黑天鵝混合感染東方次睪吸蟲與大腸桿菌的病例報(bào)告

蘇 娜，于金丹，石全剛，尹昭彤

（沈陽鳥島經(jīng)營管理有限公司，遼寧 沈陽 110161）

黑天鵝（Cygnus atratus）為鴨科天鵝屬的一種大型游禽，產(chǎn)于澳洲，棲息于湖泊、海岸、溪流等水域，主要以一些水生植物為食，偶食魚、蝦與螺類，是具有觀賞價(jià)值的珍貴野生禽類[1-3]。黑天鵝體質(zhì)較強(qiáng)，具有一定的抗病能力，不易發(fā)病[4]。目前，國內(nèi)關(guān)于黑天鵝疾病診斷方面的文獻(xiàn)較少。本文對沈陽鳥島經(jīng)營管理有限公司死亡的1只黑天鵝進(jìn)行綜合分析與診斷，確定死亡原因?yàn)闁|方次睪吸蟲與大腸桿菌混合感染，此結(jié)果為黑天鵝疾病的預(yù)防與治療提供參考。

1 病例資料

2021 年6 月9 日，沈陽鳥島經(jīng)營管理有限公司天鵝湖內(nèi)1只黑天鵝死亡。尸體呈自然趴臥狀，身體表面無創(chuàng)傷，口鼻及肛門較干凈。經(jīng)確認(rèn)該黑天鵝死前無打斗行為，精神狀態(tài)及采食情況均正常。該黑天鵝死亡后，其余黑天鵝狀態(tài)正常，該散放區(qū)域內(nèi)其他鳥禽無患病或死亡情況發(fā)生。死亡黑天鵝為沈陽鳥島自然繁殖9月齡亞成體，生長發(fā)育與成年黑天鵝相比，在體重、體長、翼展等方面均偏小，死亡黑天鵝體尺參數(shù)見表1。

表1 死亡黑天鵝體尺參數(shù)Tab.1 Death black swan body size parameters

2 檢查結(jié)果

2.1 黑天鵝病理剖檢結(jié)果（見圖1～圖4）

由圖1～圖4可知，死亡黑天鵝膽囊腫大、質(zhì)地變硬，膽汁渾濁、膽管發(fā)炎、堵塞；腸黏膜腫脹、充血、出血；肝臟腫大、變性[4]；肺臟存在褐色壞死，心肌萎縮塌陷，腹腔內(nèi)有惡臭氣味，肌胃、腺胃正常。

圖1 死亡黑天鵝肝膽管Fig.1 Death black swan liver bile duct

圖2 死亡黑天鵝腸道Fig.2 Death black swan intestine

圖3 死亡黑天鵝膽囊Fig.3 Death black swan gall bladder

圖4 死亡黑天鵝肝臟Fig.4 Death black swan liver

2.2 黑天鵝顯微鏡檢查結(jié)果（見圖5、圖6）

由圖5、圖6可知，取死亡黑天鵝膽囊、肝臟涂片，顯微鏡下觀察到有大量寄生蟲蟲卵存在。對天鵝湖水中的魚、蝦、螺等水生動物進(jìn)行鏡檢，發(fā)現(xiàn)存在大量相同形態(tài)的寄生蟲蟲卵，因此推測水域內(nèi)的魚、蝦、螺為中間宿主，該黑天鵝通過食入魚、蝦、螺等中間宿主而引發(fā)寄生蟲感染。

圖5 膽囊涂片鏡檢（×40）Fig.5 Gallbladder smear mirror(×40)

圖6 天鵝湖魚類肌肉組織涂片鏡檢（×40）Fig.6 Swan lake fish muscle tissue smear microscopy(×40)

2.3 細(xì)菌培養(yǎng)及藥敏試驗(yàn)檢測（見表2）

將死亡黑天鵝肝臟樣品在無菌操作下，分別接種到血平板固體培養(yǎng)基、營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、麥康凱培養(yǎng)基及三糖鐵培養(yǎng)基中，觀察細(xì)菌生長特性，鑒別細(xì)菌種類[5-7]；進(jìn)行藥物敏感試驗(yàn)，測量抑菌環(huán)直徑，選擇敏感藥物[8]。結(jié)果顯示，在樣品中培養(yǎng)出的細(xì)菌初步鑒定為大腸桿菌。由表2可知，該菌對頭孢曲松敏感。

表2 藥敏試驗(yàn)結(jié)果Tab.2 Drug sensitivity test results

2.4 安卡拉病原及GICA病原檢測（見圖7）

圖7 安卡拉病原PCR檢測結(jié)果Fig.7 Ankara pathogen PCR test results

通過提取死亡黑天鵝肝臟組織中的總DNA，用特異引物進(jìn)行PCR，擴(kuò)增目的基因片段，在954 bp 處未出現(xiàn)目的條帶。結(jié)果顯示，該黑天鵝未感染安卡拉病原。將死亡黑天鵝喉頭、肺臟、肛拭子樣品進(jìn)行預(yù)處理[9]，采用GICA 反應(yīng)板進(jìn)行檢測，結(jié)果顯示，該黑天鵝未感染新城疫和禽流感病原。

