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    單叢茶HS-SPME/GC-MS 指紋圖譜的構(gòu)建

    2021-11-23 08:19:10盧丹敏唐俊偉張?zhí)焯?/span>歐陽(yáng)建葉漢鐘林鎮(zhèn)填劉仲華黃建安
    食品工業(yè)科技 2021年21期
    關(guān)鍵詞:總峰單叢茶水

    盧丹敏,唐俊偉,張?zhí)焯?,歐陽(yáng)建,葉漢鐘,林鎮(zhèn)填,劉仲華,*,黃建安,*

    (1.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)茶學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,湖南長(zhǎng)沙 410128;2.國(guó)家植物功能成分工程技術(shù)研究中心,湖南長(zhǎng)沙 410128;3.植物功能成分利用省部共建協(xié)同創(chuàng)新中心,湖南長(zhǎng)沙 410128;4.宋凰生態(tài)茶業(yè)有限公司,廣東潮州 521000;5.潮州市天羽茶業(yè)有限公司,廣東潮州 521000)

    單叢茶(鳳凰單叢、嶺頭單叢)是一種傳統(tǒng)名茶,產(chǎn)自廣東潮州,以濃郁多變的花果蜜香和濃醇的滋味品質(zhì)著稱。它是用2~4 葉、芽葉完整的對(duì)夾葉,經(jīng)過(guò)采摘、曬青、攤涼、碰青、殺青、揉捻、烘焙等工藝加工而成[1?2]。單叢茶葉因其品種和工藝參數(shù)不同,其品質(zhì)特點(diǎn)也不盡相同。根據(jù)香型可分為黃枝香、芝蘭香、玉蘭香、蜜蘭香、杏仁香、姜花香、肉桂香、桂花香、夜來(lái)香、茉莉香、柚花香、橙花香、楊梅香等十幾種產(chǎn)品[3?4]。

    目前有多種方式可對(duì)茶葉中的揮發(fā)性物質(zhì)進(jìn)行提取,包括同時(shí)蒸餾萃取法[5]、超臨界流體萃取法[6]、頂空固相微萃取法[5,7]和溶劑輔助風(fēng)味蒸發(fā)法[8?9]等。由于頂空固相微萃取法具有需樣量較小、處理時(shí)間較短、能收集樣品中絕大部分揮發(fā)性成分等優(yōu)點(diǎn)[10?11],現(xiàn)已成為茶葉揮發(fā)性提取的常用方法。目前,指紋圖譜借鑒了法醫(yī)學(xué)的概念,在重視個(gè)體差異性的基礎(chǔ)上,強(qiáng)調(diào)重視群體的共性,以期綜合反映各物質(zhì)成分含量的真實(shí)性、穩(wěn)定性和均一性[12]?,F(xiàn)階段,茶葉指紋圖譜主要利用各種色譜、光譜、波譜等手段構(gòu)建,包括氣相色譜法[13]、紫外光譜法[14]、紅外光譜法[15?16]、核磁共振法[17?18]、高效液相色譜法(HPLC)[12,19?21]和氣質(zhì)聯(lián)用法[22?23]等。在揮發(fā)性物質(zhì)方面,與氣相指紋圖譜相比,氣質(zhì)聯(lián)用技術(shù)指紋圖譜具有靈敏度更高、準(zhǔn)確度更高和重現(xiàn)性更好等優(yōu)點(diǎn),近年來(lái)也被廣泛應(yīng)用于茶葉鑒定和質(zhì)量控制中。WU 等[22]利用GC-MS 指紋圖譜,結(jié)合主成分、聚類分析方法和指紋相似度分析,成功區(qū)分和識(shí)別來(lái)自云南省兩個(gè)茶山的普洱茶。LONG 等[23]通過(guò)判別分析,可以將樣品分為7 個(gè)不同的組,建立了七個(gè)不同等級(jí)的信陽(yáng)毛尖香氣成分的GC-MS 指紋圖譜,為信陽(yáng)毛尖等級(jí)判別提供了一種新方法。

