黃芪對白靈菇活性成分及抗氧化能力的影響*

蒙秋霞，聶建軍，徐全飛，潘保華，趙悠悠，馮婉君，牛 宇**

（1.山西農(nóng)業(yè)大學資源環(huán)境學院省部共建有機旱作農(nóng)業(yè)國家重點實驗室，山西 太原 030031；2.山西農(nóng)業(yè)大學農(nóng)業(yè)經(jīng)濟管理學院，山西太原 030006；3.山西省侯馬市出入境檢驗檢疫局，山西 侯馬 043000）

白靈菇學名為刺芹側(cè)耳托里亞種（Pleurotus tuoliensis 或 Pleurotus eryngii subsp.tuoliensis）[1]，過去也常被稱為阿魏蘑、阿魏側(cè)耳。其菇體形似靈芝、色澤潔白、營養(yǎng)豐富、滋味鮮美，富含多糖、氨基酸、脂肪、粗纖維、維生素和礦物質(zhì)，具有鎮(zhèn)咳、消炎、消積、殺蟲、解毒、防治腫瘤、增強人體免疫力等功效，其多糖可增強機體的抗氧化能力，是一種食用價值和藥用價值都很高的珍稀食用菌[2-4]。

自由基是帶有未配對電子的基團或原子，包括活性氧簇（ROS）、活性氮簇（RNS）、活性碳簇（RCS） 和活性硫簇（RSS）[5]。自由基是一把雙刃劍，低水平的ROS作為胞間信號通路的第二信使，通過激活核因子 кB（NF-кB） 和低氧誘導因子 1α（HIF），調(diào)控細胞的增殖、凋亡、基因表達，為維持細胞正常功能所必需[5]。ROS水平的適度提升可幫助機體抵御多種微生物引起的感染，并參與細胞凋亡過程，清除癌變細胞[6]；但若自由基水平超過一定量，多余的自由基會攻擊機體的DNA、脂類、蛋白質(zhì)等生物大分子，造成細胞死亡或功能異常，加速衰老進程，引起多種疾病[5]。因此，清除多余的自由基有益于延緩衰老、預防和治療多種疾病?？寡趸瘎┛梢蕴峁湓踊螂娮?，使其與自由基中單獨的電子配對，使自由基消失。因此，開發(fā)高效無毒、可清除自由基的天然抗氧化劑日益重要。

目前，研究食用菌的抗氧化活性及其提升方法成為功能性食用菌研究開發(fā)的一個熱點，人們開始探索利用中藥材、藥渣和微量元素研發(fā)復合培養(yǎng)基質(zhì)，通過科學方法和特殊工藝培育具有更高抗氧化功效的食（藥）用菌產(chǎn)品。研究表明，在發(fā)酵培養(yǎng)基中添加刺五加、何首烏等中藥材，可提高黑木耳、靈芝等食（藥）用菌體內(nèi)活性物質(zhì)的含量，并增強其抗氧化活性[7-8]。在研究中藥材對深層發(fā)酵白靈菇生長情況和活性物質(zhì)含量的影響方面，孟麗等[9]考察了中藥阿魏、防風、柴胡、前胡浸出液對白靈菇菌絲生長發(fā)育的影響，張勁松等[10]測定了黃芪水提物對白靈菇等5種食用菌菌絲體生長的影響，李赟等[11]測定了黨參提取液對深層發(fā)酵白靈菇多糖含量的影響。

