全自動尿液干化學分析儀測尿微量白蛋白與其它方法的差異性分析

戴曉靈，彭科燕，魯業(yè)祿，盛建平

（1.重慶市萬州區(qū)人民醫(yī)院檢驗科；2.重慶三峽醫(yī)藥高等?？茖W校，重慶 萬州 404000）

使用尿液干化學分析儀行尿蛋白定性測定，已廣泛用于臨床。隨著近年來糖尿病、高血壓等疾病的發(fā)生日益增多，這些疾病最終導致腎功能的不可逆損害，早期診斷發(fā)現(xiàn)尿液中尿微量白蛋白（20～200mg/L），對腎功能可逆轉階段治療，顯得尤為重要[1,2]。于是國內尿液干化分析儀干化學法檢測尿微量白蛋應運而生，在臨床上有著廣泛的應用。為探討全自動尿液干化學分析儀尿微量白蛋白在臨床中的應用價值，于2019年3 月14 日-2019年3 月16 日期間，對本院門診體檢人員及住院病人225例尿液標本分別用尿液干化學分析儀、特定蛋白分析儀與化學發(fā)光免疫分析儀進行檢測，探討其檢測結果的一致性，報告如下。

1 材料與方法

1.1 研究對象 收集2019年3 月14 日-16 日重慶市萬州區(qū)人民醫(yī)院門診體檢人員尿液標本155例，其中男性70例，女性85例，年齡22～63 歲，中位年齡43 歲；住院病例70例，其中男性36例，女性34例，年齡18～83 歲，中位年齡61 歲。專用尿液標本采取器取晨尿中段15ml 左右，2h 內檢測。

1.2 試劑與儀器 AVE－752 全自動尿液干化學分析儀，出自長沙愛威科技股份有限公司，含配套試紙條；博士泰A25 全自動特定蛋白分析儀，出自西班牙BioSystems S.A，含配套試劑；MAGLUMI 4000全自動化學發(fā)免疫分析儀，出自深圳新產業(yè)生物醫(yī)學工程股份有公司，含配套試劑。

1.3 方法 同份尿液標本分別用三種方法檢測，即全自動尿液干化學分析儀法（干化學法）、全自動特定蛋白分析儀法（免疫比濁法）及全自動化學發(fā)光儀分析儀法（化學發(fā)光法）檢測尿液中的mAlb。如肉眼觀察渾濁標本，以3000 轉/分鐘，離心5min后上發(fā)光法與比濁法檢測。按儀器尿液標本吸取時間，檢測順序分別為干化學法、化學發(fā)光法及免疫比濁法。以免疫比濁法作為對照組，分別與干化學法組和化學發(fā)光法組檢測尿mAlb 結果，比較分析其差異性。結果判定：尿干化學法測定尿白蛋白的結果分為五個分度，包括（－）、（+－）、（1+）、（2+）、（3+），以（+－）為弱陽性結果；免疫比濁法及化學發(fā)光法結果使用國際通用的微量白蛋白衡量標準，即尿微量白蛋白＞20 mg/L 作為陽性結果，否則為正常范圍。

1.4 統(tǒng)計學分析 采用SPSS17.0對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學分析，計數(shù)資料用百分率（%）表示，組間比較用卡方檢驗，計量資料用均數(shù)±標準差表示，多組間的比較用方差分析。P<0.05 為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 不同濃度尿液標本對比測定結果,見表1。

表1 選取不同濃度尿液標本平行測3 次mAlb 結果的比較

2.2 收集臨床腎病及老年科住院病人70例，其中男性36例，女性34例，年齡18～83 歲，中位年齡61 歲,尿液標本檢測mAlb 陽性率比較,見表2。

表2 70例住院病人尿液標本檢測mAlb 陽性率比較

2.3 門診體檢人員尿液標本155例，其中男性70例，女性85例，年齡22～63 歲，中位年齡43 歲，尿沉渣分析儀全部陰性，特定蛋白儀陽性檢出率10.96%,見表3。

表3 155例門診體檢人員尿液標本檢測mAlb 陽性率比較

3 討論

全自動尿液干化學分析儀測尿蛋白的方法，即采用球面積分析器接受雙波長反射光的方式測定試劑帶上的顏色變化（指示劑蛋白誤差原理，膜塊中主要含酸堿指示劑—溴酚藍PH 為3.0～4.6，枸椽酸鹽緩沖系統(tǒng)和表面活性劑，在PH3.2 時，溴酚藍產生陰離子與帶陽離子的白蛋白結合產生顏色變化）進行半定量測定，試紙只對白蛋白敏感，對其它蛋白敏感性較差，理論上講顏色的深淺與尿液中蛋白成分成比例關系[3]。mAlb 免疫比濁法檢測原理,即抗白蛋白抗體與樣本中的抗原反應形成抗原－抗體復合物，凝集后，該抗原－抗體復合物的濁度與白蛋白的濃度成正比,進行比濁檢測[4]。mAlb化學發(fā)光法檢測原理,以異魯米諾為發(fā)光體系,磁微粒為固相載體的直接化學發(fā)光竟爭法檢測尿液中的mAlb，其特點檢測靈敏度高，特異性較強。

本研究中，全自動尿液干化學分析儀(含尿沉渣分析)測微量白蛋白（mAlb）與其它只做干化學的尿液分析儀不同,其干化學分析與尿沉渣分析連續(xù)進行，尿液不能離心處理,導致干擾因素增多，其影響除受pH、顏色因素外，尿液濁度干擾較大[5]；AVE－752 配套尿微量白蛋白試劑帶說明書指出尿微量白蛋白檢出下限為80mg/L,本研究中發(fā)現(xiàn)尿mAlb在92.60±7.12mg/L(免疫比濁法測定結果)，尿干化學分析儀才顯示為弱陽（+-），證明可能有藥物如大量的青霉素族藥物治療后對干化學法可產生假陰性[6]。本研究中免疫比濁法測尿mAlb在203.50±15.14～928.33±50.79mg/L 之間其尿液干化學分析儀檢測結果皆為陽性（1+）,與其它文獻報道隨著尿微量白蛋白濃度的增加其半定量結果呈比例增長有差異性[7-9]。尿液干化學分析儀測155例門診體檢人員和70例住院病人,尿mAlb 結果陽性率分別為0和12.85%，而特定蛋白分析儀（免疫比濁法）陽性檢出率分別為10.96%和35.71%,其陽性率差別有統(tǒng)計學意義（P<0.05）;而特定蛋白分析儀（免疫比濁法）與化學發(fā)光法檢測結果基本一致（P>0.05）。

綜上所述，本研究中AVE－752 全自動尿液分析儀檢測尿mAlb 其靈敏度偏低（92.60±7.12mg/L）,半定量濃度梯度關系在（mAlb在203.50±15.14～928.33±50.79mg/L）不明顯（為陽性1 個+），難以監(jiān)測由于糖尿病、高血壓等所引起的早期（20～200 mg/L）及中期腎功能改變出現(xiàn)的尿mAlb 濃度變化。由此可見，引進全自動尿液干化學分析儀，半定量檢測尿微量白蛋白簡便、快速，有一定的篩查作用，但對于患者分層的預測有其局限性。其在臨床上應用的價值和方法學上的可靠性需要作一定的論證，簡單地在臨床上推廣使用易引起漏診或誤診。本研究為減少基質效應[10]，完全應用臨床原尿作對比檢測，濃度梯度選擇也存在一定的局限性，對儀器及試劑未作過多的性能評價，后續(xù)則需要更多的臨床研究加以證明。