規(guī)?；i養(yǎng)殖場豬偽狂犬病的流行特點和凈化措施

霍瑋 林森馨 陳發(fā)明 呂殿紅 陳飛 陳明望 李天宇 溫肖會

doi：10.3969/j.issn.1008-4754.2021.11.006

摘要：豬偽狂犬病是由偽狂犬病毒引起豬感染的一種急性動物傳染病。被感染豬多以發(fā)熱、奇癢和腦脊髓炎癥為主要臨床特征，其中仔豬神經(jīng)癥狀較為明顯，病死率可達100%。近年來，隨著非洲豬瘟疫情蔓延，規(guī)?；i養(yǎng)殖場生物安全防控逐步升級，但部分中小規(guī)模養(yǎng)殖場仍存在生物安全意識不強、免疫效果不佳以及引種檢疫不規(guī)范等因素，導(dǎo)致豬偽狂犬病持續(xù)保持較高的野毒感染率，給養(yǎng)豬行業(yè)帶來了巨大的經(jīng)濟損失。本文將對豬偽狂犬病的病原特點、流行情況及規(guī)?；B(yǎng)殖場豬偽狂犬病的凈化措施等研究進展進行綜述，為該病的有效防控和凈化提供參考。

關(guān)鍵詞：豬偽狂犬病;流行;防控;凈化

1 偽狂犬病毒（pseudorabies virus，PRV）的生物學(xué)特性

1.1 PRV的形態(tài)學(xué)和理化特點

PRV屬于皰疹病毒科，皰疹病毒亞科，α-皰疹病毒屬，病毒粒子呈圓形，直徑約為150～180nm，最外層有囊膜包裹，囊膜表面有呈放射性狀緊密排列的纖突。PRV的基因組為線性DNA雙鏈結(jié)構(gòu)，長度為150kbp，在低溫或潮濕環(huán)境下抵抗力較強，pH 6～8時可長期存活。在干燥或高溫環(huán)境下，特別是處于光照條件下易失活，對有機溶劑較為敏感。

1.2 PRV的基因組和編碼蛋白

PRV基因組由長區(qū)段、短區(qū)段、末端重復(fù)序列和內(nèi)部重復(fù)序列組成。PRV含有70個基因片段，編碼約100種病毒蛋白，有11種（gB、gC、gD、gE、gG、gH、gI、gK、gL、gM和gN）偽狂犬病毒糖蛋白被成功破譯并被定位于對應(yīng)的囊膜上，如圖1所示。PRV根據(jù)編碼糖蛋白是否是病毒復(fù)制所必需，分為必需糖蛋白和非必需糖蛋白。gE糖蛋白由US8基因編碼，其中位于第125位纈氨酸和第126位半胱氨酸對PRV的生物學(xué)功能具有重要作用。PRV對神經(jīng)系統(tǒng)的影響與gI和gE糖蛋白密切相關(guān)，gI和gE糖蛋白通過形成異源二聚體復(fù)合物，存在于感染細胞膜和病毒包膜中，參與PRV對神經(jīng)系統(tǒng)的侵襲及其傳播過程。

2 豬偽狂犬病的流行病學(xué)特點

2.1 傳染源

豬是自然宿主，而其他動物，如牛、綿羊、狗、貓、山羊和兔，也可能受到感染。該病主要傳染源是隱性感染PRV的豬和體內(nèi)帶毒的鼠。其中，被感染豬可表現(xiàn)為長期帶毒排毒，帶毒豬的口鼻分泌物、尿道和生殖道分泌物和乳汁中的病毒均可排出體外，且排毒時間可持續(xù)1年。

2.2 傳播途徑

PRV可通過動物呼吸道黏膜、消化道或損傷的皮膚等多種途徑傳播。其中，以直接接觸性傳播較為常見，由帶毒豬通過直接接觸感染易感豬，易感豬還可通過接觸到帶毒豬的排泄物感染豬偽狂犬病。此外，PRV可在空氣中傳播數(shù)公里，且在低溫潮濕的環(huán)境中，PRV的毒力更強。

