血清VEGF、PDGF和ES水平與濕性年齡相關(guān)性黃斑變性的關(guān)系

解鵬亮 鄭陸芳 董明霞 董如嬌 陳芳

年齡相關(guān)性黃斑變性（age?related macular de?generation，AMD）是與年齡密切相關(guān)的黃斑退行性疾病，是中老年人致盲的首要原因［1］。AMD 包括干性AMD 和濕性AMD，發(fā)病機(jī)制均尚不明確，干性AMD 疾病進(jìn)展緩慢，濕性AMD 病情則呈現(xiàn)漸進(jìn)性發(fā)展。因濕性AMD 患者存在黃斑下脈絡(luò)膜血管新生并呈現(xiàn)病理性滲出改變，誘發(fā)血管新生的細(xì)胞因子成為濕性AMD 研究的熱點(diǎn)［2］。其中，血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）是誘發(fā)血管新生的關(guān)鍵細(xì)胞因子，在新生血管形成、血管滲透增加中發(fā)揮重要的作用［3］。此外，有研究表明，血小板源性生長(zhǎng)因子（platelet?derived growth factor，PDGF）、內(nèi)皮抑素（endostatin，ES）在眼內(nèi)病理性新生血管的形成中也發(fā)揮著舉足輕重的作用［4?5］?；诖?，本研究將對(duì)濕性AMD 患者血清VEGF、PDGF 和ES 水平及其臨床意義進(jìn)行分析，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2019年10月至2020年10月本院收治的78 例濕性AMD 患者為病例組。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合AMD 診斷標(biāo)準(zhǔn)［6］，經(jīng)光學(xué)相干斷層掃描、眼底熒光造影檢查確診為濕性AMD；②此前未接受AMD相關(guān)治療；③對(duì)研究知情且簽署知情同意書(shū)。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并白內(nèi)障、青光眼、視網(wǎng)膜病變等其他眼部疾?。虎谟醒鄄渴中g(shù)史；③有玻璃體腔及球后、球周注射激素史；④合并惡性腫瘤、心腦血管疾病、活動(dòng)性感染、嚴(yán)重代謝性疾??；⑤凝血功能異常。疾病分期標(biāo)準(zhǔn)［6］：早期：黃斑區(qū)色素脫失，中心凹反射不清或消失，同時(shí)存在多個(gè)小的玻璃膜疣和少量中等大小的玻璃膜疣；中期：黃斑區(qū)出現(xiàn)漿液性和（或）出血性盤(pán)狀脫離，廣泛存在中等大小的玻璃膜疣，至少有1 個(gè)大的玻璃膜疣，或有未涉及黃斑中心凹的地圖樣萎縮；晚期：視網(wǎng)膜下和視網(wǎng)膜上皮層下纖維血管增殖，盤(pán)狀瘢痕。另選擇同期于本院健康體檢的性別、年齡與病例組相匹配40 例健康者為對(duì)照組，對(duì)照組體檢者既往無(wú)眼部疾病。兩組性別、年齡資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），見(jiàn)表1。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)通過(guò)。

表1 兩組一般資料比較（±s）Table 1 Comparison of general data between 2 groups（±s）

表1 兩組一般資料比較（±s）Table 1 Comparison of general data between 2 groups（±s）

組別對(duì)照組病例組χ2/t 值P 值n 患眼病程（月）患眼疾病分期（早/中/晚）40 78 94性別（男/女）18/22 36/42 0.014 0.905年齡（歲）60.54±6.89 62.57±7.94 1.373 0.172 6.89±1.23 20/66/8

