豬偽狂犬病病毒研究進展

韓超逸，湯德元，楊志剛，晏仁潭，羅柳，陳閶崢

（貴州大學(xué)動物科學(xué)學(xué)院，貴州貴陽550025）

豬偽狂犬病（Porcine pseudorabies,PR）是由豬偽狂犬病病毒（Pseudorabies virus,PRV）所引起的一種急性傳染病。PRV感染不同年齡的豬臨床癥狀不同，仔豬出現(xiàn)高熱、腹瀉、鳴叫，四肢劃水樣姿勢等精神癥狀，死亡率較高；公豬表現(xiàn)為睪丸炎，精液品質(zhì)下降；成年豬及育肥豬初期有高熱、呼吸困難癥狀耐過后通常呈隱性感染；懷孕母豬發(fā)生流產(chǎn)、產(chǎn)死胎，木乃伊胎；豬偽狂犬病是OIE通報疫病，該病自上個世紀八十年代發(fā)現(xiàn)至今，一直是全球范圍內(nèi)豬的重要傳播疫病。

1 病原學(xué)概述

1.1 病毒結(jié)構(gòu)

PRV屬于皰疹病毒科，α-皰疹病毒亞科，線性DNA雙股病毒。病毒粒子呈圓形或橢圓形，由核心、二十面體核衣殼、囊膜構(gòu)成，囊膜表面有呈放射狀排列的纖突長約8～10納米。PRV基因組大小約為150 kb,編碼70～100種病毒蛋白，主要包括衣殼蛋白、囊膜糖蛋白以及各種酶。病毒粒子直徑約為110～150納米,位于胞漿內(nèi)帶囊膜的病毒粒子直徑為150～180納米，帶囊膜的完整病毒粒子直徑為180納米。PRV只有一個血清型但不同毒株之間毒力有所差異。

2 流行病學(xué)

豬偽狂犬病發(fā)病無明顯季節(jié)性但以春冬較為寒冷的季節(jié)多發(fā)，PRV可感染多種動物如牛、羊、犬、貓、鼠等，但豬是其病毒的儲存宿主，2018年我國首次報道了人感染PRV病例。豬偽狂犬病傳播方式多樣，懷孕母豬感染該病毒時，病毒可通過胎盤屏障感染胎兒；健康豬接觸病豬的鼻液、口腔分泌物之后可被感染，也可因污染的飼料或飼養(yǎng)用具被感染；健康豬接觸牛、羊、貓、鼠等帶毒動物也可被感染。PRV在我國難以得到凈化的主要原因有：傳播途徑多樣、免疫不到位、野毒株正在發(fā)生變異、PRV可潛伏感染豬群。

3 基因組結(jié)構(gòu)及功能

3.1 基因組概況

PRV基因組為線狀雙鏈DNA大小約為150 kb，G+C含量為74%。病毒基因組由長獨特區(qū)(Unique long region,UL)、短獨特區(qū)(Unique short region,US)以及位于US兩側(cè)的末端重復(fù)序列(Terminal repeat,TR)與內(nèi)部重復(fù)序列(Internal re-peat,IR)組成，可編碼70～100余種蛋白。PRV主要的毒力基因包括TK、PK、gB、gI、gB基因。

3.2 主要毒力基因

3.2.1 TK基因

胸苷激酶（Thymidine kinase,TK）基因是最早發(fā)現(xiàn)的毒力基因。TK基因位于UL23區(qū)，基因全長963bp，共編碼321個氨基酸，主要功能是維持病毒的復(fù)制功能和病毒在神經(jīng)組織中的潛伏感染，是PRV最重要的毒力基因。TK基因缺失后病毒在神經(jīng)組織中潛伏感染能力減弱，但TK基因的缺失并不影響病毒免疫原性，因此TK基因可作為基因缺失疫苗的靶點基因。

3.2.2 gE基因

gE基因位于US區(qū)，大小為1740bp，編碼577個氨基酸，gE蛋白是一種膜蛋白可以促進病毒與細胞融合，促進病毒跨神經(jīng)元傳播進入中樞神經(jīng)系統(tǒng)，但gE蛋白不是病毒復(fù)制所必需的。gE缺失株的復(fù)制效率與野毒株沒有差異，缺失gE基因會降低病毒的毒力但不影響PRV感染宿主細胞，也不會降低PRV的免疫原性，目前應(yīng)用的PRV基因缺失疫苗基本都缺失gE基因。

3.2.3 PK基因

PK基因位于US區(qū)，大小約為1170bp，編碼390個氨基酸，分子量大小為53kDa。PK基因是PRV復(fù)制的非必需基因，其編碼產(chǎn)物可對病毒粒子的一種磷脂蛋白產(chǎn)生磷酸化作用，且這種磷脂蛋白在病毒體外增殖的過程中起著重要的作用。該基因缺失后可降低PRV的毒力，但不影響其免疫原性。

3.2.4 gB基因

gB基因位于UL區(qū)，長約2800bp，gB是PRV的主要囊膜蛋白也是皰疹病毒中保守性最高的蛋白，在病毒感染易感動物的過程中參與病毒與細胞的融合,gB蛋白發(fā)揮膜融合作用需要gE/gI復(fù)合物的參與，單獨的gB蛋白并不能發(fā)揮作用，并且gB蛋白具有良好的免疫原性，臨床上可通過gB-ELISA檢測豬群是否獲得免疫保護。

3.2.5 gI基因

gI基因位于US區(qū)，大小約為1053bp，編碼351個氨基酸，gI蛋白屬于I型結(jié)構(gòu)膜蛋白。gI基因是病毒復(fù)制的非必需基因，可促進病毒在細胞間擴散。在PRV糖蛋白中，gI蛋白與gE蛋白關(guān)系最為密切，通常以異源二聚體非共價鍵形式存在。gI蛋白能促進gE蛋白在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中的分泌，對gE蛋白的疊折、加工修飾都起著很重要的作用，保證gE蛋白的正確糖基化。

4 防控措施

4.1 疫苗接種

豬偽狂犬病并無有效藥物，疫苗接種是預(yù)防豬偽狂犬病的最有效手段。目前常用的疫苗有三種：滅活疫苗、弱毒疫苗、基因缺失疫苗。我國國內(nèi)通常選用gE基因缺失疫苗，進行免疫保護。除接種疫苗外還應(yīng)制定合理的免疫程序，定期進行抗體水平檢測，掌握豬群抗體消長規(guī)律。

4.2 科學(xué)引種，堅持自繁自養(yǎng)

禁止從豬偽狂犬病發(fā)病場引進種豬，引種前必須對豬群進行檢測確定無PRV感染。引進后隔離45天觀察無問題后才能進行群飼。實施自繁自養(yǎng)是預(yù)防豬偽狂犬病最有效的手段之一，但也應(yīng)當進行PRV檢測。

4.3 加強飼養(yǎng)管理

首先，營造良好的飼養(yǎng)環(huán)境。保持飼養(yǎng)圈舍清潔，及時清除糞便，保證圈舍的防寒、通風(fēng)、干燥。對圈舍嚴格消毒，同時對養(yǎng)殖場周邊環(huán)境也使用燒堿溶液或石灰水溶液交替消毒。嚴格控制豬場人員和車輛的進出，禁止外來車輛進入生產(chǎn)區(qū)，PRV可通過帶毒老鼠傳播，豬場日常做好滅鼠工作也是防控PRV的一項重要措施。