水溫、光周期和光照強(qiáng)度對(duì)塔里木裂腹魚(yú)幼魚(yú)存活、攝食和生長(zhǎng)的影響及其鹽堿耐受能力研究

趙年樺，趙 賀，強(qiáng) 壯，聶竹蘭，魏 杰, ，沈建忠

（1. 塔里木大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，新疆維吾爾自治區(qū) 阿拉爾 843300； 2. 新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)塔里木畜牧科技重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，新疆維吾爾自治區(qū) 阿拉爾 843300； 3. 塔里木珍稀魚(yú)類(lèi)研究中心，新疆維吾爾自治區(qū) 阿拉爾 843300； 4. 塔里木大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，新疆維吾爾自治區(qū) 阿拉爾 843300； 5. 華中農(nóng)業(yè)大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院，湖北 武漢 430070）

我國(guó)擁有約0.46億hm2的低洼鹽堿水域資源，廣泛分布在東北、華北和西北內(nèi)陸地區(qū)，但這些鹽堿水域資源中生物種類(lèi)單一、生態(tài)環(huán)境脆弱，因此大部分長(zhǎng)期處于荒廢狀態(tài)[1]。自1991年以來(lái)，我國(guó)開(kāi)始在河北、山東、江蘇等地進(jìn)行鹽堿水養(yǎng)殖[2]，但目前尚缺乏針對(duì)不同鹽堿水域特點(diǎn)的主導(dǎo)養(yǎng)殖技術(shù)，存在養(yǎng)殖品種單一的問(wèn)題[3]。裂腹魚(yú)亞科主要分布在我國(guó)的青藏高原及其周邊水域[4-5]，近幾年由于受外界因素干擾，其數(shù)量急劇下降，大規(guī)模人工繁育成為保護(hù)裂腹魚(yú)的首要任務(wù)。

人工繁育過(guò)程中環(huán)境因子對(duì)幼魚(yú)的代謝、存活、攝食和生長(zhǎng)起著重要作用，其中水溫、光周期和光照強(qiáng)度的影響尤為重要[6]。魚(yú)類(lèi)是變溫動(dòng)物，體溫隨著水溫而變化，水溫可以通過(guò)影響?hù)~(yú)體體溫從而改變其消化酶活性，進(jìn)而對(duì)魚(yú)類(lèi)的攝食率、食物消化率和生長(zhǎng)率產(chǎn)生重大影響[7]。魚(yú)類(lèi)的攝食率和生長(zhǎng)率隨水溫的升高而增加，但當(dāng)水溫高于臨界值時(shí)卻會(huì)隨水溫的升高而下降[8]。魚(yú)類(lèi)在整個(gè)生命周期中均受光照影響，光周期和光照強(qiáng)度對(duì)魚(yú)類(lèi)攝食和生長(zhǎng)有重要影響，光照過(guò)強(qiáng)或過(guò)弱和不適宜的光周期均會(huì)對(duì)魚(yú)類(lèi)的活動(dòng)、生長(zhǎng)和發(fā)育產(chǎn)生不利影響[9]。

塔里木裂腹魚(yú) (Schizothorax biddulphi)屬鯉形目、鯉科、裂腹魚(yú)亞科、裂腹魚(yú)屬，為國(guó)家二級(jí)保護(hù)魚(yú)種，僅分布于新疆塔里木水系[10]。近年來(lái)，塔里木裂腹魚(yú)繁殖生物學(xué)和生態(tài)學(xué)相關(guān)研究逐漸被重視[11-14]，但環(huán)境因子對(duì)其存活、攝食和生長(zhǎng)的影響及其鹽堿耐受能力的研究尚未見(jiàn)報(bào)道。本文研究了水溫、光周期和光照強(qiáng)度對(duì)塔里木裂腹魚(yú)幼魚(yú)存活、攝食和生長(zhǎng)的影響，以及塔里木裂腹魚(yú)幼魚(yú)對(duì)氯化鈉 (NaCl) 鹽度、碳酸氫鈉 (NaHCO3) 堿度和鹽堿交互的耐受性，以期為塔里木裂腹魚(yú)種群保護(hù)和養(yǎng)殖生產(chǎn)提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