    目前,在單叢茶揮發(fā)性物質(zhì)指紋圖譜方面還未有相關(guān)研究。另一方面,單叢茶鑒別的方法仍依賴于評(píng)茶師的經(jīng)驗(yàn)及其個(gè)人感受,依國(guó)標(biāo)[24]或行標(biāo)[3?4,25]進(jìn)行評(píng)判,這種方法受個(gè)人喜好及身體狀況的影響,一定程度上導(dǎo)致市面上的單叢茶魚龍混雜。因此,本文對(duì)單叢茶進(jìn)行頂空固相微萃取的條件優(yōu)化研究,并對(duì)各個(gè)樣品進(jìn)行GC-MS 檢測(cè)和分析。嘗試為單叢的揮發(fā)性物質(zhì)檢測(cè)提供操作方便、準(zhǔn)確率高的萃取方法;建立單叢茶揮發(fā)性物質(zhì)指紋圖譜以及建立基于指紋圖譜數(shù)據(jù)的地區(qū)判別函數(shù),為單叢茶的產(chǎn)地判別及真?zhèn)舞b別等提供科學(xué)的參考依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 材料與儀器

    22 個(gè)單叢茶樣(D1~D22)均為2019 年茶葉出自潮州當(dāng)?shù)仞埰胶网P凰兩個(gè)地區(qū),D1~D8 為饒平地區(qū)茶葉,D9~D22 為鳳凰茶區(qū)茶葉。樣品收集后于陰涼干燥處保存;氯化鈉 國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司;癸酸乙酯 美國(guó) Sigma-Aldrich 試劑公司;C8~C40 偶數(shù)正構(gòu)烷烴標(biāo)準(zhǔn)品 美國(guó) o2si 公司。

    樣品瓶15 mL 上海安譜科學(xué)儀器有限公司;EPFO-984TA7CHSEUA 數(shù)顯型磁力加熱攪拌器美國(guó) Talboys 公司;7890B-5977A 氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀 美國(guó) Agilent 公司;固相微萃取手動(dòng)進(jìn)樣手柄、PDMS/DVB 固相微萃取頭65 μm 美國(guó)Supelco公司。

    1.2 實(shí)驗(yàn)方法

    1.2.1 樣品處理 采用五點(diǎn)取樣法對(duì)茶樣進(jìn)行取樣、合并和磨碎,而后在每個(gè)茶樣中各取3.0 g 磨碎樣進(jìn)行混合作為條件優(yōu)化試驗(yàn)樣本QC,置于干燥器中常溫保存。

    1.2.2 頂空固相微萃取條件 采用單因素逐步優(yōu)化的方法對(duì)鳳凰單叢茶揮發(fā)性成分頂空固相微萃取條件進(jìn)行優(yōu)化。在萃取溫度為80 ℃和茶水比0.75 :5 g/mL 的條件下,分別萃取30、40、50 和60 min以此考察萃取時(shí)間對(duì)萃取效果的影響;在萃取時(shí)間為40 min 和茶水比0.75 : 5 g/mL 的條件下,分別在60、80、90 和100 ℃的電子磁力加熱攪拌器上萃取,以此考察萃取溫度對(duì)萃取效果的影響;在萃取時(shí)間40 min 和萃取溫度80 ℃的條件下,考察茶水比0.5:5、0.75:5、1:5、1.25:5 g/mL 對(duì)萃取效果的影響,通過(guò)比較因素中各水平的總峰面積和峰個(gè)數(shù)衡量萃取效果,最終確定最優(yōu)萃取參數(shù)。

