菊三七相關(guān)肝竇阻塞綜合征臨床結(jié)局相關(guān)影響因素分析

邵幼林 張鎖才 吳劍明 謝靜 龍春梅 鄭婷婷 柳龍根

肝竇阻塞綜合征(hepatic sinusoidal obstruction syndrome，HSOS)，也稱作肝小靜脈閉塞病，是由各種原因?qū)е碌母窝]、肝小靜脈和小葉間靜脈內(nèi)皮細(xì)胞水腫、壞死、脫落進(jìn)而形成微血栓，引起肝內(nèi)淤血、肝損傷和門靜脈高壓的一種肝臟血管性疾病。肝毒性吡咯里西啶生物堿(hepatotoxic pyrrolizidine alkaloids，HPAs)存在于菊三七等開花植物中，是引起菊三七相關(guān)肝竇阻塞綜合征(菊三七-HSOS)的物質(zhì)基礎(chǔ)[1]。我國報(bào)道的菊三七-HSOS逐年增加，但對(duì)于其預(yù)后影響因素仍不清晰，本研究從患者發(fā)病前服用菊三七、飲酒和發(fā)病情況、發(fā)病過程中的癥狀體征、入院檢查及治療用藥等分析患者的預(yù)后，期望有一定的臨床指導(dǎo)意義。

資料與方法

一、研究對(duì)象

2005年8月至2016年1月在常州市第三人民醫(yī)院住院的臨床診斷為菊三七-HSOS患者55例，男性46例，36～74歲，平均(57.87±8.27)歲；女性9例，57～70歲，平均(64.22±5.09)歲?；颊咴\斷符合2017年HSOS南京標(biāo)準(zhǔn)[2]。排除布加綜合征、病毒性肝炎、自身免疫性肝病、非酒精性脂肪性肝病和遺傳代謝性肝病患者。

二、研究方法

根據(jù)患者120天臨床結(jié)局分為存活組和死亡組，比較兩組患者發(fā)病前服用菊三七、飲酒等病史，以及入院時(shí)癥狀體征、檢查項(xiàng)目(肝腎功能、生化采用Olympus AU2700全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè))、iMELD、住院并發(fā)癥、治療用藥，分析低分子肝素鈉與菊三七-HSOS患者120天預(yù)后的關(guān)系，分析菊三七-HSOS患者120天預(yù)后的影響因素。iMELD=3.78×ln[TBil(μmol/L)÷17.1]+11.2×ln[INR]+9.57× ln[Cr(μmol/L)÷88.4] + 6.43+(0.3×年齡)-(0.7×Na)+100[3]。

三、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

結(jié) 果

一、患者服用菊三七情況

所有患者均有服用菊三七史，共17例患者可以清楚說明菊三七使用量，有 1～2片/天泡水服用，有總量 750 g泡酒1月服完，有總量3 500 g泡酒分3年服完等，故患者日服用菊三七劑量差異極大，難以估計(jì)。服用菊三七方式：菊三七泡酒37例，菊三七泡水12例，煎服4例，打粉沖服2例。服用菊三七的原因：腰腿關(guān)節(jié)痛18例，保健37例。服用菊三七時(shí)長(3天至十多年)：≤2月32例，≥3月23例(多為間斷服用)。停用菊三七與發(fā)病時(shí)機(jī)：發(fā)病后不及時(shí)停用菊三七(5～60天) 12例，發(fā)病立即停用菊三七24例，停用菊三七后延遲發(fā)病(延遲7天～9個(gè)月) 18例。生存或隨訪時(shí)間7天至6.8年。

二、患者一般情況

根據(jù)患者120天臨床結(jié)局分為存活組和死亡組，存活組主訴天數(shù)、服用菊三七時(shí)長、服用菊三七至發(fā)病天數(shù)、飲酒量和飲酒年限分別為：30.00(30.00)d、60.00 (160.00)d、60.00 (225.00)d、50.00 (187.50)g和1.00 (30.00)年，而死亡組分別為20.00 (27.50)d、52.50(315.00)d、52.50(340.00)d、(169.44±156.37)g和20.00 (30.00)年，均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。兩組患者既往肝病(HBsAg陽性/HBV DNA陰性3例，血吸蟲肝硬化1例)、高血壓病、糖尿病病史無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

