肺結(jié)核患者血清可溶性髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-1、干擾素-γ與降鈣素原水平與臨床預(yù)后的相關(guān)性研究

李 劍，楊梁梓，劉 智，傅佳鵬，劉志超，柯 學(xué)，傅向東，李國(guó)保

深圳市第三人民醫(yī)院肺病三科，廣東 深圳 518000

臨床中肺結(jié)核屬于常見(jiàn)呼吸道傳染性病癥，主要傳播途徑為飛沫傳播，發(fā)病是由結(jié)核桿菌誘導(dǎo)的，肺結(jié)核在我國(guó)具較高患病率，是全球22個(gè)肺結(jié)核病高負(fù)擔(dān)國(guó)家之一［1］。既往全球通過(guò)針對(duì)性方案治療肺結(jié)核的方案，發(fā)揮顯著功效，降低全球范圍內(nèi)肺結(jié)核的發(fā)病率，但近年來(lái)臨床不完全統(tǒng)計(jì)的發(fā)現(xiàn)，肺結(jié)核發(fā)病率呈上升趨勢(shì)，其中重要原因?yàn)槟退幣c耐多藥肺結(jié)核的出現(xiàn)，且呈逐步遞增趨勢(shì)［2］。形成上述現(xiàn)象的原因?yàn)榛煼桨覆缓侠怼⒒煿芾聿煌晟?、肺結(jié)核患者依從性差等。降鈣素原（PCT）與可溶性髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-1（sTREM-1）均是反映嚴(yán)重細(xì)菌性感染敏感性強(qiáng)的血清學(xué)指標(biāo)，而干擾素-γ（IFN-γ）則是反映機(jī)體免疫機(jī)制的重要性指標(biāo)［3］。既往臨床研究中上述指標(biāo)均能有效診斷與評(píng)價(jià)感染性病癥的預(yù)后，具有良好的敏感性與特異性［4］。因此本研究收集肺結(jié)核患者84例，通過(guò)檢測(cè)其血清sTREM-1、IFN-γ、PCT水平，分析其在肺結(jié)核患者機(jī)體中的變化情況，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

收集2019年5月—2020年12月期間于深圳市第三人民醫(yī)院接受診療的肺結(jié)核患者84例作為研究組；另外收集同期于醫(yī)院體檢的志愿者42例，作為對(duì)照組。肺結(jié)核納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）均符合《肺結(jié)核診斷和治療指南》中肺結(jié)核診療標(biāo)準(zhǔn)者［5］；（2）均行肺部X射線拍片、CT、痰培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)等確診為肺結(jié)核者；（3）患者肺部病灶范圍為1～2個(gè)肺野者；（4）均入院接受針對(duì)性治療者；（5）自愿參與研究且知情同意者。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）合并患其他嚴(yán)重心腎等臟器功能性不全者；（2）合并惡性腫瘤者；（3）患精神類疾病或認(rèn)知障礙者；（4）臨床資料不完整，或中途退出者。

1.2 方法

（1）亞組分組。據(jù)肺結(jié)核臨床療效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)將研究組分為兩個(gè)亞組，有效組（53例）與無(wú)效組（31例）。評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)如下：①細(xì)菌學(xué)評(píng)價(jià)：同期檢查痰結(jié)核菌培養(yǎng)1次及連續(xù)查痰涂片3次，均呈現(xiàn)為陰性，可評(píng)價(jià)為有效；②痰液評(píng)價(jià)：痰帶菌量減低或痰菌轉(zhuǎn)陰可評(píng)價(jià)問(wèn)有效，當(dāng)痰帶菌量無(wú)降低跡象，甚至增多可評(píng)價(jià)為無(wú)效；③X線評(píng)價(jià)：X線影像顯示肺部病灶已明顯吸收或者有吸收可評(píng)價(jià)為有效，反之X線影像顯示肺部病灶無(wú)變化或病灶惡化評(píng)價(jià)為無(wú)效，符合上述標(biāo)準(zhǔn)可評(píng)價(jià)為有效［6］。