    1.2.3 萃取過(guò)程 在放有QC 樣本和磁力轉(zhuǎn)子的15 mL樣品瓶中,迅速加入帶有10 μL 癸酸乙酯內(nèi)標(biāo)(8.64 mg/L)和0.5 g 氯化鈉的5 mL 沸水,用帶有聚四氟乙烯隔墊的瓶蓋擰緊,搖勻,然后置于一定溫度和轉(zhuǎn)速(600 r/min)的磁力攪拌加熱器上,攪拌加熱。5 min 平衡后將老化過(guò)的萃取纖維頭推出,纖維頭距離液面0.5 cm,進(jìn)行揮發(fā)性物質(zhì)萃取。一定時(shí)間后收回纖維頭,迅速插入進(jìn)樣口中進(jìn)行解析,每個(gè)條件重復(fù)3 次。

    1.2.4 GC/MS 分析條件 參考李永迪、肖凌等[7?8]分析茶葉揮發(fā)性成分的方法,適當(dāng)調(diào)整后的條件如下:

    GC 條件:色譜柱HP-5MS(30 m×0.25 mm×0.25 μm),載氣為氦氣(純度>99.999%),進(jìn)樣口溫度250 ℃,柱流速1 mL/min,進(jìn)樣方式為脈沖不分流;升溫程序:40 ℃(6 ℃/min 上升)→80 ℃(1.5 ℃/min上升)→100 ℃(6 ℃/min 上升,保持1 min)→130 ℃(6 ℃/min 上升)→150 ℃(3 ℃/min 上升)→165 ℃(15 ℃/min 上升)→230 ℃(保持2 min),溶劑延遲3 min。所有樣品重復(fù)3 次

    MS 條件:離子源EI,離子源溫度230 ℃,接口溫度250 ℃,EI 源能量70 eV,四級(jí)桿溫度150 ℃,掃描方式為全掃描模式(scan):掃描范圍35~450 u。譜庫(kù): NIST 17。

    1.3 數(shù)據(jù)處理

    對(duì)GC-MS 檢測(cè)得到的數(shù)據(jù)進(jìn)行解譜,與NIST17標(biāo)準(zhǔn)譜庫(kù)比對(duì),篩選出匹配度大于75%的物質(zhì);為了得到揮發(fā)性化合物的保留指數(shù)RI 值,在相同條件下檢測(cè)正構(gòu)烷烴(C8~C40)。保留指數(shù)計(jì)算公式如下:

    式中:RI 為揮發(fā)性化合物的保留指數(shù);n 為該化合物前一碳標(biāo)的原子數(shù);RTx 為該化合物的保留時(shí)間;RTn 為該化合物前一碳標(biāo)的保留時(shí)間;RTn+1 為該化合物后一碳標(biāo)的保留時(shí)間。計(jì)算后保留指數(shù)RI,查找和比對(duì)相關(guān)質(zhì)譜資料中對(duì)應(yīng)物質(zhì)的保留指數(shù),最終確定物質(zhì)成分。

    以內(nèi)標(biāo)峰癸酸乙酯的峰面積和保留時(shí)間作為參照,計(jì)算各共有峰的相對(duì)峰面積和相對(duì)保留時(shí)間。

    本研究應(yīng)用Excel 和IBM SPSS Statistics 23.0進(jìn)行數(shù)據(jù)處理、相似度分析和判別分析,并由Origin 2018 軟件繪圖完成。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 萃取條件優(yōu)化

    2.1.1 萃取時(shí)間的選擇 在同一萃取溫度和茶水比的條件下,分別萃取30、40、50 和60 min,結(jié)果如圖1(A)所示。增加頂空固相微萃取的時(shí)間,單叢茶揮發(fā)性成分的總峰面積和峰個(gè)數(shù)呈先增加后減少的趨勢(shì)。萃取時(shí)間30 min 的總峰面積顯著(P<0.05)少于萃取40 min 的總峰面積,而萃取40 min 的總峰面積顯著(P<0.05)少于50 min,萃取60 min 的總峰面積和40、50 min 無(wú)顯著性差異(P<0.05)。當(dāng)萃取時(shí)間從30 min 增加至40~60 min,整個(gè)過(guò)程峰個(gè)數(shù)均無(wú)顯著差異(P<0.05)。這說(shuō)明萃取在50 min 時(shí),纖維頭吸附與解吸基本達(dá)到平衡。而隨著萃取時(shí)間的延長(zhǎng),更多大分子物質(zhì)著附在纖維頭上,這使得纖維頭上小分子物質(zhì)的種類和濃度會(huì)有所降低[26]。故綜合單叢揮發(fā)性物質(zhì)含量和種類的檢測(cè)結(jié)果,選擇萃取時(shí)間為50 min 進(jìn)行萃取比較合適。