帶毒妊娠母豬可經(jīng)胎盤感染胎兒，造成新生仔豬發(fā)病，其窩發(fā)病率為100%，15日齡仔豬發(fā)病死亡率為100%。

由于受到帶毒豬的污染，養(yǎng)殖場內(nèi)工作人員和場內(nèi)器具常作為間接病毒攜帶載體，在場內(nèi)進行病毒傳播。

2.3 季節(jié)性和流行性

豬偽狂犬病一年四季均可發(fā)病，以寒冷潮濕的春、冬季尤為多發(fā)，產(chǎn)仔旺季多發(fā)。根據(jù)其傳播特點，常呈現(xiàn)散發(fā)性和地方流行性。

3 豬偽狂犬病的臨床表現(xiàn)

3.1 新生仔豬感染PRV臨床癥狀

新生仔豬主要表現(xiàn)為高熱不退，可高達41℃，精神萎靡，并伴有嘔吐和腹瀉^[2]。發(fā)病后第一天，神經(jīng)癥狀比較明顯，表現(xiàn)為肌肉抽搐、震顫、麻痹繼而出現(xiàn)共濟失調(diào)，呈劈叉姿勢，四肢劃動，口吐白沫，最終因呼吸困難引起昏迷直至死亡，新生仔豬死亡率可達100%。

3.2 斷奶仔豬感染PRV臨床癥狀

感染PRV的斷奶仔豬通常表現(xiàn)為神經(jīng)抽搐、嘔吐、腹瀉或頭頸歪斜，發(fā)病率通常為20%～40%，死亡率低于20%。如果受到胸膜肺炎放線菌和巴氏桿菌等細菌的繼發(fā)感染，通常會造成斷奶仔豬死亡。

3.3 母豬感染PRV臨床癥狀

妊娠母豬感染PRV后常發(fā)生流產(chǎn)、產(chǎn)木乃伊胎或產(chǎn)死胎。后備母豬感染PRV后通常也表現(xiàn)為神經(jīng)癥狀、厭食、驚厥、視覺消失或眼部炎癥等癥狀。此外，后備母豬還表現(xiàn)為不發(fā)情、配不上種，反復(fù)配種多次均無法配上，而延誤配種期。

3.4 生長肥育感染PRV臨床癥狀

生長肥育豬感染PRV后臨床上表現(xiàn)為精神萎靡、體溫升高、食欲減退或廢絕、增重減慢，并出現(xiàn)不同程度的呼吸道癥狀，如呼吸減弱、打噴嚏或咳嗽。

4 豬偽狂犬病的診斷

4.1 病毒分離與電鏡鑒別

PRV分離鑒定是診斷豬偽狂犬病的黃金標準?？捎帽茄适米印⑿怪城皇米踊蚪M織病料（如腦、心、肝、脾、肺、腎或扁桃體等器官）接種敏感細胞，在接種后72h內(nèi)可觀察細胞生長情況，若無細胞病變，可繼續(xù)盲傳分離病毒，并進一步在電鏡下觀察其形態(tài)繼而判定病毒種類^[3]，但是因所用儀器設(shè)備價格昂貴，操作人員需要經(jīng)過專業(yè)培訓(xùn)、操作步驟復(fù)雜且難度大等缺點，因此在臨床中運用較少。

4.2 PCR檢測診斷

早在1989年，國外學(xué)者Belak S等就成功建立PRV的PCR檢測方法。通常采集動物的分泌物或組織病料進行PRV基因擴增（PCR技術(shù)），以此來判斷患病動物的感染情況。相比較于病毒分離鑒定，PCR技術(shù)具有快速、敏感性高、特異性好、費用較省和樣品通量大等特點。

4.3 血清學(xué)檢測診斷

血清學(xué)診斷是豬偽狂犬病診斷中最常見方法之一，包括中和試驗、酶聯(lián)免疫吸附試驗和乳膠凝集試驗、膠體金免疫層析技術(shù)等。其中，微量血清中和試驗的特異性和敏感性最好，但由于技術(shù)條件要求高、試驗耗時長，常不被采用。因酶聯(lián)免疫吸附試驗快速、簡便，故常選為實驗室血清學(xué)檢測的重要手段，適用于較大樣品量的檢測。乳膠凝集試驗因其操作簡單、耗時最短，如今也被應(yīng)用在豬偽狂犬病的臨床診斷中^[4]。膠體金免疫層析技術(shù)因具有較好的敏感性，且成本低、操作簡單、檢測下限低、快速等優(yōu)點，臨床上常用于血液、唾液、尿液等樣品的檢測^[5]。

