)與應(yīng)用。

    表6 土元凝膠貼膏驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)結(jié)果

    3.4 載藥量的考察

    以初黏力、持黏力、剝離強(qiáng)度為指標(biāo),在空白貼膏的基礎(chǔ)上對載藥量進(jìn)行考察,結(jié)果見表7。由表7 可知,隨著載藥量的增加,凝膠貼膏黏性逐漸降低,同時(shí)在制備含藥凝膠貼膏的過程中發(fā)現(xiàn),凍干粉的加入可以起到類似填充劑的作用。為保證在含藥量盡量大的同時(shí)貼膏黏性不下降,使用正交設(shè)計(jì)法,以載藥量、高嶺土和甘油含量為因素,進(jìn)行L9(3)4正交試驗(yàn),優(yōu)化最佳含藥凝膠貼膏處方,結(jié)果見表8~9。

    表7 土元凝膠貼膏載藥量的篩選

    表8 土元凝膠貼膏載藥量正交試驗(yàn)結(jié)果

    表9 土元凝膠貼膏正交試驗(yàn)OD值方差分析

    方差分析發(fā)現(xiàn),載藥量、高嶺土用量和甘油用量對OD 值影響皆顯著,說明3個(gè)因素對凝膠貼膏均有較大影響。從直觀分析表可發(fā)現(xiàn),當(dāng)X 為1、Y 為2、Z 為2 時(shí),凝膠貼膏綜合評分最高,其中X 的1、2 水平間差距較小,為盡量增加載藥量,選擇最優(yōu)工藝為X2Y2Z2,即載藥量10%,高嶺土8 g,甘油36 g。使用最佳處方進(jìn)行3 次平行驗(yàn)證,其初黏力平均可粘住直徑為10.319 mm小球,持黏力平均值為255 s,剝離強(qiáng)度平均值為0.292 kN·m-1,明顯優(yōu)于未優(yōu)化前(9.525 mm、46 s、0.097 kN·m-1),故認(rèn)為此工藝穩(wěn)定可行。

    土元凍干粉中大部分為蛋白質(zhì),另有少量脂肪和氨基酸,其和A 相混合后呈混懸液,加入凝膠貼膏后會(huì)顯著降低其黏性,但對基質(zhì)強(qiáng)度影響較小。目前,中藥凝膠貼膏的研究多以植物藥為原料,其提取物中含大量多糖、鞣質(zhì)或各種脂溶性化合物,其可降低凝膠貼膏黏性和膠強(qiáng)度。本實(shí)驗(yàn)制備得到的凝膠貼膏減少了填充劑的使用,更適用于各種低黏性藥物,如各種動(dòng)物藥、粉質(zhì)類藥材提取物或單體化合物,但可能不適用于含大量脂溶性成分的中藥提取物。

    最終優(yōu)化的具體處方為NP-700 10.00 g、甘羥鋁0.40 g、酒石酸0.32 g、甘油36.00 g、高嶺土8.00 g、水24.00 g,載藥10%土元凍干粉,制備方法為將NP-700、甘羥鋁、甘油、高嶺土混勻后作為B 相,酒石酸、土元凍干粉、水混勻后作為A 相,將A 相邊攪拌邊加入B相中,以約60 r·min-1手動(dòng)攪動(dòng)均勻,后置于無紡布上加蓋壓花膜進(jìn)行涂布,室溫放置3 d即得。

    4 結(jié)論

    本實(shí)驗(yàn)制備得到了初黏力高、剝離無痛感、膠體強(qiáng)度大的土元凝膠貼膏,其基質(zhì)更適用于低黏性藥物及其提取物,后續(xù)實(shí)驗(yàn)證實(shí),其具有良好的促骨折愈合活性,且無皮膚刺激性或毒性,為土元凝膠貼膏的臨床應(yīng)用打下了良好的基礎(chǔ)。

