補(bǔ)體C3和C4聯(lián)合自身抗體檢測(cè)在系統(tǒng)性紅斑狼瘡臨床診斷中的應(yīng)用價(jià)值

王俊，向健

（天門市第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，湖北 天門 431700；2.天門市第一人民醫(yī)院輸血科，湖北 天門 431700）

系統(tǒng)性紅斑狼瘡是臨床常見(jiàn)的自身免疫性疾病，近年來(lái)受人們生活方式、飲食習(xí)慣及生存環(huán)境改變影響，其發(fā)病率呈逐年升高趨勢(shì)，若未積極接受治療，可對(duì)患者皮膚、漿膜、心腎組織、血液系統(tǒng)和中樞神經(jīng)系統(tǒng)造成嚴(yán)重?fù)p害，對(duì)患者造成極大痛苦，影響生活質(zhì)量[1]。系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者臨床表現(xiàn)復(fù)雜多樣，易漏診或誤診，因此，探尋一種敏感性和特異性較高的輔助診斷方法，對(duì)該病的診斷與鑒別診斷及提升疾病的治療效果及預(yù)后有重要意義[2-3]?；诖?，本研究旨在探討補(bǔ)體C3、C4聯(lián)合自身抗體檢測(cè)在系統(tǒng)性紅斑狼瘡臨床診斷中的應(yīng)用價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2017年5月至2019年2月本院收治的系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者53 例作為實(shí)驗(yàn)組，并選取同期接受健康體檢者50 名作為對(duì)照組。實(shí)驗(yàn)組男30 例，女23 例；年齡20～63 歲，平均（48.60±7.55）歲；病程1～10 年，平均（4.30±2.10）年。對(duì)照組男26 名，女24 名；年齡18～65 歲，平均（47.06±7.06）歲。兩組臨床資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，具有可比性。所有受檢者均對(duì)本研究知情同意，并自愿簽署知情同意書。本研究已通過(guò)醫(yī)院倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)。

1.2 納入及排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：臨床資料完整；可接受隨訪調(diào)查；實(shí)驗(yàn)組患者符合系統(tǒng)性紅斑狼瘡診斷標(biāo)準(zhǔn)；無(wú)實(shí)質(zhì)性臟器功能異常。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并其他肝、腎、心、肺等實(shí)質(zhì)性臟器功能障礙；伴其他凝血功能或免疫功能障礙；伴其他傳染性、血液性疾病，需隔離治療；伴智力障礙或神經(jīng)系統(tǒng)功能障礙，無(wú)法配合調(diào)查工作開(kāi)展；并發(fā)其他急慢性疾病。

1.3 儀器與方法

1.3.1 檢測(cè)儀器和試劑 生化分析儀購(gòu)自瑞士羅氏公司（型號(hào)：cobos c501）；IIF 檢測(cè)試劑盒購(gòu)自德國(guó)歐盟醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)診斷股份有限公司（生產(chǎn)批號(hào)：F131010UD）；ELISA 試劑盒購(gòu)自上?？菩律锛夹g(shù)股份有限公司（生產(chǎn)批號(hào)：ED130908）；線性免疫分析試劑盒購(gòu)自德國(guó)TMTEC公司（生產(chǎn)批號(hào)：300030）。

1.3.2 檢測(cè)方法 抽取所有受檢者清晨空腹肘靜脈血5 mL，使用無(wú)菌干燥試管收集，常規(guī)離心分離血清后等待檢測(cè)。采用間接免疫熒光法和免疫印跡法檢測(cè)抗體譜指標(biāo)，采用透射免疫比濁法檢測(cè)補(bǔ)體C3和C4水平，操作過(guò)程嚴(yán)格按照儀器和試劑使用說(shuō)明書操作。

1.4 觀察指標(biāo) 比較兩組血清中補(bǔ)體C3、C4 水平；比較兩組自身抗體檢測(cè)陽(yáng)性率，包括ANA、抗ds-DNA 抗體、抗Sm抗體、抗核小體抗體、抗組蛋白抗體、抗U1-RNP抗體和抗核糖體P蛋白抗體；分析實(shí)驗(yàn)組不同抗核抗體譜聯(lián)合檢測(cè)的敏感性和特異性。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料以“x±s”表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料組間率（%）的比較采用χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組血清補(bǔ)體C3、C4水平比較 實(shí)驗(yàn)組C3、C4水平均明顯低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表1。

表1 兩組血清補(bǔ)體C3、C4水平比較（x±s，g/L）Table 1 Comparison of serum complement C3 and C4 levels between the two groups(x±s,g/L)

2.2 兩組自身抗體檢測(cè)陽(yáng)性率比較 實(shí)驗(yàn)組ANA、抗ds-DNA抗體、抗Sm抗體、抗核小體抗體、抗組蛋白抗體、抗U1-RNP 抗體和抗核糖體P 蛋白抗體陽(yáng)性率均高于對(duì)照組（P＜0.05），見(jiàn)表2。

表2 兩組自身抗體檢測(cè)陽(yáng)性率比較（%）Table 2 Comparison of autoantibody positive rates between the two groups(%)

2.3 實(shí)驗(yàn)組自身抗體和血清補(bǔ)體聯(lián)合檢測(cè)與單獨(dú)檢測(cè)結(jié)果比較 自身抗體與血清補(bǔ)體聯(lián)合檢測(cè)漏診率低于單獨(dú)自身抗體和單獨(dú)血清補(bǔ)體檢測(cè)，敏感性高于單獨(dú)自身抗體和單獨(dú)血清補(bǔ)體檢測(cè)（P＜0.05），見(jiàn)表3。

