陰道微生態(tài)評價系統(tǒng)檢測陰道分泌物診斷細菌性陰道病的價值

吳秀珍，馬菲菲，林麗華，黃紹娥

三明市第一醫(yī)院檢驗科 (福建三明 365000)

細菌性陰道病(bacteria vaginosis，BV)是由于陰道微生態(tài)平衡被破壞而導致的混合感染型疾病，在育齡期女性中發(fā)病率較高。BV可誘發(fā)多種婦科疾病和(或)產(chǎn)科疾病，如尿道炎、婦科腫瘤、早產(chǎn)、羊水感染等，嚴重威脅患者的身心健康[1]。因此，準確診斷、及時有效治療BV患者的意義重大。既往，國內外多以Amsel診斷法為基本的臨床診斷方法，該方法雖診斷價值較高，但其重復性較差，臨床推廣有一定難度。有研究報道，陰道微生態(tài)評價系統(tǒng)能反映陰道微環(huán)境改變，在陰道感染檢測中有較為顯著的價值[2]。由此推測，陰道微生態(tài)評價系統(tǒng)在BV的診斷中或有一定價值。基于此，本研究旨在分析陰道微生態(tài)評價系統(tǒng)檢測陰道分泌物診斷BV的價值，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019年1—12月我院檢驗科收治的60例疑似BV患者作為研究對象，年齡22～40歲，平均(30.25±3.17)歲；體質量指數(shù)(body mass index，BMI)19～28 kg/m2，平均(23.07±1.26)kg/m2。本研究方案通過三明市第一醫(yī)院醫(yī)學倫理委員會審核批準。納入標準：待檢者均簽署知情同意書；精神及意識狀態(tài)正常，可高效配合研究；待檢者有外陰不適、分泌物量及性狀改變、分泌物有異味等癥狀；心、肝、腎功能正常；有性生活史。排除標準：處于月經(jīng)期；在檢查前1周內有陰道用藥史；在檢查前3 d內使用過陰道潤滑劑、陰道灌液或進行性交。

1.2 方法

陰道微生態(tài)評價系統(tǒng)檢測方法具體如下。(1)取材：輕置未涂潤滑劑的無菌窺陰器暴露陰道，取材前先用1支棉拭子輕輕拭去取材部位堆積的膿液，然后用另2支棉拭子取陰道側壁上1/3的陰道分泌物。(2)涂片、固定：將其中1支拭子在玻片上滾動1周作為涂片標本，并將涂片干燥、固定。(3)染色：準備革蘭染色液，由珠海貝索生物技術有限公司提供，包括龍膽紫溶液、碘溶液、脫色液、蕃紅染色液，首先加龍膽紫溶液染色10 s后水洗，甩干，再加碘溶液染色10 s后水洗，甩干，之后應用脫色液脫色10 s后水洗，甩干，最后應用蕃紅染色液復染10 s后水洗，待自然干燥后使用OLYMPUS CX22 型生物顯微鏡實施鏡檢，查找線索細胞的同時在鏡下進行Nugent評分(0～3分為正常，4～6分為臨界范圍，7分及以上為BV)。(4)陰道微生態(tài)評價：從2～8 ℃的恒溫冰箱中取出試劑盒，將其恢復至室溫后使用，在軟試管中滴取4～6滴稀釋液，然后將另1支附著有陰道分泌物的棉拭子置于軟試管內的稀釋液中，將棉拭子反復旋轉3～4次，使所附著的分泌物充分釋放，最后將棉拭子頭部緊貼軟管壁使其吸附的液體流回試管，得到所需樣本，從鋁箔袋中取出反應裝置，用吸管吸取樣本液，在反應裝置的7個反應孔內(包括1個空白對照孔)每孔滴加1滴樣本液，然后在唾液酸酶反應孔中再滴加1滴顯色液，輕輕震搖反應裝置，1 min內對照比色卡的顯色情況記錄PH，將反應裝置放于37 ℃溫度下溫育10 min，在乙酰氨基葡萄糖苷酶反應孔中再滴加1滴終止液，在30 s至60 min內記錄顯色結果。(5)結果判讀：以空白對照孔為對照孔，根據(jù)比色卡顯示的顏色反應(比色卡標識，“-”為陰性、“±”為弱陽性、“+、++、+++”為陽性)判讀各孔反應后的結果得出是否存在BV，在完成陰道微生態(tài)評價后實施Amsel診斷法，并以此結果為金標準。