    猜你喜歡
    貼膏剝離強(qiáng)度藥量
    不同涂層的彩鋼板對防水密封膠粘帶剝離強(qiáng)度影響的研究
    不同涂層的彩鋼板對防水密封膠粘帶剝離強(qiáng)度影響的研究
    丙烯酸酯乳液壓敏膠剝離強(qiáng)度穩(wěn)定性的研究
    PTFE板材烘板后剝離強(qiáng)度衰減原因分析及改善方法
    碳化對飛灰穩(wěn)定化加藥量測評的影響
    兩倍藥量
    骨痛貼膏不宜長期、大面積使用
    小型水池抗爆炸沖擊極限藥量分析
    藥量適中
    小說月刊(2015年6期)2015-12-16 14:55:45
    傷速康貼膏對兔膝骨性關(guān)節(jié)炎模型關(guān)節(jié)液中IL-1、IL-6及TNF-α水平的影響
    videossex国产| 久久久久久久午夜电影| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 午夜免费成人在线视频| 波野结衣二区三区在线| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| 波多野结衣巨乳人妻| 免费黄网站久久成人精品| 日韩欧美 国产精品| 成人国产综合亚洲| 国产精品亚洲美女久久久| 成人欧美大片| 亚洲人成网站高清观看| 成人亚洲精品av一区二区| 欧美xxxx性猛交bbbb| 99精品久久久久人妻精品| 麻豆国产av国片精品| 国产亚洲精品久久久com| 日本 欧美在线| 日本a在线网址| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区| 一进一出好大好爽视频| 在线观看一区二区三区| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 一区二区三区激情视频| 国产乱人伦免费视频| 欧美人与善性xxx| 动漫黄色视频在线观看| 国产亚洲欧美98| aaaaa片日本免费| 午夜精品在线福利| 亚洲欧美清纯卡通| 一区二区三区免费毛片| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 日本免费a在线| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 淫秽高清视频在线观看| 淫秽高清视频在线观看| 中文字幕熟女人妻在线| 嫩草影院精品99| 久久久久久大精品| 亚洲国产欧美人成| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 久久久久久伊人网av| 亚洲国产精品合色在线| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 黄色欧美视频在线观看| 天堂影院成人在线观看| 精品久久久久久久久久久久久| 成熟少妇高潮喷水视频| 亚洲人成网站在线播| 久久草成人影院| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 国产69精品久久久久777片| 51国产日韩欧美| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 欧美色视频一区免费| 亚洲最大成人手机在线| a在线观看视频网站| 悠悠久久av| 三级国产精品欧美在线观看| 1000部很黄的大片| ponron亚洲| 又粗又爽又猛毛片免费看| 国产爱豆传媒在线观看| 国产免费一级a男人的天堂| 国产高潮美女av| 国产女主播在线喷水免费视频网站 | 亚洲精品久久国产高清桃花| 嫩草影院入口| 欧美日韩精品成人综合77777| 亚洲美女黄片视频| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 日本与韩国留学比较| 亚洲精品成人久久久久久| 国产 一区精品| 国产 一区精品| 男女下面进入的视频免费午夜| 色噜噜av男人的天堂激情| 少妇丰满av| 国产主播在线观看一区二区| 男女做爰动态图高潮gif福利片| 国产一区二区在线观看日韩| 国产高清激情床上av| 99久久中文字幕三级久久日本| 一进一出好大好爽视频| 亚洲精品色激情综合| 天堂√8在线中文| 亚洲最大成人av| av视频在线观看入口| 性插视频无遮挡在线免费观看| 成人无遮挡网站| 久久国内精品自在自线图片| 