基于數(shù)據(jù)挖掘及網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)探討胡曉梅主任治療真性紅細(xì)胞增多癥的用藥規(guī)律及機(jī)制*

明靜 ，李芋錦 ，楊二鵬 ，王子卿 ，3，劉為易 ，胡曉梅

（1.中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院西苑醫(yī)院，北京 100091；2.中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院博士后科研流動(dòng)站，北京 100700；3.北京中醫(yī)藥大學(xué)，北京 100029）

真性紅細(xì)胞增多癥（PV）屬于BCR-ABL陰性骨髓增殖性腫瘤（MPNs）范疇，以骨髓及外周血中紅細(xì)胞異常增殖為主要特點(diǎn)，同時(shí)伴有血紅蛋白、紅細(xì)胞壓積、白細(xì)胞和血小板增多。本病起病緩慢，臨床主要表現(xiàn)為皮膚黏膜暗紅、皮膚瘙癢、頭暈、頭脹、目赤、耳鳴、手足發(fā)麻、疲勞、虛弱、盜汗等癥狀，常伴有肝脾腫大，嚴(yán)重者出現(xiàn)心肌梗死、腦血栓、肺栓塞等血栓事件，危及患者的生命。本病晚期可進(jìn)展為骨髓纖維化（MF）或急性髓系白血?。ˋML）/骨髓異常綜合征（MDS），少數(shù)可伴發(fā)淋巴瘤[1]。本病發(fā)病率為0.84/10萬(wàn)[2]，而由于部分患者無(wú)癥狀，實(shí)際發(fā)病率可能高于這一數(shù)據(jù)。PV屬于獲得性克隆性造血干細(xì)胞疾病，發(fā)病機(jī)制為造血干細(xì)胞的惡性擴(kuò)增，但具體機(jī)制尚未明確。在本病的治療上，西醫(yī)主要以降低血細(xì)胞、預(yù)防血栓為主要治療目標(biāo)，主要藥物包括羥基脲、干擾素、蘆可替尼、阿司匹林等。上述方法多能短期內(nèi)降低患者的血細(xì)胞，但均有潛在的不良反應(yīng)，且長(zhǎng)期療效欠佳[3-5]。

近年來(lái)，臨床實(shí)踐證明中醫(yī)藥在血液病的防治上安全有效。研究名中醫(yī)辨治PV的遣方用藥規(guī)律在探索本病的有效治療方法上具有重要意義。胡曉梅主任是中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院名中醫(yī)，從事血液病臨床工作30余年，在中醫(yī)治療血液病方面積累了豐富的經(jīng)驗(yàn)，尤其在治療PV方面具有中醫(yī)特色及顯著療效。筆者曾有幸跟隨胡曉梅主任學(xué)習(xí)，現(xiàn)收集其門診治療PV的有效方劑202首，應(yīng)用中醫(yī)傳承輔助平臺(tái)系統(tǒng)（V2.5），總結(jié)用藥規(guī)律和診療經(jīng)驗(yàn)，并采用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的方法對(duì)其方中的核心藥物進(jìn)行分析，探討其潛在的作用機(jī)制，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下，以供同行交流共進(jìn)。

1 資料與方法

1.1 處方來(lái)源 收集2018年4月1日—2020年11月30日中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院西苑醫(yī)院胡曉梅主任醫(yī)師門診治療PV的有效處方202首。

1.2 分析軟件 中醫(yī)傳承輔助系統(tǒng)（V2.5）軟件，由中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所提供。

1.3 處方錄入與審核 將上述篩選的處方錄入中醫(yī)傳承輔助系統(tǒng)，在錄入完成后，由第2人負(fù)責(zé)錄入數(shù)據(jù)源的審核，以確保錄入信息的準(zhǔn)確性。

1.4 數(shù)據(jù)分析 通過(guò)“中醫(yī)傳承輔助平臺(tái)”中的“統(tǒng)計(jì)報(bào)表系統(tǒng)”及“數(shù)據(jù)分析系統(tǒng)”進(jìn)行數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析。

1.4.1 藥物性味歸經(jīng)統(tǒng)計(jì) 在“統(tǒng)計(jì)報(bào)表系統(tǒng)”，對(duì)藥物的性味歸經(jīng)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

