基于網(wǎng)絡藥理學和分子對接探索桂枝茯苓丸治療卵巢癌的作用機制

吳曉晴，盧雯平

（中國中醫(yī)科學院廣安門醫(yī)院，北京 100053）

卵巢癌是女性常見的惡性腫瘤之一，中國人群卵巢癌新發(fā)病例為52 971 例/年，死亡達30 886 例/年［1］。中醫(yī)認為卵巢癌屬于“癥瘕”、“積聚”等范疇，治療宜溫陽益氣，活血消癥。桂枝茯苓丸首載于《金匱要略》，具有活血化瘀消癥之效，仲景用其治療婦科癥瘕、胎動不安、胎漏，后人用其治療卵巢癌、月經(jīng)病、子宮肌瘤、卵巢囊腫、子宮內(nèi)膜異位癥、腫大增生性內(nèi)科疾病、心腦血管疾病等［2］也取得了良好的臨床效果。有動物體外和體內(nèi)實驗報道了桂枝茯苓丸能誘導卵巢癌細胞凋亡［3］，抑制大鼠和裸鼠移植瘤的生長［4，5］，聯(lián)合西醫(yī)治療能加強晚期卵巢癌患者的療效，提高生存質(zhì)量［6，7］。中藥復方治療疾病具有多成分、多靶點的特點，因此本文采取網(wǎng)絡藥理學的研究方法，預測桂枝茯苓丸作用卵巢癌的治療靶點和信號通路，并使用分子對接進行驗證。

1 資料與方法

1.1 篩選桂枝茯苓丸的有效成分和靶點

在TCMSP（http：//lsp.nwu.edu.cn/tcmspsearch.php）數(shù)據(jù)庫中分別檢索桂枝、茯苓、赤芍、牡丹皮和桃仁，得到每味中藥的化學成分。根據(jù)口服利用度（Oral bioavailability，OB）≥30%，類藥性（drug likeness，DL）≥0.18 的屬性值對檢索到的所有化學成分進行篩選，收集到桂枝茯苓丸的活性成分。通過TCMSP 數(shù)據(jù)庫查找收集到的活性成分的作用靶點，根據(jù)已發(fā)表的文獻對藥物靶點進行補充。在Uniprot 數(shù)據(jù)庫中，將已知藥物靶點蛋白轉(zhuǎn)化為靶基因。使用Cytoscape 軟件構(gòu)建桂枝茯苓丸藥物-成分-靶基因網(wǎng)絡圖，使用Network Analyze 功能對該網(wǎng)絡進行拓撲分析，得到該網(wǎng)絡各個節(jié)點的度值Degree 值、緊密度Closeness 值和介度Betweenness值三個參數(shù)的值確定藥物的主要活性成分。

1.2 篩選卵巢癌的疾病靶點

在Genecards 數(shù)據(jù)庫中檢索關(guān)鍵詞“ovarian cancer”、“ovarian carcinoma”，獲取疾病靶點。Score值的大小代表該靶點與疾病的相關(guān)度，選取Score值大于中位數(shù)的靶點作為卵巢癌的疾病靶點。在OMIM、Digsee、TTD、Drugbank 數(shù)據(jù)庫中檢索上述關(guān)鍵詞，把獲取的疾病靶點補充到在Genecards 數(shù)據(jù)庫中得到的靶點中，在Excel 表中進行去重，得到最終的疾病靶點庫。使用Uniprot 數(shù)據(jù)庫將最終得到的基因靶點轉(zhuǎn)化為靶基因。

1.3 獲取桂枝茯苓丸對卵巢癌的作用樞紐基因

樞紐基因是指是在生物學過程中發(fā)揮至關(guān)重要作用的基因，在相關(guān)通路中，其他基因的調(diào)控往往要受到該基因的影響，是重要的靶基因。使用R 3.5.3 軟件對桂枝茯苓丸作用靶基因和卵巢癌的疾病靶基因取交集，并繪制韋恩圖。使用String 網(wǎng)絡進行蛋白質(zhì)互相作用網(wǎng)絡構(gòu)建，蛋白質(zhì)來源為“Homo Sapiens”，導出蛋白質(zhì)互作網(wǎng)絡的數(shù)據(jù)表，導入Cytoscape 中使用Cytohubba 插件篩選樞紐基因。將經(jīng)過12 種算法計算出的樞紐基因取交集，篩選出前20 個權(quán)重較大的基因作為關(guān)鍵樞紐基因。

