急性腦梗死患者頸動脈粥樣硬化斑塊特性與血漿正五聚蛋白3、超敏C反應(yīng)蛋白的相關(guān)性研究

曹雄彬, 宮 麗, 符鵬程, 劉淑云, 劉祥玉, 羅 翰, 陳永振, 林 昊, 趙增霞, 孫紅丹, 孫紅娟

(1. 廣東省深圳市龍華區(qū)中心醫(yī)院 神經(jīng)內(nèi)科, 廣東 深圳, 518110;2. 廣東省深圳市龍華區(qū)人民醫(yī)院 藥學(xué)部, 廣東 深圳, 518006;3. 中山大學(xué)第一附屬醫(yī)院 血管外科, 廣東 廣州, 510080)

急性腦梗死(ACI)是常見的顱腦疾病[1], 即便及時得到了治療，還是會留下不同程度后遺癥，導(dǎo)致患者喪失部分勞動力。動脈粥樣硬化(AS)是ACI的重要病理基礎(chǔ)，頸動脈既是負責(zé)大腦前部血液輸送的重要血管，又是最易檢測的動脈，因此臨床首選頸動脈粥樣硬化評估全身動脈粥樣硬化情況[2]。隨著近年來血管影像學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，頸動脈超聲因具備價廉、快捷、安全、可重復(fù)等多種優(yōu)點，可早期探測頸動脈斑塊形成，計算狹窄程度，有效幫助臨床防治不良血管事件。超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)是一種敏感炎癥標(biāo)志物，可通過介導(dǎo)免疫應(yīng)答使炎性介質(zhì)出現(xiàn)，從而損傷血管壁，在促進管腔狹窄和動脈粥樣硬化中扮演重要角色[3]。正五聚蛋白3(PTX3)與hs-CRP一樣均屬于正五聚蛋白超家族的一員，為一種急性炎癥時相蛋白，可在病變血管局部形成正反饋，強化組織因子表達，對斑塊穩(wěn)定造成影響，并能促進血栓形成，進而引起多種不良血管事件[4]。本研究觀察血漿hs-CRP和PTX3與ACI患者頸動脈粥樣硬化斑塊特性的關(guān)系，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019年1月—2020年1月收治的120例ACI患者為研究對象，均經(jīng)CT或MRI檢查確診，根據(jù)頸動脈彩超檢查結(jié)果分為3組。不穩(wěn)定斑塊組(USP組)40例，其中男23例，女17例; 年齡35～85歲，平均(63.82±10.68)歲; 體質(zhì)量指數(shù)(BMI)21～30 kg/m2, 平均(24.82±3.64) kg/m2; 高血壓史28例，飲酒史13例，吸煙史20例。穩(wěn)定斑塊組(SP組)42例，其中男23例，女19例; 年齡35～86歲，平均(62.51±11.83)歲; BMI 21～30 kg/m2, 平均(25.71±3.62) kg/m2; 高血壓史28例，飲酒史10例，吸煙史15例。無斑塊組(NP組)38例，其中男21例，女17例; 年齡35～85歲，平均(61.27±12.32)歲; BMI 21～29 kg/m2, 平均(24.32±3.18) kg/m2; 高血壓史20例，飲酒史8例，吸煙史12例。納入標(biāo)準(zhǔn): ① 符合《中國急性缺血性腦卒中診治指南2014》[5]中ACI診斷標(biāo)準(zhǔn)者; ② 年齡≥35歲者; ③ 首次發(fā)病且入院時間≤72 h者; ④ 患者及家屬均知情同意; ⑤ 無重要臟器功能不全者; ⑥ 頸動脈內(nèi)膜中層厚度(CIMT)≥1.2 mm者。排除標(biāo)準(zhǔn): ① 近1個月內(nèi)服用類固醇、免疫接種史、感染發(fā)熱者; ② 近3個月外傷及手術(shù)病史者; ③ 周圍血管病者; ④各種心臟疾病引起的心源性腦栓塞者; ⑤ 出血性腦血管病者。另外選取同時期40例健康體檢者為對照組，其中男19例，女21例; 年齡35～82歲，平均(61.84±12.63)歲; BMI 21～38 kg/m2, 平均(25.63±3.58) kg/m2; 高血壓史21例，飲酒史9例，吸煙史13例。4組研究對象一般資料比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。本研究經(jīng)倫理委員會批準(zhǔn)。

1.2 方法

1.2.1 生化指標(biāo)檢測: 抽取所有研究對象清晨空腹靜脈血5 mL, 2 h內(nèi)3 000轉(zhuǎn)/min離心10 min, 離心半徑60 mm, 取上清液置于EP管，放入-80 ℃冰箱中待檢。采用血細胞分析儀(邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司，型號BC-5800) 檢測中性粒細胞計數(shù)(NEUT)和白細胞計數(shù)(WBC); 采用全自動生化儀(邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司，型號BS-380)檢測同型半胱氨酸(Hcy)、脂蛋白(a)[LP(a)]、高密度脂蛋白膽固醇 (HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇 (LDL-C)、總膽固醇 (TC)、三酰甘油 (TG); 采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測PTX3; 酶聯(lián)免疫測定儀由美國Biotek公司提供，試劑盒由上海研域生物技術(shù)有限公司提供，所有操作嚴(yán)格按照說明書進行。

