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    血清microRNA-873在2型糖尿病視網(wǎng)膜病變患者中的作用機制*

    2021-11-24 11:27:56賈蒙嵐廖沁歐陽凌云張娣袁安陽光
    西部醫(yī)學 2021年11期
    關鍵詞:微血管內皮視網(wǎng)膜

    賈蒙嵐 廖沁 歐陽凌云 張娣 袁安 陽光

    (成都市第二人民醫(yī)院1.眼科;2.內分泌科,四川 成都 610017)

    糖尿病視網(wǎng)膜病變(Diabetic retinopathy,DR)是2型糖尿病患者常見的慢性并發(fā)癥之一,目前發(fā)病機制未明[1-2]。現(xiàn)階段研究已證實,由白介素-17(Interleukin-17,IL-17)介導的慢性炎癥反應在DR的血管病變及視網(wǎng)膜損傷過程中占有重要作用[3-4]。有研究報道,microRNA-873與IL-17的關系密切,且參與免疫炎癥反應的過程。國內有學者研究發(fā)現(xiàn),IL-17誘導的microRNA-873可通過靶向A20泛素編輯酶參與自身免疫性腦脊髓炎的發(fā)病機制[5-6]。但是,目前關于microRNA-873與2型糖尿病視網(wǎng)膜病變之間關系的研究尚少。本研究通過觀察2型糖尿病視網(wǎng)膜病變患者血清microRNA-873的表達量,進一步分析其與2型糖尿病視網(wǎng)膜病變之間的關系,現(xiàn)報告如下。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料 選取2018年1月~2019年12月我院收治并確診為2型糖尿病的患者150例作為研究對象,根據(jù)是否存在視網(wǎng)膜病變將所有的入組對象分為2型糖尿病合并視網(wǎng)膜病變組(DR組)78例和2型糖尿病不合并視網(wǎng)膜病變組(NDR組)72例。納入標準:①診斷標準參照《我國糖尿病臨床診療指南》中關于2型糖尿病及糖尿病視網(wǎng)膜病變的診斷標準。②正在接受降糖治療。排除標準:①合并嚴重心、肝、肺及腦血管疾病患者。②患有1型糖尿病或其他特殊類型的糖尿病患者。③存在全身免疫系統(tǒng)疾病或急、慢性感染者。④患有其他原因導致的視網(wǎng)膜病變或存在內眼手術史。本研究患者均知情同意,并經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準。

    1.2 microRNA-873表達量檢測 所有研究對象均于清晨空腹抽取肘靜脈血3mL,抗凝后離心(2000r/min,15min),選擇miRNeasy Mini Kits提取總RNA,嚴格按照說明書進行??俁NA提取后進行PCR反應,PCR反應體系:預反應(95℃,2min)-解鏈(95℃,5s)-退火(56℃,5s)-延伸(72℃,35s),共35個循環(huán),運用2-ΔΔCT相對定量計算目標基因含量。

    1.3 視網(wǎng)膜病變相關炎癥指標及微血管內皮功能指標檢測 所有入組患者均于入院后抽取清晨空腹肘靜脈5 mL,離心后留取上清液-80℃保存。酶聯(lián)免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)檢測血清中TNF-α、IL-6和IL-17水平;內皮細胞(ECs)、內皮祖細胞(EPCs)計數(shù)百分比采用流式細胞儀檢測(美國畢地公司)。

    2 結果

    2.1 兩組患者一般資料比較 DR組患者中合并糖尿病腎病者22例,合并糖尿病周圍神經(jīng)病變者15例,其他者6例,NDR組患者中合并糖尿病腎病者17例,合并糖尿病周圍神經(jīng)病變者10例,其他者5例;DR組患者平均糖化血紅蛋白值明顯高于NDR組(P<0.05),其他一般資料方面無統(tǒng)計學差異(P>0.05),見表1。DR組患者中視網(wǎng)膜病變非增殖期患者52例,增殖期患者26例。

    表1 兩組患者一般資料比較

    2.2 兩組患者microRNA-873表達量比較 相對于NDR組患者,DR組患者體內microRNA-873表達量顯著升高,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.001),見表2。

