系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者血清25-OH-D、ANCA水平與疾病活動程度的相關(guān)性分析

黃晉，吳汶芳，禚婭，孫金磊

（1.鶴壁市人民醫(yī)院檢驗科，河南 鶴壁 458030；2.鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院風(fēng)濕免疫科，河南 鄭州 450000）

系統(tǒng)性紅斑狼瘡（Systemic lupus erythematosus，SLE）是一種多發(fā)于育齡女性，多臟器、多系統(tǒng)受累的典型全身性自身免疫性疾病,其特征是產(chǎn)生多種自身抗體，導(dǎo)致多種主要器官（如腎臟、皮膚）的功能障礙[1]。SLE 普遍存在于亞洲人中，亞太地區(qū)的總體粗發(fā)病率（每年每10 萬人）在0.9～3.1之間，流行率在4.3～45.3（每10 萬人）之間[2]。SLE不能治愈，但可以通過藥物控制，盡管過去幾十年SLE的診斷和治療取得了進步，生存率有所提高，但該病的相對死亡人口仍然很高[3]。感染(65.8%)是SLE 最常見的死亡原因，其次是狼瘡腎炎(48.6%)，血液學(xué)異常(18.1%)，神經(jīng)精神性狼瘡(15.8%)和間質(zhì)性肺炎(13.1%)[4]。迄今為止，SLE的發(fā)病機制尚未完全明確，但是，有研究表明，SLE患者病情活動與血清學(xué)標(biāo)志物水平（如dsDNA、C-反應(yīng)蛋白、紅細(xì)胞、補體等）密切相關(guān)[5]。一些干預(yù)和流行病學(xué)研究已經(jīng)闡明,維生素D 缺乏也會增加SLE的風(fēng)險[6]。用于評價維生素D水平的指標(biāo)有多種，例如，25-羥基維生素D（25-hydroxyvitamin D，25-OHD）、25-羥基維生素D3、1,25-二羥基維生素D 等，25-OH-D 是維生素D的主要循環(huán)形式，被認(rèn)為是總維生素D水平的最佳指標(biāo)，在多種疾病的發(fā)生和發(fā)展過程中起到重要的作用[5]。此外，SLE 中存在大量抗體，其中約25%具有抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體（antineutrophil cytoplasmic antibody，ANCA）特異性[7]。ANCA 是一種機體針對單核細(xì)胞和中性粒細(xì)胞MPO 或PR3 抗原的自身免疫性抗體，是系統(tǒng)性血管炎的特征性抗體[7]。本研究中，我們分析了SLE患者血清中25-OH-D、ANCA的水平，并評估了其與SLE風(fēng)險和疾病嚴(yán)重程度的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取我院2017年1 月-2019年1月接收的100例符合入組及排除標(biāo)準(zhǔn)的SLE患者作為SLE 組,并按照SLE 疾病活動指數(shù)（systemic lupus erythematosus disease activity index，SLEDAI）標(biāo)準(zhǔn)對患者是否處于活動期進行評估。SLE患者組中活動期62例、非活動期38例，女48例、男52例，平均年齡為48.56±8.93 歲，平均體質(zhì)量指數(shù)(body mass index，BMI)為23.95±0.98kg/m2，平均病程為5.67±0.85年。另外，選取100例健康對照組患者作為研究對象，其中女50例、男50例，平均年齡為49.01±9.13 歲，平均BMI 為24.35±1.03kg/m2。兩組資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。入組標(biāo)準(zhǔn)：(1) SLE患者均符合1982年美國風(fēng)濕病協(xié)會修訂的SLE 診斷標(biāo)準(zhǔn)[8]；(2) 入組前半年未使用維生素D 類藥物；(3) 入組前半年未使用肼屈嗪、甲硫噠嗪、丙硫氧嘧啶藥物（此類藥物可引起ANCN陽性）；(4) 入組前1 個月無感染疾病史，未合并其他自身免疫性疾病；(5) 研究對象對本研究均知情并簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1) 合并精神類疾病疾病;(2) 合并其他自身免疫性疾??；(3) 嚴(yán)重心、肝、腎功能不全；(4) 處于妊娠或哺乳期女性；(5) 營養(yǎng)不良患者；(6) 臨床資料不全；(7) 主動申請退出本研究。