實(shí)驗(yàn)用塔里木裂腹魚(yú)幼魚(yú)采自新疆維吾爾自治區(qū)卡拉貝利魚(yú)類(lèi)增殖放流站，初始體長(zhǎng)為 (47.26±0.89) mm，體質(zhì)量為 (1.25±0.31) g。實(shí)驗(yàn)容器為透明有蓋玻璃水缸 (60 cm×35 cm×45 cm)，實(shí)驗(yàn)期間統(tǒng)一使用HZ-060型充氣增氧機(jī)供氧。實(shí)驗(yàn)飼料為四川斯特佳飼料有限公司生產(chǎn)的浮性配合飼料838，每天投喂3次 (09:30、13:30、19:30)，按體質(zhì)量3.0%～5.0%飽食投喂。投餌前吸出糞便，投餌30 min后吸出殘餌，烘干稱(chēng)質(zhì)量，調(diào)整投喂量。每天換水1次，每次換水1/3，換水前后溫差控制在0.5 ℃以?xún)?nèi)。實(shí)驗(yàn)用水為經(jīng)過(guò)循環(huán)系統(tǒng)過(guò)濾的卡拉貝利地下水，水溫 (16.5±0.5) ℃，pH 8.45～8.56，溶解氧質(zhì)量濃度 3.5～3.7 mg·L?1，鹽度 1.7～1.9，氨氮質(zhì)量濃度<0.1 mg·L?1。

1.2 水溫實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

1.3 光周期實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

實(shí)驗(yàn)設(shè) 5 個(gè)光照周期組 (0 L∶24 D、8 L∶16 D、12 L∶12 D、16 L∶8 D 和 24 L∶0 D)，每組 3個(gè)平行，每組30尾幼魚(yú)，共15個(gè)玻璃水缸，每個(gè)實(shí)驗(yàn)組分別放在獨(dú)立密閉遮光的實(shí)驗(yàn)桶 (直徑為2 m、深度為 1 m) 中進(jìn)行，每組采用 1個(gè) 36 W 日光燈進(jìn)行照明，玻璃缸遮光材料選用黑色塑料布，實(shí)驗(yàn)周期為 45 d。

1.4 光照強(qiáng)度實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

實(shí)驗(yàn)設(shè) 5個(gè)光照強(qiáng)度組 (2 000、1 000、500、100、10 lx)，每組3個(gè)平行，每組30尾幼魚(yú)，共15個(gè)玻璃水缸，均勻排成5列，4個(gè)36 W日光燈燈光從第一列玻璃缸壁外上方射入，移動(dòng)各列玻璃缸間距，使光強(qiáng)在玻璃缸中形成10～2 000 lx的光照梯度，光照周期為自然光周期 (12 L∶12 D)，實(shí)驗(yàn)周期為 45 d。

1.5 多因素調(diào)控實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

采用三因素 (水溫、光周期、光照強(qiáng)度) 四水平 (成活率、攝食率、體長(zhǎng)增長(zhǎng)率、特定生長(zhǎng)率)的Box-Benhnken實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，因子水平分別編碼為?1、0、1，共17個(gè)實(shí)驗(yàn)點(diǎn)，每個(gè)實(shí)驗(yàn)點(diǎn)重復(fù)3次，每個(gè)實(shí)驗(yàn)點(diǎn)30尾幼魚(yú)，實(shí)驗(yàn)周期為45 d。

