• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    刺莧提取物體外抑石作用研究*

    2021-11-24 08:38:34江鳳玉張一靜唐靈芝柯俊芳陳蘭妹
    中醫(yī)藥導(dǎo)報(bào) 2021年11期
    關(guān)鍵詞:全草草酸鈣正丁醇

    江鳳玉,張一靜,唐靈芝,柯俊芳,陳蘭妹

    (廈門(mén)醫(yī)學(xué)院,福建 廈門(mén) 361023)

    刺莧(Amaranthus spinosus L.)為莧科莧屬一年生草本植物,全草入藥,性甘、涼,有清熱祛濕、散血消炎等療效[1]。因其能夠促進(jìn)膀胱的濕熱之氣向外排出,能夠消石通淋,刺莧用于治療腎結(jié)石,有較好的排石療效,且具有治療周期短、效價(jià)高、毒副作用低等優(yōu)點(diǎn)。刺莧的化學(xué)成分和相關(guān)活性研究文獻(xiàn)報(bào)道較少,目前相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道的活性主要集中在利尿、免疫、降溫[2]、傷口創(chuàng)面愈合、抗菌[3]、抗炎鎮(zhèn)痛[4]、抗氧化[5-6]等方面。

    腎結(jié)石的主要組成成分草酸鈣(CaOX)存在兩種形式:一水草酸鈣(COM)和二水草酸鈣(COD),其中COM是COD的兩倍[7]。張生等[8]研究證明COD外表較圓鈍,黏附性不好,易于排出體外;而COM外表較尖銳,易黏附在損傷細(xì)胞表面形成結(jié)晶。筆者通過(guò)體外模擬實(shí)驗(yàn),利用電子顯微鏡(EM)、傅里葉紅外光譜(FTIR)、掃描電鏡(SEM)、X射線(xiàn)衍射(XRD)等檢測(cè)方法,觀(guān)察刺莧提取物在體外是否具有抑制COM的生長(zhǎng)聚集或促使COM向COD轉(zhuǎn)化的作用,評(píng)估刺莧提取物的排石活性。

    1 材料與儀器

    1.1 藥材 刺莧,采自福建省漳平市和平鎮(zhèn)野外,經(jīng)廈門(mén)醫(yī)學(xué)院藥學(xué)系中藥專(zhuān)業(yè)鮑紅娟副教授鑒定為Amaranthus spinosus L.。

    1.2 儀器 Alpha1-2冷凍干燥機(jī)(德國(guó)christ);SQP十萬(wàn)分之一天平(Sartorius);ALPHA傅里葉紅外光譜儀(德國(guó)Bruker);FlexSEM 1000掃描電子顯微鏡(日本高新技術(shù)公司);XRD6100 X射線(xiàn)衍射儀(日本高新技術(shù)公司)。

    1.3 試劑 草酸鈉(泰坦科學(xué)股份有限公司,批號(hào):P1571587);無(wú)水氯化鈣(批號(hào):2004172)、氯化鈉(批號(hào):20170313)、無(wú)水乙酸鈉(批號(hào):20170303)、氫氧化鈉(批號(hào):20200826)、石油醚(60-90)(批號(hào):2102011)、乙酸乙酯(批號(hào):1810091)、正丁醇(批號(hào):1809111)、95%乙醇(批號(hào):2002171)、鹽酸(批號(hào):20071128)均購(gòu)自西隴科學(xué)股份有限公司,分析純。

    2 方 法

    2.1 刺莧粗提

    2.1.1 刺莧全草粗提 取刺莧全草525 g,加入5倍量的65%乙醇浸漬2 h,超聲功率400 W,溫度40 ℃,提取2次,每次1 h。過(guò)濾,濃縮,依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇進(jìn)行梯度萃取,濃縮得浸膏后冷凍干燥,得到4個(gè)樣品組分,分別為石油醚層、乙酸乙酯層、正丁醇層和水層,置于干燥器中貯存。

    2.1.2 刺莧根粗提 取刺莧根750 g,加入6.5倍量65%乙醇浸漬2 h,超聲功率400 W,溫度40 ℃,提取2次,每次1 h。過(guò)濾,合并濾液濃縮后取少量濃縮液作為醇提層,其余濃縮液依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇進(jìn)行梯度萃取,濃縮得浸膏后冷凍干燥,得到4個(gè)樣品組分,分別為醇提層、石油醚層、乙酸乙酯層和正丁醇層,置于干燥器中貯存。

    2.2 溶液配制與樣品制備

    2.2.1 儲(chǔ)備液的配制 溶液A的配制:精密稱(chēng)取無(wú)水氯化鈣、氯化鈉、無(wú)水乙酸鈉,先用純化水溶解,后轉(zhuǎn)移至100 mL容量瓶中,定容至100 mL,搖勻。用鹽酸或氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至5.7,配成濃度為10.0、8.5、1.0 mmol/L的CaCl2溶液。