1.4.2 藥物頻次統(tǒng)計(jì) 在“數(shù)據(jù)分析系統(tǒng)”，對(duì)錄入處方的藥物頻次進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，其中用藥頻次≥40次的中藥進(jìn)行記錄。

1.4.3 組方規(guī)律分析 在“數(shù)據(jù)分析系統(tǒng)”，對(duì)錄入的處方進(jìn)行組方規(guī)律分析，在軟件中將“支持度個(gè)數(shù)”設(shè)為85，“置信度”設(shè)為0.8，再分別點(diǎn)擊“用藥模式”“規(guī)則分析”“網(wǎng)絡(luò)展示”按鍵，即得出相應(yīng)分析結(jié)果。

2 網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)研究

2.1 藥物靶點(diǎn)預(yù)測(cè) 提取中醫(yī)傳承輔助系統(tǒng)藥物頻次分析得到的前10位的藥物作為核心藥物。運(yùn)用中藥系統(tǒng)藥理學(xué)數(shù)據(jù)庫(kù)和分析平臺(tái)（TCMSP，http：//tcmspw.com/tcmsp.php）篩選核心中藥的相應(yīng)化合物[篩選標(biāo)準(zhǔn)：口服生物利用度（OB）≥20%，藥物相似度（DL）≥0.1]，并對(duì)化合物進(jìn)行靶點(diǎn)預(yù)測(cè)，借助 PubChem（https：//pubchem.ncbi.nlm.nih.gov）和SwissTargetPrediction（http：//www.swisstargetprediction.ch）數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)預(yù)測(cè)不到靶點(diǎn)的化合物進(jìn)行靶標(biāo)補(bǔ)充。

2.2 PV 疾病基因 在 GeneCards（http：//www.genecards.org/）、DisGenet（https：//www.disgenet.org）、OMIM（http：//www.ncbi.nlm.nih.gov/omim）、TTD（http：//db.idrblab.net/ttd/）4 個(gè)數(shù)據(jù)庫(kù)，以“polycythemia vera”為檢索詞，搜索與PV相關(guān)的疾病靶點(diǎn)。使用在線韋恩圖繪制平臺(tái) Venny2.1（http：//bioinfogp.cnb.csic.es/tools/venny/index.html，Version 2.1）對(duì) PV 和核心藥物靶點(diǎn)進(jìn)行映射并繪圖。

2.3 GO功能和KEGG通路富集分析 將核心中藥的靶點(diǎn)導(dǎo)入R平臺(tái)4.0.2，應(yīng)用clusterProfileR包（3.14.3）[6]，進(jìn)行基因本體論（GO）分析和京都基因與基因組百科全書（KEGG）通路富集分析，根據(jù)P＜0.05由低到高篩選出前24條可能性較高的信號(hào)通路并進(jìn)行可視化分析。

2.4 蛋白互作網(wǎng)絡(luò)（PPI）的構(gòu)建與分析 將交集靶點(diǎn)上傳至 STRING 數(shù)據(jù)庫(kù)（http：//string-db.org/），物種選為Homo sapiens，評(píng)分條件設(shè)定為0.9，繪制蛋白互作網(wǎng)絡(luò)圖。

3 結(jié)果

3.1 性味歸經(jīng)分布情況 202首處方中，藥性以寒性使用頻次最高，為1 713次，其次為溫性（696次），平性（656次），涼性（93次），熱性（16次）。藥味以苦味使用頻次最高為1 974次，其次為甘味（1 294次），辛味（1 093次），酸味（195次），咸味（173次），澀味（117次）。藥物歸經(jīng)以肝經(jīng)頻次最高，為2 116次，見表1。

表1 歸經(jīng)分布頻數(shù)統(tǒng)計(jì)Tab.1 Frequency statistics of drugs’channel tropism

3.2 用藥頻次分析 錄入系統(tǒng)的202首處方，共包含中藥155味，對(duì)其進(jìn)行頻次統(tǒng)計(jì)，提示方中頻次大于40次的藥物有29味，具體見表2。本研究將頻次排在前10位的藥物作為胡曉梅主任治療PV的核心藥物，依次為生地黃、柴胡、白花蛇舌草、赤芍、龍葵、半枝蓮、龍膽、夏枯草、黃芩、牛膝。

表2 出現(xiàn)頻次≥40次的中藥頻數(shù)統(tǒng)計(jì)Tab.2 Chinese medicines with a frequency greater than or equal to 40