三、患者癥狀體征

患者入院時(shí)主要癥狀體征，包括乏力(96.36%)、食欲減退(96.36%)、腹脹(98.18%)、尿量減少(98.18%)、雙下肢水腫(25.45%)等，兩組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，對(duì)于造血干細(xì)胞移植(hematopoietic stem cell transplantation)相關(guān)HSOS(HSCT-HSOS)比較特異的肝區(qū)疼痛(包括肝區(qū)隱痛和叩痛36.36%)也無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。死亡組反映慢性肝損傷表現(xiàn)的肝掌/蜘蛛痣發(fā)生率更高，可能與飲酒時(shí)間更長有關(guān)。住院期間死亡組肝性腦病發(fā)生率更高，而兩組間肝腎綜合征無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。見表1。

表1 兩組患者服菊三七、飲酒、發(fā)病情況和入院檢查比較*

四、患者入院檢查

兩組患者入院ALT、AST均為非正態(tài)分布，范圍分別為17～2 529 IU/L和31～1 308 IU/L，這可能與患者發(fā)病后是否及時(shí)就診有關(guān)，也體現(xiàn)了患者可能存在初期明顯體力下降、食欲減退而就診的發(fā)病模式，和初期癥狀不明顯直到腹脹才就診的發(fā)病模式，兩組間ALT、AST無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。兩組ALP無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，但死亡組TBil、DBil和TBA更高，反映病情可能更嚴(yán)重。死亡組反映肝臟合成指標(biāo)的CHOL和INR結(jié)果更差，而ALB無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，考慮與本院治療菊三七-HSOS中均輸注較多血漿和人血白蛋白有關(guān)。死亡組WBC更高，提示感染、內(nèi)毒素血癥可能。死亡組Hb更高，可能與門靜脈壓力增加導(dǎo)致門靜脈流速減慢、腹水形成，進(jìn)一步引起有效血容量減少和血液濃縮有關(guān)。由于本院從2012年開展D-D二聚體檢查，故檢查患者為24例，死亡組患者入院時(shí)D-D二聚體更高。死亡組iMELD評(píng)分更高(表2)。所有患者CT或MRI符合典型HSOS表現(xiàn)。2010年之前病例中12例行肝活組織檢查，符合HSOS病理組織表現(xiàn)。

表2 二組患者服菊三七方式、主要癥狀體征和治療用藥比較(%)

五、使用低分子肝素鈉與預(yù)后的關(guān)系

發(fā)病前服用菊三七、飲酒和發(fā)病情況，發(fā)病過程中的癥狀體征、入院檢查及治療用藥中多項(xiàng)指標(biāo)在存活組和死亡組間存在差異(表1和表2)。這些指標(biāo)中可作為發(fā)病后干預(yù)手段的主要是治療，而存活組和死亡組的治療中只有低分子肝素鈉使用率存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，分別為59.46%和22.22%，P=0.009 4，其余治療無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(表2)。采用Kalpan-meier生存曲線分析發(fā)現(xiàn)是否使用低分子肝素鈉與患者120天預(yù)后顯著相關(guān)，P=0.006 1(圖1)。

圖1 Kalpan-meier生存曲線分析低分子肝素鈉與菊三七-HSOS患者120天預(yù)后的關(guān)系

六、菊三七-HSOS患者臨床結(jié)局的影響因素

采用單因素Cox回歸分析顯示存活組和死亡組間有17項(xiàng)指標(biāo)存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(表3)。由于iMELD已包含INR、Na、TBil信息，而DBil為TBil近似指標(biāo)，故這些指標(biāo)不進(jìn)入多因素Cox回歸分析。最終13項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)入多因素Cox回歸分析，結(jié)果顯示服用菊三七時(shí)長、尿量減少、肝掌/蜘蛛痣、低分子肝素鈉、CHOL、Hb、iMELD與菊三七-HSOS患者臨床結(jié)局相關(guān)(表3)。它們預(yù)測(cè)菊三七-HSOS 120天預(yù)后的AUROC分別為0.54、0.53、0.65、0.69、0.71、0.72、0.76。其中iMELD、Hb和CHOL存在一定的預(yù)測(cè)效能，AUROC>0.70；低分子肝素鈉和肝掌/蜘蛛痣的預(yù)測(cè)效能較差，0.600.60的5項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)一步整合，得出聯(lián)合預(yù)測(cè)因子=0.090×iMELD + 0.044×Hb-1.51×CHOL + 1.44×(低分子肝素鈉，有=1，無=0)-3.27×(肝掌/蜘蛛痣，有=1，無=0)-4.09，預(yù)測(cè)效能進(jìn)一步提高，AUROC=0.91(95%CI: 0.83～0.99)。以聯(lián)合預(yù)測(cè)因子>4.20為切入點(diǎn)，敏感性為94.44%(95%CI: 72.71%～99.86%)，特異性為72.79%(95%CI: 55.88%～86.21%)，見圖2。

