血管性癡呆患者VILIP-1、MMP-9、ApoE水平變化及危險(xiǎn)因素分析

范月輝, 劉惠欽, 李偉峰, 呂士英, 何雪輝, 李獻(xiàn)軍

(河北省石家莊市第一醫(yī)院, 1. 神經(jīng)內(nèi)四科, 2. 影像中心, 3. 心內(nèi)一科, 河北 石家莊, 050000)

血管性癡呆(VD)屬于神經(jīng)系統(tǒng)常見疾病，近年來發(fā)病率呈升高趨勢(shì)，是由各種腦血管疾病引起的腦功能障礙而產(chǎn)生的一種獲得性智能損害綜合征，屬于慢性進(jìn)行性疾病，對(duì)患者生活質(zhì)量與身心健康產(chǎn)生嚴(yán)重的影響[1]。視錐蛋白樣蛋白-1(VILIP-1)屬于小分子量的胞質(zhì)蛋白，是神經(jīng)元鈣傳感蛋白視錐蛋白/恢復(fù)蛋白家族成員，主要在腦部神經(jīng)細(xì)胞中表達(dá)，可參與神經(jīng)元的鈣依賴型信號(hào)傳導(dǎo)，調(diào)節(jié)信號(hào)級(jí)聯(lián)放大效應(yīng)?；|(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)具有對(duì)細(xì)胞基質(zhì)降解和重塑的調(diào)節(jié)作用，同時(shí)也是腦組織發(fā)生病理變化的關(guān)鍵介質(zhì)之一。載脂蛋白E(ApoE)屬于多態(tài)性蛋白，與腦血管病變、動(dòng)脈粥樣硬化改變具有密切關(guān)系，但上述3種指標(biāo)在VD中的研究相對(duì)少見[2]。本研究分析了VD患者VILIP-1、MMP-9、ApoE的變化及危險(xiǎn)因素，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取本院2018年12月—2019年12月神經(jīng)內(nèi)科確診的VD患者116例為VD組，無認(rèn)知功能障礙的腦梗死患者110例為對(duì)照組。納入標(biāo)準(zhǔn): ① 腦梗死診斷標(biāo)準(zhǔn)參考2012年缺血性腦卒中診斷和診療質(zhì)量控制行業(yè)制訂的診斷標(biāo)準(zhǔn)[3]; ② 患者年齡19～79歲; ③ 符合VD的診斷標(biāo)準(zhǔn)者[4], 即初中及以上文化程度者簡(jiǎn)易精神狀態(tài)檢查量表(MMSE)評(píng)分<24分，小學(xué)文化程度者M(jìn)MSE評(píng)分<20分; ④ 腦卒中經(jīng)治療后病情穩(wěn)定者; ⑤ 研究方案獲得醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。排除標(biāo)準(zhǔn): ① 存在語言、理解及聽力功能障礙者; ② 存在顱腦外傷病史者; ③ 合并惡性腫瘤者; ④ 因阿爾茨海默病或其他原因引發(fā)的癡呆; ⑤ 存在抑郁、焦慮及躁狂等精神疾病者; ⑥ 文盲患者。VD組年齡55～79歲，平均年齡(66.3±6.3)歲; 男66例，女50例。對(duì)照組年齡51～79歲，平均年齡(65.0±8.1)歲; 男57例，女53例。2組患者年齡、性別比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

1.2 研究方法

采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)血漿中VILIP-1、MMP-9、ApoE的水平。入院后1 d抽取患者空腹靜脈血3 mL, 2 000轉(zhuǎn)/min離心30 min分離血清檢測(cè)，試劑盒由江蘇依科賽生物科技有限公司提供，儀器為日立公司生產(chǎn)的7600i全自動(dòng)生化分析儀，操作過程嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行。

收集VD組和對(duì)照組年齡、性別、體質(zhì)量指數(shù)(BMI)、吸煙、飲酒、合并疾病、腦梗死部位、梗死病灶大小、入院時(shí)美國國立衛(wèi)生研究院卒中量表(NIHSS)評(píng)分、入院時(shí)格拉斯哥昏迷量表(GCS)評(píng)分、MMSE評(píng)分、頸動(dòng)脈斑塊檢出率。MMSE量表[5]主要包括定向力(10分)、注意力和計(jì)算力(5分)、記憶力(3分)、回憶能力(3分)、語言能力(9分)等條目，總分為30分，評(píng)分越高代表患者認(rèn)知功能越好。NIHSS主要包括意識(shí)水平、凝視、視野、面癱、上肢運(yùn)動(dòng)、下肢運(yùn)動(dòng)、肢體共濟(jì)失調(diào)、感覺、語言、構(gòu)音障礙等項(xiàng)目，總分0～42分，評(píng)分越高表示患者神經(jīng)缺損功能越嚴(yán)重。GCS最高分為15分，表示意識(shí)清楚; 12～14分為輕度意識(shí)障礙; 9～11分為中度意識(shí)障礙; 8分及以下為昏迷; 分?jǐn)?shù)越低提示意識(shí)障礙越嚴(yán)重。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié) 果

