• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    鮮蒜貯藏期主要病原菌分離鑒定及臭氧抑菌效果研究

    2021-11-01 01:45:08紀(jì)海鵬于晉澤董成虎
    保鮮與加工 2021年10期
    關(guān)鍵詞:孢霉大蒜臭氧

    蘭 璞,紀(jì)海鵬,賈 凝,張 娜,于晉澤,董成虎,3,*

    (1.天津市農(nóng)業(yè)科學(xué)院,天津 300384;2.天津市農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品保鮮與加工技術(shù)研究所(國(guó)家農(nóng)產(chǎn)品保鮮工

    程技術(shù)研究中心(天津)),農(nóng)業(yè)農(nóng)村部農(nóng)產(chǎn)品貯藏保鮮重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,天津市農(nóng)產(chǎn)品采后生理與貯藏保鮮重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,天津 300384;3.天津市興有果蔬種植專(zhuān)業(yè)合作社,天津 301714)

    大蒜(AlliumsativumL.)也稱(chēng)為蒜頭、大蒜頭、胡蒜,是蒜類(lèi)植物的統(tǒng)稱(chēng)[1],為半年生草本植物,屬百合科蔥屬,以鱗莖入藥。從古至今埃及、中國(guó)、日本等一直用大蒜治療多種疾病。大蒜是秦漢時(shí)從西域傳入我國(guó),經(jīng)人工栽培繁育,具有抗癌功效,深受大眾喜食[2]。大蒜呈扁球形或短圓錐形,外層是灰白色或淡棕色膜質(zhì)鱗皮,剝?nèi)[葉,內(nèi)有6~10個(gè)蒜瓣,輪生于花莖的周?chē)o基部盤(pán)狀,生有多數(shù)須根,有濃烈的蒜臭,味辛辣,有刺激性氣味,可食用或供調(diào)味。目前我國(guó)大蒜主要栽培品種有:山東蒼山大蒜品種群、吉林白馬芽、山東金鄉(xiāng)白蒜、江蘇太倉(cāng)白蒜、陜西蔡家坡紫皮蒜、黑龍江阿城大蒜、天津?qū)氎娲笏獾取1狙芯克x試材為天津?qū)氎娲笏?,?瓣為主,蒜瓣在莖盤(pán)上圍成一輪,蒜皮為紫紅色,蒜瓣潔白、均勻,鮮嫩多汁,口感辛辣,脆香濃郁,肉質(zhì)肥厚[3]。大蒜傳統(tǒng)的貯藏方法有掛藏法、堆藏法、埋藏法、輻射貯藏和化學(xué)藥劑處理貯藏[4]。目前市場(chǎng)上流通的大蒜主要是干蒜,源于其耐貯性。事實(shí)上新鮮大蒜口感更為鮮美,適于鮮食,但不易保存,在貯運(yùn)過(guò)程中易受微生物污染,導(dǎo)致蒜瓣失水干縮、腐敗發(fā)芽、易霉化軟爛等問(wèn)題發(fā)生,使鮮蒜的品質(zhì)和商品價(jià)值受到影響。

    目前果蔬的貯藏保鮮方法主要有低溫、臭氧、1-甲基環(huán)丙烯(1-Methylcyclopropene,1-MCP)、涂膜、煙霧劑保鮮等。曹琳等[5]研究表明:臭氧處理大蒜可有效抑制赤霉、橘青霉等的生長(zhǎng)發(fā)育,改變菌體形態(tài)。張靜林等[6]采用30 mg/m3臭氧對(duì)脫水蒜片進(jìn)行處理,發(fā)現(xiàn)蒜片中菌落總數(shù)得到顯著抑制,且不影響蒜片內(nèi)的營(yíng)養(yǎng)成分。姜楠等[7]發(fā)現(xiàn)采用臭氧處理后的交鏈孢菌對(duì)生物活性的不良影響顯著降低,同時(shí)發(fā)現(xiàn)適宜濃度的臭氧處理能夠降解交鏈孢菌的多種芽孢菌,使得毒力得以顯著降低。臭氧由于具有強(qiáng)氧化性且使用后無(wú)殘留,被廣泛應(yīng)用于食品加工車(chē)間食品表面殺菌、防腐保鮮等多個(gè)領(lǐng)域[8]。臭氧處理果蔬,既有可靠的殺菌保鮮效果,又沒(méi)有任何有害殘留[9-10]。冷藏或氣調(diào)貯藏配合臭氧處理是一項(xiàng)新型的果蔬保鮮方式[11]。根據(jù)臭氧在果蔬貯藏的研究報(bào)道,明確得到的結(jié)論是隨貯藏庫(kù)溫度升高或相對(duì)濕度增加,臭氧的分解速率明顯加快[12]。每年的冬季市面上大多為干蒜,鮮有可口的鮮蒜,因此本研究主要以貯藏5個(gè)月的寶坻鮮蒜為試材,進(jìn)一步探索驗(yàn)證貯藏后期鮮蒜的主要致病微生物和致病微生物控制方法,以期獲得新鮮的大蒜病害控制技術(shù),滿足廣大消費(fèi)者對(duì)鮮蒜食用需求。