1.2 儀器與試劑 羅氏全自動電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀（型號：Cobas e601，購于羅氏診斷產(chǎn)品上海有限公司）；熒光顯微鏡（型號：EUROStar II，購于歐蒙醫(yī)學(xué)診斷中國有限公司）；25-OH-D 試劑盒購于羅氏診斷產(chǎn)品上海有限公司；ANCA 試劑盒購于歐蒙醫(yī)學(xué)診斷有限公司。

1.3 方法

1.3.1 血清中25-OH-D的檢測 采集5ml受試者的空腹靜脈血，3,000 rpm/min 離心10 min 收集血清，并在2h 內(nèi)按照25-OH-D 試劑盒說明書，采用羅氏全自動電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀檢測受試者血清中的25-OH-D。

1.3.2 血清中ANCA的檢測 采集5ml受試者的空腹靜脈血，3000rpm/min 離心10min 收集血清，并采用間接免疫熒光法（indirect immunofluorescence technique，IIF）檢測受試者血清中的ANCA，ANCA試劑盒購于歐蒙醫(yī)學(xué)診斷有限公司。

1.3.3 SLE 活動性判斷 SLE 活動性判斷按照SLEDAI 標(biāo)準(zhǔn)進行評估，SLEDAI 是根據(jù)患者前10天內(nèi)的有關(guān)癥狀進行計分，其中⑴記為8 分的有：抽搐、精神病、器質(zhì)性腦病綜合征、視覺障礙、腦神經(jīng)病變、狼瘡性頭痛、腦血管意外和血管炎者；⑵記為4 分的有：關(guān)節(jié)炎、肌炎、管型尿、血尿、蛋白尿和膿尿者；⑶記為2 分的有：皮疹、脫發(fā)、黏膜潰瘍、胸膜炎、心包炎、低補體和血清抗ds-DNA 升高者；⑷記為1 分的有：發(fā)熱、血小板減少和白細(xì)胞計數(shù)下降者。理論上SLEDAI 總積分為105 分，一般認(rèn)為積分為0～4 分者基本無活動，5～9 分輕度活動，10～14 分為中度活動，≥15 分重度活動[9]。本研究中把SLEDAI 評分>9 分判定為活動期，SLEDAI 評分≤9 則為非活動期[10]。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS 24.0 軟件進行統(tǒng)計學(xué)處理分析。采用表示符合正態(tài)分布的計量資料，采用Forward Logistic 回歸分析各指標(biāo)與SLE活動度的關(guān)系，計量資料組間比較采用t 檢驗，計數(shù)資料組間比較采用卡方（χ2）檢驗，P<0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 SLE 組及對照組血中各指標(biāo)檢測結(jié)果 研究結(jié)果顯示，SLE 組患者血清中25-OH-D 是15.85±2.91ng/ml,而對照組血清中25-OH-D 是23.43±3.01ng/ml，SLE 組患者血清中25-OH-D水平顯著低于對照組,且差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)；而SLE 組患者血清中ANCA 是26.98±1.96RU/ml，對照組血清中ANCA 是10.24+1.27RU/ml，SLE 組患者血清中ANCA水平顯著高于對照組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)，見表1。

表1 SLE 組及對照組血清中25-OH-D和ANCA的檢測結(jié)果()

表1 SLE 組及對照組血清中25-OH-D和ANCA的檢測結(jié)果()

2.2 活動期與非活動期患者血清中各指標(biāo)檢測結(jié)果 研究結(jié)果顯示，SLE 活動期患者血清中25-OH-D 是13.83±2.54 ng/ml，而非活動期患者血清中25-OH-D 是19.86±3.93ng/ml，SLE 活動期患者血清中25-OH-D水平顯著低于非活動期，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)；而SLE 活動期患者血清中ANCA 是30.24±2.59 RU/ml，非活動期患者血清中ANCA 是20.62+2.41 RU/ml，SLE 活動期患者血清中ANCA水平顯著高于SLE 非活動期，且差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)，見表2。

表2 活動期與非活動期患者血清中各指標(biāo)檢測結(jié)果（）

表2 活動期與非活動期患者血清中各指標(biāo)檢測結(jié)果（）

2.3 SLE 疾病活動程度的單因素分析 研究結(jié)果顯示，SLE 活動期患者的性別、年齡、BMI及病程上與非活動期患者差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；而在SLEDAI 評分上有顯著差異，且差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)，見表3。

表3 SLE 疾病活動的單因素分析

2.4 SLE 疾病活動程度的多因素分析 以是否為活動期為因變量，與SLE 疾病活動程度有關(guān)的25-OH-D、ANCA及SLEDAI 評分作為自變量，采用Forward Logistic 回歸分析，結(jié)果顯示，25-OH-D水平與SLE 活動性呈負(fù)相關(guān)，ANCA水平與SLE 活動性呈正相關(guān)，見表4。

