固相萃取/高效液相色譜法水中萘酚的測定研究

王巧利，岳云龍，肖 紅，劉秀平

(1.河南省許昌環(huán)境監(jiān)測中心，河南 許昌 461099；2.河南潔宇檢測技術有限公司，河南 許昌 461000)

1 引言

萘酚屬于等多環(huán)芳烴類物質(zhì)，有1-萘酚和2-萘酚兩種同分異構體，是醫(yī)藥、農(nóng)藥、燃料、化妝品生產(chǎn)合成等行業(yè)的重要中間體，有毒，對皮膚、黏膜由強烈的刺激作用，易經(jīng)皮膚吸收[1]。由于萘酚的化學性質(zhì)與萘酚相似，2019年環(huán)境行業(yè)標準[2]發(fā)布以前，萘酚都歸于揮發(fā)酚一類，測定方法是揮發(fā)酚的方法。萘酚的測定方法主要有紫外光譜法[3]、熒光光譜法[4～7]、高效液相色譜法、高效液相色譜質(zhì)譜法[8]、電化學分析法和聯(lián)用技術[9]，本文采取固相萃取前處理方法，利用高效液相色譜儀分離了2-萘酚和1-萘酚，并取得了很好的效果。

2 實驗儀器和試劑

2.1 儀器

安捷倫1260液相色譜儀，具有四元梯度泵和熒光檢測器(FLD)；液相色譜柱XDB-C18250 mm×4.6 mm×5 μm；GC-24型氮吹儀，北京優(yōu)晟聯(lián)合科技有限公司，Sepaths◎UP系列全自動固相萃取儀，萊伯泰科中國有限公司；超聲波清洗機，鄭州聲源儀器有限公司；TD5A型離心機，常州市萬豐儀器制造有限公司，渦旋混勻器SK-1，上?？等A生化儀器制造廠

2.2 試劑

甲醇、乙腈均為液相色譜純，實驗用水為超純水，實驗用試劑及純水使用前均用0.22 μm濾膜過濾除泡。

2.3 標準溶液的制備

2-萘酚購自北京振翔科技有限公司/24249；1-萘酚購自Dr.EhrenstorferGmbh/C15430500。

分別稱取2-萘酚0.1003 g和1-萘酚0.1001 g于燒杯中，加入100 mg抗壞血酸，并用甲醇溶解，轉(zhuǎn)移至100 mL棕色容量瓶中，甲醇稀釋并定容，混勻作為標準儲備液1000 mg/L；實驗室過程中用逐級稀釋法配制成標準中間液10.0 mg/L，標準使用液1.0 mg/L，再用逐級稀釋法配制成標準溶液系列。

3 結果與討論

3.1 液相色譜條件

柱溫35 ℃，流動相乙腈：甲醇溶液(W=0.2%)=47∶53(體積比)，柱流速1.0 mL/min，熒光檢測器激發(fā)波長228 nm，熒光檢測器發(fā)射波長425 nm，進樣量10 μL。

3.2 樣品前處理

渾濁水樣用渦旋混合器混勻，超聲3 min，離心機4000 r/min離心3 min，取上層清液通過自動固相萃取儀。較清潔水樣直接通過自動固相萃取儀。

固相萃取條件：甲醇和水依次通過C18固相萃取膜，進行膜活化，(1+1)甲醇和水為淋洗液，最后用甲醇洗脫，收集于固相萃取瓶中，氮吹至近干，定容待測。離心殘渣用8 mL甲醇超聲提取，0.22 μm濾膜過濾，氮吹，定容待測。

3.3 固相萃取條件的選擇

體積為1 L的樣品在相同萃取試劑、萃取程序條件下，分別用填料均為C18的萃取膜和萃取小柱進行萃取，結果顯示膜萃取的樣品，用時短，試劑用量少，故在實際實驗中應用膜萃取法萃取樣品。

3.4 標準曲線的繪制

用逐級稀釋的方法將2-萘酚標準溶液和1-萘酚標準溶液配制成濃度為2.0 μg/L、10.0 μg/L、100.0 μg/L、250.0 μg/L、500.0 μg/L的系列標準溶液，進樣10 μL，得到其色譜圖，詳見圖1。以濃度為橫坐標，峰面積為橫坐標，以最小二乘法繪制校準曲線。

圖1 2-萘酚和1-萘酚色譜

3.5 線性、相關性和檢出限

目標物標準序列濃度通過高效液相色譜儀分離得到不同濃度的響應值，通過線性方程擬合得到其標準曲線及相關系數(shù)。并以低濃度樣品作為試樣，重復測定7次，根據(jù)技術導則[10]中推薦方法計算方法的檢出限。具體結果詳見表1。

表1 2-萘酚和1-萘酚的線性、相關系數(shù)及檢出限

結果表明，2-萘酚和1-萘酚在2.0～500 μg/L范圍內(nèi)有良好的線性關系，相關系數(shù)均達到0.9995以上，兩種化合物的檢出限均為1.2 μg/L。

3.6 方法的精密度和加標回收

對濃度分別為2.0、25.0和200 μg/L，體積為1 L的試樣進行加標回收實驗，每份樣品測定7次，測定結果詳見表2。

表2 2-萘酚和1-萘酚的加標、平行分析結果

實驗數(shù)據(jù)表明，在相應的線性范圍內(nèi)，此方法對低、中、高濃度的樣品均有良好的精密度和較高的準確性。

4 結論

本文中2-萘酚和1-萘酚在2～500 μg/L范圍內(nèi)具有很好的線性，低、中、高濃度相對標準偏差分別為1.3、3.7、6.7和2.3、4.2、7.7，回收率范圍分別為：94.3%～113%和91.7%～115%。此方法具有簡單、快捷、精密性好、準確度高等優(yōu)點，且采用全自動固相萃取-膜萃取的方法進行前處理，既節(jié)省了實驗時間，也減少了有機試劑的使用，且保護了實驗室人員的身體健康和實驗室環(huán)境。