3.3 基于關(guān)聯(lián)規(guī)則的組方規(guī)律分析 設(shè)置“支持度個(gè)數(shù)”為85，“置信度”為0.8，得到常用藥對(duì)48個(gè)，包含13味中藥，見表3。得到2味藥物的核心組合28種，3味藥物的核心組合為18種，4味藥物的核心組合2種。此外，進(jìn)行關(guān)聯(lián)規(guī)則分析，得到用藥規(guī)則80條，其中大于0.950以上有19條，見表4。

表3 用藥模式分析Tab.3 Use patterns of drugs

表4 用藥規(guī)則分析（置信度保留3位小數(shù)）Tab.4 Rule analysis(confidence is set to retain 3 decimal places)

3.4 網(wǎng)絡(luò)展示 通過(guò)軟件的網(wǎng)絡(luò)展示功能，將“支持度個(gè)數(shù)”設(shè)為85，“置信度”設(shè)為0.8，對(duì)用藥模式中所包含的13味中藥之間的關(guān)聯(lián)性進(jìn)行網(wǎng)絡(luò)可視化展示，見圖1。

圖1 治療PV常用藥物組合網(wǎng)絡(luò)圖Fig.1 Network diagram of drug combinations commonly used to treat PV

3.5 網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)研究結(jié)果

3.5.1 核心藥物包含的化合物、靶點(diǎn)及PV疾病相關(guān)基因 按OB≥20%，DL≥0.1的標(biāo)準(zhǔn)在TCMSP檢索到各藥物的化合物分別為生地黃19個(gè)，柴胡56個(gè)，白花蛇舌草15個(gè)，赤芍46個(gè)，龍葵7個(gè)，半枝蓮41個(gè)，龍膽20個(gè)，夏枯草19個(gè)，黃芩56個(gè)，川牛膝11個(gè)，去除重復(fù)值，總共得到化合物是229個(gè)，預(yù)測(cè)到靶點(diǎn) 378 個(gè)。在 GeneCards、OMIM、DisGenet、TTD數(shù)據(jù)庫(kù)檢索到與PV疾病相關(guān)的靶點(diǎn)為589個(gè)，韋恩圖顯示核心藥物與PV相關(guān)的靶點(diǎn)為114個(gè)，見圖2。

圖2 韋恩圖Fig.2 Venn diagram

3.5.2 GO功能和KEGG通路富集分析 利用R平臺(tái)對(duì)核心藥物的靶點(diǎn)進(jìn)行富集分析，共得到2 579條GO條目，其中生物過(guò)程（BP）2422個(gè)，細(xì)胞組成（CC）37個(gè)，分子功能（MF）120個(gè)，并根據(jù)P值分別選取前10條目進(jìn)行可視化分析。如圖3所示，核心藥物治療PV主要涉及氧化應(yīng)激、藥物反應(yīng)及細(xì)胞凋亡等生物過(guò)程，它們通過(guò)細(xì)胞因子受體-配體結(jié)合、磷酸化作用、血紅素結(jié)合、蛋白結(jié)合、激酶調(diào)節(jié)等分子功能在細(xì)胞膜、分泌囊泡等部位發(fā)揮作用。

圖3 GO分析條狀圖Fig.3 GO analysis bar graph

KEGG通路分析共富集到157條信號(hào)通路，根據(jù)P＜0.05由低到高篩選出前24條可能性較高的信號(hào)通路，其中 PI3K-Akt、HIF-1、JAK-STAT、P53 等信號(hào)通路均是顯著富集的通路，見圖4。

圖4 KEGG富集氣泡圖Fig.4 Bubble diagram of KEGG enrichment

3.5.3 蛋白-蛋白互作網(wǎng)絡(luò)圖構(gòu)建 蛋白-蛋白互作網(wǎng)絡(luò)圖通過(guò)STRING（www.string.db）構(gòu)建，總共包含114個(gè)節(jié)點(diǎn)和429條邊，展示了STAT3、AKT1、TP53、MAPK1、TNF、VEGFA、MAPK14、IL6 等 分 子在作用機(jī)制中的核心地位，見圖5A。圖5B展示了蛋白互作網(wǎng)絡(luò)節(jié)點(diǎn)度值位于前25位的靶點(diǎn)。