黃芪為豆科植物蒙古黃芪 [Astragalus membranaceus Bge.var.mongholicus(Fisch.)Hsiao]和膜莢黃芪 [Astragalus membranaceus(Fisch.)Bunge]的干燥根[12]。黃芪最早記錄于《神農(nóng)本草經(jīng)》，具有益氣、排毒、利尿、消腫等功效，目前已被記錄以黃芪為原料的藥有兩百多種[13]，因此黃芪被譽為“補藥之長”，為歷代中醫(yī)常用中藥之一。我國食品藥品監(jiān)督管理局（2002） 51號文件中明確列出了114種可用于保健品的中藥，其中就包括黃芪。研究顯示，黃芪中的藥效成分有黃酮、皂苷和多糖等[14]。黃酮類成分具有抗心肌缺血、保護肝臟、消炎、預防突變、預防腫瘤等功效[15]；皂苷可抗炎抑炎、調(diào)節(jié)免疫、保護神經(jīng)、預防多發(fā)性硬化[16]；多糖具有抗腫瘤、降血糖、降血脂、保護心血管、清除多種自由基及延緩衰老等多種藥理作用[17-18]。目前，黃芪對深層發(fā)酵白靈菇活性物質(zhì)含量及抗氧化能力的影響尚無報道。

通過深層發(fā)酵，探索黃芪水提物對白靈菇菌絲生長、活性物質(zhì)含量的影響，并從DPPH·清除能力、羥基自由基（·OH） 清除能力、還原力和亞鐵離子螯合能力，測定黃芪水提物對白靈菇菌絲體抗氧化活性的影響，為新型功能性食用菌產(chǎn)品開發(fā)提供參考。

1 材料與方法

1.1 供試材料

黃芪原藥材，山西省渾源縣；白靈菇菌株天山2號，北京吉蕈園科技有限公司。

1.2 供試培養(yǎng)基

PDA固體培養(yǎng)基：馬鈴薯20%、葡萄糖2%、蛋白胨0.3%、硫酸鎂0.2%、磷酸氫二鉀0.2%、瓊脂2%。

液體種子培養(yǎng)基：黃豆芽汁20%、葡萄糖2%、磷酸二氫鉀0.2%、酵母膏0.5%、硫酸鎂0.1%、VB10.01%，pH自然。

1.3 其他試劑

二苯代苦味?；杂苫―PPH·） 試劑盒、羥基自由基測定試劑盒，南京建成生物工程研究所；亞硝酸鈉、磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉、酵母浸膏、水楊酸，天津市大茂化學試劑廠；無水乙醇、硝酸鋁、硫酸鎂、磷酸二氫鉀，天津市風船化學試劑科技有限公司；黃芪甲苷、槲皮素，北京北方偉業(yè)化工技術(shù)研究院；沒食子酸，成都市科龍化工試劑廠；葡萄糖，天津市科密歐化學試劑有限公司；香草醛、四氯苯醌、苯酚、氯化鐵，南京化學試劑股份有限公司；福林酚試劑，北京索萊寶科技有限公司；硫酸亞鐵，無錫市晶科化工有限公司；過氧化氫，天津市東方廣誠醫(yī)藥化工有限公司；三氯乙酸，天津市光復精細化工研究所；鐵氰化鉀，國藥集團化學試劑有限公司；無水氯化亞鐵，上海依赫生物科技有限公司；氫氧化鈉，天津市大陸化學試劑廠；亞鐵嗪、硼氫化鈉，美國Sigma-Aldrich公司；蛋白胨、瓊脂粉，北京奧博星生物技術(shù)有限公司；VB1，天津力生制藥股份有限公司。所用試劑均為分析純。

1.4 試驗儀器

ME204電子天平，梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司；SW-GJ-1FD系列超凈工作臺，上海博訊實驗有限公司醫(yī)療設備廠；BS-S恒溫振蕩培養(yǎng)箱，國華電器有限公司；HH-4數(shù)顯恒溫水浴鍋，江蘇金壇市環(huán)宇科學儀器廠；Christ ALPHA 2-4 LD plus真空冷凍干燥機、HG-9040S電熱恒溫鼓風干燥箱，寧波東南儀器有限公司。