    圖1 萃取時(shí)間、溫度及茶水比對(duì)單叢茶揮發(fā)性物質(zhì)萃取的影響Fig.1 Effects of extraction time, temperature and tea-water ratio on volatile components extraction of Dancong tea

    2.1.2 萃取溫度的選擇 在同一萃取時(shí)間和茶水比的條件下,分別在60、80、90 和100 ℃的電子磁力加熱攪拌器上萃取,結(jié)果如圖1(B)所示。在萃取溫度為60~100 ℃的范圍內(nèi),隨著萃取溫度的上升,單叢揮發(fā)性成分的總峰面積呈先增加后減少的趨勢(shì),而峰種類在上升到一定數(shù)量后趨于穩(wěn)定。從60 ℃升至80 ℃或者從80 ℃升至90 ℃時(shí),總峰面積增加但差異不顯著(P<0.05),峰個(gè)數(shù)顯著(P<0.05)增加。90 ℃的總峰面積高于100 ℃,而90 ℃的峰個(gè)數(shù)少于100 ℃,但這兩個(gè)萃取溫度之間的差異不顯著(P<0.05)。萃取溫度能直接影響纖維頭對(duì)揮發(fā)性物質(zhì)的吸附。溫度過(guò)低則會(huì)加長(zhǎng)纖維頭吸附解吸達(dá)到平衡的時(shí)間,溫度過(guò)高則會(huì)使樣品瓶中分子熱運(yùn)動(dòng)加快,從而減少小分子物質(zhì)的吸附濃度,且溫度過(guò)高會(huì)加快揮發(fā)性物質(zhì)的氧化[27]。故綜合單叢揮發(fā)性物質(zhì)含量和種類的檢測(cè)結(jié)果,選擇萃取溫度為90 ℃進(jìn)行萃取比較合適。

    2.1.3 茶水比的選擇 在15 mL 樣品瓶中分別加入0.5、0.75、1 和1.25 g 的QC 樣品,加入5 mL 沸水及轉(zhuǎn)子,在同一萃取溫度和時(shí)間的條件下萃取,結(jié)果如圖1(C)所示。隨著茶水比的增加,單叢揮發(fā)性成分的總峰面積和峰個(gè)數(shù)呈先增加后減少的趨勢(shì)。在茶水比為0.75:5 g/mL 時(shí),總峰面積和峰個(gè)數(shù)達(dá)到最高,它與茶水比為0.5:5 g/mL 的結(jié)果無(wú)顯著性差異(P<0.05);茶水比為0.75:5 g/mL 的峰面積顯著(P<0.05)高于茶水比為1:5 g/mL,峰個(gè)數(shù)二者差異不顯著(P<0.05)。茶水比為1:5 g/mL 與茶水比為1.25:5 g/mL 樣品量的峰面積和峰個(gè)數(shù)結(jié)果無(wú)顯著性差異(P<0.05)。合適的樣品量能使纖維頭在樣品瓶中有最大的吸附量,若磨碎樣品量過(guò)少則多余的水會(huì)使液面上方的頂空體積減小,而量過(guò)多,則會(huì)有一部分沒(méi)有被水浸沒(méi),覆蓋在充分浸濕的樣品上,影響揮發(fā)性物質(zhì)的揮發(fā)。故選擇樣品量為0.75 g,加入5 mL 沸水進(jìn)行萃取比較合適。