圖5 蛋白-蛋白互作圖Fig.5 Protein-protein interaction map

4 討論

PV 屬于中醫(yī)“血證”“癥瘕”“眩暈”“頭痛”等范疇，中醫(yī)血液病專家于2008年建議將該病規(guī)范命名為“血積”[7]。本病的病理改變是血脈瘀阻，氣滯血瘀，肝膽實(shí)火，熱入營(yíng)血等，關(guān)于本病的描述散見于各類醫(yī)籍中。如《黃帝內(nèi)經(jīng)·靈樞》云：“若內(nèi)傷于憂怒，則氣上逆，氣上逆則六輸不通，溫氣不行，凝血蘊(yùn)里而不散，津液澀滲，著而不去，而積皆成矣?！薄蹲C治匯補(bǔ)》中載：“熱極沸騰發(fā)為斑?！薄饵S帝內(nèi)經(jīng)》云：“大怒則血形氣絕，而血菀于上。”《血證類·臟腑病機(jī)論》中曰：“設(shè)木郁為火，則血不和，火發(fā)為怒，則血橫決，吐血、錯(cuò)經(jīng)、血痛諸證作焉，火太甚則頰腫面青，目赤頭痛?！薄额愖C治裁》載：“血從清道出于鼻則為衄，癥多火迫血逆……火亢則治宜清降?！薄毒霸廊珪份d有：“血本陰精，不宜動(dòng)也，而動(dòng)則為病……概動(dòng)則多由于火，火盛則迫血妄行。”本病病因分為內(nèi)、外兩端，外因?yàn)橥飧袦責(zé)嵝岸荆蛲飧酗L(fēng)寒邪毒入里化熱，傷及血分；內(nèi)因?yàn)槠咔閮?nèi)傷、情志郁結(jié)，或體質(zhì)陽(yáng)盛、郁久化熱、傷及血分。國(guó)內(nèi)外眾多的臨床及基礎(chǔ)研究證實(shí)中醫(yī)藥治療本病的良好效果及獨(dú)特優(yōu)勢(shì)[8-10]，但均缺乏廣泛推廣應(yīng)用。該病病程較長(zhǎng)，中醫(yī)藥“多靶點(diǎn)”，且可“標(biāo)本兼治”，可在該病的治療中發(fā)揮重要作用。因此，從中醫(yī)基本理論和本病的發(fā)病機(jī)制出發(fā)，積極發(fā)揮中醫(yī)優(yōu)勢(shì)，開發(fā)新的中醫(yī)治療方法，具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。朱世榮[11]觀察胡曉梅主任運(yùn)用經(jīng)驗(yàn)方治療MPNs患者40例，結(jié)果顯示治療完全緩解12例，占比30%，部分緩解22例，占比55%，2例患者病情穩(wěn)定，占比5%，且可顯著縮短活化部分凝血活酶時(shí)間（APTT），改善患者的高凝狀態(tài)，預(yù)防血栓形成，臨床療效顯著。