    1 材料與方法

    1.1 材料與設(shè)備

    1.1.1 材料與試劑

    材料:貯藏后期的寶坻鮮蒜,于2019年5月購(gòu)買(mǎi),鮮蒜購(gòu)買(mǎi)時(shí)含水量為64~66 g/100 g。挑選整理后用長(zhǎng)1 m、寬0.6 m、厚度0.05 mm的鮮蒜專(zhuān)用PE袋包裝,每袋15 kg置于冷庫(kù)的架子上,貯藏溫度(0±0.5)℃,相對(duì)濕度(RH)90%~95%,至2019年12月之后開(kāi)始出現(xiàn)輕微發(fā)霉現(xiàn)象,挑選表面已霉變或產(chǎn)生霉變趨勢(shì),甚至生長(zhǎng)出病原菌的鮮蒜進(jìn)行致病微生物的分離鑒定,對(duì)分離的菌株進(jìn)行鮮蒜反接種及分離純化,并采用臭氧處理進(jìn)行鮮蒜主要致病菌的抑制試驗(yàn)。

    瓊脂粉,北京奧博星生物化學(xué)試劑科技有限公司產(chǎn)品;葡萄糖,天津市科威有限公司產(chǎn)品;土豆,購(gòu)于天津市西青區(qū)物美超市。

    1.1.2 儀器與設(shè)備

    VS-1300-V型超凈工作臺(tái),蘇州安泰空氣技術(shù)有限公司;LDZX-50KB立式壓力蒸汽滅菌器,上海申安醫(yī)療器械廠;SPX-250B智能生化培養(yǎng)箱,上?,槴\實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司;氣調(diào)冷庫(kù),意大利Isolcell公司;557115游標(biāo)卡尺,艾威博爾研發(fā)制造有限公司;BX51TF攝像顯微鏡,日本Olympus公司。

    1.2 方法

    1.2.1 培養(yǎng)基的配制

    采用馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(PDA培養(yǎng)基)培養(yǎng)大蒜的病害組織,即去皮馬鈴薯200 g,瓊脂15~20 g,葡萄糖20 g,超純水1 000 mL。

    1.2.2 大蒜病原真菌的分離流程

    冷藏條件下獲取發(fā)病大蒜→無(wú)菌環(huán)境下分離大蒜病害組織→PDA培養(yǎng)基培養(yǎng)病害組織→鏡檢→培養(yǎng)基上多次純化→獲得單菌落菌株→鏡檢→確定病原菌[13-14]

    1.2.3 大蒜病原真菌菌落形態(tài)觀察及分離鑒定

    觀察分離培養(yǎng)基平板上菌落的形態(tài),包括形狀、色澤、大小、菌絲特征[15-16];將單菌落的病原菌制片后無(wú)需染色直接在4倍、10倍、20倍和40倍目鏡下觀察菌絲形態(tài)和孢子形狀,記錄觀察結(jié)果并拍照[17];分離純化后的菌種經(jīng)過(guò)反接種試驗(yàn)來(lái)確定其致病性,如果發(fā)病癥狀與貯藏中的腐爛癥狀相同[18-19],作為采后病害病原菌進(jìn)一步鑒定到屬種,分離鑒定方法參照《真菌鑒定手冊(cè)》等書(shū)籍[20-23]。

    1.2.4 主要病原菌回接與臭氧處理

    在無(wú)菌環(huán)境下切分發(fā)病鮮蒜病斑與健康組織交界處(1 cm×1 cm)后置于PDA培養(yǎng)基上,隨后放入培養(yǎng)箱中,設(shè)定培養(yǎng)箱環(huán)境為25℃。在已培養(yǎng)好的平板上打孔取菌餅,將菌餅置于新培養(yǎng)基中央繼續(xù)培養(yǎng),重復(fù)3次后得到純化病原菌,采用菌液法[22]制備孢子懸浮液。

    將主要病原菌侵染回接至已消毒的健康鮮蒜上,采用刺傷接種法[14],使用無(wú)菌針在鮮蒜赤道部位制造傷口(大小約為4 mm×4 mm),將10μL孢子液注入傷口,被接種的鮮蒜貯藏在不同溫度(0、25℃)條件下通過(guò)不同濃度(17.152、21.44 mg/m3)的臭氧氣體熏蒸處理,每天進(jìn)行不同時(shí)間(12、18 h)臭氧處理,共貯藏7 d。

    每天隨機(jī)取樣,采用“十字交叉法”測(cè)量鮮蒜表面菌落的直徑,每次取各處理組10個(gè)鮮蒜進(jìn)行測(cè)定,每次測(cè)定重復(fù)3次。選擇25℃旨在模擬室溫貨架溫度,同時(shí)將不同溫度下不作其他處理的接種大蒜作為空白對(duì)照組(CK)[24-25]。

    1.2.5 數(shù)據(jù)處理

    使用Excel 2016軟件處理數(shù)據(jù)與作圖,使用SPSS 20.0軟件用Duncan檢驗(yàn)進(jìn)行顯著性分析。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 鮮蒜病原菌菌落細(xì)胞形態(tài)特征觀察及鑒定