    溶液B的配制:精密稱(chēng)取草酸鈉、氯化鈉、無(wú)水乙酸鈉,先用純化水溶解,后轉(zhuǎn)移至100 mL容量瓶中,定容至100 mL,搖勻。用鹽酸或氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至5.7,配成濃度為5.0、1.5、1.0 mmol/L的Na2C2O4溶液。

    2.2.2 刺莧提取液的制備 稱(chēng)取刺莧全草和根8個(gè)樣品冷凍干燥組分各0.04 g,量取40.0 mL純化水,制備成1 000 μg/mL提取液,過(guò)濾,用純化水稀釋配制成750、500、250、125 μg/mL的提取液,備用。

    2.2.3 草酸鈣對(duì)照品的配制 按鄧芳等[9]的方法,量取1.1 mol/L的氯化鈣溶液、0.2 mol/L的氯化鈉溶液和適量的純化水于干凈的燒杯中,攪拌均勻后加0.033 mol/L的草酸鈉溶液,使最終溶液中c(Ca2+)=c(C2O42-)=11.0 mmol/L,攪拌反應(yīng)20 min,密封,陳化12 h。

    將陳化好的草酸鈣溶液用0.22 μm微孔過(guò)濾膜過(guò)濾,得草酸鈣沉淀,真空干燥,40 ℃,過(guò)夜,得空白對(duì)照品。

    2.2.4 草酸鈣樣品的配制 取干凈燒杯,分別加入1.1 mol/L的氯化鈣溶液,濃度為1 000、750、500、250、125 μg/mL的刺莧根提取物及適量的純化水,參考草酸鈣對(duì)照品的配制,得草酸鈣樣品。

    2.3 刺莧提取物體外抑石作用研究 將制備得到的草酸鈣對(duì)照品和草酸鈣樣品進(jìn)行EM、SEM、FTIR、XRD分析,通過(guò)FTIR檢測(cè)COD紅外特征峰(νs 1 324 cm-1和νas 1 646 cm-1)進(jìn)行定性分析,XRD檢測(cè)COD晶面(200)進(jìn)行定量分析。

    2.3.1 電子顯微鏡法觀(guān)察 24孔板中加入475 μL溶液A,50 μL的1 000 μg/mL刺莧全草水層提取液,475 μL的溶液B,制成不同摩爾比的草酸鈣溶液[10]。以含有50 μL純化水的樣品代替刺莧提取物作為空白對(duì)照。置于不同倍數(shù)的顯微鏡下觀(guān)察,并對(duì)晶體大小、形狀和密度進(jìn)行定性分析。

    2.3.2 SEM觀(guān)察草酸鈣晶體的外部形態(tài)結(jié)構(gòu) 參考文獻(xiàn)[11],制備草酸鈣晶體,量取0.01 mol/L的氯化鈣溶液、0.2 mol/L的氯化鈉溶液及適量的純化水,待攪拌均勻后,加0.01 mol/L的草酸鈉溶液,使c(Ca2+)=c(C2O42-)=1.00 mmol/L,攪拌反應(yīng)20 min,超聲功率100 W,溫度30 ℃,15 min,得樣品溶液。

    在培養(yǎng)皿中放大小相當(dāng)?shù)膱A形濾紙,用鑷子夾取5 mm×5 mm的單晶硅片,光亮面朝上,放于濾紙中央,用1~2滴無(wú)水乙醇清洗硅片,待干后加入上述溶液50 μL,自然晾干,得草酸鈣樣品。進(jìn)行SEM觀(guān)察,電壓10 kV。

    2.3.3 XRD的測(cè)試條件 參照胡鵬等[12]的XRD測(cè)試條件:Cu靶,Kα輻射,40 kV,20 mA;狹縫:DS,1°,RS,0.15 mm,SS,1;掃描速度:8(°)/min,掃描范圍:2θ為5°~60°。

    2.3.4 COD百分含量計(jì)算 按照文獻(xiàn)[13]的實(shí)驗(yàn)方法,用COD(%)=ICOD/(ICOM+ICOD)×100%計(jì)算樣品中COD的百分含量,式中ICOM為COM(101)晶面的強(qiáng)度,ICOD為COD(200)晶面的強(qiáng)度。