表5 從TCMSP中檢索到的重要化合物Tab.5 Candidate compounds selected from TCMSP

中醫(yī)傳承輔助平臺(tái)（V2.5）是研究名家醫(yī)方的科學(xué)、有效工具。本研究采用中醫(yī)傳承輔助平臺(tái)總結(jié)了胡曉梅主任治療PV的用藥規(guī)律。藥物頻數(shù)統(tǒng)計(jì)分析顯示位于前20位的藥物為生地黃、柴胡、白花蛇舌草、赤芍、龍葵、半枝蓮、龍膽、夏枯草、黃芩、川牛膝、炙甘草、白術(shù)、土鱉蟲、紅花、澤瀉、桃仁、青黛、梔子、莪術(shù)、全蝎，主要包含了血府逐瘀湯、龍膽瀉肝湯以及當(dāng)歸龍薈丸中的主要藥物。胡曉梅主任認(rèn)為認(rèn)為PV的病理因素可歸結(jié)為“熱毒”“瘀”“郁”，多屬肝熱血瘀，血?dú)馐?shí)之證，以瘀血為本，肝火血熱為標(biāo)，治療上以清肝瀉火，活血化瘀為主，輔以清熱解毒。PV辨證不論虛實(shí)，總以瘀血為要，瘀既為病理產(chǎn)物又是致病原因，PV主要表現(xiàn)為紅細(xì)胞增多，血液黏稠，常有顏面、唇舌暗紫、目赤、肝脾腫大、舌底靜脈迂曲擴(kuò)張，脈弦或澀等氣滯血瘀證的表現(xiàn)，故予桃仁、紅花、赤芍、柴胡等藥物活血化瘀，理氣行滯，其中桃仁入心、肝血分，常用于治療瘀血阻滯病證，紅花活血通經(jīng)，祛瘀止痛，兩者常相須為用；赤芍苦寒入肝經(jīng)血分，善清瀉肝火，泄血分郁熱而奏涼血、止血之功。氣為血之帥，氣行則血行，柴胡性善條達(dá)肝氣，疏肝解郁，善理氣行滯，使氣行則血行。柴胡和赤芍，一入血分，一入氣分，常常相互為用，以行氣活血，在方中同時(shí)出現(xiàn)的頻率較高。此外，本病初期患者常有目赤、眩暈等肝陽(yáng)上亢、肝火旺盛的見癥，故在活血化瘀的基礎(chǔ)上配以瀉肝火平肝陽(yáng)的藥物可增強(qiáng)療效，方中常用龍膽、夏枯草、赤芍清瀉肝膽實(shí)火，天麻、鉤藤、石決明平抑肝陽(yáng)。龍膽草大苦大寒，為清瀉肝膽實(shí)火第一藥，是PV治療的常用藥物，肝體陰而用陽(yáng)，性喜疏泄條達(dá)而惡抑郁，火邪內(nèi)郁，肝膽之氣不舒，驟用大劑量苦寒降泄之品，既恐肝膽之氣被抑，又慮折傷肝膽生發(fā)之機(jī)，故用柴胡舒暢肝膽之氣，并能引諸藥歸于肝膽之經(jīng)，故龍膽、柴胡是胡曉梅主任治療PV方中較常使用的藥對(duì)。PV為克隆性腫瘤性疾病，95%以上存在JAK2突變，該突變與本病發(fā)生發(fā)展相關(guān)，具有毒的病性，故胡曉梅主任認(rèn)為本病的治療應(yīng)辨病與辨證相結(jié)合，在化瘀的同時(shí)不忘解毒，常予白花蛇舌草、龍葵、半枝蓮、夏枯草、黃芩、青黛、梔子等清熱解毒且具有抗癌作用的中藥，往往能達(dá)到事半功倍的效果。結(jié)合西醫(yī)病理及中醫(yī)病機(jī)，胡曉梅主任認(rèn)為活血化瘀、解毒抗癌應(yīng)貫穿本病治療的始終。《景岳全書·積聚》：“凡有脾腎不足及虛弱失調(diào)之人，多有積聚之病?！北静“l(fā)病多因虛而生，故予白術(shù)健脾益氣，既可防清熱解毒藥物苦寒?dāng)∥?，亦可扶正補(bǔ)虛。生地黃是胡曉梅主任治療PV的重要藥物，不僅在方中使用頻次最高，且常用柴胡、赤芍、龍膽作為藥對(duì)使用，關(guān)聯(lián)規(guī)則也顯示，方中有龍膽、赤芍、柴胡時(shí)，生地黃出現(xiàn)的概率為100%，胡曉梅主任認(rèn)為方中長(zhǎng)期使用清肝瀉火及活血化瘀的藥物可耗傷陰血，故予生地黃養(yǎng)血滋陰，使邪祛而陰血不傷。綜上，借助中醫(yī)傳承輔助平臺(tái)可以很好地總結(jié)胡曉梅主任治療PV的用藥經(jīng)驗(yàn)，為臨床用藥提供參考。