    在本試驗(yàn)的冷藏條件下貯藏半年后,鮮蒜表面出現(xiàn)病斑。分離出鮮蒜的病變組織,并用PDA培養(yǎng)基培養(yǎng)。在顯微鏡下觀察后,通過(guò)劃線法分離,經(jīng)過(guò)多次純化后,得出單菌落菌株,分別鏡檢,確定鮮蒜的病原菌。

    如圖1A所示,分生孢子呈紡錘狀或倒棒狀,頂端延長(zhǎng)成喙?fàn)?,多?xì)胞,有壁磚狀分隔,分生孢子常數(shù)個(gè)成鏈。根據(jù)菌落細(xì)胞的形態(tài)特征,確定為交鏈孢綱中的交鏈孢屬(Alternaria),容易引起新鮮大蒜發(fā)生黑斑病[26-27]。

    圖1 3種致病真菌形態(tài)特征Fig.1 Morphological characteristics of three pathogenic fungi

    如圖1B所示,菌絲頂端分枝形如掃帚,有橫隔,其分生孢子梗經(jīng)多次分枝,產(chǎn)生幾輪對(duì)稱(chēng)或不對(duì)稱(chēng)的小梗,分生孢子呈球形、橢圓形或短柱形,光滑或粗糙。根據(jù)菌落細(xì)胞的形態(tài)特征,確定為半知菌亞門(mén)絲孢中的產(chǎn)黃青霉(Penicilliumchrysogenum),易引起大蒜發(fā)生黃青霉病[13]。

    如圖1C所示,分生孢子梗直立、透明、光滑,分生孢子透明、光滑,多數(shù)長(zhǎng)圓形,亦有擬橢圓形、卵圓形或不規(guī)則長(zhǎng)圓形孢子,或多或少呈平行的,或不同角度的傾斜排列。根據(jù)菌落細(xì)胞形態(tài)特征,確定為青霉屬中的斜鏈擬青霉(PaecilomycescateniobliquusLiang),易引起大蒜黑霉病[13,25]。

    通過(guò)鮮蒜致病微生物分離鑒定出的致病菌,結(jié)合貯藏后期鮮蒜發(fā)病情況統(tǒng)計(jì)得出其發(fā)病指數(shù),發(fā)現(xiàn)冷庫(kù)貯藏鮮蒜中交鏈孢霉的發(fā)病率最高,為69.3%,而觀測(cè)發(fā)現(xiàn)致病菌產(chǎn)黃青霉、斜鏈擬青霉在低溫冷藏條件下的發(fā)病率較低,分別為24.7%和17.9%,即控制交鏈孢霉的生長(zhǎng)能夠影響庫(kù)內(nèi)大部分鮮蒜霉變,且臭氧抑制交鏈孢屬效果已有研究表明有效[5]。為此本研究以分離純化的交鏈孢霉在不同臭氧處理?xiàng)l件下的生長(zhǎng)情況作比較分析,通過(guò)測(cè)量菌落在臭氧處理后的環(huán)境中生長(zhǎng)大小的直徑判定臭氧對(duì)其控制作用。

    2.2 臭氧抑制鮮蒜貯藏期交鏈孢霉的研究

    2.2.1 0℃下不同濃度臭氧處理12 h對(duì)鮮蒜貯藏期交鏈孢霉生長(zhǎng)的影響

    由圖2可見(jiàn),在0℃下,隨著貯藏時(shí)間的延長(zhǎng),鮮蒜表面的菌落直徑呈增大的變化趨勢(shì)。整個(gè)貯藏期內(nèi),空白對(duì)照組菌落直徑始終顯著高于臭氧處理組(P<0.05)。可見(jiàn)與同溫度下未經(jīng)處理的空白對(duì)照組相比,臭氧濃度為17.152 mg/m3和21.44 mg/m3下處理12 h的交鏈孢霉生長(zhǎng)速度得到了明顯的抑制,且21.44 mg/m3臭氧處理組比17.152 mg/m3臭氧處理組的菌落直徑更小。所以在相同溫度(0℃)和處理時(shí)間(12 h)下,臭氧處理的濃度越大,菌落生長(zhǎng)更為緩慢,抑菌效果更好,且證實(shí)了0℃下臭氧處理對(duì)交鏈孢霉的生長(zhǎng)具有明顯的抑制作用。

    圖2 0℃下不同濃度臭氧處理12 h對(duì)鮮蒜接種交鏈孢霉菌落直徑的影響Fig.2 Effects of ozone treatments with different concentrations at 0℃for 12 h on the colony diameters of Alternaria inoculated in fresh garlic

    2.2.2 0℃下不同濃度臭氧處理18 h對(duì)鮮蒜貯藏期交鏈孢霉生長(zhǎng)的影響

    如圖3所示,在0℃下,空白對(duì)照組和臭氧處理組鮮蒜表面菌落直徑在整個(gè)貯藏過(guò)程中均呈上升趨勢(shì)。其中,對(duì)照組在整個(gè)貯藏過(guò)程中菌落直徑顯著高于臭氧處理組(P<0.05),可見(jiàn)與同溫度下未經(jīng)處理的空白對(duì)照組比較,在臭氧濃度為17.152 mg/m3和21.44 mg/m3下處理18 h的菌落生長(zhǎng)速度得到了明顯的抑制。且在相同溫度(0℃)和處理時(shí)間(18 h)下,21.44 mg/m3比17.152 mg/m3臭氧濃度處理菌落生長(zhǎng)更為緩慢,抑菌效果更好。證實(shí)了在0℃下臭氧處理對(duì)交鏈孢霉的生長(zhǎng)有明顯的抑制作用。