1.5 黃芪水提物的制備

黃芪原藥材切片、干燥、粉碎，過60目篩后，加入其重量10倍量的蒸餾水，攪拌，沸煮1 h。冷卻后用4層紗布過濾，收集濾液，重復沸煮過濾2次，合并濾液，減壓濃縮。分裝后置于-20℃冰箱過夜，于冷凍干燥機內(nèi)凍干，研末過篩，得黃芪水提物干粉，置于-20℃冰箱備用。

1.6 白靈菇菌種的制備

配置PDA固體培養(yǎng)基，滅菌鍋滅菌90 min后趁熱倒平板，冷卻，待水汽徹底消失后接種白靈菇菌種。培養(yǎng)一段時間，待其生長良好時，收集以供后續(xù)試驗使用。

白靈菇深層發(fā)酵母液的制備：配制液體種子培養(yǎng)基，接入活化的白靈菇菌種，28℃下以轉(zhuǎn)速100 r·min-1恒溫振蕩培養(yǎng)7 d，得白靈菇深層發(fā)酵母液。

1.7 黃芪水提物對平板培養(yǎng)白靈菇菌絲體生長的影響

1.7.1 平板培養(yǎng)

用雙蒸水配制0.2 g·mL-1的黃芪水提物母液備用。在50 mL錐形瓶中分別添加黃芪水提物母液0、0.3 mL、0.6 mL、1.2 mL、1.8 mL、2.4 mL、3.6 mL，再向錐形瓶中加入熱的PDA培養(yǎng)基至24 mL，震蕩搖勻，制成黃芪水提物濃度分別為0、2.5 mg·mL-1、5.0 mg·mL-1、10.0 mg·mL-1、15.0 mg·mL-1、20.0 mg·mL-1、30.0 mg·mL-1的培養(yǎng)基。高壓蒸汽滅菌1.5h，趁熱倒平板，每個濃度3次重復。待培養(yǎng)基徹底冷卻，用打孔器取直徑6 mm、活化好的白靈菇菌種，接種于平板。連續(xù)培養(yǎng)6 d后，十字交叉法測量菌落直徑，計算菌絲生長速率。菌絲生長速率（V，mm·d-1）計算公式為：

式中：L1為菌落直徑（mm）；L2為接種菌餅直徑（mm）；D為培養(yǎng)天數(shù)（d）。

1.7.2 不同濃度黃芪水體物深層培養(yǎng)白靈菇

錐形瓶中分別加入黃芪水提物濃度為0、2.5 mg·mL-1、5.0 mg·mL-1、10.0 mg·mL-1、15.0 mg·mL-1、20.0 mg·mL-1、30.0 mg·mL-1的液體種子培養(yǎng)基 45 mL，再加入5 mL培養(yǎng)好的白靈菇液體深層發(fā)酵母液，每個濃度3次重復。28℃、100 r·min-1恒溫振蕩培養(yǎng)7 d后，以3 500 r·min-1轉(zhuǎn)速離心20 min，棄上清。洗瓶搖洗、離心2次，收集沉淀，60℃下干燥至恒重，稱重并計算菌絲體干重。

1.8 添加黃芪水提物深層培養(yǎng)白靈菇菌絲體的制備

1.8.1 母液制備

按照1.6的方法制備白靈菇深層發(fā)酵母液。

1.8.2 添加黃芪水提物的深層發(fā)酵

精密稱取黃芪水提物干粉，溶解于液體種子培養(yǎng)基中制成50 mg·mL-1的黃芪水提物母液。取4個錐形瓶，瓶中各裝入80 mL液體種子培養(yǎng)基，2個作為處理組，2個作為對照組。處理組加入10 mL黃芪水提物母液使其濃度達到5.0 mg·mL-1，對照組加入10 mL液體種子培養(yǎng)基。蒸汽滅菌，冷卻后每個錐形瓶中加入10 mL培養(yǎng)好的白靈菇深層發(fā)酵母液，28℃下轉(zhuǎn)速100 r·min-1恒溫振蕩培養(yǎng)7 d。