1.4 KEGG 通路富集分析和GO 富集分析

在Metascape 數(shù)據(jù)庫中錄入獲取的20 個樞紐基因，來源選擇“H.Sapiens”，進行自定義富集分析。設置篩選條件為：Min overlap＝3，Pvalue cutoff＝0.01，min enrichment＝1.15。分別進行KEGG 通路富集分析、GO 分子生物學功能（GO MF）、GO 生物過程（GO BP）、GO 細胞組分（GO CC）富集分析，并使用R 軟件。

1.5 分子對接驗證

在PubMed、中國知網(wǎng)、萬方數(shù)據(jù)庫中檢索樞紐基因?qū)β殉舶┳饔玫南嚓P(guān)文獻，篩選出研究較充分的靶點作為對接的靶蛋白。采用AutoDock Tools 1.5.6 軟件去除靶蛋白中水分子，添加非極性氫，分離配體和受體，計算電荷，保存為pdbqt 格式文件。在PubChem 有機小分子生物活性（https：//pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/）數(shù)據(jù)庫下載小分子3D 坐標文件，在pyMol 軟件中利用openbabel 轉(zhuǎn)換為pdb 格式，并下載主要活性成分的3D 結(jié)構(gòu)文件，用Chem3D 17.1 軟件轉(zhuǎn)化為PDB 格式。將結(jié)構(gòu)文件載入AutoDock Tools 1.5.6 軟件，添加原子電荷，分配原子類型，所有柔性鍵均默認可旋轉(zhuǎn)，作為對接配體。以靶蛋白作為受體，以藥物主要活性成分作為配體，根據(jù)靶蛋白復合物中配體的坐標確定分子對接的活性位點，根據(jù)靶蛋白活性口袋設置Gridbox 坐標及大小，采用AutoDock Vina 進行分子對接，選取自由結(jié)合能最低的結(jié)合構(gòu)象，使用PyMol和LigPlus 軟件進行可視化處理。

2 結(jié)果

2.1 桂枝茯苓丸活性成分及靶點

桂枝的活性成分有7個，茯苓的活性成分有15個，赤芍的活性成分有28個，桃仁的活性成分有23個，牡丹皮的活性成分有10個，其中谷甾醇、兒茶素為桂枝、牡丹皮、赤芍的共有成分，常春藤皂苷元為茯苓和桃仁的共有成分，β-谷甾醇為桂枝、赤芍和桃仁的共有成分，見表1。在數(shù)據(jù)庫中篩選五味中藥的作用靶點并去重后共得到201 個藥物靶點，并對已知作用靶點的化合物根據(jù)中藥名首字母進行編號（如桂枝中已知作用靶點的活性成分命名為GZ1、GZ2……）。不同中藥共有的活性成分根據(jù)所共有的中藥名首字母進行編號，如桂枝、赤芍和桃仁共有的活性成分命名為GCT，桂枝、牡丹皮和赤芍共有的活性成分命名為GMC1、GMC2，茯苓和桃仁共有的活性成分命名為FT。

表1 桂枝茯苓丸藥物活性成分Tab 1 Active components of Guizhi Fuling pills

2.2 構(gòu)建藥物-成分-靶點網(wǎng)絡圖

使用Cytoscape 構(gòu)建網(wǎng)絡圖，直觀顯示五味中藥成分和靶點的關(guān)系及其重要性。圖中共有252 個節(jié)點，633 條網(wǎng)絡，節(jié)點的大小與度值相關(guān)，節(jié)點越大代表度值越大，見圖1。度值是指連接該節(jié)點的邊的數(shù)量，連接該點的邊越多，度值越大，說明與該點相關(guān)的網(wǎng)絡越復雜。根據(jù)拓撲分析結(jié)果獲取藥物的主要活性成分，見表2。

