進境鹵蟲卵檢疫監(jiān)管初探

李富文 王樹成 馬艷 陳磊

(天津出入境檢驗檢疫局 天津 300457)

1 前言

鹵蟲(Artemia)含有豐富的蛋白質(zhì)和動物所必須的高級不飽和脂肪酸，是水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的理想餌料［1］。據(jù)報道，當(dāng)今全球85%以上的水產(chǎn)養(yǎng)殖育苗均在使用鹵蟲。但鮮活鹵蟲不便儲存和運輸，而鹵蟲卵作為鹵蟲的休眠卵，容易儲存和流通，可以隨時隨地孵化，使用極為方便，長期以來鹵蟲卵在國際市場上供不應(yīng)求，我國每年都從國外大量進口鹵蟲卵，2010年我國進口鹵蟲卵約2000t。

鹵蟲卵作為一種動物源性飼料產(chǎn)品［2］，根據(jù)我國有關(guān)進出境動植物檢疫法律法規(guī)的規(guī)定［3－5］，在進境時應(yīng)當(dāng)實施檢疫。但是，目前人們對鹵蟲卵檢疫方面的研究剛剛起步，檢疫風(fēng)險尚不確定，也未形成一套完整的檢疫方法，給進境鹵蟲卵檢疫工作帶來一定困難。本文擬對鹵蟲卵的檢疫風(fēng)險進行初步分析，并對進境鹵蟲卵檢疫監(jiān)管作一初步探索。

2 概述

2.1 鹵蟲的生物學(xué)特性

鹵蟲，俗稱鹽水豐年蟲或豐年蟲，屬甲殼動物亞門(Crustacea)鰓足綱(Branchiopoda)無甲目(Anostaca)鹵蟲科(Artemidae)［6］，是生活在碳酸鹽和硫酸鹽鹽湖、鹽田等高鹽水域中的一種小型低等甲殼類動物，雌雄異體，雌大雄小。

鹵蟲的繁殖有兩種方式，春夏季節(jié)水域環(huán)境條件優(yōu)越穩(wěn)定時行孤雌生殖，產(chǎn)生夏卵，夏卵殼薄，無需受精，就能夠迅速發(fā)育成無節(jié)幼體，成為雌蟲。夏末秋初雨季以后，氣溫下降環(huán)境改變，雄體出現(xiàn)，雌雄交尾產(chǎn)生休眠卵(即鹵蟲卵)。在夏季，如遇環(huán)境條件突變，有時也會產(chǎn)生休眠卵。

2.2 鹵蟲資源及其分布

鹵蟲是一種廣溫耐高鹽生物，廣泛分布于鹽田和內(nèi)陸鹽湖?，F(xiàn)在發(fā)現(xiàn)除了南、北極外，亞洲、歐洲、美洲、大洋洲和非洲等地均有分布，全世界已報道的鹵蟲產(chǎn)地有55個國家共350多處。目前世界鹵蟲主要生產(chǎn)國有美國、中國、加拿大、阿根廷、哥倫比亞、巴西、澳大利亞、泰國、越南、伊朗和法國等國家和地區(qū)［7］。我國是鹵蟲資源非常豐富的國家［8，9］，但由于水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展，近年來我國大量進口鹵蟲卵，主要貿(mào)易國是美國和俄羅斯。

3 檢疫風(fēng)險識別

近年來，隨著水生動物疫病尤其是對蝦疾病的暴發(fā)，國內(nèi)外學(xué)者已開始關(guān)注鹵蟲能否作為水生動物病原體的傳播媒介，并開展了許多研究工作。因此，有必要開展鹵蟲攜帶動物病原體風(fēng)險分析，并據(jù)此制定相應(yīng)的檢疫項目，嚴(yán)防相關(guān)疫病傳入，保護我國水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的可持續(xù)健康發(fā)展。

3.1 病毒

3.1.1 研究進展

3.1.1.1 白斑綜合征病毒(white spot syndrome virus，WSSV)

