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    高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜檢測神經(jīng)酰胺水平對心血管事件發(fā)生預(yù)測價值

    2021-11-06 02:52:12李斯琪李紅帥劉艷霞
    臨床軍醫(yī)雜志 2021年10期
    關(guān)鍵詞:神經(jīng)酰胺低密度高水平

    劉 巖, 曲 穎, 李斯琪, 劉 兵, 李紅帥, 劉艷霞

    北部戰(zhàn)區(qū)總醫(yī)院 老年醫(yī)學(xué)中心 干二科,遼寧 沈陽 110016

    動脈粥樣硬化是心血管疾病(cardiovascular disease,CVD)最常見的病因之一[1]。有研究表明,鞘脂分子可以通過多種不同的機(jī)制介導(dǎo)動脈粥樣硬化的發(fā)生與發(fā)展。神經(jīng)酰胺為一類重要的鞘脂,能夠參與維持細(xì)胞的正常功能,調(diào)節(jié)細(xì)胞的生長和凋亡,并且與多種心血管危險因素密切相關(guān)。已有研究證實,動脈粥樣硬化患者的血漿中神經(jīng)酰胺的水平更高,并且在粥樣硬化斑塊區(qū)域可以分離出含有神經(jīng)酰胺在內(nèi)的多種鞘脂,斑塊低密度脂蛋白中神經(jīng)酰胺的含量比血漿低密度脂蛋白中高10~50倍[2-3]。有研究發(fā)現(xiàn),神經(jīng)酰胺可以預(yù)測冠心病患者18年后的全因死亡,這一結(jié)果在調(diào)整年齡性別、體質(zhì)量指數(shù)、高血壓、吸煙、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白、血糖和CVD家族史等危險因素后仍然顯著[4]。但對于神經(jīng)酰胺與1年內(nèi)心血管事件的發(fā)生情況的預(yù)測尚有爭議。本研究旨在探討神經(jīng)酰胺水平與心血管事件發(fā)生情況的相關(guān)性,為應(yīng)用神經(jīng)酰胺預(yù)測心血管事件發(fā)生提供依據(jù)?,F(xiàn)報道如下。

    1 對象與方法

    1.1 研究對象 選取自2019年8月至2020年7月于北部戰(zhàn)區(qū)總醫(yī)院體檢或入院診治的師級以上干部586例為研究對象。納入標(biāo)準(zhǔn):年齡≤80歲;均簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn):妊娠期婦女;惡性腫瘤患者;依從性較差者。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)。

    1.2 研究方法 所有研究對象均空腹采集靜脈血,應(yīng)用高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜(ultra performance liquid chromatography tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)法檢測血液中4種不同類型的神經(jīng)酰胺的含量(Cer16∶0、Cer18∶0、Cer24∶0、Cer24∶1)。準(zhǔn)確度采用加樣回收試驗評價,通過向血漿樣品中加入低值和高值濃度(同精密度和準(zhǔn)確度濃度)標(biāo)準(zhǔn)溶液,每個濃度重復(fù)檢測6次,按照“樣品處理流程”處理樣品;計算回收率,評價準(zhǔn)確度。依據(jù)檢測出的具體的數(shù)值進(jìn)行打分,打分標(biāo)準(zhǔn)[5]見表1。根據(jù)神經(jīng)酰胺水平的不同分?jǐn)?shù)等級,將其分為A組(神經(jīng)酰胺低水平組,總分0~2分,n=403),B組(神經(jīng)酰胺中水平組,總分3~6分,n=157)、C組(神經(jīng)酰胺高水平組,總分7~12分,n=26)。隨訪觀察1年,記錄3組患者1年內(nèi)心血管事件(因缺血性心血管病包括心絞痛發(fā)作、心肌梗死等)的發(fā)生情況。

    表1 UPLC-MS/MS法檢測神經(jīng)酰胺項目及打分標(biāo)準(zhǔn)

