慢性乙型肝炎患者外周血CXCL8表達(dá)與肝臟炎癥程度的相關(guān)性

陳艷

（商丘市第四人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，河南 商丘 476100）

乙型肝炎病毒的免疫應(yīng)答是引發(fā)慢性乙型肝炎（CHB）患者肝臟炎癥損傷的主要原因，肝臟局部呈現(xiàn)以淋巴細(xì)胞等浸潤為主的病理特征[1]。多數(shù)C HB患者的肝組織均存在不同程度的炎癥反應(yīng)，而炎癥反應(yīng)程度與患者病情進(jìn)展及預(yù)后密切相關(guān)[2]。因此，尋找能夠及時(shí)準(zhǔn)確評(píng)估CHB患者肝臟炎癥程度的相關(guān)指標(biāo)，并給予合理的干預(yù)，對(duì)改善患者預(yù)后意義重大。肝穿刺病理活檢可準(zhǔn)確反饋肝臟炎癥程度,但該檢查有創(chuàng)，存在并發(fā)癥及禁忌癥，且不利于重復(fù)進(jìn)行，應(yīng)用受限[3,4]。CXC 趨化因子8（C XCL8）是常見實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)之一，其是一種小分子量蛋白質(zhì),主要由中性粒細(xì)胞所分泌,并且CXCL8 可表白細(xì)胞介素-8受體α（CXCR1）、白細(xì)胞介素-8受體β（CXCR2）等趨化因子受體[5]。CXCL8 可趨化中性粒細(xì)胞游走，并在促進(jìn)炎癥反應(yīng)及調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答等多個(gè)過程中發(fā)揮關(guān)鍵性作用[6]。近年來，隨著研究深入，研究發(fā)現(xiàn)CXCL8與CHB患者的肝臟炎癥程度關(guān)系密切，但相關(guān)研究并未形成統(tǒng)一共識(shí)?；诖?，本研究旨在探討CHB患者外周血CXCL8表達(dá)與肝臟炎癥程度的關(guān)系，探明外周血CXCL8水平能否作為CHB患者肝臟炎癥程度的評(píng)估指標(biāo)，從而為CHB患者的治療提供指導(dǎo)?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 納入本院2019年1 月-2020年1月收治的82例CHB患者。82例患者中男44例，女38例；年齡18～56 歲，平均年齡36.74±4.81 歲；身體質(zhì)量指數(shù)17.29～24.62kg/m2，平均體質(zhì)量指數(shù)20.95±1.24kg/m2；病程6 個(gè)月～5年,平均病程2.61±0.48年。

1.2 入選標(biāo)準(zhǔn) ⑴納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合《CHB 防治指南（2015年版）》[7]中相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)；②均經(jīng)肝穿刺活檢病理結(jié)果確診；③既往未接受抗病毒治療；④患者及家屬均知情本研究，且簽署同意書。⑵排除標(biāo)準(zhǔn)：①其他肝臟疾?。虎谛?、腎等其他重要臟器相關(guān)疾??；③精神疾病史。

1.3 方法

1.3.1 外周血CXCL8 檢測方法CXCL8 采集全部患者清晨空腹靜脈血3ml，離心處理，設(shè)置離心速度為3000r/min，共離心5min，離心完畢后取上清液待檢。使用美國R&D 公司提供的試劑盒，采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫法檢測CXCL8表達(dá)。

1.3.2 肝穿刺活檢、組織病理診斷及肝臟炎癥程度標(biāo)準(zhǔn) 使用2%利多卡因5ml 局麻。均取仰臥位，在超聲引導(dǎo)下行肝穿刺活檢，取得10～25mg的肝臟組織，經(jīng)甲醛溶液固定、石蠟包埋后，蘇木精染色。利用顯微鏡觀察組織病理變化，并由同一醫(yī)師閱片。根據(jù)《病毒性肝炎防治方案》[8]中的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)肝臟炎癥活動(dòng)分級(jí)，G0 級(jí)：匯管區(qū)及周圍、小葉內(nèi)未見炎癥反應(yīng)。G1 級(jí)：匯管區(qū)炎癥，小葉內(nèi)變性及少數(shù)壞死灶。G2 級(jí)：匯管區(qū)輕度碎屑?jí)乃溃∪~內(nèi)變性，點(diǎn)、灶壞死或嗜酸小體。G3 級(jí)：匯管區(qū)中度碎屑?jí)乃?，小葉內(nèi)變性、壞死重或見橋接壞死。G4 級(jí)：匯管區(qū)重度碎屑?jí)乃?，小葉內(nèi)橋接壞死范圍廣，累及多個(gè)小葉，小葉結(jié)構(gòu)失常。其中將G0～1 級(jí)劃分為輕度肝臟炎癥組，G2～4 級(jí)劃分為中重度肝臟炎癥組。