    按照上述萃取條件優(yōu)化的結(jié)果,對(duì)各個(gè)單叢樣品進(jìn)行GC-MS 分析,共檢測(cè)出73 個(gè)揮發(fā)性化合物,主要包括醇類、酮類、醛類、酯類、酚類、碳?xì)浠衔?、含氮化合物、雜氧化合物等八類化合物。

    2.2 共有峰確認(rèn)及相對(duì)峰面積

    按照優(yōu)化后的HS-SPME/GC-MS 條件對(duì)22 個(gè)單叢茶揮發(fā)性成分進(jìn)行檢測(cè),鑒定各樣本色譜圖中的揮發(fā)性物質(zhì)后進(jìn)行比對(duì)篩選。最終篩選出20 個(gè)具有相同保留時(shí)間且鑒定為同一物質(zhì)的色譜峰作為共有峰(x1~x20)。按保留時(shí)間先后順序依次為1-辛烯-3-醇、6-甲基-5-庚烯-2-酮、(E,E)-2,4-庚二烯醛、α-松油烯、3-異丙基甲苯、氧化芳樟醇I、芳樟醇、脫氫芳樟醇、α-松油醇、水楊酸甲酯、臧紅花醛、癸醛、β-環(huán)檸檬醛、香葉醇、吲哚、α-紫羅酮、香葉基丙酮、β-紫羅酮、雪松醇、鄰苯二甲酸二異丁酯,如表1 所示。這些物質(zhì)大多都具有明顯的花果香特性,區(qū)別于其他茶類主要揮發(fā)性物質(zhì)[28],構(gòu)成了單叢茶香氣的基本特點(diǎn)。

    各共有峰的相對(duì)保留時(shí)間偏差較小,表明它們?cè)贕C-MS 色譜圖中具有相對(duì)穩(wěn)定性(見(jiàn)表1);通過(guò)各共有峰的相對(duì)峰面積制作揮發(fā)性物質(zhì)熱度圖(圖2),通過(guò)該圖,可以更直觀的看出各共有的揮發(fā)性成分間的差異以及樣品間的差異??傮w來(lái)說(shuō),峰面積較大的揮發(fā)性共有物質(zhì)為脫氫芳樟醇、芳樟醇、氧化芳樟醇I、吲哚和香葉醇;1-辛烯-3-醇、α-紫羅酮、α-松油烯、鄰苯二甲酸二異丁酯的峰面積則較小。

    圖2 共有揮發(fā)性物質(zhì)含量在各單叢樣品間的熱度圖Fig.2 Heat map of the common volatile substances across each sampleof Dancong tea

    各樣本非共有峰面積占比在36.7%~58.6%之間,平均占比為45.6%,占比較大,其原因在于單叢香型多變,各樣本揮發(fā)性成分種類多且雜,在某些特殊香型單叢中無(wú)法檢測(cè)到一些峰面積較大的物質(zhì),這也是造成共有物質(zhì)種類較少的原因。

    2.3 相似度分析

    以模擬的數(shù)字化指紋圖譜(表1)做為參照,采用夾角余弦法和皮爾遜相關(guān)系數(shù)法對(duì)各色譜圖進(jìn)行相似度分析,結(jié)果如表2 所示。其中有D16 和D21 為姜花香、桂花香品種茶葉,其揮發(fā)性成分含量與多數(shù)樣品差異明顯。茶葉揮發(fā)性物質(zhì)組成復(fù)雜,不同香型的單叢茶具有相同的主成分,但是各成分比例卻不盡相同,造成了千變?nèi)f化的鳳凰單叢香型。相比蜜蘭香、黃枝香等單叢茶,這兩種香型的單叢茶為小產(chǎn)量品種茶。若除去這兩個(gè)樣本,其余20 個(gè)圖譜的夾角余弦法結(jié)果在0.917~0.995 之間,皮爾遜相關(guān)系數(shù)法的結(jié)果在0.905~0.996 之間,兩種算法所得相似度結(jié)果較為一致,均大于0.9,符合指紋圖譜的要求。據(jù)此建立了單叢茶揮發(fā)性物質(zhì)的GC-MS 指紋圖譜(圖3)。

