黨鵬程,劉長彬, *,李守江,谷紅偉,李 軍,王智鵬,郭延華,,倪建宏,王 萌
(1.佛山守仁生物技術(shù)有限公司,廣東 佛山 528000;2.新疆農(nóng)墾科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所/省部共建綿羊遺傳改良與健康養(yǎng)殖國建重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室)
胚胎工程技術(shù)包含了超數(shù)排卵、胚胎冷凍、胚胎鑒定、胚胎移植等技術(shù)環(huán)節(jié),其中,同期發(fā)情技術(shù)是胚胎移植中關(guān)鍵的技術(shù)環(huán)節(jié)之一[1]。綿羊同期發(fā)情常用的藥品主要有PGF2a、CIDR 和海綿栓+PMSG 或海綿栓+PGF2a等。有研究表明,CIDR 對動物的發(fā)情紊亂、周期延遲、卵巢靜止等具有較好的療效[2]。CIDR 法對羊、牛進(jìn)行同期發(fā)情處理,取得了較好的同期發(fā)情效率。另外,歐美等一些國家也傾向于選擇CIDR 進(jìn)行動物的同期發(fā)情處理[3]。該技術(shù)是綿羊重要的養(yǎng)殖環(huán)節(jié),也是縮短產(chǎn)羔間歇的一個重要技術(shù)手段。目前,同期發(fā)情技術(shù)在規(guī)?;图s化養(yǎng)羊場的應(yīng)用已逐漸成熟,在批量化羔羊育肥、上市和屠宰方面取得了一定的成效,在規(guī)模效益方面具有潛在的推廣應(yīng)用價值。而隨著技術(shù)的進(jìn)步,同期發(fā)情處理的裝置和藥品也在發(fā)生著不斷的變化。因此,本試驗(yàn)通過研究國產(chǎn)化CIDR[4]掉栓率、發(fā)情率、折斷率和受胎率等,旨在建立一套綿羊同期發(fā)情控制技術(shù)方案,以期能夠獲得同期發(fā)情處理的準(zhǔn)確數(shù)據(jù),更好地為中國畜牧業(yè)生產(chǎn)服務(wù)。
選擇無繁殖系統(tǒng)疾病且有產(chǎn)羔經(jīng)歷的成年母羊757只,用于國產(chǎn)化CIDR同期發(fā)情試驗(yàn)研究。
國產(chǎn)化孕酮控制釋放器CIDR 購自鹽城燕瑞生物科技有限公司;海綿栓(45 mg/個)購自北京綠欣康有限公司;孕馬血清促性腺激素(PMSG)和氯前列希醇(PGF2a),由寧波三生藥業(yè)生產(chǎn)。
1.3.1同期發(fā)情
將試驗(yàn)羊隨機(jī)分成5 組,國產(chǎn)化CIDR 處理組618 只,海綿栓處理組89 只,PGF2ɑ處理組50只。埋置CIDR 或海綿栓前,需蘸取土霉素液,埋栓當(dāng)天為0 天,第13 天撤栓,同時肌肉注射PMSG 330~450 IU,撤栓后24~48 h 公羊試情,記錄發(fā)情羊數(shù)和撤栓后發(fā)情時間,在發(fā)情后12 h 和24 h 分別輸精,共計(jì)輸精2次,統(tǒng)計(jì)發(fā)情結(jié)果。
PGF2ɑ注射當(dāng)天為0 天,注射后24 h 公羊試情,記錄發(fā)情時間和數(shù)量,輸精時間同上。
在人工授精后35~45 d 進(jìn)行B 超妊娠檢查,懷孕羊記為陽性,空胎羊記為陰性。統(tǒng)計(jì)受胎數(shù)量。
1.3.2發(fā)情鑒定
在國產(chǎn)化CIDR 撤栓或PGF2ɑ注射后24~48 h進(jìn)行公羊試情,如出現(xiàn)被爬跨母羊靜立、塌腰或母羊緊緊圍繞公羊并嗅公羊,或母羊緊跟公羊排成一線,公羊停止前進(jìn)母羊也隨之停止前進(jìn),并且母羊外陰充血發(fā)紅,或有透明拉絲粘液流出陰門等反應(yīng),即可認(rèn)定為發(fā)情。
1.3.3數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)
