妊娠期高血壓疾病早期腎損傷患者檢測血清胱抑素C及尿液腎損傷分子-1的臨床意義

張 赟 蘇家林 盧朝霞 謝淑琴 鄭九生▲

1.江西省婦幼保健院產(chǎn)科，江西南昌 330000；2.江西省婦幼保健院腫瘤科，江西南昌 330000

妊娠期高血壓疾病屬于妊娠期常見并發(fā)癥，嚴重影響孕產(chǎn)婦、圍生兒健康，同時也是令母嬰死亡的因素之一[1-2]。截止目前，臨床未查詢到頭發(fā)妊娠期高血壓疾病的病因，但隨病癥不斷發(fā)展，妊娠期高血壓疾病可能會損傷機體重要器官，其中腎損傷較為常見[3-4]。腎損傷臨床判別指標為尿微量蛋白與腎小球濾過率，但兩項數(shù)值的變化往往體現(xiàn)在較為嚴重的腎損傷之后，缺乏一定敏感性，因此不能對早期腎損傷進行評估[5-6]?；诖?，本研究旨在探討妊娠期高血壓疾病早期腎損傷產(chǎn)婦檢測血清胱抑素C（serun cystatin C，SCys C）、尿液腎損傷分子-1（renal injury molecule-1，KIM-1）的臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2017年1月至12月江西省婦幼保健院收治的30 例妊娠期高血壓疾病早期腎損傷產(chǎn)婦作為試驗組，選取同期30 例妊娠期高血壓疾病而無腎損的產(chǎn)婦作為對照組。試驗組產(chǎn)婦年齡22～37 歲，平均（29.5±4.0）歲；孕齡24～31 周，平均（27.5±3.0）周；孕次1～3 次，平均（2.5±0.3）次；單胎18 例，多胎12 例。對照組產(chǎn)婦年齡23～38 歲，平均（30.5±4.5）歲；孕齡25～32 周，平均（28.5±3.5）周；孕次1～3 次，平均（2.5±0.3）次；單胎19 例，多胎11 例。兩組產(chǎn)婦的年齡、孕齡、孕次等一般資料比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。本次研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會審核批準。納入標準：①處于妊娠期，孕周＞22 周；②意識清晰，溝通無阻礙；③24 h 尿蛋白定量水平增高；④產(chǎn)婦或家屬對本研究知曉并簽署知情同意書。排除標準：①同時參與另一研究者；②每日酗酒、抽煙者；③原發(fā)腎臟損傷者。

1.2 方法

實驗試劑與設(shè)備： 尿KIM-1 試劑盒、 血清CysC試劑盒，全自動生化分析儀（西門子ADVIA2400），紫外線分光光度儀（型號：UV2100）。

兩組產(chǎn)婦入院第2 天清晨采集尿液標本，離心分離處理后留取上層尿液，采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測KIM-1，步驟如下：取出試劑盒與尿標本，在酶標包被板上設(shè)置選取10 孔標準品孔，將標準品與稀釋液標準品加入孔內(nèi)； 將樣本稀釋液直接標記為標準濃度0.1 mg/L；加樣：選取空白孔與待測樣品孔，將50 ml樣品放入空白孔內(nèi)； 將50 ml 樣品稀釋液放置空白孔； 依次在另一側(cè)孔中放入40 ml 樣品稀釋液、10 ml待測樣；在酶標板孔底部置入樣品，期間盡量不去觸碰孔壁，輕晃混勻。酶標板經(jīng)版模加固封閉后，將其放入37℃保溫箱內(nèi)，時間為30 min；配備30 倍蒸餾水與30 倍濃縮洗滌液作為備用，將酶標板上板膜揭掉并將其甩干，在每孔內(nèi)徑洗滌后并注滿，連續(xù)洗滌5 次之后將其甩干；將50 ml 酶標試劑放入每孔內(nèi)，之后展開洗滌與溫育；以此經(jīng)50 ml 顯色劑A、50 ml 顯色劑B 加入每個孔內(nèi)，混勻輕震，避開室溫環(huán)境，顯色15 min；在每孔內(nèi)放置50 ml 終止液，此時藍色會立即轉(zhuǎn)化為黃色； 加入終止液15 min 后，利用酶標儀在450 mm 波長處測定每孔吸光度。

兩組產(chǎn)婦入院2 d 清晨空腹下抽取靜脈血，置于無菌管，室溫靜置10 min，2000 r/min，將血清離心分離，留取上清液，應(yīng)用乳膠增強免疫比濁法測定血清Cys C 濃度。