1.8.3 菌絲體干粉及待測菌絲體溶液的制備

將1.8.2中培養(yǎng)好的深層發(fā)酵液于3 500 r·min-1離心20 min，棄上清液，洗瓶搖洗、離心2次，將沉淀于60℃干燥至恒重，研末稱重，密封保存于-20℃冰箱?；钚猿煞趾繙y定時，將菌絲體干粉從冰箱取出靜置至室溫后進行?？寡趸钚詼y定前，精密稱取菌絲體干粉1 g，用50%甲醇溶液20 mL浸提1 h，離心收集上清液，制成50.0 mg·mL-1菌絲體初始溶液，再用雙蒸水稀釋成2.5 mg·mL-1、5.0 mg·mL-1、7.5 mg·mL-1、 10.0 mg·mL-1、15.0 mg·mL-1、20.0 mg·mL-1、25.0 mg·mL-1的菌絲體溶液。

1.9 活性成分含量測定

菌絲體中總皂苷測定采用濃硫酸-香草醛法[19]，標準品為黃芪甲苷；總黃酮測定采用硼氫化鈉-四氯苯醌法[20]，標準品為槲皮素；總酚酸測定采用福林酚法[21]，標準品為沒食子酸；總多糖測定采用硫酸-苯酚法[22]，標準品為葡萄糖。

1.10 黃芪水提物對白靈菇液體發(fā)酵產(chǎn)物抗氧化活性的測定

1.10.1 DPPH·清除能力的測定

配制所需濃度的菌絲體待測溶液。配制25.0 mg·L-1的DPPH溶液。按說明書指示添加試劑，搖勻，避光靜置1.5 h，在517 nm處測定吸光度。DPPH·清除率（E1，%）計算公式為：

式中：As為加樣品的吸光度值；Ar為未加DPPH溶液的吸光度值；A0為未加樣品的吸光度值。

1.10.2 ·OH清除能力的測定

配制所需濃度的菌絲體待測溶液。配制9 mmol·L-1的 FeSO4溶液、9 mmol·L-1的水楊酸-乙醇溶液和 8.8 mmol·L-1的 H2O2（3%） 溶液。取 16支10 mL EP管，先在各管中加入1mL的FeSO4溶液和2 mL水楊酸-乙醇溶液，然后加入樣品2 mL（以雙蒸水作空白對照），混勻，再加入H2O2溶液2 mL，室溫反應1 h，在510 nm處測其吸光度值。·OH清除率（E2，%） 計算公式為：

式中：A0為空白對照的吸光度值；As為待測樣品的吸光度值。

1.10.3 還原力的測定

配制所需濃度的菌絲體待測溶液。配制0.2 mol·L-1磷酸緩沖液（pH 6.6）、1%鐵氰化鉀、10%三氯乙酸和0.1%氯化鐵溶液。取21支2.5 mL EP管，在各管中加入0.2 mL菌絲體溶液（以雙蒸水為空白對照），0.5 mL磷酸緩沖液和0.5 mL鐵氰化鉀溶液，50℃水浴20 min，加0.5 mL三氯乙酸溶液，靜置反應20 min，再加入0.5 mL氯化鐵溶液，靜置10 min，測定在700 nm處吸光值。1.10.4 亞鐵離子螯合能力的測定

配制所需濃度的菌絲體待測溶液。配制2 mmol·L-1的 FeCl2溶液和 5 mmol·L-1的亞鐵嗪溶液。先在各管中加入0.5 mL樣品（以雙蒸水作空白對照） 和0.1 mL FeCl2溶液，混勻后反應5 min，然后再加入0.1 mL亞鐵嗪溶液，靜置10 min，測定562 nm處吸光度值。亞鐵離子螯合率（E3，%）計算公式為：

式中：A0為空白對照的吸光度值；As為待測樣品的吸光度值。

1.11 統(tǒng)計學分析

試驗結(jié)果表示為平均值±標準差；用SPSS Statistics 20軟件進行數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計分析，用Duncan’s多重比較檢驗各個處理數(shù)據(jù)間的差異顯著性。