同期發(fā)情試驗(yàn)分3 次進(jìn)行,數(shù)據(jù)用平均值± 標(biāo)準(zhǔn)偏差(Mean ± SD)表示,用SAS 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,當(dāng)P <0.05時表示差異顯著。
從母羊埋栓當(dāng)天計(jì),在埋栓過程中,CIDR 栓折斷率平均1.50% ± 0.46%,掉栓率平均5.30% ±1.51%,母羊發(fā)情率平均88.98% ± 6.25%。埋栓35~45 d 進(jìn)行B 超妊娠檢查,母羊受胎率平均57.38% ± 2.40%。結(jié)果如表1 所示,國產(chǎn)化CIDR埋栓組之間掉栓率、發(fā)情率、栓折斷率和受胎率差異不顯著(P >0.05)。
表1 國產(chǎn)化CIDR同期發(fā)情效果及栓折斷情況
將289 只母羊隨機(jī)分成CIDR+PMSG、海綿栓+PMSG 和PGF2a3 個處理組。從表2 可知:CIDR +PMSG 和海綿栓+PMSG 組掉栓率和發(fā)情率差異顯著(P <0.05);CIDR+PMSG、海綿栓+PMSG 和PGF2a3 組之間發(fā)情率差異顯著(P <0.05);受胎率之間差異不顯著(P >0.05)。
表2 不同同期發(fā)情處理方法的效果比較
影響同期發(fā)情效果的因素較多,包括飼料、營養(yǎng)、季節(jié)條件和激素產(chǎn)品等[5]。在綿羊同期發(fā)情過程中,埋置孕酮陰道栓以提高血液中孕酮水平,一方面抑制卵泡的發(fā)育,另一方面促使優(yōu)勢卵泡發(fā)生黃體化。孕酮陰道栓還可以促進(jìn)早期黃體的形成和發(fā)育,從而在撤除海綿栓時,血液中孕酮含量急劇下降,優(yōu)勢卵泡快速形成并發(fā)育排卵[6]。韓志強(qiáng)[7]等研究表明,CIDR+PMSG、CIDR+PGF2a等方法對同期發(fā)情后的妊娠率無顯著影響,這與本試驗(yàn)結(jié)果相似。肖國亮[8]等研究表明,進(jìn)口CIDR 與國產(chǎn)化CIDR 在秋季的同期發(fā)情處理效果上優(yōu)于春季,可能是因?yàn)榍锛局饾u進(jìn)入短日照,而大部分羊是短日照季節(jié)性發(fā)情,因此受季節(jié)影響,CIDR 秋季處理效果優(yōu)于春季。合麥提江[9]選用CIDR+PMSG處理方法,在秋季對多浪羊進(jìn)行同期發(fā)情處理,發(fā)情率為93.1%,受胎率為96.3%,同時不同季節(jié)對發(fā)情率的影響試驗(yàn)表明,春秋兩季進(jìn)行同期發(fā)情處理,在發(fā)情率方面無顯著差異(P >0.05),秋季受胎率顯著高于春季(P <0.05)。馬世昌[10]等研究顯示,同期發(fā)情率在72 h內(nèi)CIDR+氯前列烯醇(PG)組高于CIDR+PMSG組。
受胎率的高低直接影響?zhàn)B羊生產(chǎn)的經(jīng)濟(jì)效益,也是衡量生產(chǎn)效率的重要指標(biāo)。劉長彬[11]等在春季采用陰道栓+PMSG 的同期發(fā)情方法處理小尾寒羊,受胎率為47.99%。試驗(yàn)結(jié)果表明,季節(jié)不同可能對同期發(fā)情產(chǎn)生了一定的影響。同時也表明寒羊和湖羊等國內(nèi)多胎品種雖然能夠在一年內(nèi)多次發(fā)情,但秋季的發(fā)情率和受胎率明顯高于春季。
本研究發(fā)現(xiàn),國產(chǎn)化CIDR在使用過程中,羊產(chǎn)道在異物的刺激下,分泌物會明顯增加,少部分CIDR栓在撤栓時可以看到栓的表面粘有白色或膿性分泌物,為了解決炎癥反應(yīng),在試驗(yàn)后期埋栓時,在CIDR栓表面涂抹鹽酸土霉素制劑或土霉素粉劑+植物油混合劑,可有效解決炎癥反應(yīng)問題,減少因炎癥反應(yīng)造成的陰道炎癥,同時還可提高人工授精技術(shù)的成功率。