Wnt/β-catenin 在卵巢癌發(fā)展機制中的研究

徐芳娣，高 軍

（1.贛南醫(yī)學(xué)院，江西 贛州 410028；2.南昌大學(xué)第三附屬醫(yī)院，江西 南昌 330000）

卵巢癌（ovarian cancer，OC）是婦科常見的惡性腫瘤之一，起病隱匿，其死亡率位列女性癌癥死亡原因第5 位[1]。卵巢癌患者早期常無癥狀，晚期表現(xiàn)為腹脹、腹部包塊、腹腔積液等癥狀，其主要治療方法為手術(shù)聯(lián)合化療法，但仍存在卵巢癌化療耐藥或復(fù)發(fā)等問題。體外研究表明[2]，shRNA 介導(dǎo)的β-catenin沉默可抑制卵巢癌A2780 細胞增殖和集落形成。β-catenin 是Wnt/β-catenin 信號通路中的關(guān)鍵樞紐，在多種人類疾病尤其是腫瘤的發(fā)生發(fā)展中起重要的調(diào)節(jié)作用。有研究發(fā)現(xiàn)[3]，在卵巢子宮內(nèi)膜樣癌中，β-catenin 和CDX2 單獨或聯(lián)合表達是卵巢癌患者有效的預(yù)后標志物。楊尊敬等[4]在卵巢漿液性癌組織Wnt/β-catenin 信號通路蛋白的研究中發(fā)現(xiàn)，患者Wnt/β-catenin 信號途徑蛋白WNT1、β-catenin表達量在Ⅰ～Ⅱ期上皮性卵巢漿液性癌患者中較高，F(xiàn)IGO 分期為Ⅲ～Ⅳ期與Wnt/β-catenin 信號通路密切相關(guān)。本文就Wnt/β-catenin 通路的激活過程及其與卵巢癌的關(guān)系作一綜述，以期為卵巢癌的防治提供參考。

1 Wnt/β-catenin 通路的激活過程

Wnt/β-catenin 信號通路由Wnt 配體觸發(fā)，而β-catenin 是此信號通路途徑的“中樞”，可以激活下游蛋白cyclin D1、c-Myc 等基因的表達，而這些蛋白具有負責(zé)細胞周期、增殖和存活的功能。當(dāng)Wnt信號未激活時，Wnt 配體不與卷曲蛋白（FZD）結(jié)合，使得駐留在細胞質(zhì)中的降解復(fù)合物[AXIN，APC，DVL，酪蛋白激酶1（CK1）和糖原合酶激酶（GSK-3β）] 結(jié)合并促進細胞質(zhì)中游離的β-catenin 蛋白的降解，其具體過程是CK1 和GSK-3β 使β-catenin磷酸化，磷酸化的β-catenin 靶向于（泛素連接酶蛋白）βTrCP 介導(dǎo)的泛素化，隨后蛋白酶體降解，此時在細胞核內(nèi)的轉(zhuǎn)錄阻遏物Groucho 與轉(zhuǎn)錄因子TCF結(jié)合并抑制其轉(zhuǎn)錄活性[5]。當(dāng)Wnt 信號激活時，存在Wnt 配體與FZD 和LRP5/6 的結(jié)合，并促進DVL 的募集以及促使降解復(fù)合物向膜的遷移，降低了降解復(fù)合物磷酸化并降解細胞質(zhì)中β-catenin 的能力[6]。因此，細胞質(zhì)中的β-catenin 積累并轉(zhuǎn)移到細胞核中，從而取代了Groucho 并與TCF 結(jié)合，與共激活因子一起啟動下游靶基因的轉(zhuǎn)錄[7]。Shen G 等[8]研究表明，Wnt3a/b-catenin/TCF7L2 信號軸可以降低卵巢癌對曲妥珠單抗的敏感性。因此，抑制Wnt/βcatenin 信號通路可以抑制卵巢腫瘤的生長和進展。

