Lp?PLA2、Hcy及γ?GGT在下肢動脈硬化閉塞癥中的表達(dá)及臨床意義

張溫溫 孫燦龍 吳延慶 史洪濤

下肢動脈硬化閉塞癥（Arteriosclerosis obliter?ans，ASO）屬于一種慢性疾病，主要由于動脈粥樣硬化累及下肢動脈導(dǎo)致動脈狹窄或閉塞，從而使得肢體出現(xiàn)缺血癥狀，是全身動脈硬化性疾病在下肢的表現(xiàn)［1?2］。ASO 病變特點以累及大中動脈為主。近年來，ASO 已成為血管外科常見病與多發(fā)病，發(fā)病率約為0.6%～9.2%，多好發(fā)于老年人［3］。藥物、外科手術(shù)及血管腔內(nèi)治療等方式是臨床上治療ASO 的常用手段，雖具有一定療效，但ASO仍是導(dǎo)致患者截肢、致殘的主要原因之一。諸多研究均證實，在ASO 發(fā)生、發(fā)展過程中，脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2（Lipoprotein associated phospholipase A2，Lp?PLA2）、同型半胱氨酸（Homocysteine，Hcy）及γ?谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶（γ?Glutamyl transpeptidase，γ?GGT）等因子扮演著重要的角色［4?5］。本研究將進(jìn)一步闡述上述因子在不同類型、分期的ASO 患者中的表達(dá)情況及其意義?，F(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集本院2017年1月至2020年1月收治的112 例ASO 患者作為ASO 組。納入標(biāo)準(zhǔn)：①所有患者均符合ASO 的診斷標(biāo)準(zhǔn)［6］；②臨床資料完整，無缺損或丟失；③伴有間歇性跛行、下肢靜息痛等下肢癥狀；④年齡≥60 歲，且無意識障礙。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并血液病、泌尿系感染者；②合并嚴(yán)重肝腎疾病、感染性疾病者；③下肢深靜脈血栓及嚴(yán)重皮膚損傷或潰瘍者；④動脈鈣化者。男77 例，女35 例，平均年齡（64.63±8.49）歲；平均體重指數(shù)（24.15±3.23）kg/m2；Fontaine 分期［7］：Ⅰ期，間歇性跛行38 例；Ⅱ期，患肢有靜息痛43 例；Ⅲ期，患足有潰瘍或壞疽31 例。另選取同期52 例體檢的健康老年人作為對照組，男40 例，女12 例，平均年齡（65.25±9.01）歲；平均體重指數(shù)（23.51±2.42）kg/m2。兩組性別、年齡等一般資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)通過，受試者均簽署知情同意書。

1.2 方法

清晨抽取所有受檢者5 mL 空腹外周靜脈血，置于3 000 r/min 速度下離心10 min，離心半徑10 cm，隨后抽取上層血清，置于-80℃環(huán)境中保存。Lp?PLA2 采用散射比濁法檢測，Hcy、γ?GGT 采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測，試劑盒均由南京建成生物公司提供。詳細(xì)步驟嚴(yán)格按照說明書執(zhí)行。

1.3 觀察指標(biāo)

①比較兩組Lp?PLA2、Hcy 及γ?GGT 水平。②計算ASO 患者中ABI 大小情況，并比較不同ABI 大小及不同分期患者的Lp?PLA2、Hcy 及γ?GGT 水平。ABI 測量：采用8MHz 多普勒聽診器先對肱動脈收縮壓進(jìn)行測量，隨后在踝部脛前動脈、脛后動脈、腓動脈或足背動脈之間選擇動脈搏動最強的血管測量踝部，所測踝部動脈與肱動脈收縮壓之比為踝舷指數(shù)。參考Gregson 等［8］文獻(xiàn)，以0.43 為界限，將患者分為ABI>0.43 組，ABI≤0.43 組。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 22.0 統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析，計量資料以（±s）表示，行t檢驗；相關(guān)性采用spearman相關(guān)性分析法，以P<0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 ASO 組、對照組Lp?PLA2、Hcy 及γ?GGT 水平比較

ASO 組Lp?PLA2、Hcy 及γ?GGT 水平均顯著高于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。見表1。