目前，鹵蟲能否傳播WSSV尚有爭議。在對WSSV傳播途徑及宿主調(diào)查中，國內(nèi)資料顯示有鹵蟲WSSV陽性檢測的報道，也有未檢出的報道。

黃健等［10］應(yīng)用單克隆抗體ELISA在鹵蟲中檢出WSSV。史成銀等［11］用PCR－核酸探針斑點雜交在鹵蟲無節(jié)幼體和浮游生物樣品中檢測出WSSV。宋曉玲等［12］采用DNA斑點雜交法對對蝦餌料和環(huán)境生物樣品進行WSSV的檢測，結(jié)果表明對蝦主要餌料及環(huán)境生物類群包括魚類、蝦類、蟹類、橈足類、端足類、沙蠶、鹵蟲均可檢出WSSV，其中小型蝦類、端足類、橈足類、蟹類樣品的WSSV檢出率均高于20%，鹵蟲檢出率為 13.3%。鄧燈等［13］利用PCR從鹵蟲體內(nèi)擴增出WSSV特異性片段，鄧燈認(rèn)為，雖其攜帶量較少，在苗種培育期和養(yǎng)殖期使用攜帶WSSV的鹵蟲，可能導(dǎo)致對蝦感染W(wǎng)SSV。為了進一步證明鹵蟲攜帶的WSSV是否有活性且能否傳播給對蝦，鄧燈［14］等對鹵蟲進行WSSV投喂(浸泡)感染，然后用攻毒后的鹵蟲投喂中國明對蝦，結(jié)果表明，鹵蟲可以攜帶有活性的WSSV病毒粒子，并可通過攝食導(dǎo)致對蝦間接地攜帶病毒，但病毒感染能力有限。

雷質(zhì)文等［15］用浸浴法感染鹵蟲，原位雜交未在其體內(nèi)檢出WSSV，用核酸探針斑點雜交在鹵蟲無節(jié)幼體和浮游生物樣品中也未檢測出WSSV。

3.1.1.2 傳染性皮下和造血器官壞死病毒(Infectious hypodermal and hematopoietic necrosis virus，IHHNV)

史成銀等［16］應(yīng)用 PCR和 RT－PCR技術(shù)對WSSV和IHHNV等多種對蝦病毒進行檢測，在多個鹵蟲樣品中這些病毒均未能檢出;但史成銀認(rèn)為，不能就此認(rèn)為自然界中鹵蟲不能攜帶、傳播這些病毒，需要更多的調(diào)查和進一步研究。

3.1.1.3 魚類病毒性神經(jīng)壞死病病毒(Viral nervous necrosis virus，VNNV)和傳染性胰臟壞死病病毒(Infectious Pancreatic Necrosis virus，IPNV)

Skliris等［17］報道，作為仔魚餌料的輪蟲和鹵蟲對VNNV不敏感，認(rèn)為餌料不是病毒傳染源;然而Chi等［18］用RT－PCR檢測這兩種餌料時，其結(jié)果呈陽性。Mortensen等［19］在對養(yǎng)殖挪威大菱鲆 IPNV的相關(guān)性研究中發(fā)現(xiàn)，養(yǎng)殖場周圍的鹵蟲中檢出IPNV。

3.1.2 風(fēng)險識別

3.1.2.1 WSSV 和 IHHNV

WSSV和IHHNV是OIE規(guī)定甲殼類水生動物法定通報性疾病(OIE listed diseases 2011)。盡管鹵蟲攜帶WSSV和IHHNV還有爭議，但已有檢出報道。1999年當(dāng)WSSV蔓延到拉丁美洲時，巴西立即對進口鮮活冷凍甲殼類動物(包括鹵蟲)和多毛類環(huán)節(jié)動物關(guān)閉其邊境，迄今巴西一直沒有發(fā)生WSSV。

鹵蟲與蝦、蟹類同屬甲殼動物，《進境水生動物檢驗檢疫管理辦法》［20］中明確了甲殼類動物的3個檢測項目(濤拉綜合征、白斑綜合征、黃頭病);世界動物衛(wèi)生組織(OIE)《水生動物疾病診斷手冊》［21］中提出了與鹵蟲(卵)相關(guān)的疫病僅有白斑綜合征。