1.6 鹽堿耐受實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

采用單因子靜態(tài)急性毒性實(shí)驗(yàn)法[15]進(jìn)行鹽堿耐受實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)用魚(yú)先參照多因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果篩選出的模型優(yōu)化因素條件進(jìn)行飼養(yǎng)，飼養(yǎng)周期為45 d。飼養(yǎng)周期結(jié)束后，挑選體質(zhì)活躍、無(wú)傷無(wú)病的幼魚(yú)進(jìn)行鹽堿耐受能力研究并進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)，獲得幼魚(yú)24 h全部死亡鹽度、堿度最低濃度和96 h全部成活鹽度、堿度最高濃度。設(shè)置7個(gè)鹽度梯度 (2.5、3.0、3.5、4.0、4.5、5.0、5.5)和7個(gè)堿度濃度梯度 (65、75、85、95、105、115、125 mmol·L?1)，每個(gè)濃度梯度設(shè)置3個(gè)平行組和1個(gè)對(duì)照組，每組20尾幼魚(yú)。為保證實(shí)驗(yàn)過(guò)程中溶液濃度的穩(wěn)定性和水質(zhì)清澈，所有濃度梯度24 h更換10%水量，不投餌，實(shí)驗(yàn)分別使用鹽度計(jì)和酸度計(jì)測(cè)定及校準(zhǔn)鹽度和堿度。實(shí)驗(yàn)進(jìn)行96 h，連續(xù)觀(guān)察記錄前12 h魚(yú)在實(shí)驗(yàn)中的表現(xiàn)情況并記錄24、48、72、96 h的死亡數(shù)，及時(shí)撈出死亡 (不能游動(dòng)和鰓蓋未能煽動(dòng)) 個(gè)體。

1.7 數(shù)據(jù)處理

實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前和實(shí)驗(yàn)結(jié)束后停食1 d，分別測(cè)量各組實(shí)驗(yàn)魚(yú)的體長(zhǎng)、體質(zhì)量，計(jì)算成活率 (Survival rate, SR, %)、攝食率 (Feeding ratio, FR, %)、體長(zhǎng)增長(zhǎng)率 (Length growth rate, LR, %)、特定生長(zhǎng)率 (Specific growth rate, SGR, %·d?1) 等指標(biāo)：

式中：N0為實(shí)驗(yàn)開(kāi)始時(shí)魚(yú)的尾數(shù)；Nt為實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)魚(yú)的尾數(shù)；F為飼料攝入量 (g)；t為養(yǎng)殖天數(shù) (d)；W0為實(shí)驗(yàn)開(kāi)始時(shí)魚(yú)體質(zhì)量 (g)；Wt為實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)魚(yú)體質(zhì)量 (g)；L0為實(shí)驗(yàn)開(kāi)始時(shí)魚(yú)體長(zhǎng) (mm)；Lt為實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)魚(yú)體長(zhǎng) (mm)。

心理健康課程并不僅僅是把基本的理論知識(shí)傳遞給學(xué)生，更是要讓學(xué)生通過(guò)多樣化的課程方法做好心理調(diào)節(jié)。因此，在進(jìn)行課程安排時(shí)，也要按照這兩部分來(lái)展開(kāi)。首先，在理論知識(shí)普及部分，教師要利用多樣化的授課方式讓學(xué)生融入心理課程中。其次，通過(guò)理論知識(shí)學(xué)習(xí)后，教師要讓學(xué)生進(jìn)行有效的運(yùn)用。例如，某校為了充分讓學(xué)生掌握心理健康課程，發(fā)揮心理健康的作用，開(kāi)展了“我是心理醫(yī)生”的角色扮演活動(dòng)，通過(guò)讓學(xué)生對(duì)有心理問(wèn)題的案例進(jìn)行分析與“治療”，利于增強(qiáng)學(xué)生的學(xué)習(xí)自信心，并培養(yǎng)其良好的心理素養(yǎng)。

鹽堿耐受單一因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果采用改良寇氏法[16]，分析計(jì)算半致死濃度 (LC50) 及95%置信區(qū)間：

式中：Xm為最高濃度對(duì)數(shù)；d為濃度對(duì)數(shù)差；pi為死亡率；n為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物數(shù)；SD為標(biāo)準(zhǔn)差。

安全濃度 (Safe concentration, SC, %) 采用魚(yú)類(lèi)急性毒性實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)公式[17]估算：

