于紅妍,侯秀敏,唐炳民
(青海省草原總站,青海 西寧 810008)
青海省草地蝗蟲(chóng)是一種為害草原植被的有害生物,分布在以禾本科牧草為主的干旱或半干旱草地上。青海草地蝗蟲(chóng)共90種(含亞種),特有種為47種(含亞種),占蝗蟲(chóng)總數(shù)的52.22%[1]?;认x(chóng)危害嚴(yán)重時(shí),牧草幾乎被啃食殆盡,造成大批牲畜無(wú)法越冬而死亡,畜牧業(yè)生產(chǎn)經(jīng)濟(jì)損失嚴(yán)重?;认x(chóng)是嚴(yán)重威脅農(nóng)牧業(yè)生產(chǎn)的暴發(fā)性、遷飛性害蟲(chóng)。全面推進(jìn)“公共植保、綠色植保”的理念,以確保農(nóng)業(yè)生態(tài)環(huán)境安全為目標(biāo),采取生物防控尤為重要。因此,草地蝗蟲(chóng)的有效治理,是使草地生態(tài)系統(tǒng)趨于良性循環(huán)的一項(xiàng)重要措施。
蝗蟲(chóng)微孢子蟲(chóng)(Paranosemalocustae),屬于微孢子蟲(chóng)目(Microsporidia),微粒子蟲(chóng)科(Nosematidae),是一種單細(xì)胞原生動(dòng)物,為蝗蟲(chóng)等直翅目昆蟲(chóng)的專性寄生的原生動(dòng)物[2]?;认x(chóng)微孢子蟲(chóng)由蝗蟲(chóng)口器進(jìn)入蝗蟲(chóng)體內(nèi)后,不斷增殖,主要侵染蝗蟲(chóng)的脂肪,使卵的形成受阻,導(dǎo)致感病雌蟲(chóng)喪失產(chǎn)卵能力,蝗蟲(chóng)微孢子蟲(chóng)大量消耗蝗蟲(chóng)的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),最終導(dǎo)致蝗蟲(chóng)衰弱,死亡[3,4]?;认x(chóng)微孢子蟲(chóng)病的傳播方式有兩種:水平傳播和垂直傳播。在施用當(dāng)年以流行優(yōu)勢(shì)造成蝗蟲(chóng)死亡率增加,也能夠形成跨年傳播給下一代的潛在傳播,可在蝗蟲(chóng)種群間持續(xù)多年傳播[5~8]?;认x(chóng)微孢子蟲(chóng)具有感染力高,體外存活能力強(qiáng)的特性,采用蝗蟲(chóng)微孢子蟲(chóng)治理蝗蟲(chóng)是一種持久、低耗和環(huán)境友好的生物防治措施,為高寒地區(qū)可持續(xù)治理蝗害提供技術(shù)支撐。
青海省海北藏族自治州央隆鄉(xiāng)位于祁連縣西部,距縣城210 km,平均海拔高度3475 m,全鄉(xiāng)總面積2 555km2,占祁連縣土地總面積的17.30%。全鄉(xiāng)草地面積18.25×104hm2,占全鄉(xiāng)土地總面積的71.39%;可利用草地面積15.08×104hm2。草場(chǎng)類型有山地草原類、山地草甸類、高寒草甸類和灌叢草甸類等。
央隆鄉(xiāng)夏格村天然草地面積5.94×104hm2,可利用草地面積5.4×104hm2,草場(chǎng)類型為高寒草原,主要為嵩草+疏花針茅型草地類、紫花針茅+冰草型草地類,草場(chǎng)平均蓋度為56%,項(xiàng)目區(qū)為冬春季草場(chǎng)。
試驗(yàn)藥劑:蝗蟲(chóng)微孢子蟲(chóng)懸浮劑,由河北晟普生物科技有限公司提供。
寬須蟻蝗(Myremeleotettixpalpalis)、狹翅雛蝗(Chorthippusdubius)、白邊痂蝗(Bryodemaluctuasum)、紅翅皺膝蝗(Angaracrisdubius)。防控期蝗蟲(chóng)主要為3 齡、4齡蝗蝻混合期,平均蟲(chóng)口密度96.5頭/平方米。
防控機(jī)械:AC311A直升飛機(jī)。
防治時(shí)期:2020年7月30日。
檢測(cè)單位:北京中維新興技術(shù)有限公司,中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院。
施藥參數(shù):飛機(jī)作業(yè)進(jìn)行超低容量噴霧,飛行高度為10~20 m,有效噴幅為40~50 m。作業(yè)平均時(shí)速140~160 km/h。飛機(jī)作業(yè)時(shí)間選擇在天氣晴朗,地面風(fēng)速低于4 m/s時(shí)進(jìn)行?;认x(chóng)微孢子蟲(chóng)懸浮劑使用劑量為15 mL /hm2。單架次裝藥400 kg,防控面積為6 666.7 hm2。
在防治區(qū)內(nèi),采用 “Z”字形隨機(jī)抽樣,選取3個(gè)施藥區(qū)和1個(gè)非施藥區(qū)做藥效調(diào)査樣區(qū)。每樣區(qū)調(diào)查3個(gè)樣方。隨機(jī)掃網(wǎng)取樣,飛機(jī)作業(yè)前1 d調(diào)查蝗蟲(chóng)口基數(shù),施藥后15 d,30 d調(diào)查蟲(chóng)口密度并取樣。收集死蟲(chóng)樣本,統(tǒng)計(jì)死亡率。網(wǎng)捕樣本作好標(biāo)簽裝入塑料袋帶回室內(nèi)冷凍貯藏,并隨機(jī)抽取一定數(shù)量(100頭以上)的不同種類蝗蟲(chóng)個(gè)體作單體研磨,鏡檢感染情況。