表3 Cox回歸分析菊三七-HSOS患者臨床結(jié)局相關(guān)影響因素

圖2 預(yù)測(cè)菊三七-HSOS 120天預(yù)后的AUROC曲線

討 論

HSCT是常見的可預(yù)測(cè)HSOS的主要病因，這類患者診斷可以參考最新修訂的HSOS成人和兒童診斷和嚴(yán)重程度標(biāo)準(zhǔn)[4-5]。另一類HSOS的誘因?yàn)榉肏PAs[6]。目前，全球PA-HSOS報(bào)道超過10 000例[7]。世界各地3%的開花植物(6 000多種)中已發(fā)現(xiàn)660個(gè)不同結(jié)構(gòu)的PAs及其N-氧化物，這些植物大多數(shù)屬于菊科、紫草科、蘭科和豆科，其中一半PAs具有肝毒性[7]。

我國PA-HSOS主要是服用菊三七所致[2]。近年菊三七-HSOS逐漸增加，鑒于菊三七-HSOS不像HSCT-HSOS一樣能被及時(shí)發(fā)現(xiàn)，且兩者的臨床表現(xiàn)差異明顯。故本研究診斷采用我國的吡咯生物堿相關(guān)HSOS診斷和治療專家共識(shí)意見(2017年，南京)[2]。盡管我國報(bào)道的菊三七-HSOS較多，但分析菊三七-HSOS預(yù)后影響因素的報(bào)道較少。

在蘇南地區(qū)菊三七-HSOS患者菊三七來源多為食用者自行種植，部分患者將其作為傷藥“三七”使用，更多的患者單純地用其“保健”。服用方法多種多樣，服用菊三七日劑量和期限差別極大，常難以通過臨床服用菊三七史清晰知曉。這點(diǎn)與HSCT-HSOS形成巨大反差，后者在移植起始即可以監(jiān)測(cè)并可使用藥物預(yù)防，以減少其發(fā)生率和嚴(yán)重程度[8]。而菊三七-HSOS患者多數(shù)直到發(fā)病才停用菊三七、甚至有患者發(fā)病后仍繼續(xù)服用菊三七2個(gè)月，直至腹脹難忍而就醫(yī)時(shí)才停用。近年來，許多文章報(bào)道在各種食物中檢測(cè)到PA，包括蜂蜜、牛奶、肉、蛋、茶和沙拉[7]。這些隱蔽存在的PA為預(yù)防、診斷和治療HSOS造成極大的困難。在缺乏PA攝入史的情況下，如果臨床高度懷疑HSOS，可行肝活檢或檢測(cè)血清PA。

本研究發(fā)現(xiàn)患者可能存在兩種發(fā)病模式：①初期存在明顯體力下降、食欲減退而就診的發(fā)病模式，這時(shí)轉(zhuǎn)氨酶明顯升高(ALT>5×UNL，20例)；②初期癥狀不明顯直到腹脹才就診的發(fā)病模式，這時(shí)轉(zhuǎn)氨酶輕度升高或正常(ALT<2×UNL，22例)。這或相似于PA-HSOS的分期，后者根據(jù)病程和臨床表現(xiàn)的不同特點(diǎn)，大體上分為急性期/亞急性期、慢性期[9]。

肝區(qū)疼痛是HSCT-HSOS較為突出的特征[4]，2017年HSOS南京標(biāo)準(zhǔn)也納入了肝區(qū)疼痛指標(biāo)，本研究中僅36.36%患者存在肝區(qū)疼痛，但基本都存在腹脹和尿量減少(98.18%)。這與我國菊三七-HSOS的全國多中心臨床調(diào)研分析中97.07%患者存在腹水相近[10]。病理學(xué)是診斷HSOS的金標(biāo)準(zhǔn)，本院在2005至2010年對(duì)12例服菊三七后發(fā)生肝損傷患者行肝活檢檢查，其組織學(xué)符合典型HSOS表現(xiàn)，這為醫(yī)院診斷HSOS積累了寶貴的經(jīng)驗(yàn)。近年，在沒有肝活檢的情況下，依據(jù)病史和典型的影像學(xué)表現(xiàn)基本能做出臨床診斷[10]，避免了肝活檢的潛在風(fēng)險(xiǎn)，作為肝病臨床中心或是可取的選擇。筆者現(xiàn)通過小鼠驗(yàn)證了菊三七不同部位PA的肝毒性，這為下一步開展臨床應(yīng)用提供了理論支撐[1]。