2 結(jié)果與分析

2.1 黃芪水提物對白靈菇菌絲生長的影響

平板培養(yǎng)6 d或深層培養(yǎng)7 d后，黃芪水提物對白靈菇菌絲的生長產(chǎn)生不同程度的影響，見圖1、圖2。

圖1 不同黃芪水提物濃度下白靈菇菌落生長狀況Fig.1 Growth of Pleurotus tuoliensis mycelia colony cultivated with different concentrations of Astragalus membranaceus extract

圖1中同一列平板表示同一濃度的3次重復，各處理白靈菇菌落近圓形，菌絲為白色絲狀，添加黃芪水提物對菌絲顏色無影響。黃芪水提物濃度為2.5 mg·mL-1?5.0 mg·mL-1時，菌落直徑和生長速率隨濃度的升高而增大，濃度為10.0 mg·mL-1?30.0 mg·mL-1時，菌落直徑和生長速率隨濃度的升高而減小。黃芪水提物的添加提高了菌絲致密度，并呈現(xiàn)明顯的量效關系。

圖2 不同黃芪水提物濃度下白靈菇菌絲體生長狀況Fig.2 Growth of Pleurotus tuoliensis mycelia cultivated with different concentrations of Astragalus membranaceus extract

由圖2可見，深層培養(yǎng)7 d后黃芪水提物濃度在 2.5 mg·mL-1?10.0 mg·mL-1范圍內(nèi)能顯著促進白靈菇菌絲體生長，菌絲體干重與對照差異顯著（P<0.01），在濃度為 15.0 mg·mL-1?20.0 mg·mL-1時菌絲體干重與對照差異不顯著（P>0.01），在濃度為30.0 mg·mL-1抑制了菌絲體生長，菌絲體干重顯著低于對照（P<0.01）。白靈菇菌絲體干重在黃芪水提物添加量為5.0 mg·mL-1時最大，在添加量為10.0 mg·mL-1時次之。由此可見，黃芪水提物在低濃度水平促進白靈菇菌絲體生長，在高濃度水平則會抑制其生長。

試驗結(jié)果表明，在黃芪水提物添加濃度為5.0 mg·mL-1時，白靈菇生長速率和菌絲體干重最大，因此本研究采用5.0 mg·mL-1作為后續(xù)白靈菇液體發(fā)酵基質(zhì)中黃芪水提物的添加濃度。

2.2 白靈菇菌絲體的活性成分含量變化

添加黃芪水提物對白靈菇深層發(fā)酵菌絲體活性成分含量的影響見表1。

表1 白靈菇深層發(fā)酵菌絲體活性成分含量Tab.1 Contents of active compounds of Pleurotus tuoliensis mycelia in submerged fermentation

由表1可見，添加黃芪水提物深層發(fā)酵后，白靈菇菌絲體內(nèi)各活性成分含量均有不同程度的提高。其中，總皂苷的增加最為明顯，其次為總黃酮和胞外多糖，說明黃芪水提物對這些成分的影響較大。相比之下，添加黃芪水提物深層發(fā)酵后白靈菇胞內(nèi)多糖和總酚酸的增加量較小。

2.3 黃芪水提物對深層培養(yǎng)白靈菇菌絲體的抗氧化活性的影響

黃芪水提物對深層培養(yǎng)白靈菇菌絲體DPPH·清除能力的影響見圖3。

如圖3所示，白靈菇菌絲體對DPPH·的清除率表現(xiàn)出明顯的量效關系。常規(guī)深層發(fā)酵白靈菇菌絲體（B0）與添加黃芪水提物深層發(fā)酵的白靈菇菌絲體（B1），清除DPPH·的50%效應濃度（EC50）分別為 17.45 mg·mL-1和 14.69 mg·mL-1。在菌絲體濃度為 2.5 mg·mL-1?7.5 mg·mL-1時，B1 與B0 的 DPPH·清除率無顯著差異（P>0.05），在菌絲體濃度為12.5 mg·mL-1?25.0 mg·mL-1時，二者DPPH·的清除率出現(xiàn)顯著差異（P<0.05），其中在菌絲體濃度為25 mg·mL-1時差異最大，B1是對照B0的1.19倍，表明培養(yǎng)基中添加黃芪水提物發(fā)酵可顯著促進白靈菇菌絲體DPPH·的清除能力。