1.2.2 頸動脈超聲檢查: 采用彩色多普勒超聲診斷儀(邁瑞DC-N2S，頻率范圍5～10 MHz)檢查頸動脈，由專業(yè)資質(zhì)超聲醫(yī)師根據(jù)《中國健康體檢人群頸動脈超聲檢查規(guī)范》[6]對患者進行檢查，受檢者取仰臥位，頭部偏向一側(cè)，使頸部充分暴露，取雙側(cè)頸動脈和分叉處及顱外段，了解顱外段管腔和管壁情況，取各位置平均值作為CIMT值。詳細記錄斑塊位置、范圍、有無血流、內(nèi)部回聲、形態(tài)等情況。頸動脈粥樣硬化斑塊標(biāo)準(zhǔn): 超聲提示，頸動脈管腔內(nèi)某區(qū)域血流中斷，充盈缺損，直徑大于10 mm; 或內(nèi)膜中層不均勻、不連續(xù)的增厚，突入管腔并隆起，病變區(qū)域內(nèi)-中層厚度為正常區(qū)域1.5倍。(1) 穩(wěn)定斑塊。頸動脈粥樣斑塊質(zhì)地及與周圍組織比較呈強回聲，表面光滑; (2) 不穩(wěn)定斑塊。① 斑塊內(nèi)有血流信號; ② 表面不光滑，存在火山口樣龕影; ③ 偏心指數(shù)>2; ④ 同時存在不穩(wěn)定與穩(wěn)定斑塊。符合以上任意一項即可定義為不穩(wěn)定斑塊[7]。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理

2 結(jié) 果

2.1 一般生化指標(biāo)比較

4組HDL-C、LDL-C、TC、TG水平比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05); USP組、SP組和NP組平Hcy、NEUT、WBC、LP(a)水平高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 4組一般生化指標(biāo)比較

2.2 4組血漿PTX3、hs-CRP水平及CIMT比較

USP組、SP組、NP組血漿PTX3、hs-CRP水平高于對照組, CIMT大于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05), 見表2。

表2 4組血漿PTX3、hs-CRP水平及CIMT比較

2.3 血漿PTX3、hs-CRP水平與CIMT的相關(guān)性分析

Pearson相關(guān)性分析顯示，血漿PTX3、hs-CRP水平與CIMT呈正相關(guān)(P<0.05), 見圖1。

A: PTX3與CIMT的相關(guān)性; B: hs-CRP與CIMT的相關(guān)性。

2.4 ACI相關(guān)危險因素的多因素Logistics回歸分析

以是否出現(xiàn)ACI為因變量(是=1, 否=0), Hcy、NEUT、WBC、LP(a)、PTX3、hs-CRP水平為自變量。多因素Logistics回歸分析顯示, Hcy、PTX3、hs-CRP為ACI發(fā)病的獨立影響因素(P<0.05), 見表3。

表3 ACI相關(guān)危險因素的多因素Logistics回歸分析

2.5 ACI患者頸動脈粥樣硬化斑塊相關(guān)因素的多因素Logistics回歸分析

以ACI患者頸動脈粥樣硬化斑塊穩(wěn)定性因變量(USP=1, SP=0), Hcy、NEUT、WBC、LP(a)、PTX3、hs-CRP水平為自變量，原值錄入。多因素Logistics回歸分析顯示, PTX3和hs-CRP為頸動脈不穩(wěn)定斑塊的獨立影響因素(P<0.05)。見表4。

表4 ACI患者頸動脈粥樣硬化斑塊相關(guān)因素的多因素Logistics回歸分析

3 討 論

顱外頸動脈或顱內(nèi)腦AS是導(dǎo)致ACI的主要病理基礎(chǔ)和核心環(huán)節(jié)，其中頸動脈是腦動脈的一支起始血管，大腦80%的血流量均需通過該血管輸送，因此其病變情況與ACI的發(fā)生、發(fā)展、預(yù)后、復(fù)發(fā)等關(guān)系密切[8]。研究[9]顯示，頸動脈病變與30%的腦血管病有關(guān)聯(lián)，目前研究均支持頸動脈病變引發(fā)ACI, 主要有2種觀點，一種是動脈-動脈栓塞型，另一種是血流動力學(xué)末端低灌注型，雖然目前尚不清楚上述何種學(xué)說在ACI中起作用，但均與AS不穩(wěn)定性有關(guān)，在局部炎癥反應(yīng)、免疫反應(yīng)增強、斑塊內(nèi)脂質(zhì)代謝紊亂等眾多引起斑塊不穩(wěn)定的機制中，也有炎癥因子的參與，所以若能在源頭處抑制不穩(wěn)定因素形成，可有效降低ACI發(fā)生率，改善患者預(yù)后。中國很多偏遠地區(qū)人口多，缺乏顱腦影像檢查和相關(guān)醫(yī)療技術(shù)，因此生物學(xué)標(biāo)志物成為客觀檢測指標(biāo)[10]。