5 國內(nèi)外豬偽狂犬病凈化策略

5.1 法國關(guān)于豬偽狂犬病凈化策略

上世紀90年代，法國開始實施豬偽狂犬病凈化制度。首先，完備豬群檔案，限制豬群流動;其次，針對不同地區(qū)，采用不同凈化策略;最后，禁止使用疫苗。一旦發(fā)生感染，采取3種措施：①撲殺;②部分撲殺;③接種疫苗。經(jīng)過近10年的嚴格執(zhí)行凈化制度，基本上達到無豬偽狂犬病的標準。

5.2 美國豬偽狂犬病凈化策略

針對豬偽狂犬病，美國的凈化措施分五個階段實施：①制定豬偽狂犬病凈化方案;②進行大范圍的抗體普查，對陽性個體進行控制;③對感染豬偽狂犬病并確診的豬進行撲殺;④嚴密監(jiān)控，做好檢測，嚴禁接種疫苗;⑤制定實施15年無豬偽狂犬病規(guī)劃，堅持做到陽性撲殺、禁用疫苗的長期階段。最終，美國在2003年正式宣布成功凈化豬偽狂犬病。

5.3 中國現(xiàn)階段豬偽狂犬病凈化策略

①加強免疫接種并建立完善的免疫程序以控制種豬及仔豬的發(fā)病率;②對陽性感染豬進行撲殺并做好無害化處理，淘汰產(chǎn)有豬偽狂犬病仔豬的母豬;③建立無豬偽狂犬病毒感染的健康豬群并做到全進全出的飼養(yǎng)模式;④建立嚴格的衛(wèi)生消毒制度和人員出入場管理制度;⑤嚴格種豬引種檢疫，做好隔離篩查工作。

6 豬偽狂犬病的防控措施

6.1 合理制定免疫接種程序

1） 豬偽狂犬疫苗種類 豬偽狂犬疫苗可以分為三類，即豬偽狂犬滅活疫苗、豬偽狂犬減毒活疫苗和豬偽狂犬基因缺失苗^[6]。

豬偽狂犬滅活疫苗安全性較好，不但不會向外界環(huán)境排毒，并且注射該疫苗后，毒力幾乎不會返強，減少隱性感染的可能性;此外，滅活疫苗的免疫原性較好，能有效提高母豬的特異性抗體水平，使仔豬一出生便獲得較高的母源抗體，抵抗PRV的感染。但由于其免疫效力差、需要多次免疫、作用時間短和成本較高等因素，生產(chǎn)應(yīng)用選擇性較低。

減毒活疫苗具有免疫效果好，免疫作用時間長等特點，但生物安全性較差，易出現(xiàn)毒力返強的現(xiàn)象，在豬偽狂犬野毒抗體檢測中常難于與野毒感染區(qū)分。

豬偽狂犬基因缺失疫苗同時具有免疫效力強、作用時間長和生物安全性強等優(yōu)勢，并利用檢測標記蛋白抗體的方法，將疫苗免疫株與野毒感染株進行區(qū)分，此方法已在豬養(yǎng)殖業(yè)中被普遍推廣。

2） 仔豬的免疫接種程序 新生仔豬可考慮在出生后3日齡內(nèi)采用滴鼻法或噴霧法注入基因缺失疫苗0.5頭份，在30日齡時采用肌注法免疫gE基因缺失疫苗1頭份，而后在70日齡時再進行肌肉注射gE基因缺失疫苗1頭份。

3） 母豬的免疫接種程序 后備母豬通常采用配種前接種基因缺失疫苗，繁殖母豬則采用跟胎免疫，安排在產(chǎn)前20～40d或在配種后75～95d進行基因缺失疫苗的免疫接種。針對疫情較為嚴重的養(yǎng)殖場，可接種基因缺失疫苗，每年免疫3～4次。