根據(jù)SPS協(xié)議的相關(guān)規(guī)定，可對進境鹵蟲卵進行WSSV檢測。此外，為防控IHHNV，可對IHHNV實施監(jiān)測。

3.1.2.2 VNNV 和 IPNV

VNNV和IPNV是魚類重要的傳染病，鹵蟲等生物餌料是否為VNNV和IPNV的天然宿主，或者是受到VNNV和IPNV的污染，這些問題還須進一步研究。為了控制傳入風(fēng)險，建議對進境鹵蟲進行VNNV和IPNV的監(jiān)測。

3.2 細(xì)菌

3.2.1 研究進展

王傳斌等［22］利用進口鹵蟲卵進行檢測，結(jié)果沙門氏菌、弧菌、真菌和聚縮蟲等均未檢出，分離出5株細(xì)菌，分別為假單胞菌屬和腸桿菌科細(xì)菌，且均為非致病菌。翟銀成等［23］對加工鹵蟲卵和毛料鹵蟲卵中沙門氏病原菌進行分離與鑒定，確定鹵蟲卵攜帶沙門氏菌病原菌，并探討了沙門氏菌在不同鹽分和pH值蛋白胨中的增菌效果，以及沙門氏菌在不同鹽分和水分的冷藏鹵蟲卵中的存活規(guī)律。Bergh等［24］已發(fā)現(xiàn)鹵蟲是鰻弧菌(Vibrio anguillarum)的傳播載體。

3.2.2 風(fēng)險識別

3.2.2.1 沙門氏菌

由于沙門氏菌在自然界廣泛存在，且對動物的健康具有很大的威脅，故在衛(wèi)生安全檢測要求中，世界各國普遍規(guī)定食品和飼料中不得檢出沙門氏菌。我國《飼料衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》(GB13078)也規(guī)定，飼料中不得檢出沙門氏菌。

但目前從國外進口的鹵蟲卵既有已經(jīng)國外加工廠深加工、可直接投放市場的，也有僅經(jīng)過清洗、去雜等簡單加工、入境后需要在我國進行再次加工的，并且簡單加工的鹵蟲卵占進口量的絕大多數(shù)。

因此，對已深加工的鹵蟲卵進行沙門氏菌的檢測是鹵蟲動物性飼料使用安全的重要保障;對簡單加工的需要對國內(nèi)的加工場所加強檢疫監(jiān)管，杜絕沙門氏菌污染。

3.2.2.2 鰻弧菌

有關(guān)魚類弧菌病的記錄最早見于16世紀(jì)的意大利，當(dāng)時稱其為紅癤病、赤瘟病或海水癤瘡病。迄今為止，已命名的弧菌病原有37種，其中致病性的有10多種，最常見的是鰻弧菌。已有研究表明鹵蟲是鰻弧菌的傳播載體。建議對進境鹵蟲卵進行鰻弧菌檢測。

3.3 寄生蟲

3.3.1 研究進展

長期以來，鹵蟲卵被認(rèn)為是聚縮蟲傳播的重要途徑［25］。眾所周知，鹵蟲卵及其無節(jié)幼體在水產(chǎn)養(yǎng)殖中是很好的開口餌料，由于鹵蟲無節(jié)幼體與鹵蟲卵殼很難分離開，故在投喂鹵蟲無節(jié)幼體時往往帶有大量鹵蟲卵殼，而鹵蟲卵殼恰好又是聚縮蟲很好的附著基。

3.3.2 風(fēng)險識別

聚縮蟲是一種寄生蟲，在水產(chǎn)養(yǎng)殖中流行較為普遍，并且傳播途徑較多，對于水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的危害較大。鹵蟲卵是攜帶聚縮蟲的重要媒介物，應(yīng)該把聚縮蟲做為鹵蟲卵的重點檢疫對象，加強和提高對聚縮蟲檢疫的靈敏度，堅決杜絕聚縮蟲通過鹵蟲卵而傳入或傳出，防止聚縮蟲病的發(fā)生和流行。