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用 Excel 2020和 SPSS 26.0軟件進(jìn)行處理和分析，通過(guò)Origin 2019軟件繪圖，多因素調(diào)控實(shí)驗(yàn)采用 Design Expert 12進(jìn)行設(shè)計(jì)。

2 結(jié)果

2.1 水溫、光周期和光照強(qiáng)度對(duì)塔里木裂腹魚(yú)幼魚(yú)存活、攝食和生長(zhǎng)的影響

在為期 45 d 的生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn)中 (表 1)，0 L∶24 D實(shí)驗(yàn)組幼魚(yú)在實(shí)驗(yàn)開(kāi)始后10 d內(nèi)全部死亡，故未統(tǒng)計(jì)其最終體長(zhǎng)與體質(zhì)量。結(jié)果 (圖1-a) 顯示，塔里木裂腹魚(yú)幼魚(yú)適應(yīng)水溫范圍較大，水溫為5～25 ℃時(shí)幼魚(yú)成活率均在85%以上，但水溫超過(guò)25 ℃時(shí)其成活率顯著下降，30 ℃時(shí)成活率為46.7%；幼魚(yú)在水溫5～20 ℃中攝食率隨著水溫上升而提高，水溫20 ℃時(shí)達(dá)到最高 (1.96%)，在水溫25～30 ℃中攝食率隨水溫上升而下降 (最低為0.53%)；體長(zhǎng)和特定生長(zhǎng)率與幼魚(yú)攝食率變化趨勢(shì)相同，20 ℃ 時(shí)達(dá)到最高 (22.34% 和 1.58%?d?1)，30 ℃ 時(shí)較低 (5.56% 和 0.23%?d?1)。

表1 各實(shí)驗(yàn)組塔里木裂腹魚(yú)幼魚(yú)的初始和最終體長(zhǎng)及體質(zhì)量Table 1 Initial and final body length and body mass of S. biddulphi juveniles in different groupsN=1 440

全黑 (0 L∶24 D) 實(shí)驗(yàn)組的幼魚(yú)在 10 d 內(nèi)全部死亡。幼魚(yú)成活率、攝食率、體長(zhǎng)增長(zhǎng)率和特定生長(zhǎng)率隨著光照時(shí)間的延長(zhǎng)而增加，每天光照時(shí)間為16 h時(shí)各水平達(dá)到最高，但每天光照時(shí)間為24 h時(shí)，成活率、攝食率、體長(zhǎng)增長(zhǎng)率和特定生長(zhǎng)率均下降 (圖 1-b)。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，塔里木裂腹魚(yú)幼魚(yú)適應(yīng)光照強(qiáng)度范圍較大 (圖 1-c)。光照強(qiáng)度為 10～2 000 lx 時(shí)幼魚(yú)成活率均在80%以上。光照強(qiáng)度較大時(shí)幼魚(yú)進(jìn)食活動(dòng)減少，光照強(qiáng)度為500 lx時(shí)幼魚(yú)攝食率達(dá)到最高 (1.89%)；光照強(qiáng)度小于500 lx時(shí)攝食率隨著光照強(qiáng)度降低而減少，其體長(zhǎng)增長(zhǎng)率和特定生長(zhǎng)率與攝食率變化趨勢(shì)一致，均在500 lx時(shí)達(dá)到最高(25.31% 和 1.65%?d?1)。

圖1 水溫、光周期和光照強(qiáng)度對(duì)塔里木裂腹魚(yú)幼魚(yú)成活率、攝食率、體長(zhǎng)增長(zhǎng)率和特定生長(zhǎng)率影響Figure 1 Effects of water temperature, photoperiod and light intensity on survival rate, feeding rate,length growth rate, specific growth rate of S. biddulphi juveniles

2.2 多因素調(diào)控實(shí)驗(yàn)