    表2 兩組患者microRNA-873表達量比較

    2.3 兩組患者心肌損傷及相關炎癥指標結果比較 與NDR組患者相比,DR組患者的血清TNF-α、IL-6及IL-17表達量均明顯較高,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),見表3。

    表3 兩組患者心肌損傷及相關炎癥指標結果比較

    2.4 兩組患者微血管內皮功能指標比較 DR組患者的Ecs水平明顯高于NDR組,而EPCs水平明顯低于NDR組,差異均具有統(tǒng)計學意義(P<0.05),見表4。

    表4 兩組患者微血管內皮功能指標比較

    2.5 microRNA-873表達量與視網(wǎng)膜病變各指標間的相關性 通過Pearson相關性分析結果顯示,患者組血清microRNA-873表達量與TNF-α、IL-6、IL-17表達量及Ecs百分比間均存在明顯正相關,與EPCs百分比間均存在明顯負相關,差異均具有統(tǒng)計學意義(P<0.05),見表5。

    表5 microRNA-873表達量與視網(wǎng)膜病變各指標間的相關性

    3 討論

    近年來,2型糖尿病發(fā)病率逐年增加,糖尿病視網(wǎng)膜病變亦成為嚴重降低患者生活質量的慢性并發(fā)癥[7-8]。研究表明,糖尿病視網(wǎng)膜病變的主要病理特征是視網(wǎng)膜微血管損傷[9]。同時,據(jù)流行病學調查發(fā)現(xiàn),因微循環(huán)障礙導致死亡的2型糖尿病患者約有一半以上。因此,對于糖尿病微血管病變發(fā)病機制的研究逐漸引起了醫(yī)學界的廣大關注[10-11]。

    現(xiàn)階段研究發(fā)現(xiàn),微小RNA可參與多種疾病的各個生化過程中。有研究報道,microRNAs 表達量改變在視網(wǎng)膜血管病變中占有重要作用,如microRNA-410可抑制視網(wǎng)膜新生血管形成等[12-14]。本研究發(fā)現(xiàn),在合并有視網(wǎng)膜病變的糖尿病患者存在microRNA-873表達量的顯著升高,且差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。既往研究表明,microRNA-873不僅具有抑制細胞增殖、引起細胞凋亡的作用,還可參與炎癥免疫反應[15-16]。

    炎癥反應在視網(wǎng)膜病變中的作用不容忽視,本研究還發(fā)現(xiàn),與NDR組患者相比,DR組患者的血清TNF-α、IL-6及IL-17表達量均明顯較高(P<0.05),與既往研究的結果相一致[17]。微血管內皮功能方面比較,DR組患者的Ecs水平明顯高于NDR組,而EPCs水平明顯低于NDR組(P<0.05)。進一步通過Pearson相關性分析結果顯示,患者組血清microRNA-873表達量與TNF-α、IL-6、IL-17表達量及Ecs百分比間均存在明顯正相關(P<0.05),與EPCs百分比間均存在明顯負相關(P<0.05)。上述結果提示,microRNA-873表達量改變與炎癥反應介質和微血管內皮功能改變顯著相關,考慮其可能原因有:①炎癥免疫反應,有研究表明,microRNA-873表達量改變可直接影響血清IL-6、TNF-α等炎性介質的表達,而后者表達水平改變可造成視網(wǎng)膜炎性損傷、促進新生血管生成和導致神經(jīng)變性等[18-20]。②引起細胞凋亡,腫瘤學研究中發(fā)現(xiàn),microRNA-873表達量改變可影響細胞增殖、凋亡進程。動物學實驗發(fā)現(xiàn),microRNA-873表達量改變可參與NF-κB信號通路,后者p65亞基乙酰化后可激活MMP-9表達從而加快視網(wǎng)膜血管內皮細胞凋亡[21-23]。

    4 結論

    2型糖尿病視網(wǎng)膜病變患者血清中存在microRNA-873表達量改變,且與血清炎癥介質表達量改變和血管內皮功能改變密切相關,但是,關于microRNA-873的具體作用機制有待于進一步考證。

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