    3 結(jié)果與討論

    3.1 EM結(jié)果分析 空白對(duì)照品中,隨著溶液中Ca/Ox摩爾比的減少,生成的草酸鈣晶體數(shù)量增加,且晶形也不同。(見(jiàn)圖1~8)劉虹等[14]的研究也表明,草酸鹽濃度對(duì)草酸鈣的形成影響更大。在空白對(duì)照品中分別加入1 000 μg/mL刺莧全草水層提取物后,可以發(fā)現(xiàn)所形成的草酸鈣晶體相應(yīng)的數(shù)量增加,但晶形聚集變小,聚集形狀由尖銳變?yōu)檩^圓鈍。由此可見(jiàn),刺莧全草水層提取物具有一定的抑制草酸鈣晶體生長(zhǎng)和聚集的作用。由ZARIN M A等[15]的研究結(jié)果可推測(cè)刺莧全草水層提取物中可能含有皂苷、黃酮苷等成分。

    圖1 空白對(duì)照品[c(Ca2+)∶c(C2O42-)=2∶1]EM 圖

    圖2 1000μg/mL全草水層[c(Ca2+)∶c(C2O42-)=2∶1]EM圖

    圖3 空白對(duì)照品[c(Ca2+)∶c(C2O42-)=8.5∶1.5]EM 圖

    圖4 1000μg/mL全草水層[c(Ca2+):c(C2O42-)=8.5∶1.5]EM圖

    圖5 空白對(duì)照品[c(Ca2+)∶c(C2O42-)=2∶1]EM 圖

    圖6 1000μg/mL全草水層[c(Ca2+)∶c(C2O42-)=10∶1]EM圖

    圖7 空白對(duì)照品[c(Ca2+)∶c(C2O42-)=2∶1]EM 圖

    圖8 1000μg/mL全草水層[c(Ca2+)∶c(C2O42-)=1∶5]EM圖

    3.2 草酸鈣對(duì)照品結(jié)果分析

    3.2.1 SEM結(jié)果分析 由文獻(xiàn)[8]可知,草酸鈣晶體的SEM圖像,COM多為外表棱角分明的六角形狀,COD為較圓鈍的四邊形椎體。本實(shí)驗(yàn)制備的草酸鈣晶體對(duì)照品中大多為COM。(見(jiàn)圖9)

    圖9 草酸鈣晶體對(duì)照品的SEM 圖

    3.2.2 FTIR結(jié)果分析 在COM和COD的標(biāo)準(zhǔn)紅外光譜圖中,在3 000~3 600 cm-1處的寬峰由O-H的伸縮振動(dòng)引起,其中COM分裂成5個(gè)小峰,而COD為1個(gè)大峰,強(qiáng)度比COM強(qiáng),主要是因?yàn)镃OD比COM多含有1個(gè)H2O。草酸根(COO-)的對(duì)稱(chēng)伸縮振動(dòng)νs(COO-)分別為1 316 cm-1和1 324 cm-1,反對(duì)稱(chēng)伸縮振動(dòng)νas(COO-)分別為1 620 cm-1和1 646 cm-1。指紋區(qū)COM的吸收帶出現(xiàn)在949 cm-1、885 cm-1和663 cm-1,COD則出現(xiàn)在912 cm-1和611 cm-1處[17]。(見(jiàn)圖10)

    圖10 一水草酸鈣(上)和二水草酸鈣(下)的標(biāo)準(zhǔn)IR 譜圖[16]

    經(jīng)FTIR定性,草酸鈣對(duì)照品草酸根(COO-)的對(duì)稱(chēng)伸縮振動(dòng)νs(COO-)與COD的對(duì)稱(chēng)伸縮振動(dòng)峰相似,而反對(duì)稱(chēng)伸縮振動(dòng)νas(COO-)主要存在COM的反對(duì)稱(chēng)伸縮振動(dòng)峰,指紋區(qū)出現(xiàn)COM的吸收峰663 cm-1,說(shuō)明草酸鈣對(duì)照品中同時(shí)存在COM和COD,以COM為主。(見(jiàn)圖11)

    圖11 草酸鈣對(duì)照品IR 圖

    3.2.3 XRD結(jié)果分析 由文獻(xiàn)[7]可知,COM主要晶面為(101)、(020)、(202)、(130),COD主要晶面為(200)、(211)、(400)、(213)。草酸鈣對(duì)照品的XRD圖中以COM晶面為主要存在形式。(見(jiàn)圖12)

    圖12 草酸鈣對(duì)照品XRD 圖

    因此,綜上可以確定草酸鈣對(duì)照品中的主要成分主要為COM。本實(shí)驗(yàn)擬通過(guò)FTIR和XRD,將草酸鈣樣品與草酸鈣對(duì)照品進(jìn)行比較,觀(guān)察刺莧根提取物是否可以抑制草酸鈣晶體中COM的生長(zhǎng)或誘導(dǎo)COD的形成,探究其是否存在抑石作用。