    圖3 0℃下不同濃度臭氧處理18 h對(duì)鮮蒜接種交鏈孢霉菌落直徑的影響Fig.3 Effects of ozone treatments with different concentrations at 0℃for 18 h on the colony diameters of Alternaria inoculated in fresh garlic

    2.2.3 25℃下不同濃度臭氧處理12 h對(duì)鮮蒜貯藏期交鏈孢霉生長(zhǎng)的影響

    由圖4可以看出,自接種第3天后,17.152 mg/m3組的菌落直徑與空白對(duì)照組出現(xiàn)差異,而21.44 mg/m3組于接種第2天后差異逐漸明顯。與同溫度下未經(jīng)處理的空白對(duì)照組相比,臭氧濃度為17.152 mg/m3和21.44 mg/m3處理12 h下交鏈孢霉的生長(zhǎng)速度得到了明顯的抑制。25℃貯藏溫度下,接種5 d后菌落迅速布滿果實(shí)表面,同時(shí)菌落創(chuàng)面軟化塌陷嚴(yán)重,已無(wú)法繼續(xù)觀測(cè),故不再進(jìn)行量取。貯藏3 d后在相同溫度(25℃)和處理時(shí)間(12 h)下,17.152 mg/m3臭氧處理組比21.44 mg/m3組菌落直徑小,可見(jiàn)17.152 mg/m3臭氧處理組比21.44 mg/m3處理組抑菌效果更為有效。

    圖4 25℃下不同濃度臭氧處理12 h對(duì)鮮蒜接種交鏈孢霉菌落直徑的影響Fig.4 Effects of ozone treatments with different concentrations at 25℃for 12 h on the colony diameters of Alternaria inoculated in fresh garlic

    2.2.4 25℃下不同濃度臭氧處理18 h對(duì)鮮蒜貯藏期交鏈孢霉生長(zhǎng)的影響

    由圖5可以看出,在25℃下,臭氧濃度為21.44 mg/m3處理18 h與同溫度下未經(jīng)處理的空白對(duì)照組菌落生長(zhǎng)情況基本一致,并未出現(xiàn)較明顯的抑制作用。同時(shí),21.44 mg/m3臭氧處理組菌落直徑與對(duì)照組之間差異較小。而17.152 mg/m3臭氧處理組貯藏第2、4、5天的菌落直徑顯著低于其他兩組(P<0.05)。證實(shí)臭氧熏蒸處理能抑制鮮蒜表面病斑直徑的擴(kuò)大,最終觀測(cè)菌落直徑發(fā)現(xiàn)無(wú)論是在0℃下還是25℃下,17.152 mg/m3臭氧都對(duì)交鏈孢霉產(chǎn)生了抑制作用,而且這種抑制在0℃下更為明顯。

    圖5 25℃下不同濃度臭氧處理18 h對(duì)鮮蒜接種交鏈孢霉菌落直徑的影響Fig.5 Effects of ozone treatments with different concentrations at 25℃for 18 h on the colony diameters of Alternaria inoculated in fresh garlic

    3 結(jié)論與討論

    由于臭氧只作用在鮮蒜表面,因此貯藏室內(nèi)存放的鮮蒜之間必須留有一定的間隙,使臭氧充分發(fā)揮作用。臭氧處理作為一種殺菌保鮮方法[28],也有其局限性,表現(xiàn)在以下幾方面:一是當(dāng)果蔬處于密封包裝情況下,冷庫(kù)使用臭氧保鮮機(jī)保鮮時(shí)效果并不太理想;二是由于高濃度臭氧對(duì)人的眼睛、皮膚、呼吸道具有極強(qiáng)的刺激作用[29],所以貯藏室的消毒應(yīng)在無(wú)人的情況下進(jìn)行;三是臭氧濃度并不是越高越好,臭氧使用濃度太大,會(huì)引起果蔬表面質(zhì)膜損害,使其透性增大、細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)外滲,導(dǎo)致品質(zhì)下降,甚至加速果蔬的衰老和腐敗等[30]。

    本試驗(yàn)從0℃下貯藏后期鮮蒜上分離鑒定出3種致病菌,分別為交鏈孢屬(Alternaria)、產(chǎn)黃青霉(Penicilliumchrysogenum)和斜鏈擬青霉(Paccilomyces cateniobliquusLiang),且根據(jù)發(fā)病情況確定交鏈孢霉是貯藏期鮮蒜的主要致病菌。在0℃下,21.44 mg/m3臭氧處理抑制交鏈孢霉生長(zhǎng)比17.152 mg/m3臭氧處理更加明顯;而在25℃下,17.152 mg/m3臭氧處理組卻比21.44 mg/m3組抑制效果好。當(dāng)處理環(huán)境溫度相同,臭氧處理濃度也相同的情況下,處理12 h比處理18 h對(duì)霉菌的生長(zhǎng)速度抑制效果要好。且在臭氧濃度相同、處理時(shí)間也相同的情況下,0℃組比25℃組交鏈孢霉生長(zhǎng)情況得到更加明顯的抑制??梢?jiàn),溫度對(duì)鮮蒜上交鏈孢霉抑菌效果的影響很大。本試驗(yàn)結(jié)果顯示,0℃下21.44 mg/m3臭氧處理12 h對(duì)鮮蒜中主要病原菌交鏈孢霉的抑菌效果最好。