欧美色视频一区免费| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 成人鲁丝片一二三区免费| 特大巨黑吊av在线直播| 国语自产精品视频在线第100页| 婷婷精品国产亚洲av| 久久香蕉精品热| 永久网站在线| 日韩一本色道免费dvd| 午夜免费成人在线视频| 欧美日韩精品成人综合77777| 草草在线视频免费看| 亚州av有码| 国国产精品蜜臀av免费| 超碰av人人做人人爽久久| 日日干狠狠操夜夜爽| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 成年人黄色毛片网站| 人妻少妇偷人精品九色| 欧美丝袜亚洲另类 | 色哟哟哟哟哟哟| 国产三级中文精品| 无遮挡黄片免费观看| 久久这里只有精品中国| 国产精品,欧美在线| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 露出奶头的视频| 一夜夜www| 日本 欧美在线| 久久午夜亚洲精品久久| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 国内精品久久久久久久电影| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 黄色丝袜av网址大全| 午夜精品一区二区三区免费看| 99久久精品一区二区三区| 国产午夜精品论理片| 精品福利观看| 熟女电影av网| 久久热精品热| 精品久久久久久,| 国产高清激情床上av| 精品午夜福利在线看| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 最近中文字幕高清免费大全6 | 麻豆精品久久久久久蜜桃| 国产单亲对白刺激| 别揉我奶头 嗯啊视频| 成人一区二区视频在线观看| 欧美日韩国产亚洲二区| 小说图片视频综合网站| 12—13女人毛片做爰片一| 国产不卡一卡二| 国产成年人精品一区二区| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 亚洲黑人精品在线| 桃红色精品国产亚洲av| 在线免费观看不下载黄p国产 | 欧美+亚洲+日韩+国产| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 搡女人真爽免费视频火全软件 | 欧美三级亚洲精品| 午夜影院日韩av| 草草在线视频免费看| 久久精品综合一区二区三区| 日韩av在线大香蕉| 1024手机看黄色片| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 九九爱精品视频在线观看| 亚洲av成人精品一区久久| 色5月婷婷丁香| 全区人妻精品视频| 精品人妻1区二区| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 91麻豆精品激情在线观看国产| 变态另类丝袜制服| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 毛片女人毛片| 国产日本99.免费观看| 级片在线观看| 久久久久免费精品人妻一区二区| 婷婷精品国产亚洲av| 男女啪啪激烈高潮av片| 国产主播在线观看一区二区| 床上黄色一级片| 在线观看美女被高潮喷水网站| 亚洲精品影视一区二区三区av| 久久久色成人| 干丝袜人妻中文字幕| 国产精品一区二区免费欧美| 91在线观看av| 婷婷精品国产亚洲av| av天堂在线播放| 国产精品久久久久久精品电影| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 最后的刺客免费高清国语| 国内精品久久久久久久电影| 日本在线视频免费播放| 亚洲午夜理论影院| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 久久久午夜欧美精品| 黄色女人牲交| 超碰av人人做人人爽久久| 亚洲四区av| 91精品国产九色| 窝窝影院91人妻| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 动漫黄色视频在线观看| 精品久久久久久久久亚洲 | 国产综合懂色| 日本爱情动作片www.