    3.3 草酸鈣樣品結(jié)果分析

    3.3.1 FTIR結(jié)果分析 FTIR測(cè)定結(jié)果發(fā)現(xiàn),4個(gè)刺莧根提取物的5個(gè)不同濃度FTIR結(jié)果相差不大,結(jié)合XRD結(jié)果,分別從中選取一個(gè)作用較明顯的濃度進(jìn)行比較。(見(jiàn)圖13~16)

    圖13 醇提層樣品500 μg/mL IR 圖

    圖14 正丁醇層樣品500 μg/mL IR 圖

    圖15 乙酸乙酯層樣品1 000 μg/mL IR 圖

    圖16 石油醚層樣品1 000 μg/mL IR 圖

    將草酸鈣對(duì)照品與草酸鈣樣品的FT-IR譜圖進(jìn)行對(duì)比,結(jié)果見(jiàn)表1。

    表1 不同草酸鈣樣品的FT-IR 檢測(cè)結(jié)果

    由表1可知,刺莧根4個(gè)不同部位提取物制備的草酸鈣樣品的對(duì)稱(chēng)伸縮振動(dòng)νs(COO-)無(wú)明顯差異,與COD的對(duì)稱(chēng)伸縮振動(dòng)峰相似。而反對(duì)稱(chēng)伸縮振動(dòng)νas(COO-),正丁醇層和石油醚層顯示COD伸縮振動(dòng)峰,醇提層和乙酸乙酯層無(wú)顯著區(qū)別,主要與COM的伸縮振動(dòng)峰相似。

    由FTIR譜圖結(jié)果可知,刺莧根的4個(gè)不同部位提取物制備得到的草酸鈣樣品,均存在COD的特征峰,說(shuō)明刺莧根提取物可以誘導(dǎo)COD的生成,具有一定的抑石活性。

    3.3.2 XRD結(jié)果分析 根據(jù)COD(%)=ICOD/(ICOM+ICOD)×100%計(jì)算COD的百分含量,結(jié)果見(jiàn)表2。

    表2 不同草酸鈣樣品所含COD 的含量

    由表2可知,刺莧根的4個(gè)不同部位提取物制備的草酸鈣樣品中含有一定量的COD,且隨著濃度的增加,誘導(dǎo)生成的COD百分含量增加。由XRD圖可以看出,草酸鈣樣品中均以COM晶面為主要存在形式,COD晶面僅少量存在。(見(jiàn)圖17~18)由此可見(jiàn),刺莧根的4個(gè)不同部位提取物均有一定程度的誘導(dǎo)COD晶體形成的作用,但作用并不顯著。

    圖17 醇提層500 μg/mL XRD 圖

    圖18 石油醚層1 000 μg/mL XRD 圖

    4 結(jié) 論

    腎結(jié)石是泌尿系統(tǒng)的常見(jiàn)病,草酸鈣結(jié)石在腎結(jié)石中最常見(jiàn)[18],本實(shí)驗(yàn)采用EM、FTIR、XRD、SEM等方法比較研究了刺莧根4個(gè)不同部位提取物對(duì)草酸鈣晶體生長(zhǎng)的調(diào)控作用。研究表明,4個(gè)不同部位的刺莧根提取物有一定的抑制草酸鈣晶體成核和生長(zhǎng),以及誘導(dǎo)COD晶體形成的作用,但作用不顯著。結(jié)合本課題組的前期研究[19],在以小鼠為實(shí)驗(yàn)對(duì)象建立的體內(nèi)草酸鈣結(jié)石損傷模型中,刺莧根正丁醇層提取物表現(xiàn)出明顯的排石活性,可以發(fā)現(xiàn)刺莧提取液的排石活性機(jī)制可能主要為利尿作用,抑石作用較為微弱。