表3 實(shí)驗(yàn)組自身抗體和血清補(bǔ)體聯(lián)合檢測(cè)與單獨(dú)檢測(cè)結(jié)果比較（%）Table 3 Comparison of results of combined detection of autoantibodies and serum complement in the experimental group with that of single detection(%)

3 討論

系統(tǒng)性紅斑狼瘡是臨床常見(jiàn)的免疫性疾病，發(fā)病多與遺傳、激素和環(huán)境因素密切相關(guān)，患者多伴有機(jī)體免疫調(diào)節(jié)紊亂，隨病情進(jìn)展逐漸出現(xiàn)局部或全身組織器官損害，若診治不及時(shí)，可能危及患者生命安全[4]。免疫學(xué)臨床研究發(fā)現(xiàn)，系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者多伴有B細(xì)胞功能亢進(jìn)，以及多克隆免疫球蛋白和自身抗體產(chǎn)生，還可呈現(xiàn)補(bǔ)體消耗現(xiàn)象，受經(jīng)典或旁路途徑激活后，補(bǔ)體C3、C4水平均明顯下降，通過(guò)檢測(cè)相關(guān)抗體和補(bǔ)體，可為系統(tǒng)性紅斑狼瘡診斷提供重要參考指標(biāo)[5]。

本研究結(jié)果表明，實(shí)驗(yàn)組血清補(bǔ)體C3、C4水平均低于對(duì)照組（P＜0.05），表明血清補(bǔ)體C3、C4 可作為系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者診斷的重要參考指標(biāo)，與Marta Mosca等[6-7]研究結(jié)果一致。補(bǔ)體C3、C4水平與人體體內(nèi)抗體數(shù)量密切相關(guān)，當(dāng)檢測(cè)結(jié)果下降時(shí)提示體內(nèi)抗體數(shù)量增多，這說(shuō)明機(jī)體有免疫激活特征，也間接反映機(jī)體可能有潛在發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)，這主要與補(bǔ)體介導(dǎo)的毒性作用有關(guān)[8]。系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者補(bǔ)體C3、C4水平均低于正常人群，提示患者機(jī)體其他抗體增多，免疫功能紊亂，這也是系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者重要特征之一。表明檢測(cè)血清補(bǔ)體C3、C4水平能為系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者的診斷及預(yù)后評(píng)估提供重要參考[9]。

本研究結(jié)果顯示，實(shí)驗(yàn)組ANA、抗ds-DNA 抗體、抗Sm抗體、抗核小體抗體、抗組蛋白抗體、抗U1-RNP抗體和抗核糖體P 蛋白抗體陽(yáng)性率均高于對(duì)照組（P＜0.05），表明自身抗體檢測(cè)的陽(yáng)性率可作為系統(tǒng)性紅斑狼瘡診斷的參考指標(biāo)。ANA、抗ds-DNA抗體和抗核抗體譜檢測(cè)對(duì)診斷系統(tǒng)性紅斑狼瘡具有較高的敏感性和特異性，主要是因?yàn)锳NA 是一種具有各種細(xì)胞核成分的抗體，可出現(xiàn)在自身免疫性疾病中，通過(guò)檢測(cè)其滴度高低以及核型分析，能初步診斷多種自身免疫性疾病[10]。但有研究[11]指出，單獨(dú)ANA 檢測(cè)對(duì)系統(tǒng)性紅斑狼瘡并無(wú)較高的敏感性和特異性，該抗體在系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者不同時(shí)期均可出現(xiàn)，需配合其他抗體檢測(cè)進(jìn)行綜合診斷?？筪s-DNA 抗體是系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者的標(biāo)志性抗體之一，對(duì)疾病診斷有較高的特異性，但敏感度低于ANA，不能通過(guò)單獨(dú)抗ds-DNA抗體檢測(cè)排除系統(tǒng)性紅斑狼瘡[12]。抗核小體抗體與系統(tǒng)性紅斑狼瘡、狼瘡性腎炎的發(fā)生和發(fā)展密切相關(guān)，抗核抗體譜中本身包含多種其他類型抗體，與ANA 及其他抗體聯(lián)合檢測(cè)在提升系統(tǒng)性紅斑狼瘡診斷中效果顯著[13]。

此外，本研究結(jié)果還顯示，兩項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)敏感性高于單項(xiàng)檢測(cè)，漏診率低于單項(xiàng)檢測(cè)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。補(bǔ)體是存在于動(dòng)物和人體組織液、血清中的一種活化蛋白質(zhì)，具有酶活性及補(bǔ)充特異性抗體介導(dǎo)溶血和免疫溶菌作用。近年來(lái)，檢測(cè)補(bǔ)體水平已成為臨床診斷免疫疾病的重要手段，多項(xiàng)臨床研究[14-15]指出，系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者血清補(bǔ)體水平降低，與病情進(jìn)展惡化程度密切相關(guān)。補(bǔ)體C3 主要起激活補(bǔ)體旁路途徑的作用，補(bǔ)體C4 具有防止免疫復(fù)合物沉著、促進(jìn)吞噬和中和病毒的作用，在各類傳染性疾病或炎癥疾病患者中數(shù)量增多，機(jī)體合成能力下降或消耗過(guò)多時(shí)下降[16-17]。

綜上所述，補(bǔ)體與自身抗體的聯(lián)合檢測(cè)能提高系統(tǒng)性紅斑狼瘡診斷的敏感性，降低漏診率，提高該病診斷的準(zhǔn)確率，對(duì)患者診療方案的制定和預(yù)后評(píng)估有積極意義，值得臨床推廣運(yùn)用。