聯(lián)合檢測(cè)腫瘤標(biāo)志物和自身抗體對(duì)非小細(xì)胞肺癌早期診斷的臨床價(jià)值

翟展藝 趙 沖 李海明 李春苗 年立全 李寧寧

肺癌早期缺乏特異的臨床癥狀和體征，發(fā)現(xiàn)時(shí)都已較晚。根據(jù)調(diào)查顯示，非小細(xì)胞肺癌總的5 年生存率最高在15%左右，但是早期非小細(xì)胞肺癌5年生存率高達(dá)80%[1]。因此提高肺癌患者的生存率，關(guān)鍵在于肺癌早期的診斷。肺癌診斷的金標(biāo)準(zhǔn)是組織病理學(xué)和細(xì)胞病理學(xué)檢查，其具有特異性高的特點(diǎn)，缺點(diǎn)是對(duì)患者身體具有創(chuàng)傷性，部分患者無(wú)法接受。而肺部組織活檢的結(jié)果判定也極其復(fù)雜，臨床存在由于在活檢取材過(guò)程中未取到病變組織而誤診的情況，并且其結(jié)果的判定也取決于判讀結(jié)果的病理醫(yī)生，因此活檢結(jié)果也存在較大的不確定性。醫(yī)學(xué)影像學(xué)近年來(lái)得到了長(zhǎng)足的發(fā)展，考慮到其檢查的價(jià)格高昂性與結(jié)果判讀的不確定性，并不適合作為早期篩查的方法進(jìn)行大范圍推廣。而肺癌患者的血清學(xué)變化往往先于臨床影像學(xué)變化，其特性為雖然正常或良性病變者有幾率升高，但早期無(wú)癥狀癌變患者的升高比起臨床癥狀和影像學(xué)表現(xiàn)更能引起檢測(cè)者的注意[2]。

近年來(lái)，隨著研究的不斷深入，腫瘤標(biāo)志物和自身免疫抗體對(duì)早期肺癌的診斷均有提示作用。腫瘤在生長(zhǎng)過(guò)程中，會(huì)自發(fā)產(chǎn)生或刺激宿主產(chǎn)生一類(lèi)在正常組織內(nèi)含量低下或不存在的物質(zhì)，我們稱其為腫瘤標(biāo)志物。通過(guò)檢測(cè)人群血清中腫瘤標(biāo)志物可進(jìn)一步提高肺癌的檢出率，對(duì)診斷具有一定的指導(dǎo)意義。本研究擬針對(duì)3種腫瘤標(biāo)志物(CYFRA21-1、CEA和SCC)和3種自身抗體(p53、CAGE和PGP9.5)的聯(lián)合檢測(cè)方法在肺癌臨床診斷中的價(jià)值進(jìn)行探討，為聯(lián)合檢測(cè)腫瘤標(biāo)志物和自身免疫抗體的臨床應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 病例選取

病例來(lái)自我院于2016年至2019年的住院患者，均經(jīng)過(guò)病理確診。非小細(xì)胞肺癌組82人，男性49人、女性33人，平均年齡為(63.55±9.21)歲，中位年齡64歲(年齡<60歲29例，占35.7%)，均經(jīng)病理確診為非小細(xì)胞肺癌；病理類(lèi)型中腺癌患者有42例(51.4%)、鱗癌患者為34例(41.4%)、大細(xì)胞肺癌有1 例(1.2%)、其他類(lèi)型(腺鱗癌或鱗腺癌)為5例(6.1%)；有吸煙史的39例，占比47.6%；Ⅰ、Ⅱ期肺癌患者31例(37.8%)、Ⅲ、Ⅳ期肺癌患者51例(62.2%)。對(duì)照組包括肺部良性組和健康體檢組，良性對(duì)照組32人，健康體檢組50人。

1.2 入選標(biāo)準(zhǔn)

1.2.1 納入標(biāo)準(zhǔn) 非小細(xì)胞肺癌組：①年齡18～83歲；②完全排除其它器官系統(tǒng)惡性腫瘤；③經(jīng)病理學(xué)檢測(cè)(組織病理或細(xì)胞病理)，確診為肺癌，并且明確組織分型[3]及TNM分期[4]。