1.3 評價指標

(1)診斷價值：統(tǒng)計陰道微生態(tài)評價系統(tǒng)診斷BV的結果，以Amsel診斷法結果為金標準，分析陰道微生態(tài)評價系統(tǒng)診斷BV的價值，其中以a表示真陽性，以b表示假陰性，以c表示假陽性，以d表示真陰性，靈敏度=a/(a+c)×100%，特異度=d/(b+d)×100%，準確度=(a+d)/(a+b+c+d)×100%，陽性預測值=a/(a+b)×100%，陰性預測值=d/(c+d)×100%。(2)一致性分析：采用Kappa法進行一致性檢驗，分析陰道微生態(tài)評價系統(tǒng)診斷BV結果與Amsel診斷法結果的一致性。

1.4 統(tǒng)計學處理

2 結果

2.1 Amsel診斷法結果

經(jīng)Amsel診斷法確診為BV的患者共43例。

2.2 陰道微生態(tài)評價系統(tǒng)診斷BV結果

陰道微生態(tài)評價系統(tǒng)診斷BV的準確度為91.67%(55/60)、靈敏度為93.02%(40/43)、特異度為88.23%(15/17)、陽性預測值為95.24%(40/42)、陰性預測值為83.33%(15/18)；經(jīng)Kappa一致性度量，陰道微生態(tài)評價系統(tǒng)診斷BV結果和Amsel診斷法一致性較好(Kappa=0.798，P=0.000)，見表1。

表1 陰道微生態(tài)評價系統(tǒng)的診斷效果(例)

3 討論

在正常情況下，陰道內存在的微生物菌群和宿主之間是相互影響、相互制約的，處于動態(tài)平衡狀態(tài)，對維持陰道自凈作用及保持宿主健康發(fā)揮著重要作用。但當機體內外因素打破該種動態(tài)平衡的狀態(tài)時，會造成微生物在種類、數(shù)量、比例上出現(xiàn)變化，導致陰道微生態(tài)紊亂，使加特納菌、普氏菌及阿托波等厭氧菌侵襲并在陰道內大量繁殖，進而引起B(yǎng)V，嚴重降低患者的生命質量[3-4]。因此，應用快速、準確的方法診斷BV患者已成為臨床關注的重點。

Amsel診斷法是將臨床表現(xiàn)與實驗室檢查結果相結合的診斷方法，是診斷BV的金標準，但臨床普及具有一定難度，應用具有局限性[5]。當前，微生態(tài)評價系統(tǒng)逐漸用于各種陰道炎癥疾病的臨床診斷中，且取得了一定的效果[6]。本研究結果顯示，陰道微生態(tài)評價系統(tǒng)診斷BV的準確度、靈敏度、特異度、陽性預測值及陰性預測值均較高，且經(jīng)Kappa一致性度量，陰道微生態(tài)評價系統(tǒng)診斷BV結果和Amsel診斷法一致性較好，表明陰道微生態(tài)評價系統(tǒng)能準確診斷BV。分析其原因為，陰道微生態(tài)評價系統(tǒng)是將Nugent革蘭染色評分法與干化學酶技術相結合的診斷系統(tǒng)，先根據(jù)陰道內菌種情況進行評分，然后根據(jù)酶解特異性底物顯色或添加顯色液顯色評估陰道微環(huán)境改變情況。若陰道分泌物中存在過氧化氫、白細胞酯酶、唾液酸苷酶、β-葡萄糖醛酸酶、PH及乙酰氨基葡萄糖苷酶的變化，在相應底物作用下會呈現(xiàn)不同的顏色改變，并且呈現(xiàn)的顏色深淺與所含酶的濃度成正比[7-8]。其中的唾液酸苷酶是由加德納菌、普氏菌及阿托波菌等BV致病菌產(chǎn)生的特異性酶，僅在BV致病菌出現(xiàn)后才會大量產(chǎn)生。因此，檢測陰道分泌物中的唾液酸苷酶可了解陰道內BV致病菌定居及繁殖的情況。利用陰道微生態(tài)評價系統(tǒng)檢測陰道分泌物，當唾液酸苷酶孔呈陽性(顯示淡紅色、紅色或紫紅色)，且結合Nugent革蘭染色評分≥7分時可準確診斷BV。

綜上所述，陰道微生態(tài)評價系統(tǒng)能準確診斷BV，且與Amsel診斷法結果的一致性較好，診斷價值較高。