AS形成和發(fā)展為低級慢性炎癥過程, hs-CRP是臨床一種測量低水平炎癥的方法[11]。李婉珍等[12]研究顯示，感染為AS主要病因，與動脈血管紊亂有關(guān)，能夠增高動脈粥樣硬化因子水平，最終損傷內(nèi)皮，引起炎性反應(yīng)。出現(xiàn)炎癥反應(yīng)時，機體會釋放CRP, 并將補體系統(tǒng)激活，產(chǎn)生大量攻擊產(chǎn)物，損傷血管內(nèi)膜，同時CRP還能結(jié)合單核細胞誘導(dǎo)組織因子表達，促進凝血，并能結(jié)合凋亡細胞，降低一氧化氮(NO)和NO合酶表達，增加細胞粘著分子-1(CAM-1), 促進AS的發(fā)生。目前大量研究[13]證實, hs-CRP與周圍血管疾病、腦血管疾病、冠心病等有密切關(guān)系。本研究結(jié)果顯示, USP組、SP組、NP組血漿hs-CRP水平高于對照組，且USP組、SP組、NP組血漿hs-CRP水平逐漸降低，說明ACI患者血漿hs-CRP水平顯著提升，且與頸動脈粥樣硬化斑塊穩(wěn)定性有密切關(guān)系。CIMT是臨床常用的全身AS評價指標(biāo)，可預(yù)測多種心腦血管事件的發(fā)生。一項研究[14]顯示, CIMT為腦卒中獨立危險因素, CIMT每增加1個標(biāo)準(zhǔn)差，腦卒中發(fā)生率就增高1.36倍。本研究結(jié)果顯示，血漿hs-CRP水平與CIMT呈正相關(guān)，進一步提示hs-CRP水平能評估AS程度。多因素Logistic回歸分析顯示, hs-CRP為ACI發(fā)病和頸動脈不穩(wěn)定斑塊的獨立危險因素(P<0.05), 說明hs-CRP能作為臨床診療頸動脈硬化和發(fā)生ACI的生物標(biāo)志物。PTX3與CRP為同一家族，主要由初級炎癥反應(yīng)信號刺激巨噬細胞、平滑肌、血管內(nèi)皮細胞等在病變局部合成[15]。研究[16]發(fā)現(xiàn)，在急性心肌梗死患者出現(xiàn)癥狀6～8 h內(nèi)，血漿PTX3水平達到了高峰，進一步分析發(fā)現(xiàn)，肥大心肌和正常心肌中均存在PTX3, 但在壞死心肌中未發(fā)現(xiàn)PTX3, 因此推測PTX3為心肌細胞不可逆壞死的預(yù)測因子。LUO X Y等[17]研究顯示，血漿PTX3水平與急性冠狀動脈綜合征患者再發(fā)心血管等不良事件的發(fā)生率呈正相關(guān)。研究[18]發(fā)現(xiàn)，在病變局部, PTX3能通過促進外源性凝血系統(tǒng)讓周圍處于凝狀態(tài)促進血栓形成，并能結(jié)合補體長片段C1q, 將經(jīng)典補體途徑激活，促進細胞凋亡和黏附分子釋放，促進血管組織損傷加重。易立等[19]研究顯示，平滑肌細胞脂質(zhì)過氧化過程中，氧化LDL-C能誘導(dǎo)PTX3表達，并促進其增加70倍，加重炎癥反應(yīng)。LGEN U等[20]研究顯示, PTX3能結(jié)合纖維母細胞生長因子2(FGF2)形成PTX3/FGF2復(fù)合物，競爭性抑制自身作用，進而形成高危斑塊。本研究結(jié)果顯示, USP組、SP組、NP組血漿PTX3水平高于對照組，且USP組、SP組、NP組血漿PTX3水平逐漸降低，說明ACI患者血漿PTX3水平顯著提升，且與頸動脈粥樣硬化斑塊穩(wěn)定性有密切關(guān)系。本研究結(jié)果顯示，血漿PTX3水平與CIMT呈正相關(guān)(P<0.05), 進一步提示血漿PTX3能評估AS嚴(yán)重程度，同時多因素Logistic回歸分析顯示, PTX3為ACI發(fā)病和頸動脈不穩(wěn)定斑塊的獨立危險因素(P<0.05), 說明PTX3能作為臨床診療頸動脈硬化和發(fā)生ACI的生物標(biāo)志物。

綜上所述, ACI患者血漿PTX3、hs-CRP水平明顯提升，且與頸動脈粥樣硬化斑塊穩(wěn)定性密切相關(guān)，因此早期監(jiān)測有助于預(yù)測ACI的發(fā)生。