    猜你喜歡
    全草草酸鈣正丁醇
    正丁醇和松節(jié)油混合物對(duì)組織脫水不良的補(bǔ)救應(yīng)用
    草酸鈣材料在石灰?guī)r文物保護(hù)中的應(yīng)用研究綜述
    草酸鈣結(jié)石患者如何調(diào)整飲食
    上海方塔園藥用植物資源調(diào)查
    綠色科技(2018年17期)2018-11-05 08:02:02
    大風(fēng)子正丁醇部位化學(xué)成分的研究
    中成藥(2018年9期)2018-10-09 07:18:48
    三葉青藤正丁醇部位化學(xué)成分的研究
    中成藥(2018年7期)2018-08-04 06:04:08
    中華抱莖蓼正丁醇部位化學(xué)成分的研究
    中成藥(2018年3期)2018-05-07 13:34:25
    聚丙烯酰胺對(duì)草酸鈣結(jié)晶的調(diào)控作用
    化工管理(2015年26期)2015-12-21 11:17:20
    草酸鈣結(jié)石患者如何調(diào)整飲食
    大眾健康(2015年10期)2015-09-10 23:37:37
    溪黃草不同部位的紅外光譜分析與評(píng)價(jià)
    中成藥(2013年1期)2013-09-14 09:59:12
    国产精品人妻久久久久久| 日韩一区二区三区影片| 夫妻午夜视频| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 国产一区二区三区av在线| 91aial.com中文字幕在线观看| 在线天堂最新版资源| a级片在线免费高清观看视频| 亚洲欧美色中文字幕在线| 国产深夜福利视频在线观看| 国产日韩欧美视频二区| 中文字幕精品免费在线观看视频 | 午夜激情av网站| 国产免费视频播放在线视频| 亚洲精品乱久久久久久| 一区在线观看完整版| 欧美日韩成人在线一区二区| 亚洲欧美精品自产自拍| 亚洲精品美女久久av网站| a级片在线免费高清观看视频| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 国产爽快片一区二区三区| 熟女人妻精品中文字幕| av在线播放精品| 欧美少妇被猛烈插入视频| 精品久久蜜臀av无| 精品一区二区免费观看| 国产极品天堂在线| 永久免费av网站大全| 成人亚洲精品一区在线观看| 黄色配什么色好看| 国产av一区二区精品久久| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 91成人精品电影| 午夜精品国产一区二区电影| 国产亚洲一区二区精品| 亚洲精品第二区| 在线 av 中文字幕| 婷婷色综合www| 日日爽夜夜爽网站| 中文字幕av电影在线播放| 日日摸夜夜添夜夜爱| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 97在线视频观看| 国产片内射在线| 久久ye,这里只有精品| 男女国产视频网站| 男女国产视频网站| 国产高清国产精品国产三级| 国产综合精华液| 亚洲内射少妇av| 亚洲av.av天堂| 日韩大片免费观看网站| 国产精品免费大片| 精品久久国产蜜桃| 国产视频首页在线观看| 99热网站在线观看| 亚洲av.av天堂| av又黄又爽大尺度在线免费看| 国产激情久久老熟女| 国产精品欧美亚洲77777| 国产片内射在线| 午夜久久久在线观看| 亚洲欧洲日产国产| 国产精品三级大全| av天堂久久9| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 日韩精品有码人妻一区| 人人妻人人澡人人看| 亚洲精品色激情综合| 中文字幕最新亚洲高清| av一本久久久久| 观看美女的网站| 午夜免费鲁丝| 大片免费播放器 马上看| 91精品国产国语对白视频| 午夜福利视频精品| 亚洲欧美清纯卡通| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 久久精品夜色国产| 另类精品久久| 内地一区二区视频在线| 国产又爽黄色视频| 国产精品人妻久久久久久| 亚洲性久久影院| 五月开心婷婷网| 天堂中文最新版在线下载| 母亲3免费完整高清在线观看 | 亚洲综合色惰| 精品久久久久久电影网| 久久久久视频综合| 精品一区在线观看国产| 一区二区三区四区激情视频| 丝袜美足系列| 大香蕉97超碰在线| 免费黄色在线免费观看| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 亚洲五月色婷婷综合| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 韩国精品一区二区三区 | 日韩中字成人| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 久久这里只有精品19| 日韩中文字幕视频在线看片| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 中文字幕av电影在线播放| 日韩免费高清中文字幕av| 欧美日韩av久久| 啦啦啦啦在线视频资源| 三上悠亚av全集在线观看| 新久久久久国产一级毛片| 一区二区日韩欧美中文字幕 | 国产精品 国内视频| 亚洲精品,欧美精品| 国产精品秋霞免费鲁丝片| av又黄又爽大尺度在线免费看| 亚洲国产精品一区三区| 亚洲国产最新在线播放| 