    猜你喜歡
    孢霉大蒜臭氧
    被孢霉對(duì)土壤養(yǎng)分有效性和秸稈降解的影響*
    文印室內(nèi)臭氧散發(fā)實(shí)測(cè)分析及模擬
    種植大蒜要注意啥
    食用菌工廠化生產(chǎn)防治鏈孢霉技術(shù)探究
    食用菌(2019年4期)2019-08-27 06:34:58
    大蒜養(yǎng)生法
    金橋(2018年1期)2018-09-28 02:24:48
    種大蒜
    防病抑咳話大蒜
    海峽姐妹(2018年5期)2018-05-14 07:37:15
    看不見(jiàn)的污染源——臭氧
    歐盟評(píng)估鏈格孢霉毒素在不同人群中的膳食暴露風(fēng)險(xiǎn)
    利用臭氧水防治韭菜遲眼蕈蚊
    亚洲国产精品成人久久小说| 日韩成人伦理影院| 国产爱豆传媒在线观看| 久久久久久久久大av| 免费大片18禁| 色视频www国产| 午夜视频国产福利| 日韩av在线免费看完整版不卡| 七月丁香在线播放| 日韩高清综合在线| 久久人人爽人人片av| 青春草视频在线免费观看| 91精品一卡2卡3卡4卡| 22中文网久久字幕| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 免费观看人在逋| 狠狠狠狠99中文字幕| 听说在线观看完整版免费高清| 亚洲欧洲国产日韩| 国产精品国产三级专区第一集| 国产av码专区亚洲av| 熟女电影av网| 纵有疾风起免费观看全集完整版 | 国产一区有黄有色的免费视频 | 蜜桃久久精品国产亚洲av| 真实男女啪啪啪动态图| a级一级毛片免费在线观看| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 少妇熟女aⅴ在线视频| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 亚洲精品aⅴ在线观看| 婷婷六月久久综合丁香| 成人漫画全彩无遮挡| 欧美色视频一区免费| 嘟嘟电影网在线观看| 真实男女啪啪啪动态图| 国产午夜精品论理片| 亚洲性久久影院| 激情 狠狠 欧美| 毛片一级片免费看久久久久| 久99久视频精品免费| 中文字幕制服av| 日韩在线高清观看一区二区三区| 国产午夜福利久久久久久| 中文欧美无线码| 美女国产视频在线观看| 99在线人妻在线中文字幕| 偷拍熟女少妇极品色| 日韩高清综合在线| a级毛色黄片| 国产av一区在线观看免费| 美女被艹到高潮喷水动态| 日韩国内少妇激情av| 你懂的网址亚洲精品在线观看 | 一个人观看的视频www高清免费观看| 国产淫片久久久久久久久| 欧美丝袜亚洲另类| 久久精品国产亚洲av天美| 国产欧美日韩精品一区二区| 国产精品乱码一区二三区的特点| 亚洲第一区二区三区不卡| 国产三级在线视频| 一边亲一边摸免费视频| 国产精品国产三级国产专区5o | 男女视频在线观看网站免费| 观看免费一级毛片| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 69人妻影院| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看 | 18禁在线无遮挡免费观看视频| 成人无遮挡网站| 免费搜索国产男女视频| 91精品伊人久久大香线蕉| 男插女下体视频免费在线播放| 国产美女午夜福利| 欧美成人精品欧美一级黄| 国产成人freesex在线| 日韩中字成人| 午夜福利视频1000在线观看| 国产 一区 欧美 日韩| 全区人妻精品视频| 国国产精品蜜臀av免费| 18禁动态无遮挡网站| 日本熟妇午夜| 精品国产三级普通话版| 毛片女人毛片| 欧美变态另类bdsm刘玥| 又粗又爽又猛毛片免费看| a级毛片免费高清观看在线播放| 久久精品夜色国产| 天天一区二区日本电影三级| 国产成人91sexporn| 午夜免费激情av| 久久久久久久亚洲中文字幕| 欧美精品一区二区大全| 日本免费a在线| 久热久热在线精品观看| 色网站视频免费| 国产成人免费观看mmmm| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 赤兔流量卡办理| 日韩av在线免费看完整版不卡| 欧美日韩在线观看h| 久久久欧美国产精品| 免费av观看视频| 在线免费十八禁| 国产乱来视频区| 亚洲国产精品国产精品| 国产伦一二天堂av在线观看| 国产免费福利视频在线观看| 久久精品国产自在天天线| 精品久久久久久久久av| av卡一久久| 如何舔出高潮| 成人午夜精彩视频在线观看| 在线a可以看的网站| 亚洲真实伦在线观看| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 狠狠狠狠99中文字幕| 韩国av在线不卡| 亚洲在线自拍视频| av福利片在线观看| 日韩欧美精品v在线| 久久久精品欧美日韩精品| 成人鲁丝片一二三区免费| 岛国毛片在线播放| 成年女人永久免费观看视频| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 精品熟女少妇av免费看| 97在线视频观看| 成年免费大片在线观看| 你懂的网址亚洲精品在线观看 | 欧美一级a爱片免费观看看| 日本免费一区二区三区高清不卡| 丝袜美腿在线中文| 99久久人妻综合| 国产午夜福利久久久久久| 欧美性猛交黑人性爽| 一级av片app| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 