PSP、IL?10、CCL?17在新生兒早發(fā)型GBS敗血癥中的水平變化及臨床意義

王佳麗 彭文紅 徐敬軒

B 族鏈球菌（Group B Streptococcus，GBS）是一種條件致病菌，是圍產(chǎn)期母嬰感染的主要病原菌之一［1］。據(jù)統(tǒng)計(jì)，我國(guó)孕婦GBS 帶菌率高達(dá)10.1%～32.4%，新生兒早發(fā)型GBS 敗血癥發(fā)生率在1.6%～2.1%［2］。目前，培養(yǎng)法是診斷新生兒早發(fā)型GBS 敗血癥的金標(biāo)準(zhǔn)，但檢測(cè)周期較長(zhǎng)，無法實(shí)現(xiàn)早期確診及病情評(píng)估［3］。研究證實(shí)，胰石蛋白（Pancreatic stone protein，PSP）可用于感染性疾病診斷及病情評(píng)估［4］。白細(xì)胞介素?10（Interleukin?10，IL?10）是臨床常見炎癥免疫反應(yīng)相關(guān)指標(biāo)，可有效反映機(jī)體免疫失衡、炎癥狀態(tài)［5］。趨化因子17（Chemoattractant cytokine ligand 17，CCL17）可通過趨化Th12、Th17 細(xì)胞及調(diào)節(jié)性T 細(xì)胞至組織損傷或感染部位，在局部炎癥反應(yīng)中發(fā)揮重要作用［6］。但有關(guān)三者在新生兒早發(fā)型GBS 敗血癥中的臨床價(jià)值仍有待驗(yàn)證。為此，本研究嘗試探究PSP、IL?10、CCL?17 在新生兒早發(fā)型GBS 敗血癥中的水平變化及臨床意義。報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取丹陽(yáng)市婦幼保健院2018年2月至2021年2月90 例新生兒早發(fā)型GBS 敗血癥患兒作為敗血癥組，其中男55 例，女35 例，胎齡平均（37.06±0.42）周，出生體重平均（3.36±0.51）kg。另選擇同期30例新生兒GBS 感染患兒作為GBS 組，其中男19例，女11 例，胎齡平均37.15 周，出生體質(zhì)量平均3.29 kg。30 例健康新生兒作為健康對(duì)照組，其中男20 例，女10 例，胎齡平均（37.10±0.48）周，出生體重平均（3.41±0.67）kg。3 組性別、胎齡、出生體質(zhì)量均衡可比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。納入標(biāo)準(zhǔn)：①敗血癥組、GBS 組均經(jīng)血培養(yǎng)證實(shí)為GBS 感染，敗血癥組于出生≤72 h 內(nèi)發(fā)生敗血癥，且符合新生兒敗血癥診斷標(biāo)準(zhǔn)［7］；②健康對(duì)照組各項(xiàng)指標(biāo)正常，且GBS 培養(yǎng)陰性；③3 組監(jiān)護(hù)人均知情，簽訂知情承諾書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①伴有先天性畸形、遺傳性代謝性疾病者；②合并溶血性貧血、嚴(yán)重缺血缺氧性腦病者；③母體陰道常見病原菌混合感染者。且本研究經(jīng)院倫理委員會(huì)審批通過。

1.2 方法

血清檢測(cè)方法：于入院當(dāng)日清晨采集空腹靜脈血3 mL，采用3 000 r/min 速率離心10 min，取上清液，保存于-80℃條件下待檢。采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)血清PSP、IL?10、CCL?17 水平，試劑盒購(gòu)自美國(guó)R&B 公司，操作步驟遵循說明書。敗血癥組治療方法：確診后立即給予針對(duì)性抗菌藥物治療，持續(xù)治療7 d。療效判定方法［7］：臨床表現(xiàn)及體征消失，GBS 病原學(xué)檢查陰性，血常規(guī)等常規(guī)生化指標(biāo)復(fù)常為治愈；臨床表現(xiàn)及體征基本消失，GBS 病原學(xué)檢查陰性，血常規(guī)常規(guī)生化指標(biāo)有所改善但未復(fù)常為好轉(zhuǎn)；臨床表現(xiàn)及體征無明顯緩解或加重為無效。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS 22.0 處理數(shù)據(jù)；計(jì)量資料以（±s）描述，多組間比較采用單因素方差分析，進(jìn)一步兩兩組間比較采用LSD?t 檢驗(yàn)，兩組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料用n（%）表示，χ2檢驗(yàn)；相關(guān)性采用Spearma 相關(guān)系數(shù)模型分析；診斷效能采用受試者工作特征（ROC）曲線分析，獲取曲線下面積、置信區(qū)間、敏感度、特異度及截?cái)嘀?；?lián)合診斷實(shí)施Logistic 二元回歸擬合，返回預(yù)測(cè)概率logit（p），將其作為獨(dú)立檢驗(yàn)變量。P<0.05 表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 3 組血清PSP、IL?10、CCL?17 水平