国产黄色视频一区二区在线观看| 丝袜在线中文字幕| 欧美精品高潮呻吟av久久| a级片在线免费高清观看视频| www.av在线官网国产| 精品熟女少妇av免费看| 亚洲精品视频女| 国产 一区精品| 十分钟在线观看高清视频www| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 校园人妻丝袜中文字幕| 最近手机中文字幕大全| 水蜜桃什么品种好| 在线亚洲精品国产二区图片欧美| 精品亚洲成国产av| 国产av一区二区精品久久| 成人免费观看视频高清| 熟女电影av网| 2022亚洲国产成人精品| 国产麻豆69| av天堂久久9| 国产1区2区3区精品| 91精品伊人久久大香线蕉| www日本在线高清视频| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 18禁动态无遮挡网站| 国产xxxxx性猛交| 亚洲精品一二三| 国产av码专区亚洲av| 一级,二级,三级黄色视频| 亚洲国产av影院在线观看| 久久久久人妻精品一区果冻| 热re99久久国产66热| 在线 av 中文字幕| 欧美 日韩 精品 国产| 少妇精品久久久久久久| 久久亚洲国产成人精品v| 免费av不卡在线播放| 国产极品天堂在线| 我的女老师完整版在线观看| 在线观看三级黄色| 青青草视频在线视频观看| 好男人视频免费观看在线| 精品一区二区三区视频在线| 欧美丝袜亚洲另类| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 国产精品不卡视频一区二区| 岛国毛片在线播放| 伊人亚洲综合成人网| 亚洲精品,欧美精品| 各种免费的搞黄视频| 色哟哟·www| 亚洲综合色网址| 青青草视频在线视频观看| 丰满少妇做爰视频| a级毛片黄视频| 婷婷成人精品国产| 亚洲第一av免费看| 十八禁网站网址无遮挡| 狠狠婷婷综合久久久久久88av| 国产极品天堂在线| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 一本久久精品| 在线观看www视频免费| 在线观看人妻少妇| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 亚洲成人av在线免费| 香蕉国产在线看| 亚洲精品第二区| 欧美日韩亚洲高清精品| 日韩视频在线欧美| 国产在线视频一区二区| 亚洲一码二码三码区别大吗| 色吧在线观看| 久久人人爽人人爽人人片va| 卡戴珊不雅视频在线播放| 免费黄色在线免费观看| 久久久a久久爽久久v久久| 久久精品国产亚洲av涩爱| 国产福利在线免费观看视频| 免费在线观看黄色视频的| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 国产精品久久久久成人av| 超碰97精品在线观看| 人妻 亚洲 视频| av.在线天堂| 国产一区二区在线观看日韩| 91久久精品国产一区二区三区| 国产免费视频播放在线视频| 麻豆精品久久久久久蜜桃| av在线老鸭窝| 黄色配什么色好看| 蜜臀久久99精品久久宅男| 少妇的丰满在线观看| 久久久久人妻精品一区果冻| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 欧美成人精品欧美一级黄| 免费看不卡的av| 亚洲一码二码三码区别大吗| 日韩制服骚丝袜av| 欧美性感艳星| 熟女人妻精品中文字幕| 国产精品久久久av美女十八| 久久久久久久久久久免费av| 日本与韩国留学比较| 亚洲精品国产色婷婷电影| 日本欧美国产在线视频| 99久久人妻综合| 久久av网站| 久久久久久久久久久久大奶| 国产亚洲欧美精品永久| 国产成人免费无遮挡视频| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 国产成人精品一,二区| 色94色欧美一区二区| 国产极品粉嫩免费观看在线| 日日爽夜夜爽网站| 婷婷成人精品国产| 久久狼人影院| 精品熟女少妇av免费看| 七月丁香在线播放| 日日摸夜夜添夜夜爱| 亚洲精品中文字幕在线视频| 少妇被粗大的猛进出69影院 | 亚洲欧美精品自产自拍| 搡女人真爽免费视频火全软件| 丰满迷人的少妇在线观看| 国产成人aa在线观看| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 亚洲成人av在线免费| 日本午夜av视频| 亚洲精品国产色婷婷电影| 亚洲国产色片| 天天影视国产精品| av.在线天堂| 99久久中文字幕三级久久日本| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 久久久精品区二区三区| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 国产亚洲最大av| 黄色视频在线播放观看不卡| 少妇精品久久久久久久| 最近最新中文字幕大全免费视频 | 亚洲国产av新网站| 国产av国产精品国产| 欧美3d第一页| 一本一本久久a久久精品综合妖精 国产伦在线观看视频一区 | 又黄又爽又刺激的免费视频.