（2）血清學(xué)指標(biāo)檢測(cè)。①血清制備。抽取對(duì)照組、研究組（治療前、治療后2個(gè)月、治療后6個(gè)月）所有研究對(duì)象的外周靜脈血樣6 ml，放置于非抗凝的干燥試管中，后采用醫(yī)用臺(tái)式低速離心機(jī)［上海醫(yī)療器械有限公司手術(shù)器械廠，滬食藥監(jiān)械（準(zhǔn)）字2012第1410110號(hào)］以3 000 r/min的轉(zhuǎn)速離心10 min，獲取上層血清，后置于零下25℃的環(huán)境中貯存待檢。②指標(biāo)檢測(cè)方法。其中血清IFN-γ、sTREM-1水平采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附性試驗(yàn)（ELISA），配套試劑盒來(lái)源于上海酶聯(lián)生物科技有限公司，需嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。血清PCT水平采用免疫熒光法檢測(cè)，配套檢測(cè)試劑盒與熒光酶標(biāo)免疫檢測(cè)儀均來(lái)源于法國(guó)梅里埃公司，嚴(yán)格按照操作標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)通過(guò)統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS 22.0錄入處理，計(jì)量資料以（±s）表示，組間比較行t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料以n（%）表示，組間比較行χ2檢驗(yàn)，采用ROC曲線綜合分析血清sTREM-1、IFN-γ、PCT水平對(duì)肺結(jié)核預(yù)后的評(píng)價(jià)價(jià)值；采用COX回歸分析疾病預(yù)后與血清sTREM-1、IFN-γ、PCT水平的關(guān)系，P＜0.05提示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組臨床一般資料比較

兩組性別比例、平均年齡、體重指數(shù)、吸煙史、慢阻肺等比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。研究組治療前血清sTREM-1、PCT水平均高于對(duì)照組，而研究組治療前血清IFN-γ水平低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表1。

表1 兩組臨床一般資料比較（±s） 例（%）

表1 兩組臨床一般資料比較（±s） 例（%）

分類男女對(duì)照組（42例）22（52.38）20（47.62）46.89±6.41 21.86±1.34 11（26.19）0（0.00）0.04±0.01 23.54±4.12 147.86±24.33研究組（84例）43（51.19）41（48.81）47.56±7.02 21.79±1.41 21（25.00）3（3.57）0.20±0.04 181.41±15.37 19.32±4.35 t/χ2 0.028 0.866 P平均年齡（歲）體重指數(shù)（kg/m2）吸煙史慢阻肺治療前PCT（ng/mL）治療前sTREM-1（ng/mL）治療前IFN-γ（pg/mL）0.519 0.267 0.037 3.635 25.480 65.283 47.117 0.604 0.790 0.847 0.060 0.000 0.000 0.000

2.2 肺結(jié)核不用療效患者血清學(xué)指標(biāo)水平比較

肺結(jié)核患者有效組與無(wú)效組血清學(xué)指標(biāo)治療前比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；經(jīng)過(guò)治療后，在治療后2個(gè)月與6個(gè)月兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)有效組血清學(xué)指標(biāo)PCT、sTREM-1水平均低于無(wú)效組，而有效組血清學(xué)指標(biāo)IFN-γ水平高于無(wú)效組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表2。

表2 肺結(jié)核不用療效患者血清學(xué)指標(biāo)水平比較（±s）

表2 肺結(jié)核不用療效患者血清學(xué)指標(biāo)水平比較（±s）

組別PCT（ng/mL）IFN-γ（pg/mL）有效組無(wú)效組tP治療前0.18±0.06 0.21±0.07 1.345 0.568治療后2個(gè)月0.11±0.05 0.20±0.08 10.237 0.004治療后6個(gè)月0.02±0.01 3.61±0.08 22.658 0.000 sTREM-1（ng/mL）治療前185.92±42.32 189.35±41.68 0.574 0.286治療后2個(gè)月88.95±17.37 175.65±52.36 18.628 0.000治療后6個(gè)月22.95±2.74 335.47±12.35 32.625 0.000治療前19.14±4.35 19.45±4.21 0.074 0.352治療后2個(gè)月43.68±10.32 27.12±4.68 10.352 0.000治療后6個(gè)月65.68±10.64 24.36±4.59 34.047 0.000

2.3 不同時(shí)間點(diǎn)血清學(xué)指標(biāo)對(duì)臨床療效評(píng)價(jià)的ROC曲線分析

經(jīng)分析，肺結(jié)核患者治療前血清PCT、sTREM-1、IFN-γ水平對(duì)于評(píng)定臨床療效與預(yù)后的價(jià)值較低，AUC分別為0.62、0.71、0.65。而治療2個(gè)月后血清PCT、sTREM-1、IFN-γ水平具有較高評(píng)定臨床療效與預(yù)后的價(jià)值，AUC分別為0.82、0.86、0.89，見(jiàn)表3。