日本wwww免费看| 最近手机中文字幕大全| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 亚洲av福利一区| 成人无遮挡网站| 51国产日韩欧美| 精品久久久久久电影网 | 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 色噜噜av男人的天堂激情| 综合色av麻豆| 能在线免费观看的黄片| 黄色欧美视频在线观看| 亚洲精品乱码久久久久久按摩| 最近中文字幕高清免费大全6| 色综合站精品国产| av免费观看日本| 久久久久久久久久久丰满| 亚洲精品aⅴ在线观看| 69av精品久久久久久| 91久久精品电影网| 国产精品久久久久久久久免| 我要看日韩黄色一级片| 草草在线视频免费看| 日本爱情动作片www.在线观看| 欧美极品一区二区三区四区| 亚洲成色77777| 国产精品久久久久久精品电影| 91精品伊人久久大香线蕉| 久久久久久久国产电影| 国产av码专区亚洲av| 亚洲精品乱久久久久久| 三级毛片av免费| 亚洲欧美日韩东京热| 国产精品av视频在线免费观看| 久久6这里有精品| 久久久久久久久久久丰满| 寂寞人妻少妇视频99o| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 亚洲国产色片| 不卡视频在线观看欧美| 丰满人妻一区二区三区视频av| 亚洲最大成人手机在线| 欧美+日韩+精品| 免费播放大片免费观看视频在线观看 | 国产女主播在线喷水免费视频网站 | 国产精品日韩av在线免费观看| 麻豆乱淫一区二区| 最近中文字幕2019免费版| 欧美精品国产亚洲| 国产精品蜜桃在线观看| 精品一区二区三区人妻视频| 国产黄色小视频在线观看| 欧美成人午夜免费资源| 久久精品人妻少妇| 美女内射精品一级片tv| 人人妻人人看人人澡| 哪个播放器可以免费观看大片| 成人无遮挡网站| 99热精品在线国产| 免费观看a级毛片全部| av国产久精品久网站免费入址| 亚洲在线观看片| 纵有疾风起免费观看全集完整版 | 91精品伊人久久大香线蕉| 黄色欧美视频在线观看| 日韩中字成人| 久久久国产成人免费| 尾随美女入室| 久久久久久久久久黄片| 一级av片app| 国产精品一区二区在线观看99 | 观看美女的网站| 成年av动漫网址| 国产免费福利视频在线观看| 最近中文字幕高清免费大全6| 精品人妻一区二区三区麻豆| 2021天堂中文幕一二区在线观| 国产黄片视频在线免费观看| 国产一区有黄有色的免费视频 | 日本wwww免费看| 中文乱码字字幕精品一区二区三区 | 网址你懂的国产日韩在线| 亚洲自偷自拍三级| 中文字幕亚洲精品专区| 精品人妻偷拍中文字幕| 国产免费视频播放在线视频 | 国产女主播在线喷水免费视频网站 | 亚洲国产最新在线播放| 国产午夜精品论理片| 国产精品久久久久久精品电影| 亚洲人成网站高清观看| 2022亚洲国产成人精品| 男人的好看免费观看在线视频| 久久这里有精品视频免费| 国产一区二区在线观看日韩| 熟女人妻精品中文字幕| 在线观看66精品国产| 国产精品日韩av在线免费观看| 欧美高清性xxxxhd video| 看片在线看免费视频| 国产一区二区在线观看日韩| 免费在线观看成人毛片| 午夜福利在线观看免费完整高清在| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 国产久久久一区二区三区| 男的添女的下面高潮视频| 狠狠狠狠99中文字幕| 亚洲在线自拍视频| 日韩精品有码人妻一区| 韩国av在线不卡| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 一级毛片电影观看 | 国产 一区精品| 国产精华一区二区三区| 网址你懂的国产日韩在线| 一级毛片电影观看 | 国产一区二区在线观看日韩| 日韩一区二区三区影片| 中文天堂在线官网| 日韩高清综合在线| 少妇熟女aⅴ在线视频| 亚洲国产欧美在线一区| av黄色大香蕉| 亚洲成人中文字幕在线播放| 少妇人妻精品综合一区二区| 精品熟女少妇av免费看| 99久久无色码亚洲精品果冻| av在线亚洲专区| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 精品人妻一区二区三区麻豆| 午夜a级毛片| 国产美女午夜福利| 欧美三级亚洲精品| 卡戴珊不雅视频在线播放| a级一级毛片免费在线观看| www.色视频.com| 国产视频内射| 日本免费一区二区三区高清不卡| 亚洲av免费高清在线观看| 亚洲最大成人中文| 久久久精品欧美日韩精品| 国产一区有黄有色的免费视频 | 亚洲国产欧洲综合997久久,| av黄色大香蕉| 国产精品av视频在线免费观看| 国产视频内射| 欧美潮喷喷水| 波多野结衣巨乳人妻| 超碰97精品在线观看| 国产精华一区二区三区| 日本爱情动作片www.在线观看| 久久久久久伊人网av| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 国产成人91sexporn| 国产精品三级大全| 一二三四中文在线观看免费高清| 亚洲精品国产av成人精品| 免费在线观看成人毛片| 国产大屁股一区二区在线视频| 日韩在线高清观看一区二区三区| 欧美区成人在线视频| 亚洲最大成人av| 国产高清三级在线| 精品一区二区免费观看| 中文字幕亚洲精品专区| 91av网一区二区| 国产成人aa在线观看| 人体艺术视频欧美日本| 色播亚洲综合网| 97超碰精品成人国产| 国产成年人精品一区二区| 嘟嘟电影网在线观看| 精品人妻偷拍中文字幕| 国产精品久久久久久精品电影小说 | 亚洲国产欧美在线一区| 丝袜喷水一区| www.