選擇水溫 (Water temperature, WT)、光照時(shí)間(Illumination time, IT, h) 和光照強(qiáng)度 (Light intensity,LI) 為復(fù)合調(diào)控因素進(jìn)行響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)分析 (表2)。根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果建立塔里木裂腹魚(yú)幼魚(yú)SR、FR、LR 和 SGR 與水溫 (A)、光照時(shí)間 (B) 和光照強(qiáng)度(C) 因素之間的多元線(xiàn)性回歸方程：

表2 響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)方案及結(jié)果Table 2 Response surface design and results

4組回歸模型的決定系數(shù)R2均大于0.90，表明實(shí)驗(yàn)誤差較小；四組模擬失效項(xiàng)P分別為0.07、0.40、0.83、0.95，均大于0.05，說(shuō)明模型有效，可以很好地分析和預(yù)測(cè)3種環(huán)境因子對(duì)塔里木裂腹魚(yú)存活、攝食和生長(zhǎng)的影響[18]。

由表 3可見(jiàn)，一次項(xiàng)水溫 (A)、光照時(shí)間 (B) 對(duì)SR、FR、LR、SGR影響均顯著 (P<0.05)，一次項(xiàng)(C) 僅對(duì)FR影響顯著；交互項(xiàng)AB對(duì)SR、FR影響顯著 (P<0.05)，AC、BC對(duì) FR 影響顯著 (P<0.05)；二次項(xiàng)A2、B2對(duì)SR、FR、LR、SGR影響均極顯著(P<0.01)，C2對(duì) FR、LR、SGR 影響顯著 (P<0.05)。

表3 各因素及其交互作用對(duì)塔里木裂腹魚(yú)幼魚(yú)成活率、攝食率、體長(zhǎng)增長(zhǎng)率和特定生長(zhǎng)率的顯著性檢驗(yàn)Table 3 Significance test of factors and their interactions on survival rate, feeding rate, length growth rate and specific growth rate of S. biddulphi juveniles

水溫、光照時(shí)間和光照強(qiáng)度對(duì)SR、FR、LR、SGR調(diào)控的響應(yīng)面分析結(jié)果 (圖2) 顯示，水溫和光照時(shí)間、水溫和光照強(qiáng)度、光照時(shí)間和光照強(qiáng)度對(duì)響應(yīng)值的交互作用均呈現(xiàn)開(kāi)口向下的山丘狀，于底面投影等高線(xiàn)呈橢圓形，因此各環(huán)境因子之間的交互作用均對(duì)塔里木裂腹魚(yú)存活、攝食、生長(zhǎng)影響顯著。本實(shí)驗(yàn)響應(yīng)模型優(yōu)化結(jié)果顯示，水溫12.98 ℃、每天光照時(shí)間15.07 h、光照強(qiáng)度670.27 lx時(shí)可獲得塔里木裂腹魚(yú)的最佳存活、攝食和生長(zhǎng)條件，此時(shí)理論成活率為81.61%，理論攝食率為1.53%，理論體長(zhǎng)增長(zhǎng)率為16.34%，理論特定生長(zhǎng)率為1.13%?d?1。經(jīng)驗(yàn)證，最佳環(huán)境條件下塔里木裂腹魚(yú)成活率為82.22%，攝食率為1.49%，體長(zhǎng)增長(zhǎng)率為16.21%，特定生長(zhǎng)率為1.07%?d?1，該結(jié)果與理論值基本相符，說(shuō)明響應(yīng)模型可有效預(yù)測(cè)塔里木裂腹魚(yú)的存活、攝食和生長(zhǎng)狀況。

