甲狀腺乳頭狀癌組織中LAT1、VEGF水平與TNM分期的相關(guān)性

喬亮，葛東風(fēng)

（河南科技大學(xué)第一附屬醫(yī)院 病理科，河南 洛陽(yáng) 471000）

甲狀腺乳頭狀癌（PTC）是一種惡性程度較低的甲狀腺癌，早期主要采用手術(shù)方式進(jìn)行治療，但治療方案的制定與PTC的TNM分期密切相關(guān)［1］。L型氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)體1（LAT1）可促進(jìn)細(xì)胞增殖、血管生成，調(diào)控細(xì)胞周期；血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）可促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖、遷移、血管形成。研究［2］表明，LAT1、VEGF在PTC組織中呈異常高表達(dá)，由此推測(cè)LAT1、VEGF表達(dá)情況與PTC患者TNM分期具有一定聯(lián)系。鑒于此，本研究旨在分析PTC組織中LAT1、VEGF水平與TNM分期的相關(guān)性，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取2019年1月至2019年12月期間我院收治的PTC患者70例，其中男性29例、女性31例；年齡24~60歲，平均年齡（42.11±7.27）歲；BMI 16.50~26 kg／m2，平均BMI（21.25±1.46）kg／m2；腫瘤直徑0.4~4.7 cm，平均腫瘤直徑（2.55±1.04）cm。

1.2 入選標(biāo)準(zhǔn)納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合PTC診斷標(biāo)準(zhǔn)［3］，且經(jīng)組織病理學(xué)確診；②參與本研究前無(wú)相關(guān)疾病治療史。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并甲狀腺腺瘤；②合并甲狀腺結(jié)節(jié)、甲狀腺腫等其他類型的甲狀腺疾病。

1.3 方法

1.3.1 LAT1、VEGF檢測(cè) 收集患者的PTC組織標(biāo)本，應(yīng)用鏈霉菌抗生物素蛋白－過(guò)氧化物酶連結(jié)免疫組織化學(xué)染色法進(jìn)行IHC染色，切片3～4μm，常規(guī)脫蠟、脫水，應(yīng)用磷酸鹽緩沖溶液（PBS）清洗后，抗原修復(fù)，以體積分?jǐn)?shù)為3%的過(guò)氧化氫阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶，PBS清洗，滴加一抗，室溫下孵育10 min后放置在濕盒中，并置于4℃冰箱中保存12 h，PBS清洗，DAB顯色，蘇木精復(fù)染、脫水、封片，置于鏡下觀察，以PBS代替一抗作陰性對(duì)照。

1.3.2 TNM分期TNM分期標(biāo)準(zhǔn)參照《常見(jiàn)腫瘤AJCC分期手冊(cè)（第7版）》［4］： Ⅰ期：T1N0M0； Ⅱ期：T2N0M0； Ⅲ期：T3N0M0、T1N1aM0、T2N1aM0、T1N1aM0； Ⅳ期：T4aN0M0、T4aN1aM0、T1N1bM0、T2N1bM0、T3N1bM0、T4aN1bM0，T4b任何N、M0，任何T、任何N、M1。

1.3.3陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn) 選取高倍鏡下10個(gè)視野（每個(gè)視野至少包含200個(gè)細(xì)胞），LAT1細(xì)胞質(zhì)或（和）細(xì)胞膜為棕黃色顆粒樣為陽(yáng)性，VEGF細(xì)胞質(zhì)為棕黃色顆粒樣為陽(yáng)性。著色率：0分：無(wú)著色；1分：淺黃色；2分：黃色；3分：棕黃色。陽(yáng)性率（陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)／總細(xì)胞數(shù)×100%）：0分：陰性；1分：陽(yáng)性率＜10%；2分：陽(yáng)性 率11%~50%；3分：陽(yáng) 性率51%~75%；4分：陽(yáng)性率＞75%。兩項(xiàng)乘積為總評(píng)分。總評(píng)分＞9分為強(qiáng)陽(yáng)性（＋＋＋）、3~9分為中陽(yáng)性（＋＋）、1~2分為弱陽(yáng)性（＋）、0分為陰性（－）。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)。計(jì)數(shù)資料以百分比表示，等級(jí)資料采用秩和檢驗(yàn)；兩個(gè)有序分類變量之間采用Kendall＇s tau－b相關(guān)分析；P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 PTC患者TNM分期情況經(jīng)組織病理學(xué)證實(shí)，70例患者TNM分 期 情 況 如 下：Ⅰ期11例（15.71%），Ⅱ期31例（44.29%），Ⅲ期22例（31.43%），Ⅳ期6例（8.57%）。