圖3 添加黃芪水提物深層發(fā)酵后白靈菇菌絲體對DPPH·自由基的清除率Fig.3 DPPH·scavenging activity of Pleurotu stuoliensis mycelia cultivated with Astragalus membranaceus extract

黃芪水提物對深層培養(yǎng)白靈菇菌絲體·OH清除能力的影響見圖4。

如圖4所示，常規(guī)深層發(fā)酵白靈菇菌絲體（B0）和添加黃芪水提物深層發(fā)酵白靈菇子實體（B1） 均對·OH有一定的清除能力，其清除率隨著濃度的增加而變大。B0和B1清除·OH的EC50值分別為9.27 mg·mL-1和 7.33 mg·mL-1。在菌絲體濃度為 10.0 mg·mL-1?25.0 mg·mL-1時，B1對·OH的清除率與對照B0相比顯著提高（P<0.05），在菌絲體濃度為12.5 mg·mL-1時差異最大，B1達到B0的1.26倍，說明黃芪提取物的添加可顯著提高深層發(fā)酵白靈菇菌絲體對·OH的清除能力。

圖4 添加黃芪水提物深層發(fā)酵后白靈菇菌絲體對·OH的清除率Fig.4 OH·scavenging activity of Pleurotu stuoliensis mycelia cultivated with Astragalus membranaceus extract

黃芪水提物對深層培養(yǎng)白靈菇菌絲體還原力的影響見圖5。

從圖5可見，隨著菌絲體濃度的增加，還原反應體系吸光度值逐漸增加，呈一定的量效關系。吸光度值為0.5時，常規(guī)深層發(fā)酵白靈菇菌絲體（B0）和添加黃芪水提物深層發(fā)酵白靈菇子實體（B1） 的濃度分別為8.30 mg·mL-1和 6.24 mg·mL-1。在菌絲體濃度為 2.5 mg·mL-1?15.0 mg·mL-1時，B1 與 B0 的還原力出現(xiàn)顯著差異（P<0.05），其中在濃度為15.0 mg·mL-1時差異最大，B1的還原力達到B0的1.23倍。可見，黃芪提取物深層發(fā)酵可顯著提高白靈菇菌絲體的還原力。

圖5 添加黃芪水提物深層發(fā)酵后白靈菇菌絲體的還原力Fig.5 Deoxiding activity of Pleurotu stuoliensis mycelia cultivated with Astragalus membranaceus extract

黃芪水提物對深層培養(yǎng)白靈菇菌絲體亞鐵離子螯合能力的影響見圖6。

如圖6所示，常規(guī)深層發(fā)酵白靈菇菌絲體（B0）和添加黃芪水提物深層發(fā)酵白靈菇子實體（B1）均具有較強的亞鐵離子螯合能力，并表現(xiàn)出明顯的量效關系。B0和B1的Fe2+螯合EC50值分別為4.84 mg·mL-1和3.13 mg·mL-1。試驗菌絲體濃度范圍內(nèi)，黃芪提取物可顯著提高白靈菇的亞鐵離子螯合能力（P<0.05），其中在濃度為12.5 mg·mL-1時差異最大，B1達到B0的1.15倍，說明添加黃芪水提物可顯著提高深層發(fā)酵白靈菇菌絲體亞鐵離子的螯合能力。