6.2 嚴格做好種豬引種檢疫

豬養(yǎng)殖場需建立嚴格的引種制度，爭取做到自繁自養(yǎng)。若必要引種，應(yīng)堅持做好引種前的豬偽狂犬病各項病原學(xué)檢測，檢測結(jié)果為陰性的種豬方可引種^[7];但對購買的種豬要實行2個月隔離養(yǎng)殖，在隔離期間無疫病發(fā)生方可與其他豬群混養(yǎng)。

6.3 強化飼養(yǎng)管理，定期淘汰陽性豬

豬養(yǎng)殖場應(yīng)建立人員進出管理制度，封閉化管理養(yǎng)殖場。除場內(nèi)工作人員外，嚴禁其他人隨意進出養(yǎng)殖區(qū)域。工作人員進入養(yǎng)殖廠區(qū)前需更換工作服并做好自身消毒工作。在飼養(yǎng)方面，應(yīng)實行早期斷奶、全進全出的飼養(yǎng)方法。并定期進行防疫檢測，對檢測結(jié)果陽性豬和發(fā)病豬，要控制移動并將其早期隔離進行治療^[8]。同時，對其他陰性豬群采用緊急免疫接種，并加強飼養(yǎng)管理，做好對易感動物的免疫保護。逐步在養(yǎng)殖場中實現(xiàn)用陰性種豬替代陽性個體，定期檢測淘汰野毒抗體陽性的種豬，為豬偽狂犬病的養(yǎng)殖場凈化打下基礎(chǔ)。

6.4 加強養(yǎng)殖場內(nèi)消毒滅源工作

建立養(yǎng)殖場內(nèi)消毒工作制度，對場內(nèi)進行嚴格消毒。當檢測出陽性個體或發(fā)生疫病時，隔離或撲殺陽性豬，并加強對圈舍、食槽、飲水器和各個通道的消毒工作。針對病死豬，及時進行無害化處理，對其接觸過的器具進行消毒，切實做到消滅傳染源和切斷傳播途徑^[9]。此外，由于鼠是豬偽狂犬病毒的主要攜帶者，豬易食用被鼠污染的飼料而患病，因而應(yīng)當加強養(yǎng)殖場內(nèi)的滅鼠工作。

參考文獻：

[1] Pomeranz Lisa E， Reynolds Ashley E， Hengartner Christoph J. Molecular biology of pseudorabies virus： impact on neurovirology and veterinary medicine[J]. Microbiology and molecular biology reviews ： MMBR，2005，69（3）：462-500.

[2] 江濤.豬偽狂犬病的流行病學(xué)、臨床癥狀、診斷與防控措施[J].現(xiàn)代畜牧科技，2021（4）：102-103.

[3] 彭金美，安同慶，趙鴻遠.豬偽狂犬病病毒新流行株的分離鑒定及抗原差異性分析[J].中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報，2013，35（1）：l-4.

[4] 馬玉玲，陶軍，殷方芝.豬偽狂犬病野毒感染檢測的意義[J].上海畜牧獸醫(yī)通訊，2010（6）：65.

[5] 牛穎穎.宿主蛋白GBP1在豬偽狂犬病病毒感染過程中的作用[D].西北農(nóng)林科技大學(xué)，2020.

[6] Xu Shaolan， Zhang Ganggang， Fang Bolong， et al. Lateral Flow Immunoassay Based on Polydopamine-Coated Gold Nanoparticles for the Sensitive Detection of Zearalenone in Maize[J]. ACS applied materials & interfaces，2019，11（34）：31283-31290.

[7] 王榮湖，楊建斌.豬偽狂犬病的綜合防治[J].中國畜牧獸醫(yī)，2009 （3）：204-205.

[8] 李紀平，邵世義，朱海明，等.偽狂犬病高感染率豬群控制措施[J].當代畜牧，2005（12）：18-19.

[9] 劉孝剛，于金玲，吳寶君.豬偽狂犬病的病理學(xué)診斷與防治[J].中國獸醫(yī)雜志，2006，42（3）：22-23.

基金項目：廣東省重點研發(fā)項目（2019B020217002）;中山市社會公益科技研究項目基金（2018B1012）。

作者簡介：溫肖會（1982— ），女，副研究員，主要從事動物傳染病研究工作，E-mail：wenxiaohui@gdaas.cn;李天宇（1986— ），碩士，主要從事動物疫病防控和凈化研究，E-mail：lipai513@163.com。

*通訊作者。