生物餌料在非洲斑節(jié)對(duì)蝦溞狀幼體培育中的應(yīng)用

毛連環(huán)

摘要：為研究活體生物餌料在非洲斑節(jié)對(duì)蝦（Penaeusmondon）溞狀幼體中的應(yīng)用效果，試驗(yàn)使用牟氏角毛藻（Chaetocevosmueueri）和經(jīng)牟氏角毛藻強(qiáng)化的褶皺臂尾輪蟲（Brachionusplicatilis）替代商品螺旋藻粉（Spirulinaplatensis）投喂非洲斑節(jié)對(duì)蝦溞狀幼體，試驗(yàn)設(shè)置3組：對(duì)照組（A0）采用傳統(tǒng)的蝦片與商品螺旋藻粉在溞狀幼體階段全程投喂;試驗(yàn)組A1組以牟氏角毛藻替代商品螺旋藻粉投喂;試驗(yàn)組A2組以牟氏角毛藻替代商品螺旋藻粉投喂，并在Z2和Z3期添加投喂經(jīng)牟氏角毛藻強(qiáng)化的褶皺臂尾輪蟲，每組設(shè)3個(gè)平行。結(jié)果表明：3組間溞狀幼體成活率差異顯著（P<0.05），其中A2組最高（73.9%），A0組最低（51.4%）;在溞狀幼體變態(tài)時(shí)間上，3組間差異顯著（P<0.05），其中A2組變態(tài)時(shí)間最短。試驗(yàn)表明，活體生物餌料替代商品螺旋藻粉有利于非洲斑節(jié)對(duì)蝦溞狀幼體培育，效果顯著。

關(guān)鍵詞：生物餌料;非洲斑節(jié)對(duì)蝦（Penaeusmondon）;溞狀幼體;成活率;變態(tài)時(shí)間

非洲斑節(jié)對(duì)蝦（Penaeusmondon）又稱金剛蝦，南非斑節(jié)對(duì)蝦、非洲草蝦王等，其具有生長(zhǎng)快、個(gè)體大、適鹽范圍廣、抗病力強(qiáng)的特點(diǎn)。非洲斑節(jié)對(duì)蝦近年來(lái)養(yǎng)殖面積逐年增加，苗種需求量倍增，提高苗種培育成活率尤為重要。溞狀幼體培育是非洲斑節(jié)對(duì)蝦人工育苗的重要階段，該階段餌料的營(yíng)養(yǎng)搭配是決定幼體培育質(zhì)量及成活率的關(guān)鍵因素之一。目前傳統(tǒng)的對(duì)蝦生產(chǎn)性人工育苗大多使用蝦片搭配人工加工的商品螺旋藻粉、海草粉等餌料，較少使用活體生物餌料，但人工配合飼料無(wú)法完全替代活體微藻、輪蟲等生物餌料[1-3]?；铙w微藻不易沉底，營(yíng)養(yǎng)更加全面，蛋白質(zhì)、脂肪酸、碳水化合物含量等能滿足蝦類的營(yíng)養(yǎng)需求，更適宜作為對(duì)蝦幼體的開口餌料[4-5];部分單胞藻還可用于強(qiáng)化酵母培養(yǎng)的輪蟲，提高輪蟲體內(nèi)高度不飽和脂肪酸的含量，增加輪蟲營(yíng)養(yǎng)，進(jìn)而增強(qiáng)對(duì)蝦幼體體質(zhì)，促進(jìn)對(duì)蝦幼體變態(tài)發(fā)育。訖今，活體生物餌料在非洲斑節(jié)對(duì)蝦幼體培育應(yīng)用效果方面鮮見報(bào)道。本試驗(yàn)在非洲斑節(jié)對(duì)蝦溞狀幼體培育階段（溞狀幼體發(fā)育期分三階段：溞狀幼體Ⅰ期Z1、溞狀幼體Ⅱ期Z2、溞狀幼體Ⅲ期Z3），選用易于大規(guī)模培養(yǎng)獲得的鮮活牟氏角毛藻替代商品螺旋藻粉，同時(shí)在Z2、Z3階段結(jié)合投喂經(jīng)牟氏角毛藻強(qiáng)化的輪蟲，研究生物餌料對(duì)非洲斑節(jié)對(duì)蝦溞狀幼體培育成活率與變態(tài)時(shí)間的影響，為生物餌料在非洲斑節(jié)對(duì)蝦人工育苗中的應(yīng)用提供參考。