圖2 水溫、光照時(shí)間和光照強(qiáng)度對(duì)塔里木裂腹魚(yú)幼魚(yú)成活率、攝食率、體長(zhǎng)增長(zhǎng)率和特定生長(zhǎng)率的響應(yīng)面a. 水溫和光照時(shí)間對(duì)成活率的影響；b. 水溫和光照強(qiáng)度對(duì)成活率的影響；c. 光照時(shí)間和光照強(qiáng)度對(duì)成活率的影響；d. 水溫和光照時(shí)間對(duì)攝食率的影響；e. 水溫和光照強(qiáng)度對(duì)攝食率的影響；f. 光照時(shí)間和光照強(qiáng)度對(duì)攝食率的影響；g. 水溫和光照時(shí)間對(duì)體長(zhǎng)增長(zhǎng)率的影響；h. 水溫和光照強(qiáng)度對(duì)體長(zhǎng)增長(zhǎng)率的影響；i. 光照時(shí)間和光照強(qiáng)度對(duì)體長(zhǎng)增長(zhǎng)率的影響；j. 水溫和光照時(shí)間對(duì)特定生長(zhǎng)率的影響；k. 水溫和光照強(qiáng)度對(duì)特定生長(zhǎng)率的影響；l. 光照時(shí)間和光照強(qiáng)度對(duì)特定生長(zhǎng)率的影響。Figure 2 Response surface and contour plot of effects of water temperature, illumination time and light intensity on survival rate,feeding rate, length growth rate, specific growth rate of S.biddulphi juvenilesa. Influence of WT and IT on SR; b. Influence of WT and LI on SR; c. Influence of IT and LI on SR; d. Influence of WT and IT on FR; e. Influence of WT and LI on FR; f. Influence of IT and LI on FR; g. Influence of WT and IT on LR; h. Influence of WT and LI on LR; i. Influence of IT and LI on LR; j. Influence of WT and IT on SGR; k. Influence of WT and LI on SGR; l. Influence of IT and LI on SGR.

2.3 鹽堿耐受能力

塔里木裂腹魚(yú)幼魚(yú)在不同鹽度下的累計(jì)死亡率見(jiàn)表4。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，對(duì)照組中幼魚(yú)的行為始終正常，無(wú)死亡個(gè)體，水質(zhì)清澈無(wú)雜質(zhì)。在不同鹽度耐受性實(shí)驗(yàn)組中，幼魚(yú)反應(yīng)強(qiáng)烈，鰓蓋活動(dòng)頻率加快。幼魚(yú)開(kāi)始死亡的時(shí)間為第10小時(shí) (鹽度為4.0)，死亡時(shí)幼魚(yú)停止游動(dòng)，體表無(wú)光澤 (圖3-a)。

表4 不同鹽度條件下塔里木裂腹魚(yú)幼魚(yú)的死亡率Table 4 Lathal rate of S. biddulphi juveniles at different salinitiesN=560

塔里木裂腹魚(yú)幼魚(yú)的死亡率隨著時(shí)間延長(zhǎng)、堿度增加而增大 (表5)。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，對(duì)照組中幼魚(yú)未出現(xiàn)死亡，水質(zhì)始終保持清澈。幼魚(yú)在12 h堿度 85 mmol·L?1時(shí)未出現(xiàn)死亡，堿度為 105 mmol·L?1時(shí)死亡率達(dá)46.67%，第72小時(shí)全部死亡。死亡個(gè)體眼睛充血，腹部充滿(mǎn)腹水 (圖3-b)。

圖3 塔里木裂腹魚(yú)幼魚(yú)鹽中毒 (a) 和堿中毒 (b)Figure 3 Salt poisoning (a) and alkali poisoning (b) of S. biddulphi juveniles

表5 不同堿度條件下塔里木裂腹魚(yú)幼魚(yú)的死亡率Table 5 Lathal rate of S. biddulphi juveniles at different alkalinitiesN=560

塔里木裂腹魚(yú)幼魚(yú)24、48、72和96 h鹽度LC50分別為 4.01、3.62、3.29和 2.92 g·L?1，SC為 0.89 g·L?1；24、48、72和 96 h 堿度 LC50為 97.14、86.75、80.26和 74.52 mmol·L?1，SC為20.75 mmol·L?1(表 6)。

表6 塔里木裂腹魚(yú)幼魚(yú)的急性鹽度和堿度半致死濃度Table 6 Acute LC50 of S. biddulphi juveniles at different salinities and alkalinities