2 Wnt/β-catenin 信號通路與卵巢癌的關(guān)系

2.1 Wnt/β-catenin 信號通路與蛋白分子相互作用調(diào)節(jié)卵巢癌的發(fā)展 研究發(fā)現(xiàn)新的蛋白分子作用于Wnt/β-catenin 通路，控制卵巢癌的發(fā)展。Zhang H等[9]對SFRP1 基因轉(zhuǎn)染人OVCAR4 細胞進行研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)基因β-catenin、cyclin D1、c-Myc 的表達量明顯減少，它能抑制癌細胞的增殖和侵襲，提示SFRP1 可能通過Wnt/β-catenin 信號通路抑制卵巢癌細胞的發(fā)生。Wang Y 等[10]研究發(fā)現(xiàn)，R 型蛋白酪氨酸磷酸酶受體（PTPRR）通過去磷酸化使βcatenin 失活而抑制卵巢癌中Wnt/β-catenin 通路并在卵巢癌中發(fā)揮腫瘤抑制作用。Croce S 等[11]研究表明，與雌激素反應(yīng)過強的GREB1 融合轉(zhuǎn)錄本可導(dǎo)致原發(fā)和復(fù)發(fā)腫瘤中低磷酸化的核β-catenin 過表達，核β-連環(huán)蛋白的積聚導(dǎo)致Wnt/β-catenin 信號通路的激活。Liao YM 等[12]研究表明，子宮內(nèi)膜樣腺癌組織中SOX17 的表達下調(diào)，β-catenin 和cyclin D1 mRNA 的表達上調(diào)，且5-AZA 可以使SOX17 的表達上調(diào)，β-catenin 和cyclin D1 的表達下調(diào)，從而抑制卵巢癌的增殖及發(fā)展。以上蛋白分子均通過抑制Wnt/β-catenin 信號通路來控制卵巢癌的發(fā)展，其可能成為卵巢癌新的潛在治療靶點。

Dong P 等[13]研究發(fā)現(xiàn)，PCNP 與β-catenin 結(jié)合促進了β-catenin 核轉(zhuǎn)位，進而激活了Wnt/βcatenin 信號通路；且在shRNA-PCNP 介導(dǎo)的SKOV3 和A2780 細胞中，β-catenin、p-GSK 及Bcl-2、N-cadherin 表達下調(diào)，而E-cadherin 表達上調(diào)，揭示沉默PCNP 能介導(dǎo)卵巢癌細胞周期停滯，誘導(dǎo)其凋亡；與此同時，因PCNP 調(diào)控了卵巢癌EMT 相關(guān)基因N-cadherin、E-cadherin 的表達，進一步證明PCNP 可通過激活Wnt/β-catenin 途徑加劇卵巢癌的演變。楊宏毅[14]研究發(fā)現(xiàn)，TNKS1 的沉默使卵巢癌細胞AXIN 的表達上調(diào)，但是Snail、PC、CyclinD1、MDR、MMP－9 等Wnt/β-catenin 信號通路靶蛋白的表達下調(diào)，最終抑制卵巢癌細胞體外增殖、細胞集落形成、腫瘤發(fā)生，阻斷體內(nèi)細胞周期進程，降低卵巢癌細胞的生長和遷移能力，有效提高卵巢癌細胞對化療藥物的敏感性，提示TNKS1 激活Wnt/βcatenin 途徑促進卵巢癌的發(fā)生，成為卵巢癌遷移、侵襲干預(yù)的靶點以及潛在的預(yù)后標志因子。馮姍姍等[15]體外研究表明，賴氨酰氧化酶樣蛋白2（lysine oxidase-like protein 2，LOXL2）的沉默可抑制卵巢癌細胞的活性并誘導(dǎo)凋亡，其機制可能與LOXL2 抑制Wnt/β-catenin 信號途徑有關(guān)，揭示LOXL2 可作為干預(yù)卵巢癌增殖的靶點。Mehdi S 等[16]研究表明，LY75 被敲除后會抑制上皮性卵巢癌細胞SKOV3、OVCAR8 中N-cadherin、β-catenin 的表達，但能促進E-cadherin，Axin1 的表達，提示LY75 的表達與間充質(zhì)-上皮轉(zhuǎn)化相關(guān)基因的改變有關(guān)，表明沉默LY75 可以抑制上皮性卵巢癌細胞間充質(zhì)-上皮轉(zhuǎn)化。鄧琳[17]研究發(fā)現(xiàn)，卵巢癌組織環(huán)氧化酶2（cyclooxygenase-2，COX2）通過Wnt/β-catenin/EMT 途徑促進卵巢子宮內(nèi)膜異位癥惡變及卵巢透明細胞癌轉(zhuǎn)移。以上研究表明，其為正向調(diào)控Wnt/β-catenin通路的蛋白分子，它們可能是卵巢癌潛在預(yù)后標志物和治療靶點。