4 檢疫監(jiān)管方式探討

目前，國內(nèi)對于鹵蟲卵的檢驗方法已有行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，是國家質(zhì)檢總局頒布的《進出口鹵蟲卵檢驗方法》(SN/T0476－95)。但是對于鹵蟲卵的檢疫，我國目前無專門的檢疫程序，國外也鮮有鹵蟲檢疫的報道。鹵蟲卵兼有動物和動物產(chǎn)品的檢疫屬性，既要按動物產(chǎn)品檢疫，又要參照隔離檢疫的方法對其進行加工監(jiān)管［26］。結(jié)合我國有關(guān)進口動物產(chǎn)品及水生動物的檢疫規(guī)定，在檢疫中擬提出如下檢疫監(jiān)管方式，以供參考。

4.1 注冊登記

已經(jīng)國外加工廠深加工、可直接投放市場的鹵蟲卵，重點要求鹵蟲卵須來自國外官方主管機構(gòu)注冊登記的加工廠;僅經(jīng)過清洗、去雜等簡單加工、入境后需要在我國進行再次加工的，建議對鹵蟲卵的捕撈區(qū)域進行注冊登記。

4.2 檢疫審批

貨主在簽訂進口鹵蟲卵合同之前，應(yīng)按規(guī)定辦理檢疫審批手續(xù)。檢驗檢疫機構(gòu)主要審查審查是否來自我國允許進口的國家或地區(qū)以及注冊加工廠或捕撈區(qū)域，并提出入境后的檢疫監(jiān)管要求。

4.3 口岸查驗

鹵蟲卵進境前或進境時，貨主或其代理人應(yīng)向入境口岸檢驗檢疫機關(guān)報檢。報檢時應(yīng)當(dāng)提供原產(chǎn)地證書、貿(mào)易合同、信用證、提單、發(fā)票、《中華人民共和國進境動植物檢疫許可證》以及輸出國或地區(qū)檢疫證書。檢疫人員實施現(xiàn)場查驗，包括核對單證、外包裝消毒和檢查包裝等。

對進口已經(jīng)國外加工廠深加工、可直接投放市場的鹵蟲卵，根據(jù)有關(guān)規(guī)定采取樣品，送實驗室檢測。經(jīng)檢驗檢疫合格的，準(zhǔn)予銷售、使用;對進口經(jīng)簡單加工的鹵蟲卵，現(xiàn)場查驗合格后原包裝運抵《中華人民共和國進境動植物檢疫許可證》規(guī)定的隔離、加工場所。

4.4 實驗室檢測

4.4.1 檢測項目

WSSV、沙門氏菌(已經(jīng)國外深加工的鹵蟲卵)、鰻弧菌和聚縮蟲。

4.4.2 監(jiān)測項目

IHHNV、VNNV和 IPNV。

4.5 后續(xù)監(jiān)管

根據(jù)飼料《關(guān)于發(fā)布進出口飼料和飼料添加劑風(fēng)險級別及檢驗檢疫監(jiān)管方式的公告》［26］，鹵蟲卵可歸為餌料用活動物，風(fēng)險等級I級，需要對進口后的隔離、加工場所實施檢疫監(jiān)督。因此，運抵《中華人民共和國進境動植物檢疫許可證》規(guī)定的加工場所的鹵蟲卵，由目的地檢驗檢疫局抽取樣品進行實驗室檢測，并負(fù)責(zé)后續(xù)監(jiān)管。

另外，一旦在在鹵蟲卵中檢出聚縮蟲，也應(yīng)做好進境鹵蟲卵的后續(xù)監(jiān)管，加強消毒處理［25］，可采用50mg/L的漂白粉溶液浸泡30min至1 h，殺死蟲體后，再進行鹵蟲卵的孵化。有人還提出更為徹底的消毒處理方法，就是待無節(jié)幼體孵出后，再加熱到50℃ －60℃，燙死卵殼上的聚縮蟲后，再作為水產(chǎn)養(yǎng)殖的餌料。

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