2.5 病理切片（見圖8、圖9）

由圖8 可知，通過病理組織石蠟切片，HE 染色觀察發(fā)現(xiàn)，死亡黑天鵝肝細(xì)胞發(fā)生變性、壞死，肝細(xì)胞索紊亂，大量嗜酸性粒細(xì)胞增生浸潤。

由圖9可知，死亡黑天鵝腸道充血，腸黏膜炎性細(xì)胞浸潤，異嗜性粒細(xì)胞增多，上皮絨毛脫落。

圖9 腸道病理組織切片（HE×200）Fig.9 Intestinal pathological tissue slices(HE×200)

2.6 棲息地水體檢測（見表3）

由表3 可知，對該黑天鵝棲息的天鵝湖水域進(jìn)行水體檢測，結(jié)果表明，菌群總數(shù)、總大腸桿菌數(shù)、耐熱大腸桿菌數(shù)、大腸埃希氏菌[10]均不符合《生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》GB 5479—2006要求。

表3 天鵝湖水體檢測結(jié)果Tab.3 Swan Lake water body test results

3 診斷

經(jīng)安卡拉病原、GICA病原檢測及發(fā)病情況調(diào)查顯示，排除感染安卡拉、新城疫、禽流感等傳染病的可能。通過病理剖檢、顯微鏡檢查與組織切片檢查等結(jié)果與寄生蟲生活史等綜合分析，初步診斷該死亡黑天鵝為東方次睪吸蟲與大腸桿菌混合感染[11]。

4 治療與預(yù)防

根據(jù)診斷結(jié)果，本病例可采取頭孢曲松及丙硫苯咪唑進(jìn)行藥物治療。由于本次黑天鵝死亡為個(gè)體發(fā)病，同一水域內(nèi)其余黑天鵝與其他鳥禽均未出現(xiàn)發(fā)病情況，因此主要采取以下預(yù)防措施。

4.1 水體消毒

鵝湖為我園一處人工湖。鑒于該湖從未干塘，水體污染嚴(yán)重，大腸桿菌數(shù)超標(biāo)，易引發(fā)鳥禽感染大腸桿菌疾病[12]。因此，在秋季干塘，清理湖底污物，更換水源，對水質(zhì)進(jìn)行監(jiān)測。在干塘換水期間，對天鵝湖內(nèi)魚、蝦、螺等進(jìn)行徹底撲殺，采取必要措施減少或消滅中間宿主[13]。定期對天鵝湖水域進(jìn)行消毒，采取每立方米水潑灑20 g次氯酸鈣的方式進(jìn)行水體消毒[14]。對天鵝湖岸邊區(qū)域進(jìn)行噴灑消毒，交替使用不同種類消毒劑，以保證消毒效果。對天鵝湖岸邊糞便及時(shí)清理，并采取無害化處理，避免糞便中攜帶蟲卵傳染給其他鳥禽[15]。

4.2 寄生蟲治療預(yù)防

本次黑天鵝發(fā)病死亡后，對區(qū)域內(nèi)所有水禽投喂吡喹酮進(jìn)行藥物驅(qū)蟲，采集糞便進(jìn)行鏡檢，均未發(fā)現(xiàn)存在寄生蟲蟲卵。對天鵝湖內(nèi)放養(yǎng)的魚、蝦、螺等每月進(jìn)行1 次鏡檢，對區(qū)域內(nèi)的水禽每周采集1次糞便進(jìn)行鏡檢[16]，以便及時(shí)發(fā)現(xiàn)是否存在寄生蟲感染[17-18]。按防疫計(jì)劃進(jìn)行預(yù)防性驅(qū)蟲，每年2次，分別在春、秋兩季，使用阿苯達(dá)唑伊維菌素粉按說明計(jì)量進(jìn)行預(yù)防[19]，對驅(qū)蟲效果做好跟蹤記錄。

4.3 加強(qiáng)飼養(yǎng)管理

夏季天氣悶熱潮濕，需定期更換天鵝湖岸邊墊草，避免墊草發(fā)潮變霉[20]。保證投食盆、水盆的干凈衛(wèi)生，每天進(jìn)行清洗與浸泡消毒，對投食區(qū)域多注意觀察，避免所飼食物發(fā)霉變質(zhì)。對該區(qū)域內(nèi)所有水禽定期投喂生物脫霉制劑、白頭翁散及多種維生素[21]，進(jìn)行疾病預(yù)防。

5 結(jié)論

本次黑天鵝發(fā)病過程為東方此睪吸蟲蟲卵在天鵝湖水域內(nèi)浮出毛蚴，鉆入螺類體內(nèi)發(fā)育為尾蚴，后感染水域內(nèi)魚類并發(fā)育為囊蚴，黑天鵝因食入感染囊蚴的魚而感染。同時(shí)，水質(zhì)污染嚴(yán)重、天氣悶熱潮濕、墊草及食物易發(fā)霉變質(zhì)、清理不及時(shí)等因素，引發(fā)大腸桿菌感染，最終導(dǎo)致黑天鵝發(fā)病死亡。