平板菌落計(jì)數(shù)法對食品微生物檢驗(yàn)的作用研究

田微微

(南通市疾病預(yù)防控制中心 江蘇南通 226000)

1 前言

近年來隨著人們健康意識的增強(qiáng)，食品安全成為社會熱點(diǎn)話題[1]。在食品加工生產(chǎn)中，若未能按照國家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行衛(wèi)生管理，易造成微生物超標(biāo)[2]?，F(xiàn)階段，在我國的食品安全監(jiān)督管理中，會對抽檢樣品的菌落總數(shù)、大腸菌群、霉菌、酵母菌含量進(jìn)行檢驗(yàn)，平板菌落計(jì)數(shù)法、紙片法、TTC檢驗(yàn)較為常用[3]。本文對平板菌落計(jì)數(shù)法在食品衛(wèi)生微生物檢驗(yàn)中的作用進(jìn)行探討，以期為相關(guān)研究提供參考。

2 資料與方法

2.1 一般資料

研究時(shí)間為2021年2月—2021年5月，研究對象為我中心收到的120份食品樣品，研究方法為平板菌落計(jì)數(shù)法。

2.2 方法

在開始檢驗(yàn)前先做好檢驗(yàn)準(zhǔn)備工作，按照培養(yǎng)基說明進(jìn)行制備，在高壓滅菌消毒后將其置入恒溫水浴鍋中(46℃)，測試紙片需恢復(fù)常溫后才能使用。

平板菌落計(jì)數(shù)法的食品樣液均需要按照GB 4789.2-2016進(jìn)行制備。準(zhǔn)備質(zhì)控樣品，在無菌條件下，準(zhǔn)備60 ml的滅菌后生理鹽水，在1 min內(nèi)開啟凍干樣品西林瓶蓋，取4 ml樣品進(jìn)行水化；在其完全被溶解后吸出溶液至無菌錐形瓶內(nèi)，用剩余的稀釋液進(jìn)行西林瓶內(nèi)壁清洗，將清洗液置入無菌瓶，即待測樣品原液(60 ml)；將質(zhì)控樣品與食品樣品樣液進(jìn)行10倍稀釋，混勻后用1 ml的無菌吸管吸?。谎刂鼙诰徛龑⑵渥⑷胧⒂? ml稀釋液的無菌試管內(nèi)再次搖勻，制成100倍稀釋溶液，按同樣的方法稀釋為1 000倍溶液。

平板菌落計(jì)數(shù)法：在無菌環(huán)境下進(jìn)行操作，用1 ml的無菌吸管吸取制備好的稀釋液，分別將其置于2個(gè)無菌平皿內(nèi)(其中1個(gè)為對照組)，同時(shí)在升溫至46℃的平板計(jì)數(shù)瓊脂中注入1 ml的無菌生理鹽水，混勻，冷卻后翻轉(zhuǎn)平板在(36±1)℃下培養(yǎng)(48±2)h。

2.3 觀察指標(biāo)

檢查結(jié)果：以實(shí)驗(yàn)室檢出結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)，統(tǒng)計(jì)平板菌落計(jì)數(shù)法在不合格樣品檢出方面的差異。

2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

數(shù)據(jù)計(jì)算統(tǒng)計(jì)軟件：SPSS20.0；計(jì)數(shù)資料表示：(n，%)，檢驗(yàn)：χ2，統(tǒng)計(jì)學(xué)差異的判定標(biāo)準(zhǔn)：P<0.05。

3 結(jié)果

在本次研究中，采用實(shí)驗(yàn)室綜合法進(jìn)行檢查發(fā)現(xiàn)有16份樣品不合格，運(yùn)用平板計(jì)數(shù)法進(jìn)行檢測，檢出不合格樣品14例，與實(shí)驗(yàn)室檢查相比較無明顯差異，P>0.05，詳見表1。

表1 2組檢查結(jié)果比較比較(n，%)

4 討論

食品安全與人們的日常生活息息相關(guān)，雖然相關(guān)機(jī)構(gòu)比較關(guān)注該方面的管理與研究，但在實(shí)際生活中食品被微生物污染的事件時(shí)有發(fā)生。為減少食品安全問題，檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)通常會從菌落總數(shù)、大腸菌群、霉菌、酵母菌3個(gè)方面進(jìn)行細(xì)菌指標(biāo)檢查[4]。菌落總數(shù)是指將食品處理后，在一定的培養(yǎng)條件下取1 ml或1 g的檢驗(yàn)樣品檢測其中含有的細(xì)菌菌落總數(shù)，可以通過該指標(biāo)檢查，來觀察食品中微生物的繁殖情況，為食品的衛(wèi)生檢測提供更多依據(jù)[5]。

在本次研究中，采用平板計(jì)數(shù)進(jìn)行檢查，發(fā)現(xiàn)其具有以下優(yōu)勢：能夠直觀的觀察到培養(yǎng)基上的菌落生長情況，方便檢測人員進(jìn)行計(jì)算、讀數(shù)；具有線性范圍較大的優(yōu)勢，梯度稀釋提高了計(jì)算的線性范圍，在此基礎(chǔ)上采用菌懸液涂布，可以有效控制菌落的疏密排布程度，提高觀察的重復(fù)性與平行性。

綜上所述，在進(jìn)行食品微生物檢驗(yàn)時(shí)，選擇平板菌落計(jì)數(shù)法可以得到較好的檢驗(yàn)結(jié)果，在檢驗(yàn)中需注意控制好培養(yǎng)皿溫度，遵循無菌操作原則，減少外部環(huán)境對研究結(jié)果的影響。