肺部良性組：①年齡18～83歲；②影像學(xué)檢查完全排除其它器官系統(tǒng)惡性腫瘤；③經(jīng)胸部CT及其他相關(guān)輔助檢測(cè)，確診為其他肺部良性疾病，同時(shí)排除肺部惡性腫瘤。

健康人群入組標(biāo)準(zhǔn)：①年齡18～83歲；②影像學(xué)檢查完全排除其它器官系統(tǒng)惡性腫瘤；③胸部CT檢查無(wú)異常，排除肺部惡性腫瘤及其他良性疾病。

1.2.2 排除標(biāo)準(zhǔn) 標(biāo)本溶血致使血清檢測(cè)無(wú)法進(jìn)行的；病歷病史混亂，診斷不明確的；已經(jīng)進(jìn)行人為干預(yù)致使目標(biāo)標(biāo)記物含量喪失檢測(cè)意義的。

1.3 方法

抽取晨起空腹靜脈血3 ml，采用電化學(xué)發(fā)光法對(duì)CEA、SSC和CYFRA21-1進(jìn)行測(cè)定，試劑盒由德國(guó)羅氏公司提供；采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)對(duì)p53、CAGE和PGP9.5進(jìn)行測(cè)定，試劑盒由上海晶抗生物科技公司生產(chǎn)提供。正常參考值范圍：腫瘤標(biāo)志物：CYFRA21-1 0～3.3 ng/ml，CEA 0～5 μg/l，SCC 0～1.5 ng/ml；p53：13.1 U/ml、PGP9.5：11.1 U/ml、CAGE：7.2 U/ml。

1.4 結(jié)果的判定

1.4.1 陰性判定 如果樣本所有自身抗體檢驗(yàn)結(jié)果低于陽(yáng)性判斷值，那么診斷為“陰性”。 如果樣本所有腫瘤標(biāo)志物檢驗(yàn)結(jié)果低于陽(yáng)性判斷值，那么診斷為“陰性”。

1.4.2 陽(yáng)性判定 如果任何一個(gè)自身抗體的檢驗(yàn)結(jié)果高于其陽(yáng)性判斷值，那么診斷為“陽(yáng)性”。 如果任何一個(gè)腫瘤標(biāo)志物的檢驗(yàn)結(jié)果高于其陽(yáng)性判斷值，那么診斷為“陽(yáng)性”。

1.5 統(tǒng)計(jì)方法

2 結(jié)果

2.1 2組自身抗體陽(yáng)性例數(shù)及陽(yáng)性率

非小細(xì)胞肺癌組檢測(cè)自身抗體的陽(yáng)性率為82.9%(68/82)，明顯高于對(duì)照組的17.1%(14/82)，經(jīng)χ2檢驗(yàn)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=71.122，P<0.01)。

2.2 2組自身抗體的檢測(cè)結(jié)果

非小細(xì)胞肺組自身抗體的測(cè)定值明顯高于對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。見(jiàn)表1。

表1 2 各組自身抗體檢測(cè)結(jié)果

2.3 2組腫瘤標(biāo)志物陽(yáng)性例數(shù)及陽(yáng)性率

非小細(xì)胞肺癌組檢測(cè)腫瘤標(biāo)志物陽(yáng)性率為54.9%(45/82)，明顯高于對(duì)照組的18.5%(15/82)，經(jīng)χ2檢驗(yàn)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=23.654，P<0.01)。

2.4 2組腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)結(jié)果

非小細(xì)胞肺組腫瘤標(biāo)志物的測(cè)定值明顯高于對(duì)照組，經(jīng)t檢驗(yàn)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。見(jiàn)表2。

表2 各組腫瘤標(biāo)志物陽(yáng)性結(jié)果

2.5 聯(lián)合檢測(cè)的價(jià)值

非小細(xì)胞肺癌組中聯(lián)合檢測(cè)的陽(yáng)性率為84.2%(69/82)，即聯(lián)合檢測(cè)診斷非小細(xì)胞肺癌的敏感性為84.2%，高于單用自身抗體檢測(cè)的82.9%及單用腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)的54.7%；對(duì)照組中聯(lián)合檢測(cè)的陰性率為74.3%(61/82)，即聯(lián)合檢測(cè)診斷非小細(xì)胞肺癌的特異性性為74.3%，高于單用自身抗體檢測(cè)的72.8%，低于單用腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)的81.4%，且聯(lián)合檢測(cè)陰性預(yù)測(cè)值高達(dá)91.2%。見(jiàn)表3。