1.2 方法

研究對(duì)象均采集清晨空腹肘靜脈血3 mL，3 000 r/min 離心10 min（離心半徑10 cm），取上層清液與-80℃冰箱保存待測(cè)。采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)血清VEGF、PDGF、ES 水平，試劑盒購(gòu)自武漢默沙克生物科技有限公司。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 19.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料以（±s）表示，組間比較行t檢驗(yàn)、多組間比較行F檢驗(yàn)；采用Pearson 相關(guān)分析法分析AMD 患者血清VEGF、PDGF、ES 水平，采用Spearman 相關(guān)分析法分析AMD 患者血清VEGF、PDGF、ES 水平與病情分期的關(guān)系，并繪制受試者工作特征曲線(xiàn)（ROC）評(píng)價(jià)血清VEGF、PDGF、ES 對(duì)AMD 的臨床意義，以P<0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組血清VEGF、PDGF、ES 水平比較

病例組血清VEGF、PDGF 水平顯著高于對(duì)照組，ES 水平顯著低于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表2。

表2 兩組血清VEGF、PDGF、ES 水平比較（±s）Table 2 Comparison of levels of serum VEGF，PDGF and ES between 2 groups（±s）

表2 兩組血清VEGF、PDGF、ES 水平比較（±s）Table 2 Comparison of levels of serum VEGF，PDGF and ES between 2 groups（±s）

組別對(duì)照組病例組t 值P 值n 40 78 VEGF（ng/L）65.52±26.23 155.58±72.35 7.610<0.001 PDGF（μg/L）39.66±10.41 60.26±19.32 6.283<0.001 ES（ng/L）164.28±33.85 136.82±38.86 3.791<0.001

2.2 病例組不同患者血清VEGF、PDGF、ES 水平

病例組血清VEGF、PDGF 水平：晚期>中期>早期，ES 水平：晚期>中期>早期，兩兩比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表3。

表3 病例組不同病情患者血清VEGF、PDGF、ES 水平比較（±s）Table 3 Comparison of levels of serum VEGF，PDGF and ES in case group of patients with different disease status（±s）

表3 病例組不同病情患者血清VEGF、PDGF、ES 水平比較（±s）Table 3 Comparison of levels of serum VEGF，PDGF and ES in case group of patients with different disease status（±s）

注：與早期患者比較，aP<0.05；與中期患者比較，bP<0.05。

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2.3 AMD 患者血清VEGF、PDGF、ES 水平間的關(guān)系及與病情分期的關(guān)系

AMD 患者血清VEGF 水平與PDGF 水平呈正相關(guān)（r=0.613，P<0.05），而血清VEGF 水平和PDGF水平的表達(dá)情況均與ES 的表達(dá)水平無(wú)關(guān)（r=0.165，0.197，P>0.05）。AMD 患者VEGF 、PDGF 水平與病情分期呈正相關(guān)（r=0.754，0.664，P<0.05），ES 水平與病情分期呈負(fù)相關(guān)（r=-0.706，P<0.05）。

2.4 血清VEGF、PDGF、ES 水平對(duì)AMD 患者的預(yù)測(cè)價(jià)值

分別以VEGF、PDGF、ES 水平繪制診斷AMD患者 的ROC 曲線(xiàn)，AUC 對(duì)應(yīng)為0.868、0.833、0.694，敏感性為83.33%、57.69%、55.13%，特異性為92.50%、100.00%、82.50%。見(jiàn)圖1。

圖1 ROC 曲線(xiàn)Figure 1 ROC curve

2.5 血清VEGF、PDGF、ES 水平對(duì)AMD 中晚期患者的預(yù)測(cè)價(jià)值

分別以VEGF、PDGF、ES 水平繪制診斷AMD中晚期患者的ROC 曲線(xiàn)，AUC 對(duì)應(yīng)為0.945、0.874、0902，敏感性為100.00%、68.33%、81.67%，特異性為77.78%、100.00%、88.89%。見(jiàn)圖2。

圖2 ROC 曲線(xiàn)Figure 2 ROC curve

3 討論

濕性AMD 是我國(guó)患者失明的主要原因，其發(fā)病機(jī)制錯(cuò)綜復(fù)雜，臨床表現(xiàn)為視網(wǎng)膜色素上皮嚴(yán)重的脫位和（或）脈絡(luò)膜新生血管生成［8］。異常的脈絡(luò)膜新生血管生成后會(huì)穿透脈絡(luò)膜和Bruch 膜朝向視網(wǎng)膜生長(zhǎng)，出現(xiàn)滲出、出血等病理改變，最終導(dǎo)致中心視力喪失與組織瘢痕形成。有研究發(fā)現(xiàn)促血管生成因子與抗血管生成因子的平衡在脈絡(luò)膜新生血管生成中發(fā)揮著重要作用，影響濕性AMD 的發(fā)生、發(fā)展［9］。

