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    高效液相色譜法測(cè)定蛋制品中蘇丹紅含量

    2021-10-14 02:25:36
    現(xiàn)代食品 2021年15期
    關(guān)鍵詞:松花蛋蘇丹紅咸蛋

    ◎ 陳 潔

    (寧德市食品藥品檢驗(yàn)檢測(cè)中心,福建 寧德 352100)

    蘇丹紅又名蘇丹,是一類人工合成的工業(yè)染料,有Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ號(hào)4種[1-2]。該染料具有致癌性和致突變性,我國(guó)嚴(yán)令禁止將其用于食品加工中[3]。經(jīng)蘇丹紅染色后的食品色澤鮮艷且穩(wěn)定,不易掉色,因此一些無(wú)良商家違法將該染料添加至如辣椒粉、辣椒油、紅豆腐、紅心禽蛋等食品中。

    GB/T 19681—2005利用高效液相色譜測(cè)定蘇丹紅含量,樣品經(jīng)中性氧化鋁柱凈化,操作過(guò)程不僅煩瑣,且回收率不高。目前,主要采用液相色譜法[4-7]、液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法[8-12]、毛細(xì)管電泳法[13-14]、免疫分析法[15-17]以及各種電化學(xué)法[18-21]測(cè)定食品中蘇丹紅染料的含量。以上幾種檢測(cè)方法中,高效液相色譜儀價(jià)格相對(duì)便宜,操作簡(jiǎn)單,且精密度和準(zhǔn)確度高,使用比較普及。因此本研究以市售咸蛋、松花蛋為對(duì)象,利用蘇丹紅的親脂性,用強(qiáng)極性的有機(jī)溶劑作為提取液,旨在建立一種前處理簡(jiǎn)單、快速、高效的食品中蘇丹紅染料含量的HPLC-DAD分析檢測(cè)方法,進(jìn)一步完善蘇丹紅染料檢測(cè)體系,為食品中蘇丹紅染料的監(jiān)督檢驗(yàn)和殘留監(jiān)控提供技術(shù)參考。

    1 材料與方法

    1.1 材料與試劑

    標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì):蘇丹紅Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ(濃度:100 μg·mL-1,壇墨質(zhì)檢-國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中心)。乙腈、丙酮,色譜純;醋酸銨,分析純;實(shí)驗(yàn)用水:一級(jí)水。實(shí)驗(yàn)所用蛋制品(皮蛋、咸鴨蛋)為市售。

    1.2 儀器與設(shè)備

    1260高效液相色譜儀,安捷倫科技(中國(guó))有限公司;SQP電子天平,賽多利斯科學(xué)儀器(北京)有限公司;TDL-5-A高速離心機(jī),上海安亭科學(xué)儀器廠;WP-UP-YJ-20S超純水機(jī),四川沃特爾水處理設(shè)備有限公司。

    1.3 實(shí)驗(yàn)方法

    1.3.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

    分別準(zhǔn)確移取蘇丹紅Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ 4種標(biāo)準(zhǔn)品各1.0 mL,丙酮定容至10 mL,得到10 μg·mL-1的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。移取適量混合標(biāo)準(zhǔn)溶液,用乙腈稀釋成濃度為0.1~5.0 μg·mL-1系列標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。

    1.3.2 樣品前處理

    準(zhǔn)確稱取2 g(精確到0.001 g)樣品至50 mL具塞離心管中,加入提取液(90%丙酮水溶液)10.0 mL浸泡過(guò)夜。取出,超聲 30 min,8 000 r·min-1離心5 min。上清液經(jīng)0.45 μm有機(jī)濾膜過(guò)濾后上機(jī)測(cè)定。

    1.3.3 色譜條件

    色譜柱為Sepax Bio-C18(4.6 mm×150 mm,5 μm),A流動(dòng)相為0.02 mol·L-1醋酸銨水溶液(每L 0.02 mol·L-1醋酸銨水溶液添加6 mL 1‰(V/V)醋酸水溶液),B流動(dòng)相為乙腈,流速為1.0 mL·min-1,檢測(cè)波長(zhǎng)480 nm,進(jìn)樣量10 μL,柱溫40 ℃,梯度洗脫程序見表1。