表3 自身抗體、腫瘤標(biāo)志物單獨(dú)檢測(cè)和聯(lián)合檢測(cè)的臨床診斷價(jià)值/%

3 討論

3.1 自身抗體和腫瘤標(biāo)志物各自在肺癌早期診斷中的作用

近年來(lái)，針對(duì)肺癌的治療方法雖然有了長(zhǎng)足的進(jìn)步，但是，5年生存率仍然僅為18%[5]，所以對(duì)肺癌的早發(fā)現(xiàn)、早確診、早治療才能提高患者的生存率和生活質(zhì)量。

P53基因是轉(zhuǎn)錄因子組成部分，屬于抑癌基因的一種。P53編碼翻譯的蛋白質(zhì)起著調(diào)節(jié)細(xì)胞周期的重要作用，同時(shí)它監(jiān)視著細(xì)胞，避免細(xì)胞的異常發(fā)生而導(dǎo)致的癌變。在諸多癌癥中，P53基因或蛋白的失效可導(dǎo)致細(xì)胞周期失控，而這是癌癥產(chǎn)生的關(guān)鍵步驟。CAGE為腫瘤相關(guān)抗原基因，對(duì)于非小細(xì)胞肺癌的診斷具有一定的價(jià)值。PGP9.5在正常的組織中完全檢測(cè)不出，而有一半以上原發(fā)性非小細(xì)胞肺癌有大量的PGP9.5進(jìn)行表達(dá)。

CYFRA21-1是細(xì)胞蛋白19的可溶性片段，有研究指出[6-10]CYFRA21-1不僅對(duì)鱗癌的早期診斷有著很好的評(píng)價(jià)效果，對(duì)所有的非小細(xì)胞肺癌都有著出色的提示作用。其原理在于，由于腫瘤生長(zhǎng)旺盛，機(jī)體的營(yíng)養(yǎng)供應(yīng)往往跟不上腫瘤組織的巨量消耗，導(dǎo)致大量癌細(xì)胞死亡裂解，使得CYFRA21-1溶解入血從而得到檢測(cè)。CEA即癌胚抗原，在胚胎組織中高度表達(dá)，而成人正常組織中無(wú)法得到檢測(cè)的酸性糖蛋白。以前CEA主要作為結(jié)腸癌和直腸癌早期診斷的特異標(biāo)志物。CEA 的檢測(cè)可增加肺癌早期的檢出率最高 87%[11]，并且有著58%的腫瘤復(fù)發(fā)預(yù)測(cè)值[12]。SCC 是一種從子宮頸鱗狀細(xì)胞而來(lái)的抗原 TA4 的亞成分，分為酸性和中性兩個(gè)亞組，惡性腫瘤細(xì)胞可見(jiàn)酸性組分。肺富含鱗狀細(xì)胞，發(fā)生惡性腫瘤時(shí)，SCC 將高度表達(dá)，但部分肺部良性病變和皮膚病變也可引起小幅升高。經(jīng)查閱資料，SCC在鱗癌中的檢測(cè)率相當(dāng)顯著，最高可達(dá)60%[13]。

3.2 自身抗體和腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測(cè)的意義

本實(shí)驗(yàn)中可以看出，在以往的肺癌早期診斷中單獨(dú)對(duì)腫瘤標(biāo)志物或自身抗體的檢測(cè)對(duì)肺癌的診斷敏感度和特異度均達(dá)不到對(duì)二者聯(lián)合檢測(cè)的程度，并且單獨(dú)檢測(cè)的陽(yáng)性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值均不理想。說(shuō)明在對(duì)肺癌的早期診斷中，二者的同時(shí)檢測(cè)能夠更好地提高肺癌的檢出率。由于同時(shí)檢測(cè)的陰性預(yù)測(cè)值高達(dá)91.2%，所以二者同時(shí)檢測(cè)結(jié)果均為陰性則可以基本排除肺癌的可能性。

但是值得注意的是，聯(lián)合檢測(cè)的靈敏度提高，但特異度并不理想。只有不斷優(yōu)化檢測(cè)的組合，才能更好地提高臨床診斷價(jià)值。