表1 ASO 組、對照組Lp?PLA2、Hcy 及γ?GGT 水平比較（±s）Table 1 comparison of Lp?PLA2，Hcy and TNF?α between ASO group and control group γ?GGT level（±s）

表1 ASO 組、對照組Lp?PLA2、Hcy 及γ?GGT 水平比較（±s）Table 1 comparison of Lp?PLA2，Hcy and TNF?α between ASO group and control group γ?GGT level（±s）

組別ASO 組對照組t 值P 值n 112 52 Lp?PLA2（μg/L）64.76±7.15 26.87±3.63 36.074<0.001 Hcy（μmol/L）26.53±3.84 10.63±2.31 27.603<0.001 γ?GGT（U/L）40.36±7.23 22.41±2.44 17.423<0.001

2.2 ASO 不同F(xiàn)ontaine 分期患者Lp?PLA2、Hcy及γ?GGT 水平比較

ASO 患者Lp?PLA2、Hcy 及γ?GGT 水平：Ⅰ期<Ⅱ期<Ⅲ期，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。見表2。

表2 ASO 不同F(xiàn)ontaine 分期患者Lp?PLA2、Hcy 及γ?GGT 水平比較（±s）Table 2 comparison of Lp?PLA2，Hcy and Hcy in patients with different Fontaine stages of ASO γ?GGT level（±s）

表2 ASO 不同F(xiàn)ontaine 分期患者Lp?PLA2、Hcy 及γ?GGT 水平比較（±s）Table 2 comparison of Lp?PLA2，Hcy and Hcy in patients with different Fontaine stages of ASO γ?GGT level（±s）

注：與Ⅰ期比較，aP<0.05；與Ⅱ期比較，bP<0.05。

組別Ⅰ期Ⅱ期Ⅲ期F 值P 值n 38 43 31 Lp?PLA2（μg/L）55.25±4.21 63.25±7.46a 78.51±10.32ab 82.700<0.001 Hcy（μmol/L）19.68±3.67 27.54±2.19a 33.52±6.34ab 95.570<0.001 γ?GGT（U/L）28.66±4.99 41.63±8.59a 52.94±10.03ab 78.800<0.001

2.3 ASO 不同ABI 大小患者的Lp?PLA2、Hcy、γ?GGT 水平及ABI 比較

ABI≤0.43 者 50 例，ABI>0.43 者 62 例。ABI≤0.43 組Lp?PLA2、Hcy 及γ?GGT 水平均顯著高于ABI>0.43 組，ABI 低于ABI>0.43 組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。見表3。

表3 ASO 不同ABI 大小患者的Lp?PLA2、Hcy、γ?GGT水平及ABI 比較（±s）Table 3 Comparison of Lp?PLA2，Hcy，Hcy in ASO patients with different ABI sizes γ?GGT level and ABI（±s）

表3 ASO 不同ABI 大小患者的Lp?PLA2、Hcy、γ?GGT水平及ABI 比較（±s）Table 3 Comparison of Lp?PLA2，Hcy，Hcy in ASO patients with different ABI sizes γ?GGT level and ABI（±s）

組別ABI≤0.43 組ABI>0.43 組t 值P 值n 50 62 Lp?PLA2（μg/L）72.63±8.14 58.41±6.35 10.387<0.001 Hcy（μmol/L）31.71±6.11 22.35±2.02 11.329<0.001 γ?GGT（U/L）45.63±9.84 36.11±5.13 6.592<0.001 ABI 0.25±0.06 0.63±0.11 21.926<0.001

2.4 Lp?PLA2、Hcy、γ?GGT 水平與ABI 相關(guān)性分析

相關(guān)性分析結(jié)果示，Lp?PLA2（r=-0.587）、Hcy（r=-0.641）、γ?GGT（r=-0.465）水平與ABI 均呈負(fù)相關(guān)（P<0.05）。

3 討論

目前有關(guān)ASO 發(fā)病機制的報道顯示，內(nèi)皮功能障礙是發(fā)生動脈粥樣硬化的早期事件，與動脈粥樣斑塊發(fā)生、進(jìn)展關(guān)系密切。近年來，“內(nèi)皮損傷反應(yīng)學(xué)說”備受廣大學(xué)者的關(guān)注，另一種主要學(xué)說是脂質(zhì)浸潤學(xué)說。國內(nèi)外相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，合并冠狀動脈疾病的ASO 比率顯著高于其他疾病，高達(dá)70%［9］。Lp?PLA2、Hcy 及γ?GGT 等生物學(xué)因子與ASO 之間的關(guān)系十分密切。