此外，本研究基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的方法，對(duì)頻數(shù)排在前10位的核心藥物（生地黃、柴胡、白花蛇舌草、赤芍、龍葵、半枝蓮、龍膽、夏枯草、黃芩、川牛膝）進(jìn)行了分析。PV患者中95%存在JAK2V617F突變[12]，因此JAK2V617F突變成為PV發(fā)生和發(fā)展的核心問(wèn)題。JAK2是一種酪氨酸蛋白激酶，能夠介導(dǎo)多種細(xì)胞因子的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，調(diào)控細(xì)胞增殖。JAK2V617F突變使JAK2持續(xù)活化，激活JAK2-STAT3信號(hào)通路，使STAT3磷酸化，進(jìn)而引起紅細(xì)胞、血小板以及白細(xì)胞的增多[13]。JAK2V617F突變還可通過(guò)下游JAKSTAT信號(hào)通路激活多種炎性細(xì)胞因子產(chǎn)生，包括白介素（IL）-1、IL-2、IL-6、IL-8、IL-12、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）和 γ-干擾素（IFN-γ）等[14-15]。HIF-1可以誘導(dǎo)下游血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子A（VEGFA）表達(dá)，促進(jìn)血管新生，使腫瘤等微環(huán)境發(fā)生重塑，從而促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖、轉(zhuǎn)移和耐藥[16-17]。研究表明，缺氧誘導(dǎo)因子-1（HIF-1）能夠促進(jìn)小鼠JAK2V617F突變細(xì)胞增殖[18]。MPNs患者的造血干細(xì)胞中也發(fā)現(xiàn)了HIF-1和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）的異常升高，并且在羥基脲治療后明顯降低。蘆可替尼可抑制JAK2V617F陽(yáng)性的HEL細(xì)胞的生長(zhǎng)，降低HIF-1及其下游靶基因VEGF的表達(dá)。而HIF-1抑制劑可選擇性抑制MPN細(xì)胞的存活和增殖，而不影響正常細(xì)胞[18]，因此，HIF-1有可能是JAK2V617F陽(yáng)性PV的新治療靶點(diǎn)[18]，調(diào)控HIF-1/VEGFA通路有可能成為PV治療的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)結(jié)果顯示，共得到核心藥物治療PV的活性成分137個(gè)，這些活性成分包含了已知對(duì)PV有效的多種機(jī)制，例如柴胡中的主要成分柴胡皂苷有很好的抗炎抗腫瘤作用[19]，研究表明其可明顯抑制JAK2V617F陽(yáng)性的HEL細(xì)胞的增殖，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，調(diào)控ATK和STAT3分子的表達(dá)[20]。槲皮素已被證實(shí)能夠通過(guò)下調(diào)PI3K-Akt通路及JAK-STAT通路誘導(dǎo)血液系統(tǒng)腫瘤細(xì)胞凋亡[21]。芹菜素能夠調(diào)節(jié) PI3K-Akt，MAPK-ERK，JAK-STAT，NF-κB和Wnt/β-catenin等多條惡性腫瘤相關(guān)通路[22]。葛根素能通過(guò)抑制PI3K/mTOR信號(hào)通路抑制人類乳頭瘤病毒（HPV）陽(yáng)性宮頸癌細(xì)胞的生長(zhǎng)和遷移[23]。GO富集分析中，分子功能（MF）富集于細(xì)胞因子和蛋白磷酸化激活途徑，與PV發(fā)病機(jī)制中JAK2病理性磷酸化和IL-6等細(xì)胞因子改變有關(guān)[24-25]。細(xì)胞組件（CC）富集于細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)和細(xì)胞囊泡轉(zhuǎn)運(yùn)結(jié)構(gòu)，與PV病理過(guò)程中的JAK2受體結(jié)構(gòu)性激活和進(jìn)一步級(jí)聯(lián)反應(yīng)有關(guān)[26]。生物過(guò)程（BP）富集于活性氧和氧化應(yīng)激等過(guò)程，與PV關(guān)于紅細(xì)胞氧代謝異常的機(jī)制相一致[27]。KEGG 富集于 PI3K-Akt、HIF-1、JAK-STAT、P53等信號(hào)通路，皆為PV發(fā)病機(jī)制中的重要信號(hào)通路[18，28-29]。蛋白互作網(wǎng)絡(luò)圖顯示，STAT3、AKT1、TP53、MAPK1、TNF、VEGFA、MAPK14、IL6 等分子在作用機(jī)制中居核心地位，這些基因有可能是核心藥物治療PV的關(guān)鍵靶點(diǎn)。

本研究運(yùn)用數(shù)據(jù)挖掘和網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)分析方法，獲得胡曉梅主任治療PV的高頻核心藥物，并揭示了核心藥物具有多成分、多靶點(diǎn)、多通路治療PV的潛在作用機(jī)制，為臨床治療PV提供了參考方案，并為進(jìn)一步深入研究物質(zhì)基礎(chǔ)和分子機(jī)制提供了思路。