表2 桂枝茯苓丸主要活性成分Tab 2 main active components of Guizhi Fuling pills

圖1 藥物-成分-靶點網(wǎng)絡圖Fig 1 Drug-ingredient-target network diagram

2.3 桂枝茯苓丸對卵巢癌的作用靶點

在GeneCards 數(shù)據(jù)庫中檢索到卵巢癌的基因靶點7 071 個，篩選出相關(guān)度得分大于中位數(shù)的靶點作為疾病的潛在靶點，得到潛在靶點3 540 個。根據(jù)OMIM、TTD，DRUGBANK 數(shù)據(jù)庫補充卵巢癌相關(guān)靶點，共得到疾病潛在靶點3 937 個。使用R軟件將藥物成分靶點和疾病靶點進行分析，得到共同靶點160 個，如圖2。

圖2 疾病靶基因-藥物靶基因韋恩圖Fig 2 Wayne map of disease target gene-drug target gene

2.4 桂枝茯苓丸治療卵巢癌的樞紐基因

把藥物和疾病的交集基因靶點導入String 數(shù)據(jù)庫，限定物種為人，獲取蛋白質(zhì)相互作用網(wǎng)絡圖，共有160 個節(jié)點，618 條邊，平均節(jié)點度值7.72。將經(jīng)String 數(shù)據(jù)庫分析后的數(shù)據(jù)導入Cytoscape 軟件后，使用Cytohubba 插件進行拓撲分析，得到了各個節(jié)點的關(guān)鍵程度，構(gòu)建了蛋白質(zhì)互作網(wǎng)絡圖，節(jié)點的顏色越深代表節(jié)點在網(wǎng)絡中的權(quán)重越大，即在網(wǎng)絡中發(fā)揮的作用越關(guān)鍵，見圖3，根據(jù)12 種算法計算出的樞紐基因取交集得到值最大的20 個樞紐基因，分別為VEGFA、AKT1、MAPK8、JUN、MMP9、IL-6、TNF、CXCL8、PTGS2、TP53、CASP3、MAPK1、EGF、ESR1、EGFR、MYC、FOS、CCL2、CXCL8 和IL1B，這些節(jié)點最有可能是藥物在治療疾病中發(fā)揮作用的關(guān)鍵節(jié)點。

圖3 蛋白質(zhì)相互作用網(wǎng)絡圖Fig 3 Protein-protein interaction network

2.5 KEGG 通路富集分析和GO 富集分析

將樞紐基因進行KEGG 通路富集分析和GO 富集分析，獲得靶基因參與的通路和生物過程。KEGG 通 路160 個條目，GO MF 分析245 條目，GO BP 分 析3 083 個 條 目，GO CC 分 析205 個 條 目。

根據(jù)-log10（P）值篩選出10 條較為主要的通路，為癌癥信號通路、MAPK 信號通路、流體剪切應力與動脈粥樣硬化、乙型肝炎、美國錐蟲病、糖尿病并發(fā)癥中的年齡-年齡信號通路、腫瘤壞死因子信號通路、百日咳、IL-17 信號通路、膀胱癌，如圖4 所示。IL-17 信號通路富集基因數(shù)和富集程度最高，癌癥信號通路的富集基因數(shù)量和富集程度均較高，腫瘤壞死因子信號通路富集程度較高，這3 條通路可能是桂枝茯苓丸治療卵巢癌的靶標通路。

圖4 KEGG 通路富集分析結(jié)果圖Fig 4 KEGG pathway enrichment analysis result diagram

在Metascape 中對藥物和疾病的樞紐基因靶點進行GO MF、GO CC、GO BP 三個部分的富集分析，P 值越小代表富集程度越高，篩選出每個部分富集程度最高的10 個結(jié)果，使用R 軟件進行可視化，繪出氣泡圖，氣泡的大小代表富集基因的數(shù)量，氣泡的顏色代表富集程度，紅色代表富集程度高，綠色代表富集程度低，見圖5～7。由此得出，在分子生物學功能中，主要參與細胞因子受體結(jié)合、細胞因子活性、一氧化氮合酶調(diào)節(jié)活性、受體配體活性、受體調(diào)節(jié)活性、生長因子受體結(jié)合、RNA 聚合酶Ⅱ轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合、核心啟動子結(jié)合、轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合、磷酸酶結(jié)合這些功能過程，見圖5；在細胞組分富集分析中，含有膜筏、膜微區(qū)、膜內(nèi)區(qū)、質(zhì)膜筏、囊腔、RNA 聚合酶Ⅱ轉(zhuǎn)錄因子復合物、分泌顆粒腔、細胞質(zhì)囊腔、轉(zhuǎn)錄因子復合物、受體復合體10 個條目，見圖6；在生物過程中，藥物主要參與對脂多糖的反應、對細菌來源分子的反應、氧化應激反應、對活性氧的反應、鎘離子對細胞的反應、細胞遷移的正調(diào)控、細胞因子介導的信號通路、細胞運動的正向調(diào)節(jié)、細胞成分運動的正向調(diào)節(jié)、運動正調(diào)節(jié)這些過程，見圖7。