2.2 不同TNM分期的PTC組織中LAT1、VEGF表達(dá)情況比較TNM分期的PTC組織中LAT1、VEGF陽(yáng)性表達(dá)強(qiáng)度：Ⅳ期>Ⅲ期>Ⅱ期>Ⅰ期，兩兩間比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05）。見(jiàn)表1、表2。

表1 不同TNM分期的PTC組織中LAT1表達(dá)情況（例）

表2 不同TNM分期的PTC組織中VEGF表達(dá)情況（例）

2.3 PTC組織中LAT1、VEGF表達(dá)與TNM分期的相關(guān)性相關(guān)性分析結(jié)果顯示，PTC組織中LAT1、VEGF表達(dá)與TNM分期呈正相關(guān)（r＝0.860、0.798，P＝0.000、0.000）。

3 討論

手術(shù)是PTC患者常用治療方式，但不同TNM分期患者手術(shù)方案存在一定的差異性，TNM分期Ⅲ期、Ⅳ期患者往往單一手術(shù)治療效果不甚理想，臨床上多采取綜合治療方案，以有效改善患者預(yù)后。因此，及時(shí)明確PTC患者TNM分期，對(duì)其臨床治療方案的制定具有重要指導(dǎo)意義。

本研究顯示，TNM分期越高，PTC組織中LAT1、VEGF陽(yáng)性表達(dá)越強(qiáng)；且PTC組織中LAT1、VEGF表達(dá)與TNM分期呈正相關(guān)，提示PTC組織中的LAT1、VEGF表達(dá)情況與PTC患者TNM分期密切相關(guān)。分析原因如下：LAT1可轉(zhuǎn)運(yùn)大中型氨基酸和芳香族中性氨基酸，其可與CD98結(jié)合形成二聚體復(fù)合物，參與腫瘤轉(zhuǎn)移、侵襲過(guò)程［5］；另外，LAT1可提供腫瘤細(xì)胞快速增殖過(guò)程中所需的氨基酸，其在腫瘤細(xì)胞中呈異常高表達(dá)，會(huì)促進(jìn)腫瘤細(xì)胞不斷增殖、分化、遷移，進(jìn)而促進(jìn)PTC病情進(jìn)展［2］。VEGF在體內(nèi)及體外均有較高生物活性，，VEGF在體外可促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)，在體內(nèi)可誘導(dǎo)血管增生，在低氧環(huán)境下可與內(nèi)皮細(xì)胞膜上的VEGF受體結(jié)合，誘發(fā)受體自身磷酸化，激活有絲分裂原活化蛋白激酶，促進(jìn)VEGF有絲分裂，誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞增生［6］。同時(shí)，VEGF可通過(guò)提高血漿酶原活化因子與血漿酶原活化因子抑制因子－1的mRNA表達(dá)，提高血漿酶原活化因子活性，促進(jìn)細(xì)胞外蛋白水解，進(jìn)一步促進(jìn)新生血管形成［7］。另外，VEGF在腫瘤增殖、分化、遷移等過(guò)程中發(fā)揮重要作用，可通過(guò)新生血管供給腫瘤細(xì)胞增殖、分化過(guò)程中所需的氧氣及營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖、轉(zhuǎn)移，增加TNM分期。

綜上所述，PTC組織中LAT1、VEGF水平與TNM分期密切相關(guān)，臨床上可通過(guò)測(cè)定PTC組織中LAT1、VEGF水平來(lái)評(píng)估TNM分期，為臨床治療方案的制定提供依據(jù)。