光學(xué)顯微鏡(目鏡10倍以上、物鏡20倍以上的相差顯微鏡)、血球計(jì)數(shù)板(計(jì)數(shù)區(qū)分成25個(gè)中方格)、載玻片、蓋玻片、離心管(5mL)、離心機(jī)、二次蒸餾水、燒杯(50mL)、移液槍(精確至0.1mL)、移液管1 mL(精確至0.1mL)等。
(1)用移液管吸取5 mL試樣置于25 mL容量瓶中,用蒸餾水稀釋至刻度,充分搖勻。
(2)將計(jì)數(shù)板的蓋玻片加蓋在計(jì)數(shù)板上,用滴管取少量稀釋后的懸浮液由小槽慢慢注入,使液體充滿計(jì)數(shù)室,將此計(jì)數(shù)板放在顯微鏡載物臺(tái)上靜置15 min,對(duì)左上、左下、右上、右下及中央共5個(gè)中型方格中蝗蟲(chóng)微孢子蟲(chóng)進(jìn)行計(jì)數(shù),每次計(jì)數(shù)重復(fù)3次,所得數(shù)目基本一致后取其算術(shù)平均值作為計(jì)數(shù)結(jié)果。
(3)計(jì)數(shù)時(shí)若每個(gè)中型方格中的蝗蟲(chóng)微孢子蟲(chóng)大于50個(gè),則對(duì)樣本溶液進(jìn)行梯度稀釋,稀釋到計(jì)數(shù)板上每個(gè)中型方格有30~50個(gè)蝗蟲(chóng)微孢子蟲(chóng)為止。
根據(jù)所取樣品體積、計(jì)數(shù)板上5個(gè)中方格中蝗蟲(chóng)微孢子蟲(chóng)數(shù)量以及稀釋的倍數(shù),計(jì)算出每毫升樣品所含蝗蟲(chóng)微孢子蟲(chóng)數(shù)目。試樣中蝗蟲(chóng)微孢子蟲(chóng)含量X1(億孢子/毫升)按以下公式計(jì)算:
公式中:
N—計(jì)數(shù)板上5個(gè)中型方格中蝗蟲(chóng)微孢子蟲(chóng)數(shù)目的平均值,單位為個(gè)孢子;
M—樣品被稀釋的倍數(shù);
V—試樣的體積,單位為毫升(mL);
50 000—換算系數(shù)。
兩次蝗蟲(chóng)微孢子蟲(chóng)含量的平行測(cè)定結(jié)果之相對(duì)偏差應(yīng)不大于8%。取其算術(shù)平均值作為測(cè)定結(jié)果。
鏡檢孢子采用分級(jí)的方法(Henry,1972)來(lái)表示微孢子蟲(chóng)對(duì)蝗蟲(chóng)的致病程度。分級(jí)標(biāo)準(zhǔn):0級(jí),無(wú)孢子;1級(jí),視野中小于1個(gè)孢子;2級(jí),視野中有1~10個(gè)孢子;3級(jí),視野中有10~100個(gè)孢子;4級(jí),視野中有100個(gè)以上孢子。
分別對(duì)防治前、防治后15 d、防治后30 d各取100頭蝗蟲(chóng)進(jìn)行抽樣檢測(cè),其中防治前感染率為0%、防治后15 d感染率為54%、防治后30 d感染率為72%。見(jiàn)圖1。
對(duì)防治后15 d、30 d的蝗蟲(chóng)各取50頭樣本進(jìn)行抽樣檢測(cè),15 d蝗蟲(chóng)感染指數(shù)為34.5%(其中:0級(jí)23頭、1級(jí)5頭、2級(jí)7頭、3級(jí)10頭、4級(jí)5頭)。30 d蝗蟲(chóng)感染指數(shù)為47.5%(其中:0級(jí)13頭、1級(jí)7頭、2級(jí)10頭、3級(jí)12頭、4級(jí)8頭),見(jiàn)表1。
圖1 蝗蟲(chóng)感染率
表1 蝗蟲(chóng)微孢子處理后草原蝗蟲(chóng)的感染指數(shù)
防治前蝗蟲(chóng)平均值為52頭/平方米,防治后15 d為27頭/平方米,防治后30 d為15頭/平方米。蟲(chóng)口減退率分別為:防治后15 d為48.08%,防治后30 d為71.15%,見(jiàn)圖2。
對(duì)防治后15 d、30 d的土壤、植被進(jìn)行抽樣檢測(cè),均未發(fā)現(xiàn)蝗蟲(chóng)微孢子蟲(chóng)。
圖2 蟲(chóng)口減退率
結(jié)果表明,蝗蟲(chóng)微孢子蟲(chóng)生物制劑對(duì)高寒地區(qū)草原蝗蟲(chóng)有一定的防控效果。經(jīng)防治作業(yè)15 d和30 d后,蝗蟲(chóng)微孢子感染率分別達(dá)到54%和72%,感染指數(shù)分別為34.5%和47.5%。與對(duì)照區(qū)相比,防控后蝗蟲(chóng)蟲(chóng)口數(shù)量顯著降低,15 d和30 d后蟲(chóng)口減退率分別達(dá)到48.08%和71.15%。綜上所述,防控后蝗蟲(chóng)種群蟲(chóng)口數(shù)量下降明顯,且蝗蟲(chóng)微孢子蟲(chóng)在高寒草原蝗蟲(chóng)自然種群中隨時(shí)間增長(zhǎng)而呈上升趨勢(shì),證明其在施藥區(qū)具有可持續(xù)性防控效果。