3 組血清PSP、IL?10、CCL?17 水平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；兩兩比較，敗血癥組血清PSP、IL?10、CCL?17 高于GBS 組、健康對(duì)照組，GBS 組高于健康對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表1。

表1 3 組血清PSP、IL?10、CCL?17 水平比較（±s）Table 1 Comparison of serum PSP，IL?10 and ccl?17 levels among the three groups（±s）

表1 3 組血清PSP、IL?10、CCL?17 水平比較（±s）Table 1 Comparison of serum PSP，IL?10 and ccl?17 levels among the three groups（±s）

注：與健康對(duì)照組比較，aP<0.05；與GBS 組比較，bP<0.05。

組別敗血癥組GBS 組健康對(duì)照組F 值P 值n 90 30 30 PSP（ng/mL）20.63±6.72ab 13.81±4.43a 5.18±1.19b 88.606<0.001 IL?10（pg/mL）61.34±15.47ab 45.96±12.10a 10.07±3.31b 168.527<0.001 CCL?17（pg/mL）412.77±113.59ab 308.45±84.28a 69.41±17.20b 143.497<0.001

2.2 血清PSP、IL?10、CCL?17 與新生兒GBS 感染及敗血癥的關(guān)系

Spearman 相關(guān)性分析，血清PSP、IL?10、CCL?17與新生兒GBS 感染、新生兒早發(fā)型GBS 敗血癥呈正相關(guān)（P<0.05）。見表2。

表2 血清PSP、IL?10、CCL?17 與新生兒GBS 感染及早發(fā)型GBS 感染敗血癥的關(guān)系Table 2 Relationship between serum PSP，IL?10，ccl?17 and neonatal GBS infection

2.3 血清PSP、IL?10、CCL?17 對(duì)新生兒早發(fā)型GBS 敗血癥的診斷價(jià)值

以敗血癥組為陽(yáng)性樣本，GBS 組為陰性樣本，繪制ROC 曲線，結(jié)果顯示，血清PSP、IL?10、CCL?17診斷新生兒早發(fā)型GBS 敗血癥的AUC 分別為0.788、0.648、0.722，三者聯(lián)合診斷新生兒早發(fā)型GBS 敗血癥的AUC 為0.927 診斷價(jià)值優(yōu)于各血清指標(biāo)單獨(dú)診斷（P<0.05）。見圖1。

圖1 血清PSP、IL?10、CCL?17 對(duì)新生兒早發(fā)型GBS 敗血癥的診斷價(jià)值Figure 1 The diagnostic value of serum PSP，IL?10 and ccl?17 in the early?onset GBS sepsis of newborn

2.4 敗血癥組不同療效患兒血清PSP、IL?10、CCL?17 水平

敗血癥組不同療效患兒血清PSP、IL?10、CCL?17水平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；治愈患兒血清PSP、IL?10、CCL?17 低于好轉(zhuǎn)患兒組、無效患兒組，好轉(zhuǎn)患兒組低于無效患兒組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表3。

表3 敗血癥組不同療效患兒血清PSP、IL?10、CCL?17水平比較（±s）Table 3 Comparison of serum PSP，IL?10 and CCl?17 levels in children with different curative effects in Study Group（±s）

表3 敗血癥組不同療效患兒血清PSP、IL?10、CCL?17水平比較（±s）Table 3 Comparison of serum PSP，IL?10 and CCl?17 levels in children with different curative effects in Study Group（±s）

注：與無效患兒比較，aP<0.05；與好轉(zhuǎn)患兒比較，bP<0.05。

CCL?17（pg/mL）368.41±92.25ab 446.74±108.53a 609.72±149.21b 28.292<0.001組別治愈患兒組好轉(zhuǎn)患兒組無效患兒組F 值P 值n 64 14 12 PSP（ng/mL）16.57±4.38ab 25.49±6.59a 36.61±10.12b 66.755<0.001 IL?10（pg/mL）54.37±13.14ab 67.55±18.79a 91.27±22.46b 29.803<0.001

2.5 血清PSP、IL?10、CCL?17 與療效的關(guān)系

Spearman 相關(guān)性分析，血清PSP（r=-0.745）、IL?10（r=-0.579）、CCL?17（r=-0.476）與療效呈負(fù)相關(guān)（P<0.05）。

3 討論

GBS 通常定植于泌尿生殖道、胃腸道，是引起新生兒肺炎、腦膜炎、敗血癥的常見致病菌，嚴(yán)重者甚至死亡，及早確診、及時(shí)治療、控制病情進(jìn)展是降低死亡風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)鍵所在［8?9］。因此，積極探索較為可靠的指標(biāo)進(jìn)行早期診斷具有重要意義。