2.2 Wnt/β-catenin 信號通路與RNA 相互作用調(diào)節(jié)卵巢癌的發(fā)展 RNA 也可調(diào)控卵巢癌的發(fā)生、發(fā)展。Zhuang XH 等[18]體外實驗表明，沉默上皮性卵巢癌中長鏈非編RNAHOXB-AS3 可以使β-catenin、cyclin D1，c-Myc，N-cadherin 表達減少，E-cadherin 表達增加，抑制卵巢癌細胞的轉(zhuǎn)移，揭示長鏈非編RNAHOXB-AS3 可能成為卵巢癌患者轉(zhuǎn)移的預(yù)后判斷因子。Zhou Y 等[19]研究表明，過表達miR-133a-3p 可使卵巢癌細胞中的β-catenin、cyclin D1、Wnt3a、APC 基因的表達量減少，從而抑制卵巢癌細胞的增殖、遷移及侵襲，提示miR-133a-3p 也可以作為卵巢癌潛在的治療靶點及預(yù)后標志因子。Liu L等[20]研究證明，micR-6089 高表達可抑制SKOV3 細胞及OVCAR3 的增殖、遷移、侵襲，并抑制Wnt/βcatenin 信號通路的活性，所以micR-6089 可成為卵巢癌潛在預(yù)后標志物及治療靶點。Liu HR 等[21]研究表明，UL4B 基因是miR-217 的靶基因，其可以抑制該基因的表達，進而抑制Wnt/β-catenin 信號通路的激活，逆轉(zhuǎn)耐藥，抑制細胞侵襲和遷移，促進細胞凋亡，因此miR-217 可以為卵巢癌治療耐藥提供新希望。RNA 分子通過調(diào)控Wnt/β-catenin 信號通路抑制卵巢癌的增殖、遷移、侵襲及間質(zhì)轉(zhuǎn)化，增強卵巢癌細胞化療敏感性，其可能成為干預(yù)卵巢癌轉(zhuǎn)移的潛在靶點。

2.3 Wnt/β-catenin 信號通路與藥物相互作用調(diào)節(jié)卵巢癌的發(fā)展 陳茹等[22]研究表明，淫羊藿苷處理CAOV3 細胞后，細胞中β-catenin、cyclin D1，c-Myc的mRNA 水平下調(diào)，從而抑制CAOV3 細胞的增殖。另有研究表明[12]，經(jīng)5-AZA 處理的HEC1A 細胞中SOX17 的表達量上調(diào)，β-catenin，cyclin D1 的表達量下調(diào)，從而抑制子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生發(fā)展，因此5-AZA 也有望通過Wnt/β-catenin 信號通路抑制卵巢癌的增殖，為卵巢癌的治療提供新的方法。龔建明等[23]研究發(fā)現(xiàn)，羥基紅花黃色素A（hydroxysafflor yellow A，HSYA）可能通過促進menin 表達，導(dǎo)致βcatenin 降解，抑制下游癌基因MMP-7 和Survivin的表達，間接抑制卵巢癌細胞的遷移和侵襲，促進其凋亡。Mehdi S 等[16]研究發(fā)現(xiàn)，XAV939 通過下調(diào)LY75 負向調(diào)控上皮性卵巢中的β-catenin 及Ncadherin 的表達，抑制上皮性卵巢癌細胞的侵襲及上皮間質(zhì)化。Zhou B 等[24]研究發(fā)現(xiàn)，尼日利亞菌素與順鉑聯(lián)合治療可以進一步下調(diào)經(jīng)順鉑單一處理的卵巢癌細胞中的β-catenin、GSK-3β、Axin2、MMP7、Vimentin 的表達量，上調(diào)E-cadherin 蛋白表達，從而抑制卵巢癌的遷移和侵襲。

3 總結(jié)

卵巢癌早期發(fā)病隱匿，是女性生殖系統(tǒng)惡性腫瘤中死亡率最高的癌癥，卵巢癌細胞的增殖、凋亡、遷移、侵襲、耐藥等與Wnt/β-Catenin 途徑的異常激活有著密切聯(lián)系。此外，蛋白分子、RNA 分子及藥物阻斷Wnt/β-Catenin 途徑，可抑制卵巢癌的發(fā)展，可能成為干預(yù)卵巢癌轉(zhuǎn)移的潛在治療靶點。