色视频.com| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 久久99蜜桃精品久久| 亚洲国产色片| 成人毛片60女人毛片免费| 亚洲五月天丁香| 国产免费男女视频| 99九九线精品视频在线观看视频| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 国产黄a三级三级三级人| 国产乱人偷精品视频| 日韩一本色道免费dvd| 青春草亚洲视频在线观看| av线在线观看网站| 91aial.com中文字幕在线观看| 亚洲av一区综合| 99热精品在线国产| АⅤ资源中文在线天堂| 国产日韩欧美在线精品| 我的女老师完整版在线观看| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 日本午夜av视频| 国产单亲对白刺激| 精品久久久久久久久亚洲| 麻豆av噜噜一区二区三区| 亚洲精品自拍成人| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 国产精品嫩草影院av在线观看| 欧美日韩综合久久久久久| 91久久精品国产一区二区成人| 欧美+日韩+精品| 国产精品女同一区二区软件| 亚洲性久久影院| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 亚洲欧美成人精品一区二区| 最近视频中文字幕2019在线8| 国产伦精品一区二区三区四那| 亚洲av成人av| 99热精品在线国产| 国产精品日韩av在线免费观看| 久久这里有精品视频免费| 精品久久久久久久久av| 天堂av国产一区二区熟女人妻| АⅤ资源中文在线天堂| 波多野结衣巨乳人妻| 久久久久久国产a免费观看| 午夜精品一区二区三区免费看| 精品久久久久久电影网 | АⅤ资源中文在线天堂| 午夜视频国产福利| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| av专区在线播放| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 成人美女网站在线观看视频| 国产一区二区在线av高清观看| 中文字幕久久专区| 久久久久久大精品| 亚洲性久久影院| 日韩成人av中文字幕在线观看| 色5月婷婷丁香| 国产精品精品国产色婷婷| 波多野结衣巨乳人妻| 久久久久久大精品| 麻豆成人av视频| 国产亚洲最大av| 亚洲人成网站在线观看播放| 亚洲国产欧美人成| 18+在线观看网站| av在线天堂中文字幕| 亚洲欧美成人精品一区二区| 校园人妻丝袜中文字幕| 黄色一级大片看看| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 成年女人看的毛片在线观看| 99在线视频只有这里精品首页| 中文天堂在线官网| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 日韩精品青青久久久久久| 少妇人妻精品综合一区二区| 亚洲自拍偷在线| 成人二区视频| 免费播放大片免费观看视频在线观看 | 日韩国内少妇激情av| 日日干狠狠操夜夜爽| 久久鲁丝午夜福利片| 亚洲av熟女| 少妇人妻精品综合一区二区| 女人久久www免费人成看片 | 亚洲精品亚洲一区二区| 国产视频内射| 看非洲黑人一级黄片| 色尼玛亚洲综合影院| 最近最新中文字幕免费大全7| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 国产私拍福利视频在线观看| 国产色婷婷99| 最近视频中文字幕2019在线8| 欧美人与善性xxx| 一夜夜www| www.av在线官网国产| 国产免费视频播放在线视频 | 国产精品,欧美在线| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久 | 人妻少妇偷人精品九色| 日本与韩国留学比较| 国产69精品久久久久777片| 亚洲自拍偷在线| 欧美另类亚洲清纯唯美| 99热网站在线观看| 亚洲三级黄色毛片| 国产精品爽爽va在线观看网站| 久久久久久久久久成人| 免费搜索国产男女视频| 中文亚洲av片在线观看爽| 国产老妇伦熟女老妇高清| 22中文网久久字幕| 国产69精品久久久久777片| 看非洲黑人一级黄片| 天堂影院成人在线观看| 长腿黑丝高跟| 看黄色毛片网站| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 久久鲁丝午夜福利片| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 日本免费在线观看一区| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 亚洲精品,欧美精品| 99久国产av精品| 26uuu在线亚洲综合色| 亚洲精品一区蜜桃| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 69av精品久久久久久| 在线天堂最新版资源| 精品一区二区三区视频在线| 黄片无遮挡物在线观看| 亚洲人成网站在线播| 日日撸夜夜添| 日韩一区二区视频免费看| 色综合站精品国产| 国产毛片a区久久久久| 蜜臀久久99精品久久宅男| 国产精品一二三区在线看| 