1.3.3 基線資料調(diào)查方法 采用自制問卷收集患者的年齡、家庭月收入、家庭條件、工作情況、吸煙史、飲酒史等基線資料，問卷Cronbach’αs 系數(shù)為0.834。⑴年齡：劃分為＞35 歲、≤35 歲。⑵家庭條件：劃分為中等和良好、差；⑶有無工作；⑷吸煙史：連續(xù)或累積吸煙6 個(gè)月或以上。⑸飲酒史：有長期飲酒史,一般超過5年,折合乙醇量男性≥40g/d，女性≥20g/d，或2 周內(nèi)有大量飲酒史，折合乙醇＞80 g/d。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS24.0 軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，全部計(jì)量資料均經(jīng)Shapiro-Wilk 正態(tài)性檢驗(yàn)，呈正態(tài)分布以表示，組間采用獨(dú)立樣本t 檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料用百分比表示，采用χ2檢驗(yàn)，采用多項(xiàng)Logistic 回歸分析外周血CXCL8對(duì)肝臟炎癥程度的影響；繪制受試者工作特征曲線（ROC）得到曲線下與坐標(biāo)軸圍成的面積（AUC），檢驗(yàn)外周血CXCL8對(duì)肝臟炎癥程度的預(yù)測價(jià)值:AUC＜0.5 無價(jià)值，0.5-0.7 診斷價(jià)值較低，0.7-0.9 診斷價(jià)值中等，＞0.9診斷價(jià)值高，P＜0.05 為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 CHB患者的肝臟炎癥程度情況 本研究納入的82例CHB患者，38例輕度肝臟炎癥，占比46.34%（38/82），44例中重度肝臟炎癥，占比為53.66%（44/82）。輕度組15例為G0 級(jí)，23例為G1級(jí)，中重度組中25例G2 級(jí)，17例G3 級(jí)，2例G4級(jí)。

2.2 輕度組和中重度組基線資料、外周血CXCL8表達(dá)比較 兩組年齡、家庭條件、家庭月收入、工作情況、吸煙史及飲酒史等一般資料比較無差異（P＞0.05）；中重度組外周血CXCL8表達(dá)高于輕度組（P＜0.05）。

表1 輕度組和中重度組的基線資料、外周血CXCL8表達(dá)對(duì)比

2.3 外周血CXCL8表達(dá)對(duì)CHB患者肝臟炎癥程度影響的Logistic 回歸分析結(jié)果 將CXCL8表達(dá)作為協(xié)變量，將患者肝臟炎癥程度作為因變量（1=中重度，0=輕度），經(jīng)Logistic 回歸分析檢驗(yàn)結(jié)果顯示，CXCL8 過表達(dá)是CHB患者肝臟炎癥程度的影響因素（OR＞1，P＜0.05）。見表2。

表2 外周血CXCL8表達(dá)對(duì)CHB患者肝臟炎癥程度影響的Logistic 回歸分析結(jié)果

2.4 外周血CXCL8表達(dá)對(duì)CHB患者肝臟炎癥程度的預(yù)測價(jià)值 將CXCL8表達(dá)作為檢驗(yàn)變量，將肝臟炎癥程度（1=中重度，0=輕度）作為狀態(tài)變量，繪制ROC 曲線,見圖1，得到CXCL8 預(yù)測肝臟炎癥程度（中重度）的AUC 為0.946，在外周血CXCL8表達(dá)臨界值為573.45pg/ml 時(shí)，可獲得最佳的特異度及靈敏度，分別為：0.974、0.886，約登指數(shù)為0.860。ROC 曲線圖見圖1。