| 岛国毛片在线播放| 日韩中字成人| 视频中文字幕在线观看| 日韩一区二区三区影片| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 蜜臀久久99精品久久宅男| 欧美性感艳星| 超碰97精品在线观看| 99re6热这里在线精品视频| 国产精品国产三级专区第一集| 一级毛片电影观看| 亚洲五月色婷婷综合| 久热这里只有精品99| 一级,二级,三级黄色视频| 日韩三级伦理在线观看| 亚洲欧美清纯卡通| 两个人免费观看高清视频| 99精国产麻豆久久婷婷| 久久精品国产自在天天线| 久久ye,这里只有精品| 国产精品久久久久久久久免| 国产成人精品在线电影| 久久久国产一区二区| 9热在线视频观看99| 亚洲三级黄色毛片| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 成人国产av品久久久| 国产成人精品婷婷| 欧美人与性动交α欧美软件 | 日本vs欧美在线观看视频| 日日摸夜夜添夜夜爱| 亚洲美女搞黄在线观看| 国产一区二区三区综合在线观看 | 麻豆乱淫一区二区| 午夜免费男女啪啪视频观看| 久久免费观看电影| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 9热在线视频观看99| 精品一品国产午夜福利视频| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 97在线视频观看| 韩国av在线不卡| 免费看不卡的av| 91国产中文字幕| 黄片播放在线免费| 久久99热6这里只有精品| 18+在线观看网站| 日本与韩国留学比较| 久久久久久久精品精品| 黄色 视频免费看| av有码第一页| 一区二区av电影网| 日韩欧美精品免费久久| 国产成人精品一,二区| 国产有黄有色有爽视频| 99久久中文字幕三级久久日本| 亚洲综合精品二区| 久久国产精品男人的天堂亚洲 | 亚洲精品国产色婷婷电影| 免费黄色在线免费观看| 十八禁网站网址无遮挡| 精品国产乱码久久久久久小说| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 中文字幕最新亚洲高清| 三级国产精品片| 宅男免费午夜| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 两个人看的免费小视频| 久热久热在线精品观看| 91精品三级在线观看| 亚洲天堂av无毛| 嫩草影院入口| 欧美日韩亚洲高清精品| 久久精品人人爽人人爽视色| 国产一区二区在线观看av| 久久韩国三级中文字幕| 91成人精品电影| 久久免费观看电影| 桃花免费在线播放| 日韩中文字幕视频在线看片| 精品国产乱码久久久久久小说| 久久久久久久久久久久大奶| 深夜精品福利| 午夜激情av网站| 热re99久久国产66热| 热99国产精品久久久久久7| 国产精品久久久久久精品电影小说| 内地一区二区视频在线| 亚洲天堂av无毛| 晚上一个人看的免费电影| 美女国产高潮福利片在线看| 蜜桃国产av成人99| 国产成人精品在线电影| 大码成人一级视频| 久久99热6这里只有精品| 欧美激情极品国产一区二区三区 | 国产精品久久久久久精品电影小说| 成年女人在线观看亚洲视频| 日韩一本色道免费dvd| 黑人欧美特级aaaaaa片| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 久久久久久久久久久免费av| 日韩大片免费观看网站| 最近2019中文字幕mv第一页| 亚洲国产精品999| 人人妻人人澡人人看| 高清欧美精品videossex| 国产精品国产av在线观看| 免费人妻精品一区二区三区视频| 丝袜美足系列| 亚洲国产看品久久| 久久99精品国语久久久| 在线观看免费高清a一片| 在线观看一区二区三区激情| 国产黄色免费在线视频| 久久97久久精品| 91成人精品电影| 男女边摸边吃奶| 欧美性感艳星| 丝瓜视频免费看黄片| 女人久久www免费人成看片| 久久99蜜桃精品久久| 精品一区二区免费观看| 国产视频首页在线观看| 又黄又粗又硬又大视频| 国产爽快片一区二区三区| 男人添女人高潮全过程视频| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 亚洲情色 制服丝袜| a级毛片黄视频| 男人舔女人的私密视频| 久久精品aⅴ一区二区三区四区 | 丰满乱子伦码专区| 日本欧美国产在线视频| 欧美成人午夜免费资源| 亚洲人成网站在线观看播放| 制服丝袜香蕉在线| 国产国语露脸激情在线看| 国产高清国产精品国产三级| 老司机亚洲免费影院| 午夜福利视频在线观看免费| 日韩av不卡免费在线播放| 亚洲色图综合在线观看| 亚洲国产看品久久| 一区在线观看完整版| 一本久久精品| kizo精华| 国产国语露脸激情在线看| 春色校园在线视频观看| 少妇的逼水好多| 26uuu在线亚洲综合色| 久久精品国产综合久久久 | 婷婷色综合大香蕉| 日韩制服丝袜自拍偷拍| 最近最新中文字幕大全免费视频 | 亚洲成国产人片在线观看| 国产男人的电影天堂91| 两个人看的免费小视频| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 一边摸一边做爽爽视频免费| 精品一品国产午夜福利视频| 国产欧美亚洲国产| 久久毛片免费看一区二区三区| 22中文网久久字幕| 免费av中文字幕在线| 51国产日韩欧美| 久久精品aⅴ一区二区三区四区 | 国产深夜福利视频在线观看| 人体艺术视频欧美日本| av福利片在线| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 日韩一区二区三区影片| 蜜桃国产av成人99| 精品亚洲乱码少妇综合久久| a级片在线免费高清观看视频| 精品酒店卫生间| 国产国语露脸激情在线看| 我要看黄色一级片免费的| 国产精品人妻久久久久久| 