    表1 流動(dòng)相洗脫梯度表

    2 結(jié)果與分析

    2.1 色譜條件優(yōu)化

    將染料蘇丹紅Ⅰ~Ⅳ混合標(biāo)準(zhǔn)溶液(濃度為10 μg·mL-1)進(jìn) 樣。在相同洗 脫 條 件 下,對(duì) 比 以0.02 mol·L-1醋酸銨和 0.02 mol·L-1醋酸銨水溶液(每L 0.02 mol·L-1醋酸銨水溶液添加6 mL 1‰(V/V)醋酸水溶液)作為流動(dòng)相時(shí)目標(biāo)物的洗脫效果。結(jié)果表明,以 0.02 mol·L-1醋酸銨水溶液(每 L 0.02 mol·L-1醋酸銨水溶液添加6 mL 1‰(V/V)醋酸水溶液)作為流動(dòng)相時(shí),可達(dá)到理想的分離效果,色譜圖見圖1。

    圖1 蘇丹紅Ⅰ~Ⅳ標(biāo)準(zhǔn)品溶液的色譜圖

    2.2 線性范圍及檢出限

    配制目標(biāo)物混合系列標(biāo)準(zhǔn)工作溶液(濃度為0.1 μg·mL-1、0.2 μg·mL-1、0.5 μg·mL-1、1.0 μg·mL-1、2.0 μg·mL-1和 5.0 μg·mL-1), 并 在 1.3.3 色 譜 條件下上機(jī)測(cè)試,繪制4種目標(biāo)物工作曲線。根據(jù)GB/T 27417—2017標(biāo)準(zhǔn)驗(yàn)證,本方法對(duì)于2.0 g樣品,定容至 10 mL,檢出限為 10 μg·kg-1,定量限為 30 μg·kg-1。

    繪制目標(biāo)物標(biāo)準(zhǔn)曲線。橫坐標(biāo)為目標(biāo)物濃度(X,μg·mL-1),縱坐標(biāo)為相應(yīng)的峰面積(Y),得到線性方程相關(guān)系數(shù)r2≥0.999 92,線性關(guān)系良好。具體見表2。

    表2 蘇丹紅Ⅰ~Ⅳ的線性方程、線性范圍及相關(guān)系數(shù)表

    2.3 加標(biāo)回收率及精密度

    在空白樣品(咸蛋及松花蛋)中添加3種不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)混合溶液,按照上述1.3.2樣品前處理方法及1.3.3色譜條件進(jìn)行6水平測(cè)定?;厥章蕿?9.1%~100.5%,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為0.88%~1.4%,滿足GB/T 27404—2008的質(zhì)控要求,結(jié)果見表3。

    表3 蘇丹紅Ⅰ~Ⅳ的平均回收率和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差表(n=6)

    2.4 樣品測(cè)定

    運(yùn)用本研究建立的實(shí)驗(yàn)方法,對(duì)市售的咸蛋、松花蛋各30批次進(jìn)行分析檢測(cè),結(jié)果顯示蘇丹紅Ⅰ~Ⅳ含量均低于檢出限(10 μg·kg-1)。

    3 結(jié)論與討論

    隨著經(jīng)濟(jì)和生活條件的改善,全社會(huì)對(duì)食品安全關(guān)注度也在不斷提升。而一些不法商家在利益的驅(qū)動(dòng)下,總能“推陳出新”地與科技斗智斗勇,在食品加工過(guò)程中添加禁用添加劑或?yàn)E用限用的添加劑,威脅人們“舌尖上的安全”。

    蘇丹紅在極性強(qiáng)的溶劑中有很好的溶解性,因此本研究以90%丙酮水溶液作為提取劑,采用高效液相法同時(shí)測(cè)定市售咸蛋、松花蛋中4種蘇丹紅染料的含量,大大提高了前處理效率,精密度好、回收率高,滿足檢測(cè)要求,為進(jìn)一步完善蘇丹紅染料檢測(cè)體系提供了理論參考。

    此次研究對(duì)市售咸蛋、松花蛋各30份樣品進(jìn)行了測(cè)定,蘇丹紅Ⅰ~Ⅳ含量均低于檢出限(10 μg·kg-1)。表明在法律和相關(guān)部門的監(jiān)管下,添加劑違規(guī)使用的情況有所好轉(zhuǎn),但仍需要持續(xù)關(guān)注和監(jiān)測(cè)。同時(shí),提醒消費(fèi)者應(yīng)盡量減少購(gòu)買顏色過(guò)分鮮艷的商品,發(fā)現(xiàn)有問(wèn)題的商品應(yīng)及時(shí)向有關(guān)部門舉報(bào),全民共治,營(yíng)造全社會(huì)食品安全宣傳的良好氛圍。

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