2.1 2組一般資料比較

VD組和對(duì)照組的年齡、性別、BMI、吸煙、飲酒、合并疾病、入院時(shí)GCS評(píng)分比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05); VD組入院時(shí)NIHSS評(píng)分、腦梗死部位、梗死病灶大小、頸動(dòng)脈斑塊檢出率與對(duì)照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 2組一般資料比較

2.2 2組血清VILIP-1、MMP-9、ApoE水平比較

VD組血清VILIP-1、MMP-9、ApoE水平高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05), 見表2。

表2 2組血清VILIP-1、MMP-9、ApoE水平比較

2.3 2組患者M(jìn)MSE評(píng)分比較

VD組的定向力、注意力和計(jì)算力、記憶力、回憶能力、語言能力、MMSE總分高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05), 見表3。

表3 2組患者M(jìn)MSE評(píng)分比較 分

2.4 相關(guān)性分析

VD組血清VILIP-1、MMP-9、ApoE水平與MMSE總分均呈顯著負(fù)相關(guān)(r=-0.577、-0.463、-0.481,P=0.001、0.002、0.001)。

2.5 多因素分析結(jié)果

以患者是否發(fā)生VD作為因變量，以血清VILIP-1、MMP-9、ApoE水平，入院時(shí)NIHSS評(píng)分，腦梗死部位、梗死病灶大小以及頸動(dòng)脈斑塊檢出率作為因變量，建立Logistic回歸模型。結(jié)果顯示，血清VILIP-1、MMP-9、ApoE水平增高，入院時(shí)NIHSS評(píng)分較高，額葉部位腦梗死以及大梗死病灶是腦梗死患者并發(fā)VD的獨(dú)立危險(xiǎn)因素(P<0.05), 見表4。

表4 腦梗死患者并發(fā)VD的多因素分析結(jié)果

3 討 論

VD是由于腦血管病變所致的認(rèn)知功能障礙及神經(jīng)功能障礙，動(dòng)脈粥樣硬化、血管炎癥反應(yīng)參與這一病理損傷過程。炎癥反應(yīng)使血管內(nèi)皮受損，氧化修飾后的脂蛋白沉積于受損的內(nèi)皮，產(chǎn)生泡沫細(xì)胞，繼而引起動(dòng)脈粥樣硬化，影響神經(jīng)元供血、供氧[3-4]。長期處于低灌注狀態(tài)下神經(jīng)元線粒體功能障礙，自由基大量生成，導(dǎo)致神經(jīng)元功能受損，主導(dǎo)認(rèn)知功能的神經(jīng)元環(huán)路傳遞中斷，繼而發(fā)生VD[5]。研究[6-7]發(fā)現(xiàn)炎癥反應(yīng)和氧化應(yīng)激反應(yīng)在VD發(fā)生發(fā)展中也起到重要作用，炎癥反應(yīng)加劇會(huì)導(dǎo)致腦損傷加重和認(rèn)知功能減退，許多促氧化劑和抗氧化酶都參與氧化應(yīng)激反應(yīng)，進(jìn)而導(dǎo)致神經(jīng)元損傷。動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生會(huì)導(dǎo)致患者血管異常，隨著病程的延長或由于突發(fā)腦卒中導(dǎo)致患者神經(jīng)功能損傷，進(jìn)而演變?yōu)閂D。VD是中老年人群中發(fā)病率較高的神經(jīng)系統(tǒng)疾病，嚴(yán)重影響其生活質(zhì)量和身心健康。因此，對(duì)VD發(fā)病危險(xiǎn)因素進(jìn)行研究，有利于早期診斷及干預(yù)，提高患者生活質(zhì)量，減輕家庭及社會(huì)負(fù)擔(dān)[8]。

本研究分析了VD發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)因素，額葉部位腦梗死是腦梗死患者并發(fā)VD的高風(fēng)險(xiǎn)因素。額葉部位梗死會(huì)導(dǎo)致患者額葉-皮質(zhì)功能異常，患者抽象思維、概念形成以及轉(zhuǎn)換信息等受到干擾，尤其是執(zhí)行功能損傷突出，因此更容易并發(fā)VD[8]。NIHSS評(píng)分是評(píng)價(jià)患者神經(jīng)功能缺損情況的量表，評(píng)分越高提示患者神經(jīng)功能缺損越嚴(yán)重，表明患者認(rèn)知功能損傷更為嚴(yán)重[9]。目前對(duì)于癡呆發(fā)生后早期識(shí)別尚無特異性方法，神經(jīng)心理學(xué)量表檢查主要是針對(duì)患者所有認(rèn)知領(lǐng)域功能，但是腦梗死患者早期的認(rèn)知損傷主要為執(zhí)行功能損傷，量表缺乏特異性針對(duì)執(zhí)行功能的評(píng)估，因此早期診斷不具有特異性[10]。本研究尋找更為敏感、可靠的細(xì)胞因子在急性腦梗死合并癡呆患者中的變化，以期為臨床進(jìn)一步早期診斷及開展治療奠定基礎(chǔ)。