PSP 是胰腺應(yīng)激蛋白家族成員之一，由再生基因編碼，不僅可反映胰腺損傷情況，在糖尿病、消化道腫瘤、炎癥性腸病、急慢性胰腺炎中還屬于急性反應(yīng)蛋白，呈現(xiàn)出不同程度升高表達(dá)。有文獻(xiàn)指出，PSP 是判斷感染嚴(yán)重程度的新型指標(biāo)，在新生兒敗血癥中異常升高表達(dá)［10］。結(jié)合查麗等［11］報(bào)道，考慮原因?yàn)椋篜SP 作為C 型凝聚素，具有特異性凝聚細(xì)菌作用，可通過加快有絲分裂、細(xì)胞黏附、促進(jìn)細(xì)胞聚集、抑制凋亡等途徑加速感染發(fā)生，隨著其水平不斷升高，病情逐漸加劇，從而參與新生兒GBS 感染、早發(fā)型GBS 敗血癥發(fā)生發(fā)展。本研究還發(fā)現(xiàn)，血清PSP 對(duì)新生兒早發(fā)型GBS 敗血癥中具有一定診斷價(jià)值，且與療效呈負(fù)相關(guān)，說明血清PSP 不僅可以作為診斷指標(biāo)，還可為臨床評(píng)估療效提供相關(guān)信息。

邢靜等［12］研究顯示，血清IL?10 在小兒膿毒癥中呈升高表達(dá)，動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)有利于評(píng)估膿毒癥病情程度。本研究發(fā)現(xiàn)，血清IL?10 在新生兒早發(fā)型GBS敗血癥中水平較高，參與其發(fā)生發(fā)展過程。IL?10是目前臨床公認(rèn)的炎癥與免疫抑制細(xì)胞因子，在敗血癥細(xì)胞因子瀑布中發(fā)揮強(qiáng)大抗炎作用。在敗血癥條件下，內(nèi)毒素、腫瘤壞死因子會(huì)刺激Th 細(xì)胞、B 細(xì)胞、單核細(xì)胞產(chǎn)生、分泌IL?10，達(dá)到抑制炎癥反應(yīng)的目的，但過高的抗炎介質(zhì)濃度會(huì)打破促炎?抗炎系統(tǒng)之間的動(dòng)態(tài)平衡，從而抑制機(jī)體免疫功能，導(dǎo)致對(duì)病原菌清除能力減弱，甚至可能引發(fā)“免疫麻痹狀態(tài)”［13］。同時(shí)，相關(guān)報(bào)道證實(shí)，GBS表面三磷酸甘油醛脫氫酶（GAPDH）能誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞吞噬，刺激大量IL?10 分泌，在感染早期發(fā)揮抑制炎癥反應(yīng)作用，但I(xiàn)L?10 濃度不斷升高會(huì)反饋性抑制中性白細(xì)胞抗炎效應(yīng)，并超過IL?10 的直接抗炎作用加快GBS 增殖［14］。本研究數(shù)據(jù)表明，血清IL?10 對(duì)新生兒早發(fā)型GBS 敗血癥單獨(dú)診斷價(jià)值欠佳，需與其他指標(biāo)聯(lián)合診斷，還發(fā)現(xiàn)其與療效之間存在負(fù)相關(guān)關(guān)系，可見血清IL?10 可應(yīng)用于療效評(píng)估中。

CCL17 屬于CC 趨化因子之一，由巨噬細(xì)胞M1 產(chǎn)生，當(dāng)病原菌入侵機(jī)體，巨噬細(xì)胞M0 接觸干擾γ 后會(huì)極化為M1，產(chǎn)生過多CCL17，參與局部炎癥反應(yīng)，并加劇病變所致的免疫紊亂［15］。本研究表明，與健康新生兒、新生兒GBS 感染患兒相比，新生兒早發(fā)型GBS 敗血癥患兒血清CCL17 水平呈顯著高表達(dá)。主要是因?yàn)镚BS 定植條件下，處于休眠狀態(tài)的巨噬細(xì)胞M0 便可極化為巨噬細(xì)胞M1，發(fā)揮抗炎作用，一旦發(fā)生GBS 感染，M0 便會(huì)通過極化為M2 抑制過度炎癥反應(yīng)，而CCL17 上調(diào)不僅與M1有關(guān)，還與M2 極化聯(lián)系緊密，從而在GBS 敗血癥發(fā)生發(fā)展過程中占據(jù)重要地位［16］。提示臨床可將檢測(cè)血清CCL17 水平作為早期診斷與療效評(píng)估的重要環(huán)節(jié)，為及早確診、制定合理治療方案提供參考依據(jù)。

血清PSP、IL?10、CCL?17 單獨(dú)診斷價(jià)值均有較大提升空間，為此本研究初次嘗試分析血清PSP、IL?10、CCL?17 聯(lián)合診斷價(jià)值，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，三者聯(lián)合診斷價(jià)值較各指標(biāo)單獨(dú)診斷顯著提高，為臨床早期診斷提供新思路、新途徑。但本研究屬于單中心、小樣本分析，可能造成數(shù)據(jù)偏移，需進(jìn)一步采取多中心、大樣本研究，以獲取更可靠的數(shù)據(jù)支持。

綜上可知，血清PSP、IL?10、CCL?17 在新生兒早發(fā)型GBS 敗血癥中異常升高，聯(lián)合檢測(cè)可作為臨床輔助診斷的潛在途徑，還可為評(píng)估療效提供參考依據(jù)。