1.3 觀察指標及評價標準

比較兩組產(chǎn)婦的尿N-乙酰葡糖胺（N-acetylglucosamine，NAG）、24 h 尿蛋白定量、SCys C、KIM-1 水平及不良母嬰結(jié)局發(fā)生率。①觀察兩組腎功能相關(guān)指標，判定依據(jù)：尿NAG 正常值0.3～12 U/L；24 h 尿蛋白定量正常值＜150 mg；SCys C 正常值0.5～1.1 mg/L；KIM-1 正常值＜1 μmol/L；②不良母嬰結(jié)局包括胎兒生長受限、新生兒窒息、新生兒低血糖與呼吸窘迫。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 20.0 統(tǒng)計學(xué)軟件進行數(shù)據(jù)分析，計量資料用均數(shù)±標準差（±s）表示，兩組間比較采用t 檢驗；計數(shù)資料用率表示，兩組間比較采用χ2檢驗，以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組產(chǎn)婦腎功能指標的比較

試驗組產(chǎn)婦的尿NAG、24 h 尿蛋白定量、SCys C、KIM-1 均高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）（表1）。

表1 兩組產(chǎn)婦腎功能指標的比較（±s）

表1 兩組產(chǎn)婦腎功能指標的比較（±s）

組別 尿NAG（U/L）24 h 尿蛋白定量（mg）SCys C（mg/L）KIM-1（μmol/L）試驗組（n=30）對照組（n=30）t 值P 值8.91±1.24 1.72±0.35 30.565 0.000 272.08±26.88 118.13±15.39 27.223 0.000 7.05±1.02 0.86±0.12 33.012 0.000 3.26±0.44 0.86±0.13 28.651 0.000

2.2 兩組不良母嬰結(jié)局發(fā)生率的比較

試驗組的不良母嬰結(jié)局胎兒生長受限、新生兒窒息、 新生兒低血糖與呼吸窘迫發(fā)生率均高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）（表2）。

3 討論

通過文獻資料分析，妊娠期高血壓引起的腎損傷在孕產(chǎn)婦死亡原因中排在前三，由此可知，該疾病屬于孕產(chǎn)婦嚴重并發(fā)癥，同時在臨床產(chǎn)科中屬于重要研究課題之一[7-8]。該疾病發(fā)展過程中，產(chǎn)婦全身出現(xiàn)異常，即原本體內(nèi)正常小血管發(fā)生痙攣，繼而引發(fā)血管內(nèi)皮細胞損傷，嚴重時或疾病病程發(fā)展，會逐漸發(fā)生局部缺血，令其原有器官、系統(tǒng)血液灌流量降低[9]。血肌酐屬于人體肌肉代謝生成的小分子物質(zhì)，會經(jīng)腎小球過濾，隨尿液排出，因此臨床將該指標作為反應(yīng)腎小球過濾功能的標志之一。尿素氮主要是由腎臟排泄的蛋白質(zhì)分解產(chǎn)物，機體腎功能產(chǎn)生改變時，尿素氮正常排泄受到影響，其含量升高，因此臨床會采用兩項指標對早期腎損傷進行判斷。但因檢測數(shù)據(jù)結(jié)果靈敏度較低，加之該水平值結(jié)果易受到他類干擾因素，因此不能直觀地對早期腎損傷進行診斷，從而臨床需選取早期腎損傷標志物為疾病實施診斷與早期治療[10-11]。

尿NAG 臨床中屬于腎功能相關(guān)指標，可對腎臟進行監(jiān)測。該指標為早期腎臟損傷監(jiān)測指標之一，各種腎臟實質(zhì)性疾病引起的腎小管損害都有可能會導(dǎo)致尿NAG 升高。Cys C 屬于人體中的一種血清因子，即半胱氨酸蛋白酶抑制，其屬性可與體內(nèi)所有核細胞進行合成、分泌，因此穩(wěn)定生成速率較高[12]。該抑制劑體積、分量較小，因此在腎小球中可自由暢行，并順利留置原尿中，但該因子存在于原尿中時，臨近腎臟近曲小管會將其全部吸收，吸收后實施分離與分解，分解可成為小分子肽或是氨基酸。分離后的因子，腎臟近曲小管無法再次進行吸收與釋放[13-14]，故可將Cys C作為臨床上對腎小球濾過功能的理想內(nèi)源性物質(zhì)之一。KIM-1 最早發(fā)現(xiàn)是在1998年臨床動物實驗中，其本質(zhì)在臨床中屬于T 細胞免疫球蛋白黏膜結(jié)構(gòu)域1。有研究發(fā)現(xiàn)，KIM-1 的表達方式與其他細胞不同，或是不以任何表達形式，但當(dāng)機體受多類疾病損傷時，該指標會顯現(xiàn)與腎小管上皮細胞表面的表達中，即表達形式可為，水平值處于上升階段，且KIM-1 作為Ⅰ型跨膜糖蛋白時，其表達數(shù)據(jù)也只會在腎臟損傷時出現(xiàn)，故而臨床將其指標作為診斷早期腎小管損傷的標志物之一[15]。本研究結(jié)果顯示，試驗組產(chǎn)婦的尿NAG、24 h 尿蛋白定量、SCys C、KIM-1 均高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），提示Cys C、KIM-1 檢測可用于對妊娠期高血壓早期腎損傷產(chǎn)婦的早期篩查。

綜上所述，SCys C、UKIM-1 檢測對于妊娠期高血壓疾病早期腎損傷診斷具有一定價值。