本研究結(jié)果顯示，病例組血清VEGF、PDGF 水平較對(duì)照組升高，而ES 水平降低，說(shuō)明濕性AMD發(fā)病后，因促血管生成因子與抗血管生成因子失衡，血清VEGF、PDGF、ES 水平均處于異常狀態(tài)。VEGF 是促進(jìn)血管新生作用最強(qiáng)的細(xì)胞因子之一，其過(guò)度表達(dá)會(huì)增加血管滲透性，誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖并以出芽的方式形成新的血管，是目前濕性AMD 抗VEGF 治療的靶點(diǎn)［10］。既往研究已證實(shí)VEGF 在濕性AMD 患者患眼房水中處于高表達(dá)，參與濕性AMD 的發(fā)病、發(fā)展［11］。但 僅 有VEGF 作用，新生血管未必能夠形成結(jié)構(gòu)和功能健全的血管，尚需多種信號(hào)通路和血管周?chē)h(huán)境的調(diào)節(jié)［12］。PDGF、ES 是影響AMD 促血管生成因子與抗血管生成因子平衡的重要細(xì)胞因子，其中PDGF 正常生理狀態(tài)下存在于血小板內(nèi)，而濕性AMD 新生血管形成后，血管內(nèi)皮細(xì)胞開(kāi)始分泌相關(guān)因子促進(jìn)血管穩(wěn)定和內(nèi)皮細(xì)胞分化，PDGF 由崩解的血小板釋放并被激活，刺激特定細(xì)胞趨化、生長(zhǎng)，促進(jìn)新生血管形成［13］。ES 則具有抗血管增生活性，能抑制脈絡(luò)膜新生血管內(nèi)皮細(xì)胞的異常增殖，是控制脈絡(luò)膜新生血管的靶點(diǎn)之一，已成功用于治療發(fā)生脈絡(luò)膜新生血管的眼部疾?。?4］。相關(guān)性分析顯示，三個(gè)指標(biāo)中僅VEGF 水平與PDGF 水平正相關(guān)，與陳燁等［15］研究結(jié)果一致，這與VEGF的過(guò)度表達(dá)可刺激PDGF 表達(dá)有關(guān)。此外，濕性AMD 患者VEGF、PDGF 水平與病情分期呈正相關(guān)，ES 水平與病情分期呈負(fù)相關(guān)，表明濕性AMD患者VEGF 和PDGF 水平越高、ES 水平越低病情越嚴(yán)重。ROC 曲線(xiàn)結(jié)果提示VEGF、PDGF、ES 均可作為濕性AMD 潛在的診斷檢測(cè)指標(biāo)，且以VEGF 診斷效能最佳。病情評(píng)估時(shí)，VEGF、PDGF、ES 水平診斷濕性AMD 中晚期的AUC 為0.945、0.874、0902，且VEGF 評(píng)估的敏感性和PDGF 評(píng)估的特異性均達(dá)100.00%，表明VEGF、PDGF、ES 水平還可為濕性AMD 病情分期提供診斷信息，篩查早期、中晚期患者，其中VEGF 在三者指標(biāo)中診斷效能最高，對(duì)病情判斷更為準(zhǔn)確。

綜上所述，濕性AMD 患者處于高VEGF、PDGF水平和低ES 水平狀態(tài)，三者可作為AMD 潛在的診斷和病情評(píng)估指標(biāo)，且VEGF 對(duì)疾病診斷和病情評(píng)估的效能最高。但本研究樣本量較小，且未能比較不同預(yù)后患者指標(biāo)的差異，后期將進(jìn)一步深入研究。