在线观看 | 亚洲最大成人av| www.www免费av| 欧美中文日本在线观看视频| 看片在线看免费视频| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 免费在线观看影片大全网站| 搡女人真爽免费视频火全软件 | 久久热精品热| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 我要看日韩黄色一级片| 亚洲五月天丁香| 免费看日本二区| 精品国内亚洲2022精品成人| 亚洲av五月六月丁香网| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 国产精品一及| 欧美一区二区亚洲| 99久久精品国产国产毛片| 极品教师在线视频| 亚洲成av人片在线播放无| 亚洲第一区二区三区不卡| 日本 av在线| 我要看日韩黄色一级片| 国产精品一区www在线观看 | 亚洲欧美日韩无卡精品| 亚州av有码| 成人无遮挡网站| 老司机午夜福利在线观看视频| 国产精品电影一区二区三区| 国产精品亚洲一级av第二区| 亚洲精品成人久久久久久| 有码 亚洲区| 毛片女人毛片| 亚洲avbb在线观看| 国产成人一区二区在线| 日本-黄色视频高清免费观看| 精品国产三级普通话版| 中文字幕熟女人妻在线| 久久久国产成人免费| 直男gayav资源| 黄色配什么色好看| 久久人人精品亚洲av| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 亚洲av免费高清在线观看| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| 欧美+亚洲+日韩+国产| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 狠狠狠狠99中文字幕| 亚洲成a人片在线一区二区| 窝窝影院91人妻| 中文亚洲av片在线观看爽| 搡老岳熟女国产| 最近视频中文字幕2019在线8| 麻豆国产av国片精品| 国产精品一区二区免费欧美| av福利片在线观看| 午夜a级毛片| 亚洲av第一区精品v没综合| 亚洲人成伊人成综合网2020| 精品久久久噜噜| 日韩,欧美,国产一区二区三区 | 精品人妻1区二区| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 亚洲国产色片| 国产在视频线在精品| 日本成人三级电影网站| eeuss影院久久| 午夜亚洲福利在线播放| 无人区码免费观看不卡| 免费人成在线观看视频色| 999久久久精品免费观看国产| 草草在线视频免费看| 久久6这里有精品| 国产精品伦人一区二区| 在线国产一区二区在线| 两个人的视频大全免费| 精品午夜福利在线看| 99久久精品国产国产毛片| 精品久久久久久久久久久久久| av福利片在线观看| 午夜a级毛片| 狠狠狠狠99中文字幕| 国产单亲对白刺激| 成人永久免费在线观看视频| 亚洲 国产 在线| 国产精品三级大全| av女优亚洲男人天堂| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 欧美激情久久久久久爽电影| 精品久久久久久久久亚洲 | 亚洲午夜理论影院| 神马国产精品三级电影在线观看| 天堂√8在线中文| 久久久国产成人免费| 免费人成在线观看视频色| 国内精品美女久久久久久| 国产91精品成人一区二区三区| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 久久精品国产鲁丝片午夜精品 | 欧美日韩乱码在线| 国产亚洲欧美98| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 亚洲成人中文字幕在线播放| 听说在线观看完整版免费高清| 成人性生交大片免费视频hd| 国产av麻豆久久久久久久| 12—13女人毛片做爰片一| 有码 亚洲区| 99热6这里只有精品| 亚洲中文日韩欧美视频| 男女啪啪激烈高潮av片| a级毛片a级免费在线| 乱系列少妇在线播放| 色综合婷婷激情| 日本与韩国留学比较| 日本免费a在线| 如何舔出高潮| 成人国产综合亚洲| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 18+在线观看网站| 男女啪啪激烈高潮av片| 黄色视频,在线免费观看| 亚洲欧美激情综合另类| 看免费成人av毛片| 一级a爱片免费观看的视频| 两个人视频免费观看高清| 国产精品伦人一区二区| 国产精品国产高清国产av| 一a级毛片在线观看| 一边摸一边抽搐一进一小说| 一本精品99久久精品77| 又紧又爽又黄一区二区| 99热只有精品国产| 