對(duì)癥支持、維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)、腸道穩(wěn)態(tài)、減少并發(fā)癥是治療HSOS的基礎(chǔ)，本研究中患者使用了大量的血漿和人血白蛋白注射液，這可為長期治療爭取更多時(shí)間。HSOS典型病理表現(xiàn)為以肝腺泡Ⅲ區(qū)為主的肝竇內(nèi)皮細(xì)胞腫脹、損傷、脫落，肝竇顯著擴(kuò)張充血；肝細(xì)胞不同程度的腫脹、壞死，紅細(xì)胞滲入狄氏間隙，肝內(nèi)小靜脈管壁增厚，管腔狹窄、閉塞，無纖維化表現(xiàn)或僅見匯管區(qū)輕度纖維增生[2]。結(jié)合實(shí)驗(yàn)室檢查中血小板減少和D-D二聚體升高等凝血功能異常，HSOS似乎可以理解為肝臟局部DIC樣病變，而抗凝、清除血栓是治療DIC的關(guān)鍵。去纖苷是一種具有抗血栓及促進(jìn)纖溶作用的單鏈寡核苷酸混合物，是唯一被證明可有效預(yù)防和治療HSCT-HSOS的藥物，安全有效劑量為25 mg/(kg·d)，持續(xù)使用至少14天或達(dá)到完全反應(yīng)[11]。目前，沒有使用去纖苷治療菊三七-HSOS的經(jīng)驗(yàn)，且與HSCT-HSOS可以預(yù)防和早期用藥不同，菊三七-HSOS半數(shù)以上入院時(shí)已是晚期。本研究治療使用的多種藥物中唯有低分子肝素鈉使用率在存活和死亡組間存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。王軼等[12]研究也發(fā)現(xiàn)，抗凝治療可提高菊三七-HSOS治愈率，抗凝-經(jīng)頸靜脈肝內(nèi)門體靜脈分流術(shù)階梯治療可進(jìn)一步提高臨床治愈率。

本研究中采用單因素Cox回歸分析發(fā)現(xiàn)眾多因素與菊三七-HSOS 120天預(yù)后相關(guān)，但進(jìn)入多因素分析時(shí)發(fā)現(xiàn)iMELD、Hb、CHOL、低分子肝素鈉、肝掌/蜘蛛痣、尿量減少和服菊三七時(shí)長與之有關(guān)。終末期肝病模型(model for end-stage liver disease，MELD)是對(duì)終末期肝病短期、中期病死率進(jìn)行有效預(yù)測(cè)的工具，能預(yù)測(cè)經(jīng)頸靜脈肝內(nèi)門體靜脈分流術(shù)患者的存活率，為肝移植肝源分配提供依據(jù)[13]。整合的MELD(integrated model of end-stage liver disease，iMELD)是將年齡和血清鈉整合到MELD的預(yù)測(cè)模型，其較MELD有更高的預(yù)測(cè)價(jià)值[14]。HSOS患者Hb升高反映了門靜脈壓力升高導(dǎo)致腹水、有效血容量減少和血液濃縮，而血液濃縮有可能反過來再加重肝小靜脈閉塞和門靜脈壓力。CHOL在重癥肝病中反映肝臟合成能力，明顯降低提示預(yù)后不佳。將iMELD、Hb、CHOL、低分子肝素鈉和肝掌/蜘蛛痣整合為聯(lián)合預(yù)測(cè)因子，其AUROC=0.91，進(jìn)一步提高了對(duì)菊三七-HSOS患者120天預(yù)后的預(yù)測(cè)能力。

總之，近年來菊三七-HSOS患者正在增加，患者間存在巨大的異質(zhì)性，由于PA存在的形式復(fù)雜多樣，不能提供明確病史的患者可能被漏診?；颊叱Ｒ蛑饾u增加的腹脹慢性病形式就診，少數(shù)以明顯的乏力和消化道癥狀急性病形式就診。低分子肝素鈉抗凝治療可提高患者120天生存率。入院時(shí)的聯(lián)合預(yù)測(cè)因子可用于患者120天預(yù)后評(píng)估。但本回顧性研究病例數(shù)較少、年度跨度大、醫(yī)師對(duì)疾病的認(rèn)識(shí)存在差異，期待多中心前瞻性研究提供更充實(shí)的循證依據(jù)。