圖5 GO MF 分析結(jié)果top10Fig 5 Top10 of GO MF analysis result

圖6 GO CC 分析結(jié)果top10Fig 6 Top10 of GO CC analysis result

圖7 GO BP 分析結(jié)果top10Fig 7 Top10 of GO BP analysis result

2.6 分子對接結(jié)果

槲皮素、β-谷甾醇、山奈酚、常春藤皂苷元、兒茶素、鞣花酸、豆甾醇和花旗松素分別與選取的IL-6、MAPK1、VEGFA、AKT1、TP53、TNF 和CCL2 編碼的蛋白作為靶點進行小分子-蛋白分子對接。結(jié)合自由能可以評估受體和配體之間的親和性，結(jié)合能小于0 時，認為配體和受體可以自由結(jié)合［8］，且結(jié)合自由能越低，二者親和力越強，對接結(jié)果如表3。鞣花酸和TNF-α 蛋白親和力最強，將這一構(gòu)象進行 可視化分析，結(jié)果見圖8。

圖8 TNF-α 蛋白和鞣花酸的分子對接構(gòu)象圖Fig 8 Molecular docking conformation of TNF-α protein with ellagic acid

表3 靶蛋白和藥物主要活性成分分子對接結(jié)合自由能表（kcal/mol）Tab 3 Free energy table of docking binding between target proteins and main active components of drugs（kcal/mol）

3 討論

卵巢癌屬于中醫(yī)婦科癥瘕范疇內(nèi)，瘀血凝聚是卵巢癌形成的原因之一，桂枝茯苓丸具有活血化瘀消癥的功效，在《金匱要略》中提到：“婦人宿有癥病，經(jīng)斷未及三月，而得漏下不止，胎動在臍上者，為癥痼害……當下其癥，桂枝茯苓丸主之”，可見仲景用此方治療婦科癥瘕。方中桂枝為君藥，溫通經(jīng)脈，調(diào)和營衛(wèi)；茯苓利水滲濕，“血不利則為水”，既能化瘀利水，又能給瘀血以出路；桃仁能活血祛瘀，且有“苦以泄滯血，甘以生新血”一說，能祛瘀血而生新血；牡丹皮清熱涼血，活血化瘀；赤芍入血分，能清熱涼血，散瘀止痛。全方以攻邪為主，處方精妙，共奏活血化瘀，散結(jié)消癥之效。

根據(jù)拓撲分析找到了桂枝茯苓丸的主要活性成分，分別為槲皮素、β-谷甾醇、山奈酚、常春藤皂苷元、兒茶素、鞣花酸、豆甾醇、花旗松素。既往研究發(fā)現(xiàn)槲皮素能上調(diào)TP53 基因，促進癌細胞的凋亡［9］，還能抑制PTK、PKC、MAPK 等多條信號通路［10，11］，抑制癌細胞周期進程，能逆轉(zhuǎn)癌細胞的耐藥性，增加癌細胞對藥物的敏感性［12］。β-谷甾醇能抑制癌細胞增殖并促進其凋亡［13］，抑制腫瘤細胞對基底膜的黏附和侵入而阻止癌細胞轉(zhuǎn)移［14］，且具有預防腫瘤和治療腫瘤的雙重作用［15］。山奈酚是黃酮類化合物，能夠抑制細胞生長，誘導細胞凋亡［16］，通過激活p53 的內(nèi)在途徑誘導卵巢癌細胞凋亡［17］，還能與雌激素受體結(jié)合產(chǎn)生抗腫瘤作用［18］。常春藤皂苷元能抑制卵巢癌瘤體的生長［19］，具有對腫瘤細胞的膜分解活性，誘導腫瘤細胞凋亡［20］。兒茶素包括表兒茶素、表沒食子兒茶素、表兒茶素沒食子酸酯和表沒食子兒茶素沒食子酸酯，研究發(fā)現(xiàn)兒茶素能增加卵巢癌細胞對鉑類藥物的敏感性［21］，損傷DNA 和減少DNA 合成抑制癌細胞增殖［22］，下調(diào)血管內(nèi)皮生長因子，減少MMP2 和MMP9 的分泌［23］。鞣花酸可抑制致癌物質(zhì)在體內(nèi)的代謝，與致癌物結(jié)合，使其不能與DNA 結(jié)合致癌，或直接與DNA 結(jié)合，競爭性抑制致癌物與DNA 結(jié)合，消除致癌劑毒性，降低癌細胞抗藥性，降低癌細胞中ATP 水平，阻斷細胞生殖周期［24］。豆甾醇衍生物能抑制卵巢癌細 胞 的 增 殖［25，26］。花 旗 松 素 抑 制 熱 休 克 蛋 白90 抑制癌細胞增殖［27］，對胃癌、肝癌、宮頸癌和盲腸癌有生長抑制作用［28］，干預影響腫瘤細胞增殖的Wnt/β-catenin 通路［29］，阻滯細胞周期，誘導腫瘤細胞的凋亡與P53/P21 途徑有關(guān)［30］。