麻豆成人午夜福利视频| 欧美一级a爱片免费观看看| 国产午夜福利久久久久久| 久久精品影院6| 欧美xxxx性猛交bbbb| 在线播放无遮挡| 午夜福利18| 偷拍熟女少妇极品色| 内地一区二区视频在线| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 久久人人爽人人爽人人片va| 国产美女午夜福利| 尾随美女入室| 3wmmmm亚洲av在线观看| 午夜福利在线观看吧| 九色国产91popny在线| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 91久久精品国产一区二区三区| 国产日本99.免费观看| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 婷婷色综合大香蕉| 欧美zozozo另类| 天堂影院成人在线观看| 国产一级毛片七仙女欲春2| 亚洲精品粉嫩美女一区| 国产亚洲精品久久久com| av专区在线播放| 日本五十路高清| 一个人免费在线观看电影| 亚洲第一电影网av| 国产视频一区二区在线看| 免费电影在线观看免费观看| 99久久精品国产国产毛片| 看片在线看免费视频| 色在线成人网| 欧美黑人巨大hd| 国产色爽女视频免费观看| 中文字幕av成人在线电影| 欧美日韩乱码在线| 日本三级黄在线观看| 亚洲av二区三区四区| 国产亚洲91精品色在线| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 国内精品一区二区在线观看| 丰满的人妻完整版| 精品一区二区三区视频在线| 18+在线观看网站| eeuss影院久久| 最后的刺客免费高清国语| a级一级毛片免费在线观看| 国产 一区精品| 久久久久国内视频| 国产欧美日韩精品一区二区| 成人三级黄色视频| 一个人观看的视频www高清免费观看| 国产综合懂色| ponron亚洲| 岛国在线免费视频观看| 国产高清三级在线| 亚洲av中文av极速乱 | 波多野结衣巨乳人妻| 91av网一区二区| 亚洲精品久久国产高清桃花| 免费在线观看日本一区| 日韩欧美精品v在线| 嫁个100分男人电影在线观看| 啦啦啦韩国在线观看视频| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 亚洲va在线va天堂va国产| 18+在线观看网站| 精品国产三级普通话版| 成年人黄色毛片网站| 色5月婷婷丁香| 国产精品久久久久久精品电影| 最近在线观看免费完整版| 伊人久久精品亚洲午夜| 久久久久久久久久黄片| 韩国av在线不卡| .国产精品久久| 欧美一区二区国产精品久久精品| 国产精品伦人一区二区| 全区人妻精品视频| 黄色视频,在线免费观看| 级片在线观看| 日韩一本色道免费dvd| 一个人观看的视频www高清免费观看| 国产精品一区二区免费欧美| 人人妻人人澡欧美一区二区| 亚洲国产精品成人综合色| 亚洲在线观看片| 国产一区二区三区av在线 | 老熟妇乱子伦视频在线观看| 天堂√8在线中文| 老司机福利观看| 国内精品美女久久久久久| 亚洲av熟女| 十八禁国产超污无遮挡网站| 午夜免费成人在线视频| 午夜福利在线观看吧| 午夜日韩欧美国产| 高清日韩中文字幕在线| 美女 人体艺术 gogo| 久久香蕉精品热| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 国产av一区在线观看免费| 久久欧美精品欧美久久欧美| 国产精品久久视频播放| 欧美日本视频| 他把我摸到了高潮在线观看| bbb黄色大片| 九九在线视频观看精品| 色综合站精品国产| 老女人水多毛片| 国产精品无大码| 麻豆成人午夜福利视频| 成人国产综合亚洲| 成人特级av手机在线观看| 九九爱精品视频在线观看| 日韩欧美国产一区二区入口| 欧美成人一区二区免费高清观看| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 国产精品av视频在线免费观看| 能在线免费观看的黄片| 亚洲专区国产一区二区| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 欧美xxxx性猛交bbbb| 欧美一级a爱片免费观看看| 婷婷色综合大香蕉| 亚洲人与动物交配视频| 网址你懂的国产日韩在线| 91久久精品国产一区二区三区| 亚洲久久久久久中文字幕| 婷婷精品国产亚洲av在线| 精品久久久久久久末码| 