1材料與方法

1.1試驗(yàn)材料與條件

本試驗(yàn)于2020年5月9日—16日在福建省寧德市南海水產(chǎn)科技有限公司室內(nèi)育苗場(chǎng)進(jìn)行，試驗(yàn)采用高度1.2m的玻璃鋼錐形桶，有效水體500L，試驗(yàn)用非洲斑節(jié)對(duì)蝦無(wú)節(jié)幼體（N4期）購(gòu)自福建漳浦。試驗(yàn)用海水經(jīng)沉淀砂濾后，用15～18mL/m3的福爾馬林溶液消毒，曝氣48h后再經(jīng)脫脂棉袋過濾使用。海水鹽度29‰，pH值8-1，總堿度123mg/L（CaCO3），試驗(yàn)使用自動(dòng)控溫防水電熱棒調(diào)控水溫，理化因子使用奧克丹（Octadem）便攜式水質(zhì)分析儀測(cè)定。

1.2試驗(yàn)餌料

人工配合餌料：雙色蝦片（XP）、商品螺旋藻粉（Spirulinaplatensis，以下簡(jiǎn)稱SP）購(gòu)自廈門某公司;活體生物餌料：牟氏角毛藻（Chaetocevosmueueri，以下簡(jiǎn)稱CM）、褶皺臂尾輪蟲（Brachionusplicatilis，以下簡(jiǎn)稱BP），投喂前用牟氏角毛藻營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化6～8h的褶皺臂尾輪蟲（以下簡(jiǎn)稱BPcm）。

1.3試驗(yàn)設(shè)計(jì)

對(duì)照組A0：Z1—Z3期均投喂XP+SP餌料組合;試驗(yàn)組A1：Z1—Z3期均投喂XP+CM餌料組合;試驗(yàn)組A2：Z1期投喂XP+CM餌料組合，Z2—Z3期投喂XP+CM+BPcm餌料組合。

每組設(shè)三個(gè)平行，每個(gè)平行投放無(wú)節(jié)幼體（N4期）5萬(wàn)尾，培育密度10萬(wàn)尾/m3，各組餌料投喂種類與密度見表1。

1.4試驗(yàn)日常管理

非洲斑節(jié)對(duì)蝦溞狀幼體培育水溫保持31～32℃。溞狀幼體開口后即開始投喂餌料，XP、SP日投喂6次，CM日投喂3次，BPcm日投喂2次。投喂前后觀察幼體攝食及拖便情況。XP、SP搓洗篩絹網(wǎng)目分別為：300目（Z1）、250目（Z2）、200目（Z3）。充氣量Z1—Z3從微波狀逐漸調(diào)至沸騰狀。試驗(yàn)桶初始水位0.8m，溞狀幼體培育期間保持各試驗(yàn)組水位相近，不換水。試驗(yàn)結(jié)束測(cè)定各組氨氮、亞硝酸鹽、pH值等水質(zhì)指標(biāo)。

1.5數(shù)據(jù)來(lái)源及處理方法

1.5.1成活率及變態(tài)時(shí)間的計(jì)算非洲斑節(jié)對(duì)蝦無(wú)節(jié)幼體Ⅳ期（N4）經(jīng)兩期發(fā)育進(jìn)入無(wú)節(jié)幼體Ⅵ期（N6），再經(jīng)過變態(tài)發(fā)育后就進(jìn)入溞狀幼體期。非洲斑節(jié)對(duì)蝦溞狀幼體階段分Z1、Z2、Z3三個(gè)發(fā)育期，溞狀幼體Z3變態(tài)發(fā)育后就進(jìn)入糠蝦Ⅰ期（M1）。利用顯微鏡鏡檢或肉眼觀察溞狀幼體各期變態(tài)發(fā)育情況，當(dāng)發(fā)現(xiàn)下一期幼體時(shí)，將幼體發(fā)育所需時(shí)間記為該階段的變態(tài)時(shí)間;經(jīng)顯微鏡鏡檢后，如發(fā)現(xiàn)有90%以上幼體已進(jìn)入相同發(fā)育期，即用500mL燒杯隨機(jī)取樣三次計(jì)數(shù)，用水體比例法計(jì)算每個(gè)變態(tài)期的幼體數(shù)量及成活率[6]：

變態(tài)成活率（%）=變態(tài)進(jìn)入下一期存蝦數(shù)/變態(tài)前初始存蝦數(shù)×100;