根據(jù)核心靶點、KEGG 通路分析和已有研究，提示桂枝茯苓丸治療卵巢癌主要調(diào)節(jié)了腫瘤信號通路、MAPK 信號通路、腫瘤壞死因子（TNF）信號通路、IL-17 信號通路。癌癥信號通路包括MAPK信號通路、Wnt 信號通路、PI3k-Akt 信號通路、Jak-STAT 信號通路、鈣信號通路、PPAR 信號通路、雌激素信號通路、p53 信號通路、VEGF 信號通路等多條通路。IL-17 家族與受體結(jié)合后，可誘導IL-6 活化下游的信號通路，促進癌細胞增殖。局部高濃度的TNF-α 可以殺傷腫瘤細胞，但是緩慢釋放的TNF-α 可以激發(fā)血管生成因子和趨化因子等細胞因子，促進卵巢癌細胞的種植轉(zhuǎn)移和新生血管生成［31］，可 介 導NF-κB 信 號 通 路，抑 制 細 胞 凋 亡，MYC 是該通路的下游基因。有臨床試驗觀察到33%的復發(fā)性卵巢癌患者使用TNF 抑制劑依那西普治療后腫瘤穩(wěn)定期延長了22～40 周，降低了血清內(nèi)的IL-6 和CCL2［32］。MAPK1、MAPK8 屬于絲/蘇氨酸蛋白激酶，其亞族包括主要包括細胞外信號調(diào)節(jié)激酶1/2（ERK1/2）、c-Jun 氨基末端激酶（JNK）、p38 絲裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）和細胞外信號 調(diào) 節(jié) 激 酶5［33］，MAPK1 參 與ERK1/2 信 號 通 路，MAPK8 參與JNK/SAPK 通路，雌激素與雌激素受體α 結(jié)合后可通過刺激血清效應元件激活ERK1/2信號通路，促進癌細胞增殖，ERK1/2 和JNK 通路的持續(xù)激活可增加癌細胞對鉑類藥物的耐藥性，參與多種細胞因子對癌細胞的增殖、凋亡、轉(zhuǎn)移作用［34］。VEGFA 是血管內(nèi)皮生長因子的一種，主要參與調(diào)控血管生成，VEGFA 間接激活PI3K［35］，PI3K 參與內(nèi)皮細胞微管的形成，也參與內(nèi)皮細胞增殖、存活、遷移和血管通透性的形成［36］。AKT1 是PI3K 信號通路下游的主要受體［37］，激活AKT1，合成并釋放基質(zhì)金屬蛋白酶使腫瘤血管通透性增加，血管擴張，內(nèi)皮細胞遷移。MMP9 是基質(zhì)金屬蛋白酶的一種，屬于明膠酶類，其能釋放生長因子促進腫瘤生長，可降解細胞外基質(zhì)幫助脫落的癌細胞在體內(nèi)轉(zhuǎn)移［38］。IL6、CXCL8 和IL1B 是免疫調(diào)節(jié)細胞因子，卵巢癌患者血清和腹水內(nèi)存在高表達的IL6，與不良預后相關(guān)［39］，可導致對鉑類的耐藥性［40］，能間接激活PI3K/AkT 和P38MAPK 通路刺激癌細胞增殖［41］［42］［43］。JUN 是一種原癌基因，轉(zhuǎn)錄翻譯為c-jun蛋白，與FOS 轉(zhuǎn)錄翻譯的c-fos 蛋白形成的二聚體是轉(zhuǎn)錄因子AP-1 的組成部分，在體內(nèi)的表達量與癌細胞的分化程度成正相關(guān)［44］，可通過ERK1/2 被激活促進基因的轉(zhuǎn)錄和表達［45］。