91在线观看av| 精品午夜福利在线看| 午夜福利成人在线免费观看| 中文字幕av成人在线电影| 国模一区二区三区四区视频| 看片在线看免费视频| 亚洲综合色惰| 亚洲精品456在线播放app | 亚洲av免费高清在线观看| 欧美激情国产日韩精品一区| 亚洲精品粉嫩美女一区| 亚洲第一电影网av| 91av网一区二区| bbb黄色大片| 日韩中文字幕欧美一区二区| 天美传媒精品一区二区| 国产在线男女| 久久久久久伊人网av| 91精品国产九色| 91午夜精品亚洲一区二区三区 | 精品福利观看| 黄色视频,在线免费观看| 欧美最黄视频在线播放免费| 日日撸夜夜添| 欧美成人免费av一区二区三区| 久久精品91蜜桃| 毛片一级片免费看久久久久 | 午夜福利在线观看免费完整高清在 | 可以在线观看的亚洲视频| av福利片在线观看| 狠狠狠狠99中文字幕| 免费av观看视频| 国产黄a三级三级三级人| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 少妇被粗大猛烈的视频| 少妇人妻精品综合一区二区 | 亚洲av.av天堂| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 亚洲av中文av极速乱 | .国产精品久久| 制服丝袜大香蕉在线| 亚洲精华国产精华液的使用体验 | 国产aⅴ精品一区二区三区波| 男人舔女人下体高潮全视频| 久久99热6这里只有精品| 国产精品综合久久久久久久免费| 日本一二三区视频观看| 婷婷亚洲欧美| 日本免费a在线| 亚洲精华国产精华液的使用体验 | 国产色婷婷99| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 特大巨黑吊av在线直播| 99国产极品粉嫩在线观看| 日韩 亚洲 欧美在线| 免费观看在线日韩| 亚洲五月天丁香| 伦理电影大哥的女人| 欧美日韩乱码在线| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 亚洲18禁久久av| 日韩欧美国产在线观看| 搡女人真爽免费视频火全软件 | 免费观看人在逋| 在线国产一区二区在线| 免费高清视频大片| 国产大屁股一区二区在线视频| 日本色播在线视频| 成年免费大片在线观看| 精品人妻1区二区| 国产美女午夜福利| 国产午夜福利久久久久久| 春色校园在线视频观看| 国语自产精品视频在线第100页| 两个人视频免费观看高清| 亚洲无线观看免费| 极品教师在线免费播放| 亚洲成av人片在线播放无| 有码 亚洲区| 午夜精品一区二区三区免费看| 99久久中文字幕三级久久日本| 又爽又黄a免费视频| 国产主播在线观看一区二区| 校园春色视频在线观看| 91av网一区二区| 国产69精品久久久久777片| 国产男靠女视频免费网站| aaaaa片日本免费| 日日啪夜夜撸| 国产亚洲欧美98| 日本五十路高清| 亚洲成a人片在线一区二区| 村上凉子中文字幕在线| 国产中年淑女户外野战色| 男女啪啪激烈高潮av片| 午夜激情欧美在线| 欧美+亚洲+日韩+国产| 99精品久久久久人妻精品| 国产高清视频在线播放一区| 真人一进一出gif抽搐免费| 我的老师免费观看完整版| 麻豆国产av国片精品| 国产女主播在线喷水免费视频网站 | 国产av一区在线观看免费| avwww免费| 日本三级黄在线观看| 最新中文字幕久久久久| 日本三级黄在线观看| 国产精品av视频在线免费观看| 亚洲久久久久久中文字幕| 国产不卡一卡二| 亚洲美女搞黄在线观看 | 美女免费视频网站| 91精品国产九色| www日本黄色视频网| 欧美中文日本在线观看视频| 搡老岳熟女国产| 亚洲avbb在线观看| 黄色女人牲交| 国产大屁股一区二区在线视频| 精品乱码久久久久久99久播| 国产精品一区二区免费欧美| 88av欧美| 窝窝影院91人妻| 久久久精品欧美日韩精品| 亚洲性久久影院| 嫩草影院新地址| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 欧美黑人巨大hd| 精品不卡国产一区二区三区| 最后的刺客免费高清国语| 久久精品91蜜桃| 久久九九热精品免费| 一区二区三区高清视频在线| 51国产日韩欧美| 国产三级在线视频| 国产v大片淫在线免费观看| 一区福利在线观看| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 日日撸夜夜添| 久久久精品大字幕| 变态另类丝袜制服|