    2 結(jié)果

    2.1 3組患者一般資料比較 3組患者男性比例、年齡、體質(zhì)量指數(shù)、血糖、吸煙比例、高血壓比例、同型半胱氨酸、糖化血紅蛋白比較,差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。A組患者的甘油三酯、膽固醇、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白水平低于B組、C組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

    表2 3組患者一般資料比較

    2.2 3組患者心血管事件發(fā)生率比較 A組、B組、C組分別發(fā)生心血管事件9例(2.2%)、9例(5.7%)、4例(15.4%)。B組患者心血管事件發(fā)生率明顯高于A組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);C組患者心血管事件發(fā)生率明顯高于A、B組,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。

    2.3 高水平神經(jīng)酰胺患者發(fā)生心血管事件的二元Logistic回歸分析 應(yīng)用二元Logistic回歸分析,對3組患者低密度脂蛋白、高密度脂蛋白、膽固醇和甘油三酯水平進(jìn)行校正,結(jié)果表明高水平神經(jīng)酰胺是心血管事件的獨立危險因素(P<0.05)。見表3。

    表3 高水平神經(jīng)酰胺患者發(fā)生心血管事件的二元Logistic回歸分析

    3 討論

    目前,我國CVD處于高患病率、高致殘率、高病死率階段,已成為重大公共衛(wèi)生問題[6-8]。構(gòu)建有效的心血管事件預(yù)測體系,尋找能預(yù)測心血管事件的核心生物學(xué)標(biāo)記物意義重大。而神經(jīng)酰胺在心血管事件風(fēng)險預(yù)測中有重要的臨床指導(dǎo)價值,具備成為CVD相關(guān)生物學(xué)標(biāo)記物的潛能。

    本研究中神經(jīng)酰胺的檢測采用了國際領(lǐng)先UPLC/MS-MS技術(shù)。UPLC/MS-MS技術(shù)是一種通過制備、分離、檢測氣相離子來鑒定化合物的專門技術(shù),廣泛應(yīng)用于各領(lǐng)域中[9]。在眾多的分析測試方法中,質(zhì)譜學(xué)方法被認(rèn)為是一種同時具備高特異性和高靈敏度的且被廣泛應(yīng)用的普適性方法,在臨床研究的應(yīng)用方面,已成為國際公認(rèn)的定量分析首選技術(shù)。截至目前,UPLC/MS-MS已經(jīng)可以用于檢測多種神經(jīng)酰胺[10]。有研究發(fā)現(xiàn),血漿神經(jīng)酰胺水平越高的急性心肌梗死患者斑塊易損特征越明顯[11]。一些前瞻性研究證實,血漿中Cer(d18∶1/16∶0)、Cer(d18∶1/20∶0)、Cer(d18∶1/24∶1)及其與 Cer(d18∶1/24∶0)的比率對斑塊的不穩(wěn)定性、CVD病死率和健康人群發(fā)生意外主要心血管事件均具有預(yù)測能力[12-14]?;颊咝难苁录陌l(fā)生受多種因素的影響,如年齡、性別、膽固醇、低密度脂蛋白、血糖、吸煙、飲酒、用藥情況等[15]。本研究結(jié)果顯示,高水平神經(jīng)酰胺是心血管事件的獨立危險因素(P<0.05)。這表明,神經(jīng)酰胺水平與心血管事件發(fā)生密切相關(guān)。本研究結(jié)果還顯示,B組患者心血管事件發(fā)生率明顯高于A組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);C組患者心血管事件發(fā)生率明顯高于A、B組,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。這表明,高水平神經(jīng)酰胺患者心血管事件發(fā)生率更高,高水平神經(jīng)酰胺能夠一定程度上預(yù)測心血管事件的發(fā)生。本研究納入人群為師級以上干部,對于研究廣泛人群的神經(jīng)酰胺水平仍有一定局限性,尚需進(jìn)一步大樣本、多中心檢測。

    綜上所述,高水平的神經(jīng)酰胺的患者心血管事件發(fā)生率更高,為心血管事件的獨立危險因素。

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