本研究對(duì)VILIP-1、MMP-9、ApoE等指標(biāo)進(jìn)行了分析，MMP-9參與白細(xì)胞滲入過程，可減少中性粒細(xì)胞滲透進(jìn)腦損傷部位，MMP-9濃度降低可使中性粒細(xì)胞產(chǎn)生的毒素增多，間接產(chǎn)生神經(jīng)毒性作用，除了神經(jīng)元死亡、炎癥及沉積血液的毒性，還可以改變血液動(dòng)力學(xué)和生理血流過程[11]。MMP-9主要發(fā)揮炎癥介質(zhì)作用，在梗死發(fā)生后，釋放于細(xì)胞外液中的MMP-9顯著增加，且梗死時(shí)間越長或病情越嚴(yán)重者，MMP-9的峰值濃度越高，神經(jīng)損傷越嚴(yán)重[12]。視錐蛋白樣蛋白-1屬于神經(jīng)元鈣傳感蛋白視錐蛋白/恢復(fù)蛋白家族，通過神經(jīng)元的鈣依賴型信號(hào)系統(tǒng)進(jìn)行細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)，視錐蛋白樣蛋白-1與鈣離子進(jìn)行結(jié)合發(fā)生不同的結(jié)構(gòu)變化，從而傳導(dǎo)不同的下游信號(hào)[13]。視錐蛋白樣蛋白-1在腦組織中表達(dá)較高，通過影響tau蛋白的磷酸化以及β-淀粉樣蛋白沉積從而影響疾病進(jìn)程，造成神經(jīng)元細(xì)胞生理功能的缺失[14]。ApoE則是多態(tài)性蛋白，與動(dòng)脈硬化、腦血管病變、心血管疾病發(fā)生之間存在密切關(guān)系。ApoE是乳糜微顆粒殘基受體、低密度脂蛋白受體的配基，可以介導(dǎo)細(xì)胞對(duì)脂蛋白的攝取，會(huì)造成脂質(zhì)發(fā)生內(nèi)吞，膽固醇濃度顯著升高，加重血管硬化[15]。

本研究顯示，VD組患者入院時(shí)NIHSS評(píng)分、腦梗死部位、梗死病灶大小、頸動(dòng)脈斑塊檢出率與對(duì)照組比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05), 提示VD患者NIHSS評(píng)分更高，與梗死部位、病灶大小以及頸動(dòng)脈斑塊形成之間關(guān)系密切。VD組的血清VILIP-1、MMP-9、ApoE水平高于對(duì)照組，提示在VD患者體內(nèi)VILIP-1、MMP-9、ApoE濃度顯著升高。VD組的定向力、注意力和計(jì)算力、記憶力、回憶能力、語言能力、MMSE總分低于對(duì)照組，提示VD患者認(rèn)知功能損傷更嚴(yán)重。VD組的血清VILIP-1、MMP-9、ApoE水平與MMSE總分均呈顯著負(fù)相關(guān)關(guān)系，Logistic回歸分析發(fā)現(xiàn)，血清VILIP-1、MMP-9、ApoE水平增高及入院時(shí)NIHSS評(píng)分較高、額葉部位腦梗死、大梗死病灶是腦梗死患者并發(fā)VD的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，提示臨床對(duì)于存在上述高位因素的腦梗死患者應(yīng)密切關(guān)注，采取積極的預(yù)防措施，以減少其VD發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)。

目前國內(nèi)外對(duì)于VD的研究樣本來源多集中于腦脊液方向，在血液生物學(xué)指標(biāo)的研究上開展相對(duì)較少，而血液學(xué)指標(biāo)獲取相對(duì)便捷，更具有研究價(jià)值。本研究分析表明VILIP-1、MMP-9、ApoE可作為參考血清學(xué)指標(biāo)，該類指標(biāo)臨床應(yīng)用效果令人滿意，具有低成本、無輻射、動(dòng)態(tài)實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)等優(yōu)點(diǎn)。但本研究樣本量較小，未納入病情較重、不能配合的認(rèn)知障礙患者，存在一定的納入偏倚，同時(shí)上述指標(biāo)變化的具體機(jī)制也未能深入分析，因此還需進(jìn)一步完善實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和方法，以深入探討病理機(jī)制。

綜上述所，血清VILIP-1、MMP-9、ApoE水平升高會(huì)增加腦梗死患者并發(fā)VD的風(fēng)險(xiǎn)，患者認(rèn)知受損程度同上述血清學(xué)指標(biāo)具有一定關(guān)聯(lián)，監(jiān)測(cè)上述指標(biāo)，有助于指導(dǎo)臨床預(yù)防癡呆的發(fā)生以及早期干預(yù)。