    圖3 單叢茶揮發(fā)性物質(zhì)GC-MS 指紋圖譜Fig.3 GC-MS fingerprints of volatile components for Dancong tea

    表1 單叢揮發(fā)性共有物質(zhì)數(shù)字化指紋圖譜Table 1 Digitalvolatile common componentsfingerprint chromatogram of Dancong tea

    表2 單叢茶揮發(fā)性物質(zhì)指紋圖譜的相似度分析Table 2 Similarity analysis of the volatile substancesfingerprint chromatogram for Dancong tea

    2.4 判別分析

    將單叢茶揮發(fā)性成分中的20 個(gè)共有峰相對(duì)峰面積作為特征,將單叢總樣本按3:1 的比例隨機(jī)分為分析組和驗(yàn)證組。其中分析組17 個(gè)樣本,用于構(gòu)建地區(qū)判別模型;驗(yàn)證組5 個(gè)樣本,用于對(duì)所建模型的檢驗(yàn)(表3)。以17 個(gè)樣本的20 個(gè)共有峰的相對(duì)峰面積為原始數(shù)據(jù),建立典型判別函數(shù)如下:

    F=0.556x1?15.633x2+6.298x3?10.964x4+10.763 x5+15.865x6?1.169x7+3.269x8?4.015x9?7.864x10+10.653x11?2.477x12?7.188x13+9.845x14?7.323x18

    由于變量x15、x16、x17、x19和x20與判別函數(shù)之間的相關(guān)性較大,因而不納入到該典型判別式函數(shù),該函數(shù)F 的特征值為100.562,貢獻(xiàn)率為100%。

    用自身驗(yàn)證法、外源驗(yàn)證法和交互驗(yàn)證法對(duì)該典型函數(shù)判別模型的準(zhǔn)確性進(jìn)行檢驗(yàn)(表3)。自身驗(yàn)證法和交叉驗(yàn)證法的準(zhǔn)確率均達(dá)100%。將5 個(gè)驗(yàn)證組樣本代入判別函數(shù)F中進(jìn)行檢驗(yàn),有1 個(gè)饒平地區(qū)茶樣被錯(cuò)判,鳳凰地區(qū)茶樣判對(duì)率100%,外部驗(yàn)證正確分類率為80%,表明應(yīng)用該判別模型將兩個(gè)地區(qū)茶葉分開來(lái)是可行的。

    表3 不同地區(qū)單叢茶判別驗(yàn)證結(jié)果Table 3 Results obtained for Dancong tea classification in different regions by discrimination analysis

    3 結(jié)論

    據(jù)報(bào)道HS-SPME 提取揮發(fā)性物質(zhì),主要受到樣品中揮發(fā)性物質(zhì)濃度、萃取時(shí)間和溫度等因素的影響,這三者均通過(guò)影響分子物質(zhì)的揮發(fā)及在萃取纖維頭的著附情況影響萃取結(jié)果[10?11]。本文采用單因素研究方法對(duì)這三方面單叢茶頂空固相微萃取的條件進(jìn)行優(yōu)化研究,最終發(fā)現(xiàn)采用萃取時(shí)間為50 min、萃取溫度為90 ℃、茶水比為0.75:5 g/mL 的條件進(jìn)行萃取,單叢茶揮發(fā)性物質(zhì)含量和種類萃取效果最好。利用頂空固相微萃取結(jié)合GC-MS 方法檢測(cè)單叢茶揮發(fā)性物質(zhì),操作方便、靈敏度高,分析速度快、準(zhǔn)確率高,具有一定的可行性和優(yōu)越性,為單叢茶的揮發(fā)性物質(zhì)檢測(cè)方法提供了高效、節(jié)能的分析方法。此外,萃取效果還受萃取纖維頭材質(zhì)的影響,不同的材料吸附各種香氣化合物的能力均不同。鹽的加入可以起到鹽析作用,不同的鹽濃度影響揮發(fā)性物質(zhì)的離子強(qiáng)度從而影響萃取效果。另外解析時(shí)間、溫度及進(jìn)樣模式均能影響檢測(cè)結(jié)果從而影響萃取效果的分析[29]。因此還可以從以上幾方面進(jìn)行研究頂空固相微萃取條件,使方法更系統(tǒng)更科學(xué)。