Z1→Z2（%）、Z2→Z3（%）、Z3→M1（%）分別表示三個(gè)變態(tài)發(fā)育過程的成活率;Z1→M1（%）表示溞狀幼體階段成活率。

1.5.2數(shù)據(jù)處理試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS17.0進(jìn)行分析處理，運(yùn)用單因素方差進(jìn)行顯著性檢驗(yàn)，顯著性水平P<0.05為差異顯著。

2結(jié)果與分析

2.1生物餌料對(duì)非洲斑節(jié)對(duì)蝦溞狀幼體成活率的影響

活體生物餌料對(duì)非洲斑節(jié)對(duì)蝦溞狀幼體培育成活率影響顯著。溞狀幼體階段（Z1→M1）成活率A2組最高（73.9%），A1組次之（65.3%），A0組成活率最低（51.4%），三者差異顯著（P<0-05）;溞狀幼體各變態(tài)期（Z1→Z2、Z2→Z3、Z3→M1）成活率A1、A2組均顯著高于A0組（P<0-05），同時(shí)Z2→Z3、Z3→M1變態(tài)期成活率A2組顯著高于A1組（P<0.05）。見表2。

2.2生物餌料對(duì)非洲斑節(jié)對(duì)蝦溞狀幼體變態(tài)時(shí)間的影響

從表3可見，在培育水溫、密度相同情況下，活體生物餌料對(duì)非洲斑節(jié)對(duì)蝦溞狀幼體變態(tài)時(shí)間影響顯著。溞狀幼體Z1變態(tài)到M1，A2組變態(tài)時(shí)間最短，約104h;A1組約107h;A0組變態(tài)時(shí)間最長(zhǎng)，約111h;A0組變態(tài)時(shí)間比A2組慢近7h。各試驗(yàn)組溞狀幼體變態(tài)時(shí)間差異顯著（P<0-05）。

3討論

3.1牟氏角毛藻對(duì)非洲斑節(jié)對(duì)蝦溞狀幼體成活率及變態(tài)時(shí)間的影響

在水產(chǎn)動(dòng)物育苗過程中餌料不合適或營(yíng)養(yǎng)不足會(huì)影響幼體成活率和變態(tài)[7]，牟氏角毛藻是一種小型浮游硅藻，細(xì)胞小、細(xì)胞壁薄，富含EPA和DHA等高度不飽和脂肪酸[8]。王家偉等[9]研究結(jié)果表明：牟氏角毛藻含有全部的對(duì)蝦5種必需不飽和脂肪酸，其中EPA含量高達(dá)23.8%，DHA含量1.4%。EPA和DHA為n-3系列高度不飽和脂肪酸（n-3HUFA），營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高，是對(duì)蝦幼體發(fā)育階段必需脂肪酸，會(huì)間接影響蝦、蟹類幼體蛻皮及提高幼體變態(tài)和存活率[10]。大部分蝦蟹類體內(nèi)不能合成EPA和DHA，只能從食物中獲得[11]。商品螺旋藻粉雖然蛋白含量高，但溞狀幼體對(duì)商品螺旋藻粉消化能力差，過量投喂會(huì)影響溞狀幼體的存活率[12]，且人工加工的螺旋藻粉n-3HUFA系列高度不飽和脂肪酸EPA和DHA含量低于活體牟氏角毛藻，不能完全滿足幼體發(fā)育的營(yíng)養(yǎng)需求，投喂效果也不如活體生物餌料。這可能是本試驗(yàn)中A1、A2組非洲斑節(jié)對(duì)蝦溞狀幼體培育成活率高，且變態(tài)時(shí)間顯著快于A0組的原因之一。楊育凱等[13]也研究報(bào)道了蝦片、螺旋藻粉等人工配合飼料僅能部分代替活體生物餌料，單獨(dú)投喂效果差，不利于對(duì)蝦幼體生長(zhǎng)發(fā)育。本試驗(yàn)結(jié)果與上述研究結(jié)果相似。

