藥物代謝產(chǎn)物結(jié)構(gòu)鑒定方法與實(shí)例

奚夢(mèng)婷

（泰州市第三人民醫(yī)院，江蘇 泰州，225300）

根據(jù)相關(guān)部門提供的數(shù)據(jù)，我國(guó)醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)獲得了長(zhǎng)足發(fā)展，2020 年，國(guó)內(nèi)醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)規(guī)模達(dá)到1450 億人民幣，同比增長(zhǎng)27.0%[1]?？焖侔l(fā)展的醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)，對(duì)于現(xiàn)有的國(guó)內(nèi)醫(yī)藥研發(fā)生產(chǎn)體系提出了更高的要求，越來越多的企業(yè)為了進(jìn)一步壓縮研發(fā)生產(chǎn)周期，降低藥品研發(fā)成本，充分吸收借鑒了過往經(jīng)驗(yàn)，利用藥物代謝產(chǎn)物結(jié)構(gòu)鑒定的路徑，以評(píng)估藥物性質(zhì)，實(shí)現(xiàn)新型藥品藥理性、毒性的精準(zhǔn)測(cè)定，為后續(xù)藥品研發(fā)、推廣等活動(dòng)的開展提供方向性引導(dǎo)。

1.藥物代謝產(chǎn)物鑒定的必要性

對(duì)藥物代謝產(chǎn)物鑒定必要性的梳理，有助于藥品生產(chǎn)企業(yè)、研發(fā)人員形成準(zhǔn)確的思路認(rèn)知，細(xì)化代謝產(chǎn)物鑒定的積極作用，通過思路的快速轉(zhuǎn)變，帶動(dòng)后續(xù)藥品代謝產(chǎn)物鑒定工作的有序開展。從過往經(jīng)驗(yàn)來看，藥物代謝產(chǎn)物具有藥理性、毒性以及藥物相互作用等特點(diǎn)，著眼于藥物代謝產(chǎn)物的特點(diǎn)，藥品研發(fā)過程中將其作為重要指標(biāo)，對(duì)新型藥品的臨床價(jià)值、安全性進(jìn)行測(cè)定[2]。藥物代謝產(chǎn)物鑒定作為藥品研發(fā)產(chǎn)業(yè)的重要組成部分，是提升藥物臨床成效的有效路徑。例如在藥品的研發(fā)環(huán)節(jié)，需要借助相應(yīng)的技術(shù)設(shè)備，對(duì)藥物代謝產(chǎn)物進(jìn)行全面的篩選，通過篩選及時(shí)確定代謝性質(zhì)達(dá)不到預(yù)期要求的化合物。在完善上述篩選工作后，借助相應(yīng)的技術(shù)手段，對(duì)化合物的結(jié)構(gòu)進(jìn)行必要的修飾，優(yōu)化結(jié)構(gòu)組成，以確保代謝化合物性狀的穩(wěn)定性。例如現(xiàn)階段，多數(shù)藥品研發(fā)企業(yè)，使用分子設(shè)計(jì)來規(guī)避反應(yīng)性代謝物的產(chǎn)生，從而實(shí)現(xiàn)了藥品副作用的有效控制，保證了藥品研發(fā)的有效性，在很大程度上，降低了藥品研發(fā)成本[3]。同時(shí)在藥品臨床開發(fā)階段，藥物代謝產(chǎn)物鑒定，可以確保藥品臨床安全性評(píng)估結(jié)果的精準(zhǔn)性，逐步形成完整的藥品臨床前期綜合評(píng)估機(jī)制，為后續(xù)臨床一期的藥物代謝物研究提供了便利。