国产黄频视频在线观看| 嫩草影院入口| 亚洲丝袜综合中文字幕| 国产成人91sexporn| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 欧美最新免费一区二区三区| 夫妻午夜视频| 欧美丝袜亚洲另类| 亚洲av电影在线进入| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 下体分泌物呈黄色| 秋霞伦理黄片| 国产极品粉嫩免费观看在线| 水蜜桃什么品种好| 看十八女毛片水多多多| 激情五月婷婷亚洲| 中文字幕制服av| 午夜日本视频在线| 亚洲精品国产av成人精品| 久久精品国产亚洲av涩爱| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 久久久久精品性色| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀 | 成人手机av| 欧美人与性动交α欧美软件 | 欧美性感艳星| 男女无遮挡免费网站观看| 国产熟女午夜一区二区三区| 我要看黄色一级片免费的| 国产成人一区二区在线| 亚洲性久久影院| 成人午夜精彩视频在线观看| 成人黄色视频免费在线看| 欧美国产精品va在线观看不卡| 亚洲,欧美,日韩| 一级毛片 在线播放| 少妇 在线观看| 成人亚洲精品一区在线观看| 丰满迷人的少妇在线观看| 国产高清三级在线| 视频区图区小说| 激情视频va一区二区三区| av女优亚洲男人天堂| 女性生殖器流出的白浆| 国产片内射在线| 乱人伦中国视频| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 久久精品国产综合久久久 | 一区二区av电影网| 亚洲精品第二区| 日本黄大片高清| 精品卡一卡二卡四卡免费| 色5月婷婷丁香| 久久久国产一区二区| 97在线人人人人妻| 大香蕉久久成人网| 在现免费观看毛片| 日本黄色日本黄色录像| 一级片'在线观看视频| 超碰97精品在线观看| 满18在线观看网站| 国产av国产精品国产| 一本一本久久a久久精品综合妖精 国产伦在线观看视频一区 | 岛国毛片在线播放| 国产片内射在线| 免费看不卡的av| 久久久国产一区二区| 一级爰片在线观看| 看非洲黑人一级黄片| 国产成人aa在线观看| 九九在线视频观看精品| 精品少妇久久久久久888优播| 久久婷婷青草| 99热网站在线观看| 欧美亚洲日本最大视频资源| 亚洲av欧美aⅴ国产| 亚洲成人手机| 国产精品不卡视频一区二区| 亚洲国产欧美在线一区| 久久久久久人人人人人| 美女大奶头黄色视频| 久久 成人 亚洲| 亚洲欧美成人精品一区二区| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 国产精品一国产av| 97精品久久久久久久久久精品| 老司机影院毛片| 黑人欧美特级aaaaaa片| 少妇精品久久久久久久| 日本av免费视频播放| a 毛片基地| 国产有黄有色有爽视频| 在线观看美女被高潮喷水网站| 男女无遮挡免费网站观看| 亚洲国产av新网站| 亚洲精品456在线播放app| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 国产黄色视频一区二区在线观看| 亚洲av日韩在线播放| 国产精品久久久久成人av| 亚洲成人av在线免费| 男男h啪啪无遮挡| 五月开心婷婷网| 国精品久久久久久国模美| 99re6热这里在线精品视频| 国产精品三级大全| 精品人妻一区二区三区麻豆| 五月伊人婷婷丁香| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 国产成人精品无人区| 久久国内精品自在自线图片| 久久久久久久久久人人人人人人| 亚洲精品av麻豆狂野| 高清视频免费观看一区二区| 久久久久人妻精品一区果冻| 一区二区日韩欧美中文字幕 | 美女xxoo啪啪120秒动态图| 亚洲欧美色中文字幕在线| 一级毛片 在线播放| 丁香六月天网| 亚洲国产av影院在线观看| 内地一区二区视频在线| 少妇被粗大猛烈的视频| 国产精品久久久久久久久免| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕 | 免费黄频网站在线观看国产| 免费播放大片免费观看视频在线观看| 在线观看www视频免费| 精品福利永久在线观看| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 国产免费现黄频在线看| 久久热在线av| 国产成人一区二区在线| 天堂8中文在线网| 色5月婷婷丁香| 看免费av毛片| 在线天堂中文资源库| 91精品国产国语对白视频| 国产精品一区二区在线观看99| 咕卡用的链子| 色94色欧美一区二区| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 高清视频免费观看一区二区| 在线观看美女被高潮喷水网站| 亚洲,欧美,日韩| 免费观看性生交大片5| 一本一本久久a久久精品综合妖精 国产伦在线观看视频一区 | 欧美激情极品国产一区二区三区 | 欧美激情国产日韩精品一区| 看免费av毛片| 成人亚洲欧美一区二区av| 婷婷色综合www| 永久免费av网站大全| 曰老女人黄片| 亚洲av国产av综合av卡| 啦啦啦啦在线视频资源| 欧美人与性动交α欧美精品济南到 | 男人舔女人的私密视频| 少妇人妻 视频| 男女午夜视频在线观看 | 精品亚洲成a人片在线观看|