3.2輪蟲對(duì)非洲斑節(jié)對(duì)蝦溞狀幼體成活率及變態(tài)時(shí)間的影響

褶皺臂尾輪蟲是魚、蟹、蝦類苗種培育的良好生物餌料，但僅用酵母培養(yǎng)的輪蟲體內(nèi)EPA和DHA的相對(duì)含量較低，分別只有0-7%、0-2%[14]。經(jīng)牟氏角毛藻強(qiáng)化后的輪蟲，其EPA和DHA相對(duì)含量分別高達(dá)8.2%、8.8%[8]。本試驗(yàn)A2組從Z2期開始投喂經(jīng)牟氏角毛藻強(qiáng)化的輪蟲，幼體變態(tài)成活率最高，發(fā)育變態(tài)時(shí)間更短;肉眼觀察M1個(gè)體也明顯大于A1、A0組?？梢娫诜侵薨吖?jié)對(duì)蝦Z2期，開始添加投喂經(jīng)牟氏角毛藻營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化的輪蟲更適合幼體生長(zhǎng)發(fā)育和成活。胡賢德等[15]在斑節(jié)對(duì)蝦育苗中使用褶皺臂尾輪蟲替代部分人工配合餌料，溞狀幼體成活率達(dá)76%～84%。本研究試驗(yàn)結(jié)果表明，投喂經(jīng)牟氏角毛藻營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化的輪蟲對(duì)提高非洲斑節(jié)對(duì)蝦育苗成活率具有明顯效果。

3.3生物餌料可以改善育苗水環(huán)境

生物餌料牟氏角毛藻、褶皺臂尾輪蟲營(yíng)養(yǎng)豐富，作為活體餌料投喂后均勻分布于水體中，利于對(duì)蝦幼體攝食，餌料利用率高。牟氏角毛藻、褶皺臂尾輪蟲還能凈化水質(zhì)、改善水環(huán)境，是良好的水質(zhì)改良劑[16]。而人工加工的商品螺旋藻粉易沉底，餌料利用率不高，過量投喂也難以提高攝食量且更容易敗壞水質(zhì)。本試驗(yàn)結(jié)束時(shí)檢測(cè)各試驗(yàn)組氨氮、亞硝酸鹽含量，發(fā)現(xiàn)A0組氨氮、亞硝酸鹽含量分別為0.15mg/L和0.12mg/L，明顯高于A1組的0.08mg/L和0.06mg/L與A2組的0-07mg/L和0.04mg/L。pH值檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，A1、A2組pH值相對(duì)穩(wěn)定，分別為8.0和7.9;A0組pH值為7.3。以上水質(zhì)變化情況說(shuō)明，在非洲斑節(jié)對(duì)蝦溞狀幼體培育階段中，使用活體生物餌料替代商品螺旋藻粉，在不換水的情況下水質(zhì)更適宜幼體生長(zhǎng)發(fā)育。

3.4生物餌料培養(yǎng)與使用

牟氏角毛藻具有繁殖快、耐高溫、抗污染能力強(qiáng)及營(yíng)養(yǎng)豐富等特點(diǎn)，是對(duì)蝦人工育苗的優(yōu)質(zhì)開口餌料[17-18]，但在投喂時(shí)，應(yīng)選擇細(xì)胞處于指數(shù)生長(zhǎng)期、活力強(qiáng)、呈上浮或懸浮、顏色正常、質(zhì)量好的牟氏角毛藻（藻細(xì)胞培養(yǎng)濃度約為300×104個(gè)/mL）。投喂量與投喂頻次視幼體的攝食、拖便及胃腸飽滿度情況而定，盡量避免投喂密度過大引起餌料沉底、老化，敗壞水質(zhì)。

輪蟲是對(duì)蝦人工育苗重要的動(dòng)物餌料，但使用酵母培育的輪蟲，由于長(zhǎng)時(shí)間培養(yǎng)，經(jīng)常會(huì)攜帶原生動(dòng)物，如聚縮蟲、鐘形蟲等，影響溞狀幼體培育。因此，在投喂輪蟲前，應(yīng)使用200mL/m3的福爾馬林溶液消毒并清洗干凈后投喂，投喂量視攝食情況適當(dāng)增減。

4結(jié)論

在非洲斑節(jié)對(duì)蝦人工育苗的重要階段溞狀幼體培育時(shí)期，采用活體生物餌料（牟氏角毛藻、輪蟲）替代常用的商品螺旋藻粉投喂，對(duì)非洲斑節(jié)對(duì)蝦溞狀幼體成活率有顯著提高，并且能顯著縮短變態(tài)時(shí)間，促進(jìn)對(duì)蝦幼體變態(tài)發(fā)育，試驗(yàn)結(jié)果在非洲斑節(jié)對(duì)蝦人工育苗上具有較高的應(yīng)用推廣價(jià)值。

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（收稿日期：2021-07-20）