2.藥物代謝產(chǎn)物結(jié)構(gòu)鑒定的主要方法

藥物代謝產(chǎn)物結(jié)構(gòu)鑒定涉及不同的技術(shù)內(nèi)容，為確保結(jié)構(gòu)鑒定的精準(zhǔn)性，在實(shí)際鑒定環(huán)節(jié)，應(yīng)當(dāng)在科學(xué)性原則、實(shí)用性原則的引導(dǎo)下，整合技術(shù)資源，確保藥物代謝產(chǎn)物結(jié)構(gòu)鑒定工作的有序開展，確保對(duì)代謝產(chǎn)物的識(shí)別、鑒定能力。經(jīng)過多年的實(shí)踐，藥物代謝產(chǎn)物結(jié)構(gòu)結(jié)構(gòu)鑒定方法容易完善，針對(duì)于不同的藥物類型，采取相應(yīng)的鑒定方法，以確保順利完成各項(xiàng)藥物代謝產(chǎn)物結(jié)構(gòu)鑒定的指標(biāo)、任務(wù)[4]。從技術(shù)層面來看，藥物代謝產(chǎn)物具有更強(qiáng)的親水性，因此在人體內(nèi)更容易被代謝消除，由于人體的特殊性，藥物代謝物產(chǎn)業(yè)的消除主要可以劃分為合成反應(yīng)以及非合成反應(yīng)兩大類，其中合成反應(yīng)主要以結(jié)合的方式進(jìn)行，非合成反應(yīng)主要以氧化、還原以及水解等方式進(jìn)行。因此藥物代謝產(chǎn)物在人體內(nèi)往往形成濃度較低、結(jié)構(gòu)多樣的化合物。同時(shí)藥物代謝產(chǎn)物作為化合物含有大量的蛋白質(zhì)、脂肪等，無形之中對(duì)正常的藥物代謝產(chǎn)物結(jié)構(gòu)鑒定產(chǎn)生了干擾，造成鑒定結(jié)果失真。針對(duì)于這種情況，綜合各類因素，現(xiàn)階段主要采取液相色譜-質(zhì)譜法對(duì)藥物代謝產(chǎn)物結(jié)構(gòu)進(jìn)行分離、檢測(cè)以及鑒定等工作，依托該檢測(cè)鑒定方法的高靈敏性、高選擇性，實(shí)現(xiàn)藥物代謝產(chǎn)物結(jié)構(gòu)的精準(zhǔn)鑒定，在確保鑒定有效性的同時(shí)，兼顧檢測(cè)周期，避免額外費(fèi)用的產(chǎn)生。

3.藥物代謝產(chǎn)物結(jié)構(gòu)鑒定實(shí)例

考慮到藥物代謝產(chǎn)物結(jié)構(gòu)鑒定涉及內(nèi)容較多，鑒定方法的操作難度較高，為確保鑒定工作成效，壓縮鑒定周期，減少藥物代謝產(chǎn)物結(jié)構(gòu)鑒定盲區(qū)，減少人為因素對(duì)于藥物代謝產(chǎn)物結(jié)構(gòu)鑒定結(jié)果的影響，應(yīng)當(dāng)總結(jié)過往經(jīng)驗(yàn)，實(shí)現(xiàn)應(yīng)用經(jīng)驗(yàn)的有效總結(jié)。

3.1 蝙蝠葛堿代謝物鑒定方法蝙蝠葛堿其本質(zhì)屬于一種生物堿，目前主要從山豆根中提出獲得。從分子結(jié)構(gòu)角度來看，蝙蝠葛堿具有雙芐基異喹啉結(jié)構(gòu)，對(duì)于喉嚨腫痛、扁桃體炎以及支氣管炎有著較強(qiáng)的治療作用。在對(duì)其進(jìn)行藥品代謝產(chǎn)物鑒定的過程中，藥品研發(fā)結(jié)構(gòu)針對(duì)于其進(jìn)入人體后產(chǎn)生的亞甲基醌中間體的特殊性，采取液相色譜-質(zhì)譜法進(jìn)行代謝產(chǎn)物的鑒定工作，在鑒定過程中，將蝙蝠葛堿作為多級(jí)質(zhì)譜，以此為基礎(chǔ)，按照相關(guān)的技術(shù)操作流程，進(jìn)行相應(yīng)的測(cè)定分析，從最終的檢測(cè)結(jié)果來看，在人體肝臟產(chǎn)生的體液中可以測(cè)算出一定分子量的藥物代謝物質(zhì)[5]。完成分子量測(cè)定后，工作人員將谷胱甘肽作為捕獲劑，對(duì)藥物代謝物質(zhì)進(jìn)行二次的分析，從最終的結(jié)果來看，肝臟內(nèi)獲取的藥物代謝物經(jīng)過捕獲劑以及核磁共振光譜的聯(lián)合作用，獲得4 種藥物代謝物，這種情況的出現(xiàn)充分說明代蝙蝠葛堿在進(jìn)入人體后，所產(chǎn)生的物質(zhì)，實(shí)現(xiàn)對(duì)藥物代謝結(jié)構(gòu)的全面認(rèn)知。除了利用液相色譜-質(zhì)譜法開展蝙蝠葛堿的測(cè)定之外，目前?？颂婺嵩谒幤反x物鑒定中，也使用了相關(guān)測(cè)定方法。

結(jié)語(yǔ)

藥物代謝產(chǎn)物結(jié)構(gòu)鑒定，對(duì)于藥品研發(fā)、推廣有著深遠(yuǎn)影響。為充分發(fā)揮藥品代謝產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)鑒定成效，研發(fā)人員需要在掌握藥物代謝產(chǎn)物結(jié)構(gòu)鑒定必要性的基礎(chǔ)上，明確鑒定技術(shù)的實(shí)踐方法，以確保鑒定工作的有序開展，更好地滿足現(xiàn)階段藥品研發(fā)等工作的開展要求。