PTGS2、MYC 屬于癌基因，PTGS2 和MYC 的產(chǎn)物PTGS2 蛋白和myc 蛋白能抑制細胞凋亡，抑制免疫監(jiān)視，促進細胞增 殖，促 進 血 管 生 成［46，47］。CCL2 參 與JAK2-Stat5和p38MAPK 通路，增加血管內(nèi)皮細胞的通透性，促進癌細胞轉(zhuǎn)移［48］。TP53 是一種抑癌基因，TP53 基因突變?yōu)楦呒墑e子宮內(nèi)膜樣腺癌主要的分子生物學 特 點［49］，是 卵 巢 癌 復 發(fā) 的 獨 立 危 險 因 素［50］。CASP3 是細胞內(nèi)調(diào)節(jié)通路的下游效應分子，被激活的CASP3 是最終導致癌細胞凋亡的胱冬肽酶［51］。EGF 是一種細胞生長因子，EGFR 為其受體，EGFR與配體EGF 結(jié)合并激活后，激活下游的MAPK 信號通路、PI3K/AKT 信號通路和JAK/STAT 通路，共同促進癌細胞增殖和轉(zhuǎn)移［52，53］。ESR1 是雌激素受體（ER）α 的編碼基因，雌激素能促進ER 陽性的卵巢癌myc 蛋白表達增加，進而促進卵巢癌細胞增殖［54］。EGF 可通過激活MAPK 通路加強ERα 的促轉(zhuǎn)錄效應［55］，ERα 與雌激素結(jié)合后與靶基因上的雌激素受體反應元件結(jié)合調(diào)控基因的轉(zhuǎn)錄［56-57］。在GO 分析中，主要活性成分的生物功能、細胞組分和生物過程均涉及多種細胞分子和機體對細胞分子的反應過程，藥物的分子生物學功能主要為調(diào)控配體受體的結(jié)合、調(diào)控細胞因子和受體的活性、底物的去磷酸化和調(diào)節(jié)基因的轉(zhuǎn)錄過程，細胞組分主要與細胞膜有關(guān)，在生物學過程方面主要影響細胞的遷移、由細胞因子介導的信號通路、外界致癌物致病和炎癥反應。綜上所述，桂枝茯苓丸治療卵巢癌可能主要通過調(diào)節(jié)多種細胞因子調(diào)控免疫系統(tǒng)、抑制血管內(nèi)皮細胞增殖，進而抑制癌細胞增殖和轉(zhuǎn)移。

分別把桂枝茯苓丸主要活性成分和核心靶點進行分子對接，結(jié)果顯示結(jié)合自由能均低于0，即主要活性成分和核心靶點之間可以進行自由結(jié)合。在鞣花酸-TNF-α 分子對接構(gòu)象圖中可以看出，配體羥基可與GLU116、CYS101 形成氫鍵作用，形成的氫鍵鍵長分別為2.92、3.31。疏水殘基Pro100、Gln102、Glu104、Cys101、Ser99、Glu116、Lys98 形成的堆積作用有助于配體的結(jié)合。

惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展涉及多靶點、多環(huán)節(jié)，人們在使用現(xiàn)有靶向藥物治療的過程中逐漸發(fā)現(xiàn)了單靶點藥物的缺點，因此開始尋求多靶點藥物治療惡性腫瘤?；诰W(wǎng)絡藥理學對桂枝茯苓丸治療卵巢癌的機制探討，充分體現(xiàn)了桂枝茯苓丸治療卵巢癌多組分、多靶點、多通路的治療特點，為今后進一步的研究提供了參考意義。