亚洲成人中文字幕在线播放| 国产综合懂色| 国产亚洲午夜精品一区二区久久 | 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 狠狠狠狠99中文字幕| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 简卡轻食公司| 91aial.com中文字幕在线观看| 久久精品国产亚洲av天美| 97超视频在线观看视频| 秋霞伦理黄片| 国产成人福利小说| 亚洲最大成人中文| 国内精品宾馆在线| 亚洲精品久久久久久婷婷小说 | 国产精品一区二区在线观看99 | 晚上一个人看的免费电影| av免费在线看不卡| kizo精华| 卡戴珊不雅视频在线播放| 国内精品美女久久久久久| 日韩一区二区三区影片| 久久99热这里只有精品18| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久 | 女人被狂操c到高潮| 热99在线观看视频| av专区在线播放| 久久99热这里只频精品6学生 | 少妇猛男粗大的猛烈进出视频 | 国产白丝娇喘喷水9色精品| 18禁在线无遮挡免费观看视频| 永久免费av网站大全| 国产视频内射| 日日撸夜夜添| 亚洲欧美成人精品一区二区| 一区二区三区免费毛片| 日本免费一区二区三区高清不卡| 亚洲av电影不卡..在线观看| 五月玫瑰六月丁香| 国产探花极品一区二区| 亚洲综合精品二区| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 嘟嘟电影网在线观看| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看 | 亚洲欧美日韩东京热| 禁无遮挡网站| 亚洲欧美日韩无卡精品| 亚洲人成网站高清观看| 免费观看人在逋| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 国产乱来视频区| 色综合亚洲欧美另类图片| 日韩一区二区视频免费看| 亚洲av熟女| 我的老师免费观看完整版| 国产亚洲一区二区精品| 亚洲综合色惰| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 三级国产精品欧美在线观看| 美女高潮的动态| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 中国美白少妇内射xxxbb| 一区二区三区免费毛片| 2022亚洲国产成人精品| 亚洲天堂国产精品一区在线| 综合色av麻豆| 波野结衣二区三区在线| 最近2019中文字幕mv第一页| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 国产探花在线观看一区二区| 69人妻影院| 国产一级毛片七仙女欲春2| 国产单亲对白刺激| 亚洲av成人av| 国产精品一区二区三区四区免费观看| 日韩亚洲欧美综合| 少妇人妻一区二区三区视频| 日本一本二区三区精品| 嫩草影院新地址| 精品熟女少妇av免费看| 国产精品久久久久久久久免| 99在线人妻在线中文字幕| 国产毛片a区久久久久| 能在线免费观看的黄片| 国产精品av视频在线免费观看| 欧美变态另类bdsm刘玥| 一边摸一边抽搐一进一小说| 国产三级在线视频| 亚洲在线观看片| 狠狠狠狠99中文字幕| 欧美精品一区二区大全| 亚洲国产精品久久男人天堂| 欧美一区二区国产精品久久精品| 波野结衣二区三区在线| 青春草国产在线视频| 七月丁香在线播放| 特级一级黄色大片| 亚洲四区av| 久久精品国产自在天天线| 欧美一级a爱片免费观看看| 岛国在线免费视频观看| 国产乱人视频| av线在线观看网站| 99九九线精品视频在线观看视频| 午夜福利在线观看免费完整高清在| 如何舔出高潮| 久久精品综合一区二区三区| 国语自产精品视频在线第100页| 亚洲国产精品成人久久小说| 色噜噜av男人的天堂激情| 美女被艹到高潮喷水动态| 丝袜美腿在线中文| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 国产在视频线在精品| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 亚洲经典国产精华液单| 国产精品一二三区在线看| 国产精品一区二区三区四区久久| 大香蕉久久网| av女优亚洲男人天堂| 看非洲黑人一级黄片| 看黄色毛片网站| 日本一二三区视频观看| 美女大奶头视频| 国产伦精品一区二区三区四那| 一边摸一边抽搐一进一小说| 亚洲欧美日韩无卡精品| 老师上课跳d突然被开到最大视频| 成人漫画全彩无遮挡| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 欧美成人免费av一区二区三区| 九色成人免费人妻av| 一级黄色大片毛片| 桃色一区二区三区在线观看| 日韩三级伦理在线观看| 白带黄色成豆腐渣| 国产亚洲一区二区精品| 变态另类丝袜制服| 看十八女毛片水多多多| 成年免费大片在线观看| 在线免费观看的www视频| 日韩国内少妇激情av| 日韩 亚洲 欧美在线| 免费av毛片视频| 国产色爽女视频免费观看| 久久99热这里只频精品6学生 | 日韩亚洲欧美综合| 国产精品av视频在线免费观看| 嫩草影院新地址| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 在现免费观看毛片| 久久99蜜桃精品久久| 又爽又黄a免费视频| 一级毛片电影观看 |