圖6 添加黃芪水提物深層發(fā)酵后白靈菇菌絲體的亞鐵離子螯合率Fig.6 Ferrochelatation activity of Pleurotu stuoliensis mycelia cultivated with Astragalus membranaceus extract

3 討論與結(jié)論

試驗結(jié)果表明，黃芪水提物的添加可影響深層發(fā)酵白靈菇菌絲體的生長。在濃度為2.5 mg·mL-1?15.0 mg·mL-1時，黃芪水提物對白靈菇菌絲體的生長有促進作用；在濃度升至30 mg·mL-1時，黃芪水提物對其菌絲體的生長有抑制作用?；谄桨迮囵B(yǎng)和深層發(fā)酵結(jié)果，黃芪水提物濃度為5 mg·mL-1時對白靈菇菌絲體的生長促進作用最強，這與張勁松等的結(jié)論一致[10]。孟麗等[9]的研究結(jié)果表明阿魏、防風、柴胡、前胡浸出液都能促進白靈菇菌絲的生長發(fā)育，并且中藥浸出液的濃度不同，對菌絲生長發(fā)育的影響也不同，在低濃度時促進菌絲生長，本試驗也得出類似結(jié)果。孟麗等[9]還發(fā)現(xiàn)，盡管隨著濃度增加，中藥浸出液對白靈菇菌絲生長的促進作用隨之減弱，但未出現(xiàn)抑制作用。而本試驗中，在濃度升至30.0 mg·mL-1時，黃芪水提物對白靈菇菌絲體的生長表現(xiàn)出顯著的抑制作用，表現(xiàn)為菌落直徑和菌絲體干重的減小。這種差異可能是由于試驗采用的中藥材種類和提取物制備方法的不同造成，也可能與白靈菇品種的不同有關。不同中藥材在不同濃度對白靈菇菌絲生長發(fā)育的影響及其機理尚待進一步研究。

目前中藥材對白靈菇深層發(fā)酵活性物質(zhì)含量影響的報道較少，僅李赟等[11]研究了黨參提取液對深層發(fā)酵白靈菇多糖含量的影響，結(jié)果表明黨參水提取液的添加對白靈菇生物量及胞外多糖、胞內(nèi)多糖含量均有促進作用，以黨參水提取液濃度為50.0 mg·mL-1效果最顯著。本試驗發(fā)現(xiàn)，深層發(fā)酵培養(yǎng)基中黃芪水提物濃度為5.0 mg·mL-1時，白靈菇菌絲體中的活性成分含量顯著增加，其胞外多糖、胞內(nèi)多糖、總酚酸、總黃酮和總皂苷含量分別為對照的1.82倍、1.53倍、1.46倍、2.27倍和3.15倍。這些結(jié)果表明培養(yǎng)基質(zhì)中添加中藥材對深層發(fā)酵白靈菇活性物質(zhì)的含量具有提升效果。

近年來對深層發(fā)酵冬生多孔菌、海鮮菇、香菇、茶樹菇等食藥用菌的抗氧化活性的研究方興未艾[23-24]，也有學者研究了白靈菇多糖和子實體的抗氧化作用[11，25]，但中藥材尤其是黃芪對深層發(fā)酵白靈菇菌絲抗氧化活性的影響目前未見報道。本研究中試驗結(jié)果表明添加5 mg·mL-1黃芪水提物進行深層發(fā)酵后，白靈菇菌絲體的DPPH·清除率、·OH清除率、還原力和亞鐵離子螯合率最高分別達到對照菌絲體的1.47倍、1.26倍、1.67倍和1.42倍，說明黃芪水提物的添加可顯著提升白靈菇深層發(fā)酵菌絲體的抗氧化活性。

通過研究添加中藥材黃芪對白靈菇深層發(fā)酵菌絲體生長的促進作用，以及對活性成分含量和抗氧化活性的提升效果，可推動白靈菇這一食藥兩用珍稀真菌的研究和新產(chǎn)品研發(fā)。