3 討論

在養(yǎng)殖過(guò)程中，幼魚(yú)對(duì)環(huán)境因子的變化非常敏感[19]。其中水溫是一個(gè)重要的環(huán)境因子，它可以通過(guò)改變幼魚(yú)體內(nèi)酶的活性，調(diào)節(jié)代謝過(guò)程中的能量收支，直接影響幼魚(yú)的發(fā)育和存活[20]。本實(shí)驗(yàn)中，水溫低于25 ℃時(shí)各組成活率差異不顯著 (P>0.05)；水溫高于25 ℃時(shí)各組成活率急劇下降。這與曾本和等[21]異齒裂腹魚(yú) (S. oconnori) 的研究結(jié)果相似，可能是因?yàn)樗锬玖迅刽~(yú)和異齒裂腹魚(yú)長(zhǎng)期生活在高海拔地區(qū)，水溫較低，魚(yú)體為適應(yīng)環(huán)境產(chǎn)生了耐低溫的能力。

魚(yú)類(lèi)攝食率是決定其生長(zhǎng)的重要因素之一[22]。本實(shí)驗(yàn)中，隨著水溫的升高，塔里木裂腹魚(yú)幼魚(yú)的攝食率呈現(xiàn)先升高后降低的變化趨勢(shì)，其體長(zhǎng)增長(zhǎng)率和特定生長(zhǎng)率與幼魚(yú)攝食率變化一致，這與胡發(fā)文等[23]對(duì)大瀧六線(xiàn)魚(yú) (Hexagrammos otakii)，牟振波等[24]對(duì)細(xì)鱗魚(yú) (Brachymystax lenok) 的研究結(jié)果一致。本實(shí)驗(yàn)中，塔里木裂腹魚(yú)幼魚(yú)在水溫20 ℃時(shí)攝食率達(dá)最高，與異齒裂腹魚(yú)[21]、細(xì)鱗魚(yú)[24]等冷水魚(yú)相似。

光周期與晝夜更替信號(hào)，刺激生物體內(nèi)節(jié)律調(diào)節(jié)系統(tǒng)和外界環(huán)境保持一致[25]。本實(shí)驗(yàn)中，光照時(shí)間對(duì)塔里木裂腹魚(yú)的生長(zhǎng)和存活有一定影響。幼魚(yú)是視覺(jué)性攝食動(dòng)物，依靠光照產(chǎn)生視覺(jué)反應(yīng)而進(jìn)行攝食[26]，本研究中全黑實(shí)驗(yàn)組因無(wú)光照，幼魚(yú)不能進(jìn)行正常攝食，最終在10 d內(nèi)全部死亡；幼魚(yú)成活率、攝食率、體長(zhǎng)增長(zhǎng)率和特定生長(zhǎng)率在8 L∶16 D、12 L∶12 D、16 L∶8 D 和 24 L∶0 D 組之間均差異顯著 (P<0.05)，這與對(duì)克氏雙鋸魚(yú) (Amphiprion clarkii)[27]、?？p鋸魚(yú) (A. percula)[28]的研究結(jié)果存在差異，可能是因?yàn)樗锬玖迅刽~(yú)生活在青藏高原上，海拔高、光照時(shí)間長(zhǎng)，其幼魚(yú)適應(yīng)了長(zhǎng)光照環(huán)境。