圖1 外周血CXCL8表達(dá)預(yù)測CHB患者肝臟炎癥程度的ROC 曲線圖

3 討論

乙型肝炎病毒（HBV）和炎癥反應(yīng)導(dǎo)致的纖維化病變?cè)贑HB 病情進(jìn)展過程中發(fā)揮關(guān)鍵性作用[9]。并且有研究表明，對(duì)未達(dá)到抗病毒治療標(biāo)準(zhǔn)的CHB患者需實(shí)施肝穿刺活檢術(shù)，若肝臟炎癥分級(jí)在G2 級(jí)以上，疾病進(jìn)展風(fēng)險(xiǎn)高，需及時(shí)給予抗病毒治療[10]。但肝穿刺活檢術(shù)屬有創(chuàng)檢查，且費(fèi)用較高，不易被患者接受，故不宜作為常規(guī)檢查[11]。

趨化因子是近年來才被發(fā)現(xiàn)可用于反饋炎癥活動(dòng)的一種敏感指標(biāo)，趨化因子受體可與相應(yīng)配體結(jié)合，趨化和激活可表達(dá)趨化因子受體的多種淋巴細(xì)胞，在機(jī)體防御、抗感染等多種炎癥性疾病中發(fā)揮關(guān)鍵性作用[12,13]。趨化因子CXCL8 又被稱為白介素-8，是一種多效性細(xì)胞因子[14]。CXCL8 可促進(jìn)炎癥反應(yīng)，并趨化中性粒細(xì)胞游走，加強(qiáng)中性粒細(xì)胞的溶酶體酶活性和吞噬作用[15]。當(dāng)CXCL8 接觸中性粒細(xì)胞后，使中性粒細(xì)胞形態(tài)改變并游走至反應(yīng)部位，最后在反應(yīng)部位釋放大量可引發(fā)局部炎癥反應(yīng)的活性產(chǎn)物，以發(fā)揮殺菌和損傷細(xì)胞的作用[16,17]。同時(shí)，CXCR1、CXCR2 是CXCL8 特異性受體，CXCL8與CXCR1和CXCR2 相互結(jié)合后可趨化中性粒細(xì)胞，起到調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)的作用[18,19]。此外，CXCL8 可促使嗜酸性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞等多種細(xì)胞募集[20]。因此，本研究分析CXCL8與CHB患者肝臟炎癥程度的關(guān)系。

本研究結(jié)果顯示，82例CHB患者中，有38例為輕度肝臟炎癥，占比為46.34%，44例為中重度肝臟炎癥，占比為53.66%，提示CHB患者肝臟普遍伴不同程度炎癥反應(yīng)。此外，本研究結(jié)果顯示，中重度組外周血CXCL8表達(dá)高于輕度組，初步推測外周血CXCL8 過表達(dá)可推動(dòng)CHB患者肝臟炎癥程度進(jìn)展，外周血CXCL8表達(dá)越高，提示肝臟炎癥越嚴(yán)重。進(jìn)一步經(jīng)Logistic 回歸分析并繪制ROC曲線結(jié)果顯示，CXCL8 是CHB患者肝臟炎癥程度的影響因素，推測CXCL8 可能在預(yù)測CHB患者肝臟炎癥程度進(jìn)展風(fēng)險(xiǎn)方面也有一定價(jià)值。本研究繪制ROC 曲線結(jié)果顯示，CXCL8 預(yù)測CHB患者肝臟炎癥程度進(jìn)展的AUC 為0.946，有較理想的預(yù)測價(jià)值，證實(shí)推測。

綜上所述，外周血CXCL8 異常過表達(dá)預(yù)示著CHB患者肝臟炎癥程度較重，臨床可依據(jù)CXCL8表達(dá)變化，判斷CHB患者的肝臟炎癥程度，可能對(duì)指導(dǎo)早期肝臟炎癥程度評(píng)估與治療計(jì)劃制定有一定積極意義。