Lp?PLA2 是一種磷脂酶超家族成員，由成熟的巨噬細(xì)胞合成分泌，肥大細(xì)胞在受到炎癥刺激時會有少量分泌，該物質(zhì)的分泌受到炎癥介質(zhì)的調(diào)節(jié)［10］。Lp?PLA2 對氧化卵磷脂具有水解作用，其生成產(chǎn)物會對血管內(nèi)皮造成損傷，引起單核細(xì)胞浸潤，使泡沫細(xì)胞發(fā)生沉積，進(jìn)而促進(jìn)動脈粥樣硬化［11］。吳愛成等［12］研究發(fā)現(xiàn)，伴有冠狀動脈粥樣硬化者Lp?PLA2 水平會顯著上升，Lp?PLA2 一定程度上參與了動脈粥樣硬化的病理發(fā)展過程。Hcy 是一種含硫氨基酸，是甲硫氨酸代謝的中間產(chǎn)物。高Hcy 會導(dǎo)致血管內(nèi)皮產(chǎn)生羥自由基、過氧化物等氧自由基，并且導(dǎo)致清除氧自由基的酶能力降低，引起蛋白質(zhì)損傷，破壞彈力膠原纖維；同時可刺激血管平滑肌細(xì)胞增生，促進(jìn)硬化斑塊形成，是導(dǎo)致血管硬化的獨立危險因素之一［13］。Kozakova 等［14］通過比較有斑塊ASO 患者與非斑塊ASO 患者的Hcy水平，發(fā)現(xiàn)兩組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義；在ASO 患者不同階段中，Hcy 均發(fā)揮作用。γ?GGT 主要存在于人體肝膽系統(tǒng)中，與肥胖、高血脂癥、高血壓等代謝性疾病具有一定關(guān)系。最近流行病學(xué)證實血清γ?GGT 可作為預(yù)測心血管疾病的生化標(biāo)志物［15］。目前頸動脈、冠狀動脈粥樣硬化中均發(fā)現(xiàn)有γ?GGT活性表達(dá)，由于γ?GGT 可催化低密度脂蛋白氧化反應(yīng)，而氧低密度脂蛋白在動脈粥樣硬化中具有重要作用，因此γ?GGT 參與了動脈粥樣硬化［16］。進(jìn)一步具體比較不同分期、ABI 大小的ASO 患者Lp?PLA2、Hcy 及γ?GGT 水平發(fā)現(xiàn)，不同分期、ABI大小的ASO 患者上述因子水平比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義。故推測Lp?PLA2、Hcy 及γ?GGT 水平的高低可能是評估ASO 病情嚴(yán)重程度的有效指標(biāo)。

ABI 是評估周圍血管閉塞性疾病病變程度的一種有效手段，其很好地消除了年齡、全身血壓計動脈壁硬化等因素對下肢血壓絕對值的影響，可較為準(zhǔn)確地反映下肢動脈缺血的病變程度［17］。本研究通過分析Lp?PLA2、Hcy、γ?GGT 水平與ABI 的相關(guān)性，發(fā)現(xiàn)Lp?PLA2、Hcy、γ?GGT 水平越高者，ABI 越低，呈顯著負(fù)相關(guān)。ABI 大小反映ASO 患者嚴(yán)重程度，即患者ABI 越低，病情越嚴(yán)重，同時Lp?PLA2、Hcy、γ?GGT 水平越高，反之亦然?？梢姰?dāng)Lp?PLA2、Hcy、γ?GGT 水平低時，ASO的發(fā)病進(jìn)度放緩。上述因子可作為評估ASO 嚴(yán)重程度的生物指標(biāo)。

綜上所述，Lp?PLA2、Hcy 及γ?GGT 在ASO 中呈異常表達(dá)，且與ABI 具有一定相關(guān)性。通過檢測上述因子可有效評估ASO 患者病情嚴(yán)重程度