表4 SLE 疾病活動的多因素分析

3 討論

SLE 是臨床常見的慢性自身免疫性疾病，其發(fā)病機制尚未完全揭示,一些遺傳，免疫，內(nèi)分泌和環(huán)境因素均與疾病機制有關(guān)[11]。全球范圍內(nèi),SLE的患病率為每10 萬人12 至50例，且因地區(qū)和種族而異[12]。據(jù)報道，在發(fā)達國家，SLE的發(fā)生率增加，美國幾個地區(qū)的數(shù)據(jù)表明，在20 世紀(jì)下半葉，SLE的發(fā)病率至少增加了三倍[13]。同時，SLE 是一種具有多種表型的多系統(tǒng)疾病，臨床特征可能從僅粘膜皮膚受累的非常輕度的疾病到多器官受累的非常嚴(yán)重的危及生命的疾病[11]。SLE 是無法治愈的，只能通過藥物等其他手段維持SLE患者的正常生活，而進行疾病的活動度評估是確定治療方案的前提。因此，如何有效評估疾病活動程度對SLE患者具有重要的意義。

Reynolds JA 等[14]人報道，維生素D 缺乏會導(dǎo)致SLE的疾病活動和發(fā)病率，維生素D 抑制了SLE患者外周血單個核細(xì)胞自身抗體的產(chǎn)生，因此，維生素D 缺乏癥可能會增強SLE 中的炎癥反應(yīng)，從而增強疾病活動性和血管僵硬。25-OH-D 是維生素D的主要活性形式，Guan 等[15]人報道，與健康對照相比，SLE患者的25-OH-D水平顯著降低。Eloi M 等[16]人研究表明，與健康對照組相比，SLE患者的25-OH-D 血清濃度顯著降低，25-OH-D 血清濃度在疾病活動性比例上也有顯著差異。Emerah AA 等[17]人也報道了較高的SLE 活性評分和較低的血清25-OH-D 濃度相關(guān)。我們的結(jié)果顯示，SLE 組患者血清中25-OH-D水平顯著低于對照組，SLE 活動期患者血清中25-OH-D水平顯著低于非活動期，與以往的研究結(jié)論一致。另外盧等[18]人和李等[5]人的研究表明，SLE 組患者血清中25-OH-D水平顯著低于對照組，SLE 活動期患者血清中25-OH-D水平顯著低于非活動期，25-OH-D水平與SLE 疾病活動性呈負(fù)相關(guān)。另外，Dutta C 等[19]人研究表明，維生素D 缺乏的SLE患者更可能具有高的疾病活動性，且SLEDAI 得分與25-OH-D 值呈負(fù)相關(guān)。我們的研究也顯示，25-OH-D水平與SLE 活動性呈負(fù)相關(guān)，說明25-OHD水平升高是SLE 活動期的獨立性保護因素。

ANCA 是一種重要的自身抗體，多存在于系統(tǒng)性血管炎患者，部分SLE患者血清中也存在ANCA，在腎炎和中樞神經(jīng)系統(tǒng)受累的SLE患者中最常見，且SLE的ANCA 陽性與疾病活動性和嚴(yán)重程度相關(guān)[7]。Pradhan 等[20]人報道了ANCA與SLE疾病活動呈正相關(guān)，并可能被用作區(qū)分狼瘡性腎炎和無腎炎的SLE的標(biāo)準(zhǔn)。SU 等[21]人和李等[5]人的研究也表明，ANCA與SLE 疾病活動呈正相關(guān)。我們的結(jié)果顯示，SLE 組患者血清中ANCA水平顯著高于對照組，SLE 活動期患者血清中ANCA水平顯著高于SLE 非活動期，ANCA水平與SLE 活動性的正相關(guān)，表明ANCA水平升高是SLE 活動期的獨立性危險因素，與以往的研究一致。但也有研究表明，ANCA的水平與SLE 疾病活動不存在關(guān)聯(lián)。Nishiya K 等[22]人報道，SLE患者中的ANCA與臨床特征無關(guān)。Fauzi 等[23]人也未能發(fā)現(xiàn)ANCA陽性與SLE 疾病活動之間存在顯著關(guān)聯(lián)。患者的選擇標(biāo)準(zhǔn)可能是造成結(jié)果差異的重要因素。