本研究中，光照強(qiáng)度達(dá)到500 lx時(shí)塔里木裂腹魚(yú)幼魚(yú)成活率、攝食率、體長(zhǎng)增長(zhǎng)率和特定生長(zhǎng)率均最大，而光照強(qiáng)度低于500 lx時(shí)，其成活率、攝食率和生長(zhǎng)率開(kāi)始下降，反映光照強(qiáng)度對(duì)其存活、攝食和生長(zhǎng)具有重要影響。筆者在克孜勒河進(jìn)行為期2個(gè)月的野外捕撈，發(fā)現(xiàn)塔里木裂腹魚(yú)幼魚(yú)喜在太陽(yáng)初升或黃昏時(shí)段于淺水區(qū)域進(jìn)行攝食，沒(méi)有被驚擾時(shí)喜在陽(yáng)光直射的中下水層聚集，這與本實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致。尖齒胡鯰 (Clarias gariepiinus) 在 0 lx 時(shí)獲得較快生長(zhǎng)速度[29]；豹紋鰓刺鱸 (Plectropomus leopardus) 幼魚(yú)在 3 000 lx光照條件下存活和生長(zhǎng)也可達(dá)到較好水平[30]；克氏雙鋸魚(yú)仔魚(yú)發(fā)育則需要較弱光照強(qiáng)度 (100～1 000 lx)[27]。不同魚(yú)類(lèi)對(duì)光照需求不同，光照對(duì)魚(yú)類(lèi)生長(zhǎng)的影響機(jī)制有待進(jìn)一步研究。

多因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，塔里木裂腹魚(yú)最佳存活、攝食、生長(zhǎng)條件為水溫12.98 ℃、每天光照時(shí)間15.07 h、光照強(qiáng)度670.27 lx，推斷其幼魚(yú)適宜在擁有低溫水源、長(zhǎng)光照時(shí)間的區(qū)域進(jìn)行規(guī)?；B(yǎng)殖，中國(guó)青藏高原及中國(guó)東北地區(qū)可滿(mǎn)足塔里木裂腹魚(yú)的大規(guī)模苗種培育工作。

鹽度可以通過(guò)影響?hù)~(yú)類(lèi)體內(nèi)滲透壓來(lái)干擾魚(yú)類(lèi)的正常生理活動(dòng)[31-32]。大部分魚(yú)類(lèi)可以通過(guò)魚(yú)鰓上三磷酸腺苷酶 (ATP酶)為離子轉(zhuǎn)運(yùn)提供載體和驅(qū)動(dòng)力，從而平衡滲透壓，其中Na+/K-ATPase可將K+向胞內(nèi)運(yùn)輸?shù)耐瑫r(shí)向胞外排出Na+，使胞內(nèi)Na+維持在一定水平[33-35]。本研究中，隨著鹽度的升高，4種裂腹魚(yú)幼魚(yú)的死亡率也隨之升高，96 h后無(wú)幼魚(yú)存活。裂腹魚(yú)幼魚(yú)從低滲環(huán)境轉(zhuǎn)變到高滲環(huán)境中，魚(yú)鰓的結(jié)構(gòu)和生理機(jī)能會(huì)發(fā)生明顯改變，魚(yú)鰓上Na+/K-ATPase活性受到抑制，K+/Na+與外界交換受阻，從而造成細(xì)胞損傷和魚(yú)類(lèi)死亡[36-37]。

不同研究中的實(shí)驗(yàn)條件和魚(yú)類(lèi)規(guī)格有所差異，但簡(jiǎn)單地將不同淡水魚(yú)類(lèi)鹽堿耐受能力進(jìn)行比較后發(fā)現(xiàn)，塔里木裂腹魚(yú)幼魚(yú)耐鹽堿能力較差，耐堿能力低于大鱗鲃 (Barbus capito)[41]、青海湖裸鯉(Gymnocypris przewalskii)[42]，與黑龍江泥鰍 (Misgurnus mohoity)[43]、灘頭雅羅魚(yú) (Tribolodon brandti)[44]耐堿能力相近；耐鹽能力低于松浦鏡鯉(Cyprinus carpio songpu)[41]、歐鲇 (Silurus glanis)[45]、黃鱔 (Monopterus albus)[46]等。推測(cè)可能是由于實(shí)驗(yàn)用魚(yú)體型偏小，魚(yú)體內(nèi)鹽堿緩沖體系尚未發(fā)育完善，導(dǎo)致其耐鹽堿能力較差；另外，本實(shí)驗(yàn)用水為新疆南疆地區(qū)地下水，水質(zhì)偏堿性且鹽度較高，也可能造成所測(cè)幼魚(yú)的鹽堿耐受能力偏弱。