    單叢茶(鳳凰單叢、嶺頭單叢)主要產(chǎn)自于廣東潮州潮安區(qū)和饒平縣內(nèi)特定生長(zhǎng)區(qū)域,依賴得天獨(dú)厚的地理環(huán)境和自然條件,經(jīng)過(guò)特殊復(fù)雜的工藝加工而成,成為了具有區(qū)域特色的國(guó)家地理標(biāo)志保護(hù)產(chǎn)品。采用GC-MS 檢測(cè)分析技術(shù)從22 個(gè)單叢樣品中確定了20 個(gè)共有峰,分別為1-辛烯-3-醇、6-甲基-5-庚烯-2-酮、(E,E)-2,4-庚二烯醛、α-松油烯、3-異丙基甲苯、氧化芳樟醇I、芳樟醇、脫氫芳樟醇、α-松油醇、水楊酸甲酯、臧紅花醛、癸醛、β-環(huán)檸檬醛、香葉醇、吲哚、α-紫羅酮、香葉基丙酮、β-紫羅酮、雪松醇、鄰苯二甲酸二異丁酯。在潮州地區(qū),傳統(tǒng)的茶葉生產(chǎn)者單株選育,單株采制,在歷代沿習(xí)下,孕育了數(shù)量繁多、類型豐富的茶樹種質(zhì)資源,加上當(dāng)?shù)貧夂驕睾?,雨量充沛的自然條件使得單叢茶揮發(fā)性成分種類比例復(fù)雜,香型多變[30?31]。因此建立單叢茶揮發(fā)性物質(zhì)指紋圖譜,發(fā)現(xiàn)其相似度可達(dá)0.9 以上,該結(jié)果可為單叢茶的共有物質(zhì)成分鑒別研究提供理論支持。目前關(guān)于單叢揮發(fā)性成分指紋圖譜的研究較少,本研究由于樣品限制僅建立潮州地區(qū)單叢茶總指紋圖譜,此外,還可從各類香型、各種季節(jié)等方面對(duì)單叢揮發(fā)性指紋圖譜進(jìn)一步展開研究。本實(shí)驗(yàn)基于指紋圖譜共有峰數(shù)據(jù)對(duì)潮州兩個(gè)地區(qū)的單叢茶進(jìn)行判別分析,其自身驗(yàn)證法和交叉驗(yàn)證法的正確率均為100%,外部驗(yàn)證正確分類率為80%。潮安和饒平兩個(gè)地區(qū)茶葉品質(zhì)差異主要與茶葉品種、土質(zhì)狀況、海拔地形以及天氣條件密切相關(guān)。潮安區(qū)茶葉主要產(chǎn)自鳳凰鎮(zhèn)鳳凰山,以生產(chǎn)鳳凰單叢為主,其品種香型多變,品質(zhì)風(fēng)格獨(dú)特[31];饒平縣茶葉主要產(chǎn)自浮濱鎮(zhèn)嶺頭村雙髻娘山,以生產(chǎn)嶺頭單叢為主,其品種為白葉品種,香型以蜜蘭香為主[32]。該結(jié)果可為單叢茶地區(qū)鑒別提供科學(xué)參考。

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