表3 不同時(shí)間點(diǎn)血清學(xué)指標(biāo)對(duì)臨床療效評(píng)價(jià)的ROC曲線分析

2.4 肺結(jié)核患者不同因素COX回歸分析

經(jīng)單因素分析發(fā)現(xiàn)，年齡、合并胸腔積液、血清PCT、sTREM-1、IFN-γ水平的高低均是肺結(jié)核患者臨床預(yù)后的危險(xiǎn)因素（P＜0.05）。進(jìn)一步多因素分析發(fā)現(xiàn)血清PCT（≥0.16 ng/mL）、sTREM-1（≥93.46 ng/mL）、IFN-γ（≤38.69 pg/mL）均是肺結(jié)核患者預(yù)后的危險(xiǎn)因素（P＜0.05），見(jiàn)表4。

表4 肺結(jié)核患者不同因素COX回歸分析

3 討論

調(diào)查發(fā)現(xiàn)肺結(jié)核因治療效果差，肺部X線影像改變以及痰菌變化緩慢，短期內(nèi)難以判斷臨床療效與預(yù)后情況，是臨床治療的困難點(diǎn)之一。本研究探究肺結(jié)核患者血清sTREM-1、IFN-γ與PCT水平與臨床療效與預(yù)后的相關(guān)性，分析發(fā)現(xiàn)血清PCT、sTREM-1、IFN-γ均是肺結(jié)核患者預(yù)后的危險(xiǎn)因素。表示當(dāng)血清PCT超過(guò)0.16 ng/mL、sTREM-1超過(guò)93.46 ng/mL、IFN-γ低于38.69 pg/mL時(shí)，提示肺結(jié)核患者臨床療效與預(yù)后較差，表明血清PCT與sTREM-1水平與肺結(jié)核預(yù)后呈負(fù)性相關(guān)，而IFN-γ水平與肺結(jié)核預(yù)后呈正性相關(guān)。PCT作為降鈣素的前體，生理情況下血清PCT幾乎不升高，而當(dāng)機(jī)體受到外界細(xì)菌感染時(shí)，全身多種組織和細(xì)胞均可在炎癥細(xì)胞和細(xì)菌分泌的內(nèi)外毒素的刺激下大量合成PCT，PCT尤其對(duì)細(xì)菌毒素的刺激敏感，細(xì)菌感染機(jī)體的早期PCT即可迅速升高，因此PCT又是感染性疾病的早期診斷指標(biāo)。本研究調(diào)查發(fā)現(xiàn)在結(jié)核桿菌感染方面，當(dāng)血清PCT水平高于0.16 ng/mL時(shí)是影響其預(yù)后的危險(xiǎn)因素，且在診斷疾病臨床療效與預(yù)后時(shí)的敏感性較高，該指標(biāo)與臨床預(yù)后呈負(fù)相關(guān)，即該指標(biāo)水平升高，患者療效與預(yù)后均較差。TREM-1是表達(dá)在巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞表面的膜受體蛋白，對(duì)免疫反應(yīng)具有正調(diào)控作用，是免疫反應(yīng)的發(fā)生和級(jí)聯(lián)放大效應(yīng)的重要觸發(fā)器，sTREM-1為T(mén)REM-1的可溶性形式，水平主要受細(xì)胞外細(xì)菌的影響，當(dāng)細(xì)菌感染時(shí)其水平表達(dá)會(huì)明顯上調(diào)，因此可作為肺結(jié)核預(yù)后的診斷指標(biāo)。IFN-γ是在抗原刺激作用下由CD4+細(xì)胞早期產(chǎn)生、CD8+后期產(chǎn)生的多活性糖蛋白，其可通過(guò)增強(qiáng)T細(xì)胞功能、促進(jìn)其自身產(chǎn)生的作用，形成良性的正反饋機(jī)制，利于提升肺結(jié)核感染的免疫應(yīng)答作用，從而阻斷肺結(jié)核感染發(fā)病和病情的進(jìn)一步加重，因此可作為診斷肺結(jié)核臨床療效的預(yù)后的指標(biāo)［7］。

綜上所述，經(jīng)臨床檢測(cè)分析發(fā)現(xiàn)肺結(jié)核患者血清sTREM-1、IFN-γ、PCT水平與病情嚴(yán)重程度、臨床療效與預(yù)后均密切相關(guān)，治療期間定期測(cè)定上述血清學(xué)指標(biāo)水平有助于及時(shí)評(píng)價(jià)臨床療效與預(yù)后情況。